BNG提取物对动物移植性肿瘤的作用

本文报告BNG甲醇和乙醇提取物腹腔注射对动物移植性肿瘤的抑瘤作用。结果表明:BNG甲醇提取物对大鼠W256剂量为350—200毫克/公斤/天时抑瘤率为77.6—33.9％之间,BNG乙醇提取物剂量为400～200毫克/公斤/天时对W256的肿瘤生长抑制率是79.87％     

新穎的蒽环类抗生素(87-9)MIX·HCI体外体内抗肿瘤活性研究

本文主报道我所合成室以三烃基蒽环酮为原料、苄胺作侧链进行A环和C_1C_4的取代而得到(87-9)MIX·HCL化合物体外内抗肿瘤活性试验的结果。在体外,3~H-TdR渗入P388白血病细胞DNA合成抑制试验表明(87-9)MIX·HCI有较强的抑制作用、当化合物浓度为100μg/ml、10μg/ml时,其抑制率分别达97.7％、22.5％。此活性几乎     

ACM—M抗肿瘤活性的初步研究

本文用~3H—胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)体外参入法和对荷瘤小鼠的生命延长了新蒽环类抗肿瘤抗生素ACM—M抗肿瘤活性的初步研究。实验结果表明,ACM—M10ug/ml和100ug/ml对~3H—TdR参入P_(380)肿瘤细胞的DNA合成制率分别为97％和98.4％。ACM—M4mg/kg和2mg/kg两剂量对DBA/2小鼠P_(380)的白血病的生命延长率分别为276.36％和310.91％。     

用~3H标记探针作DNA滤膜杂交的快速自显影方法(摘要)

作者用~3H—dNTP代替~(32)P—dNTP标记DNA,进行滤膜杂交放射自显影。其操作步骤与用~(32)P—dNTP标记的核酸作滤膜杂交基本一致。 ~3H标记DNA作探针进行滤膜杂交,继而用水杨酸钠溶液处理,使~3H放出的低能β粒子     

阿克拉霉素B和亚德里亚霉素对人胃癌细胞核仁作用的比较

阿克拉霉素B(Aclacinomycin B,AcM—B)为新抗肿瘤抗生素,与亚德里亚霉素(Adriamycin)(ADM)同属葸环类抗肿瘤抗生素。ACM—B为葸环类第Ⅱ类,抑制细胞DNA相RNA合成,尤以抑制RNA的合成特别明显;ADM为第Ⅰ类,抑制DNA和RNA合成的作用程度相近。ACM-B和ADM这种抑制DNA和RNA作用的差别的机制,尚未见报道。本文就ACM—B和ADM对细胞核仁作用的特点结合大分子合成的抑制作用作一初步的比较。     

蜈蚣提取物诱导SiHa细胞凋亡及其作用机制

目的研究蜈蚣提取物对宫颈癌SiHa细胞生长的抑制及其作用机制。方法观察不同浓度的不同蜈蚣提取物对宫颈癌SiHa细胞的生长抑制情况:以不同浓度的蜈蚣提取物和顺铂作用于SiHa细胞48h,MTT法测定药物对细胞生长的影响,流式细胞术观察DNA含量和凋亡的改变,DNA片断化分析凋亡特有DNA梯形格局,Western blot测定bax、Caspase3蛋白水平的表达。结果SiHa细胞用8、16、32mg/mL的乙醚、乙醇蜈蚣提取物处理48h后,细胞生长显著受抑制;DNA周期改变明显,亚G1峰与对照组有显著性差异;DNA-Ladder显著;Western blot提示相关凋亡蛋白bax、Caspase3表达并显示活性,凋亡率增高明显。结论中药蜈蚣乙醚、乙醇提取物在体外对宫颈癌SiHa细胞的生长有明显地抑制作用,机制与改变细胞DNA周期,促进凋亡有关。     

MTT法筛选葛根抗癌有效部位

作者用MTT法对悬浮肿瘤细胞P388白血病细胞、EAC腹水癌细胞进行抗癌药物的体外筛选,并成功地筛选出葛根抗癌有效部位为总皂甙,通过与~3H—TdR掺入法比较,说明在不具备贴壁细胞的条件下,MTT法仍可作为一种大批量筛选抗癌药物的体外方法进行普及推广     

3H-TdR应用研究现状

细胞在合成、分裂、增殖时需要摄取各种嘧啶核苷,氚标记脱氧嘧啶核苷酸(^3H—TdR)作为DNA补救合成的前体,可较特异地掺入细胞DNA中。因氚能放射出低能β射线,半衰期长,生物毒性小,具有良好的示踪作用。故^3H—TdR作为一种快速、简便、廉价的方法,广泛地用于生物医学的各个领域。     

几种抗癌药物对小鼠白血病L_(7212)肝脾的~3H-TdR掺入的影响(摘要)

可移植性615小鼠淋巴白血病L_(7212)是我国建立的实验白血病模型之一。本文观察了L_(7212)小鼠发病进程中肝、脾的~3H—TdR掺入变化及环磷酰胺、氮芥、靛玉红、促肾上腺皮质激素对其~3H—TdR掺入的影响。实验结果表明: 1、接种六天的L_(7212)小鼠肝、脾DNA的~3H—TdR的掺入量随注射~3H—TdR的时间而逐浙增加,在注射~3H—TdR后2—4小时掺入量趋于平稳。肝脏的掺入量比脾脏相应时间的掺人量高,速度也较快。说明白血病发病时小鼠肝脏的DNA合成比脾脏更为旺盛。 2、615小鼠在接种白血病L_(7212)后,小鼠的肝、脾被白血病浸润逐浙加重,肝脾指数     

野百合碱对人体和动物癌细胞核酸生物合成的影响

野百合碱是中草药农吉利的有效成分。临床和实验资料都证明:野百合碱具有明显的抗癌作用。本文研究其对人体和动物癌细胞核酸生物合成的影响。结果证明:在八天内给予S_(180)瘤株鼠以野百合碱可降低瘤组织中RNA和DNA含量及其~(32)P掺入量。用~3H-UR和~3H-TdR掺入试验证明:野百合碱对~3H-UR掺入癌细胞RNA具有明显的抑制作用,而对~3H-TdR掺入癌细胞DNA的抑制作用则不明显。结果表明:野百合碱对癌细胞核酸生物合成的抑制作用主要表现在对癌细胞RNA生物合成的抑制作用。     

肺结核中DNA低甲基化趋势与TETs及TDG的相关性研究

目的明确肺结核病人DNA低甲基化状态与TETs、TDG之间的相关性。方法在前期研究结果的基础上,收集健康对照和活动性肺结核病人治疗前全血RNA,通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法,对参与DNA甲基化下调的DNA去甲基化酶,即十-十一染色体异位酶基因(TETs,包括TET1、TET2、TET3)及胸腺嘧啶糖基酶(TDG)进行定量检测。利用H37Rv裂解抗原以及5-氮杂胞嘧啶核苷(5azac)刺激物刺激人肺癌细胞系A549和人支气管上皮细胞Beas-2B两种细胞系,并收集刺激后不同时间点细胞DNA、RNA。利用甲基化敏感性限制性分析(MSRA)对所收集DNA样本进行分析;进一步利用Real-time PCR(RT-PCR)方法对细胞RNA样本进行检测。结果在肺结核病人组中,DNA去甲基化酶表达均显著升高(P0.05)。H37Rv抗原、5azac导致DNA甲基化水平降低,且刺激时间越长甲基化降低越明显。且在刺激第4天A549细胞中H37Rv刺激组DNA去甲基化酶TET2、TET3上调,而在Beas-2B中为H37Rv刺激组DNA去甲基化酶TDG上调,与临床检测结果相符。结论在活动性肺结核病人中及体外细胞刺激实验H37Rv抗原刺激组中,DNA甲基化呈现低甲基化趋势;DNA去甲基化酶可能是参与其DNA低甲基化趋势的主要的酶。     

多抗甲素体外对肿瘤细胞生物大分子合成的抑制作用

应用放射性同位素前体掺入法,研究多抗甲素对人自血病体外培养细胞株K_(562),HL-60细胞DNA和RNA合成的影响,并观察其对E_4B_(11)C_9杂交瘤细胞及体内分离的B_(16)F_(10)黑色素瘤细胞DNA、RNA和旦自质合成的影响。实验结果表明:多抗甲素对四株肿瘤细胞DNA、RNA和蛋白质合成均     

山稔子提取物对体外DNA氧化性损伤的保护作用

目的观察山稔子提取物对原代体外培养淋巴细胞DNA氧化损伤的保护作用。方法原代培养24h的脾淋巴细胞悬液,随机分为7组,其中5组细胞用不同浓度的山稔子提取物溶液预先处理60min,再加入50μmol/L的H2O2,H2O2染毒组直接加入相同浓度的H2O2,空白对照组加入等量的PBS溶液,7组细胞共同在4℃下染毒20min,收获细胞同时进行单细胞凝胶电泳,计算DNA迁移的细胞率和总彗星长度。结果H2O2可致原代培养脾淋巴细胞的DNA严重损伤,而山稔子提取物能不同程度地降低H2O2诱导产生的DNA损伤,在10、50、100μg/mL的浓度下,彗星细胞出现率从阳性对照组的100%分别降低为85%、65%和30%（P分别〈0.05、0.01、0.01）,总彗星长度也从对照组的（52.82±6.42）μm,逐渐降低为（43.68±5.59）μm、（35.80±8.75）μm、（25.35±4.32）μm（P分别〈0.05、0.01、0.01）。结论山稔子提取物具有抗氧化作用,能在一定浓度范围内保护细胞显著降低氧自由基对DNA的氧化损伤。     

人原癌基因c—fos反义RNA制备及初步应用

采用逆转录 DNA 聚合酶链反应方法合成了人原癌基因 c—fos 特定 cDNA 片段.然后,将该片段与 PGEM3Zf( )质粒重组,构建成为可体外转录 c—fos 反义 RNA 重组质粒.选用 T7RNA 聚合酶系统合成了 c—fos 反义 RNA。且本文对反义 RNA 的应用亦进行了初步探讨.     

国产新型抗炎药物萘普酮对大鼠肝脾核糖核酸(RNA)及脱氧核糖核酸(DNA)含量的影响

由于同种动物相同的器官体细胞中的DNA含量相对恒定,损伤DNA的药物可能影响细胞中的DNA合成速度(修复速度)及含量。RNA在体细胞中的含量与细胞的功能和活动状态有密切关系,对蛋白质合成有重要影响。因此观察药物作用后器官中的DNA及RNA含     

小泛素样修饰蛋白1假基因3通过蛋白激酶B信号通路影响非小细胞肺癌细胞系H1299增殖和凋亡

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)小泛素样修饰蛋白1假基因3(SUMO1P3)对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 用Real-time PCR方法测定非小细胞肺癌细胞系H1299中SUMO1P3表达变化.在H1299细胞中转染SUMO1P3小干扰RNA(siRNA),Real-time PCR方法测定下调...     

p27kip1基因对食管癌细胞DNA复制及蛋白质合成的影响

目的:研究p27kip1基因对人食管癌细胞EC-9706的DNA复制及蛋白质合成的影响。方法: 重组体腺病毒Ad-p27kip1转染EC-9706细胞, 采用细胞生长计数、 [³H]-TdR、[³H]-Leucine掺入法、流式细胞术,研究其对食管癌细胞DNA复制及蛋白合成的影响。结果: Ad-p27kip1组细胞生长明显受抑, [³H]-TdR、[³H]-Leucine掺入量均明显减少,与对照组比较P<0.01;食管癌细胞的增殖明显受抑制。结论: p27可有效抑制食管癌细胞的增殖活性,这与其抑制食管癌细胞DNA复制及蛋白质合成有关。     

兔网织红细胞5srRNA对小鼠骨髓瘤细胞SP2/0DNA合成的影响

本文报道以~(125)Ⅰ-兔网织红细胞5srRNA温育小鼠骨髓瘤细胞SP2/0后的放射自显影实验,及对宿主细胞DNA合成的影响。结果表明,进入小鼠骨髓瘤细胞中的兔网织红细胞5srRNA集中在核内,~3H-TdR参入实验表明,兔网织红细胞5srRNA进入SP2/O核内后,显著抑制了核内DNA合成和肿瘤细胞的分裂活动。以上结果对哺乳类网织红细胞胞质中存在调控肿瘤细胞生长的负调节因子提供了实验依据。     

小鼠不同细胞间表观遗传修饰的变化对Pdx-1基因转录表达的影响

目的:通过比较小鼠不同细胞类型之间Pdx-1基因转录起始区的表观遗传修饰差异,探讨表观遗传修饰对Pdx-1基因转录表达的作用。方法:采用免疫共沉淀-实时定量PCR法检测小鼠胚胎干细胞(mES)、小鼠成纤维细胞株NIH3T3细胞和小鼠β细胞株NIT-1细胞Pdx-1和MLH1基因转录起始区DNA甲基化和组蛋白修饰(H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化)的状况。同时采用实时定量RT-PCR检测上述3种细胞各基因mRNA表达水平。分析基因的DNA甲基化水平、H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化修饰与基因表达之间的相互关系。结果:(1)以mES细胞为对照,NIT-1细胞的Pdx-1基因转录起始区呈低DNA甲基化和高H3K4m3修饰(P0.05),NIH3T3细胞的Pdx-1基因的转录起始区的DNA甲基化、H3乙酰化、H3K4m3和H3K9m3修饰水平明显增高(P0.05);(2)Pdx-1基因仅在NIT-1细胞表达,其表达与DNA甲基化存在等级负相关(r=-0.802,P0.01),与H3K4m3修饰存在直线相关(r=0.997,P0.01),与H3K9m3修饰存在等级负相关(r=-0.879,P0.01);(3)管家基因MLH1的表达与所检测的表观遗传修饰无相关性。结论:DNA甲基化、H3K9m3与H3K4m3修饰能相互协调,共同调控Pdx-1基因的表达,对胚胎干细胞向β细胞分化具有重要意义。     

蒽环类抗癌抗生素对DNA碱基顺序作用的研究

本文采用体外无细胞RNA合成系统对蒽环类中的代表药阿克拉霉素B(ACM-B)和阿霉素(ADM)抑制十种不同顺序排列的DNA模板的依赖DNA的RNA合成作了比较研究。实验结果表明两药对依赖DNA的RNA合成均有显著的抑制;抑制作用的强弱与不同的模板有关。抑制作用可被增加DNA模板的量逆转。这有力地表明两药抑制