鲍曼不动杆菌的耐药基因分型与脉冲场凝胶电泳分型的比较

[目的]了解耐药鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii,Ab）中耐药基因的分布情况,并比较基于耐药基因分型和脉冲场凝胶电泳分型的差异性。[方法]对2005年宁波市第二医院收集的27株流行和散发的Ab进行耐药分析,并对脉冲场凝胶电泳方法和基于耐药基因聚合酶链反应的聚类分析方法进行比较。[结果]27株Ab耐多种抗生素和携带多种耐药基因。基于多个类别的耐药基因分型与脉冲场凝胶电泳方法分型相比有88.9%的一致性,而且耐药基因分型能更好地反映不同耐药株的耐药过程。[结论]与脉冲场凝胶电泳方法相比,耐药基因分型方法可以用于院内感染的流行研究,且有助于临床的诊断和治疗。     

多耐药鲍氏不动杆菌菌株亲缘性分析

目的了解医院感染多耐药鲍氏不动杆菌(MDR-ABA)的耐药基因及亲缘性。方法采用PCR对20株MDR-ABA进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类耐药基因、转座子遗传标记、整合子遗传标记共36种耐药基因的检测,并以耐药基因作为分子标志作聚类分析;同时用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子同源性检测以作参照。结果 20株MDR-ABA中,TEM、ADC、OXA-23群阳性率分别为100%、75%、50%,而其他β-内酰胺酶相关基因均为阴性;aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ阳性率分别为10%、15%、30%、25%;转座子遗传标记tnpU检出率为55%、整合子遗传标记qacE△1-sul1阳性15株(75%),并对检测结果作样本聚类分析,聚类分析提示20株MDR-ABA可分为A、B两群,均存在克隆传播现象;而PFGE法通过图形条带分析所得结果与聚类分析结果具有一定差异。结论 MDR-ABA耐药基因检出率较高,并可导致医院内克隆传播感染,聚类分析比PFGE更能反映菌株遗传信息,是分析同源性更科学方法。     

鲍氏不动杆菌耐药基因和整合子、转座子遗传标记及菌株亲缘性研究

目的了解鲍氏不动杆菌(ABA)耐药基因和整合子、Tn21/Tn501转座子存在状况及菌株亲缘性。方法对分离自临床27株ABA进行耐药基因、整合子、转座子检测,检测结果作聚类分析。结果27株中blaTEM、blaOXA-23群、blaADC、aac(3)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅰ、ant(3″)-Ⅰ、qacE△1-sulⅠ、intⅠ1阳性率分别为81.5%、44.4%、85.2%、85.2%、66.7%、81.5%、85.2%、85.2%,其余基因均阴性,聚类分析显示存在克隆传播现象。结论ABA可导致克隆传播医院感染,并存在暴发性流行。     

泛耐药鲍曼不动杆菌相关耐药基因检测及亲缘性分析

目的 了解临床分离的泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-AB)携带β-内酰胺酶(bla)基因、整合酶基因、氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因及喹诺酮类耐药基因情况以及它们的亲缘性关系.方法 用PCR及序列分析方法对50株PDR-AB进行各种耐药基因的检测,采用DNAMAN软件进行基因的树状结构的构建和亲缘性分析.结果 50株PDR-AB共检测耐药基因21种,TEM、SHV、PER、VEB-1、CTX-M-1、ADC、IMP-1、IMP-2、VIM-2、OXA-23、OXA-24、IntI1、IntI2、IntI3、qnrAm、qnrBm、qnrS、qepA、gyrA突变基因、parC突变基因、Aac(6')-1b阳性检出率分别为100％、100％、86％、0、38％、100％、100％、76％、88％、86％、0、98％、22％、2％、6％、60％、6％、0、100％、100％、76％.50株PDR-AB间具有一定的亲缘性.结论 PDR-AB同时携带多种耐药基因是导致其对常用药物均耐药的重要原因,临床应加强有效的监测工作来控制PDR-AB传播并选择有效的抗生素进行治疗.     

鲍氏不动杆菌流行株耐药基因及菌株亲缘性分析

目的 了解鲍氏不动杆菌(ABA)流行株耐药基因携带状况和菌株的亲缘性,为医院流行病学溯源提供依据.方法对39株ABA采用PCR检测19种耐药基因(TEM、SHV、PER、VEB、GES、CARB、CTX-M-1群、OXA-23群、OXA-24群、IMP、VIM、DHA、aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅰ、aac(6')-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ、ant(2")-Ⅰ、qacE△1-sull).结果 TEM阳性13株(33.3%)、OXA-23群阳性20株(51.3%)、aac(3)-Ⅰ阳性25株(64.1%)、aac(6')-Ⅰ阳性25株(64.1%)、ant(3")-Ⅰ阳性29株(74.4%)、qacE△1-sull阳性32株(82.1%),其余基因均阴性;聚类分析提示存在克隆传播现象.结论 ABA流行株β-内酰胺酶、氨基糖苷类修饰酶和消毒剂-磺胺耐药基因携带率高,存在克隆传播医院感染流行的危险.     

泛耐药鲍曼不动杆菌的研究进展

鲍曼不动杆菌已成为医院感染的重要病原菌.随着广谱抗生素的广泛应用,鲍曼不动杆菌的耐药率逐渐增高.临床上已出现了泛耐药菌株,而且其分离率也逐年上升,已成为临床抗感染治疗的难题.此文对近年来国内外泛耐药鲍曼不动杆菌的耐药机制、分型方法、临床治疗策略及最新研究等方面作一综述.     

多药耐药鲍氏不动杆菌菌株亲缘性分析

目的了解多药耐药鲍氏不动杆菌(MDR-ABA)临床分离株的亲缘性。方法在2007年11月~2008年2月从浙江大学医学院附属第一医院住院患者中分离62株MDR-ABA,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法检测β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类耐药基因(含氨基糖苷类修饰酶基因、16S rRNA甲基化酶基因)和喹诺酮类、利福平、四环素、氯霉素、磺胺类耐药基因,多种药物外排泵基因以及质粒、转座子、整合子遗传标记等68种基因,并以该68种基因为分子标记,对检测结果作样本聚类分析。结果62株中TEM、ADC、OXA-23、gyrA突变、aac(3)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ、aph(3′)-Ⅰ、aph(3′)-Ⅱb、tetB、mdf A、tehA、qacE△1-sul1、intⅠ1、tnpU和tnp513基因阳性率分别为82.2%、58.1%、80.6%、83.9%、12.9%、35.5%、35.5%、30.6%、3.2%、74.2%、100.0%、12.9%、58.1%、54.8%、54.8%和56.4%,聚类分析示存在克隆传播现象,有两个流行株,并已发生衍化。结论调查MDR-ABA多药耐药表型与基因检测状况相符,MDR-ABA可导致克隆传播医院感染,多基因聚类分析法是判断医院感染流行株的可靠方法,对临床治疗和医院感染的防控具有指导意义。     

鲍氏不动杆菌老年患者分离株亲缘性分析

目的 了解鲍氏不动杆菌(ABA)老年患者分离株亲缘性.方法 采用聚合酶链反应(PCR)检测20株ABA 33种耐药基因,并作聚类分析.结果 AmpC(染色体型)、TEM、PER阳性率为85%、55%、25%,其余基因均阴性;aac(3)-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ,aac(6')-Ⅰ b、armA阳性率为95%、95%、40%、15%、35%,其余基因均阴性;消毒剂-磺胺耐药基因qacE△1-sull阳性15株(75%);在ABA老年患者分离株中AmpC(染色体型)、TEM、PER、aac(3)-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ、armA、qacE△1-sull阳性率高;聚类分析示存在克隆传播现象.结论 ABA老年患者分离株耐药表型与基因检测状况相符,ABA可导致医院感染.     

鲍氏不动杆菌脉冲场凝胶电泳和扩增片段长度多态性基因分型的研究

目的利用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和扩增片段长度多态性（AFLP）分型方法,了解医院鲍氏不动杆菌菌株亲缘性。方法采用NCCLS方法研究药物敏感性;采用PFGE和AFLP技术研究鲍氏不动杆菌基因型;对检测结果作聚合分析讨论菌株亲缘性。结果鲍氏不动杆菌利用PFGE分型可以分为4个亚型、利用AFLP分型可以分为2个亚型;聚合分析具有一致性。结论AFLP分型更具有实用价值。     

临床多重耐药鲍曼不动杆菌的研究进展

随着新型广谱抗菌药物的广泛应用,鲍曼不动杆菌的耐药率逐年升高,多重耐药甚至泛耐药鲍曼不动杆菌的临床分离率明显增高。此文对近年来国内外多重耐药鲍曼不动杆菌感染的耐药机制、分型检测方法及临床治疗作一综述。     

扩增片段多态性分析鲍曼不动杆菌的同源性

目的 采用扩增片段长度多态性(AFLP)技术,分析鲍曼不动杆菌(鲍氏不动杆菌)菌株亲缘性.方法 建立AFLP分型平台研究鲍曼不动杆菌基因型,对检测结果 作聚合分析并分析菌株亲缘性.结果 经AFLP分型,27株鲍曼不动杆菌可分为2个亚型:AFLP Ⅰ和AFLP Ⅱ.结论 AFLP分型可用于鲍曼不动杆菌的基因分型,有助于观察其耐药性变化和监测院内感染.     

鲍氏不动杆菌消毒剂耐药基因qacE△1的检测

目的:了解重症监护患者耐药性鲍氏不动杆菌携带消毒剂耐药基因存在情况。方法:应用聚合酶链反应(PCR),对鲍氏不动杆菌耐药株进行消毒剂qacE△1基因检测与分析。结果:20株鲍氏不动杆菌检测到消毒剂耐药基因qacE△1 20株,检出率为100%。结论:重症监护患者多重耐药性鲍氏不动杆菌消毒剂耐药基因检出率高,提示临床抗药菌株可能也对消毒剂存在抗性。     

中山市两家医院鲍曼不动杆菌耐药性及同源性分析

目的 了解中山市两家医院临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药性及耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii, CRAB)耐药基因的携带情况,并分析其同源性,为医院感染控制提供实验室依据。方法 收集2018年3—8月中山市两家医院临床分离的35株鲍曼不动杆菌,采用最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)法进行16种抗菌药物敏感试验,并筛选出CRAB菌株,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)扩增CRAB中的耐药基因并测序确认;应用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)技术对35株鲍曼不动杆菌进行分子分型。结果 35株鲍曼不动杆菌中有33株为CRAB,其余2株对16种抗菌药物全敏感。33株CRAB对替加环素和多粘菌素B均敏感,对米诺环素的敏感率为45.45%,而对其他抗菌药物的耐药率均高达80%以上。33株CRAB均携带OXA-51基因,未检测到IMP和VIM基因。35株鲍曼不动杆菌共分为18个PFGE带型;分为A-F 6个聚类型别,A型(9/35,25.7%)和B型(22/35,62.9%)为主要流行克隆株。结论 鲍曼不动杆菌耐药现象严重,携带多种耐药基因可能是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类等多种抗菌药物耐药的重要原因。医院内存在不同克隆株播散以及同一克隆株在医院间流行播散。     

脉冲场凝胶电泳与多基因聚类分析在铜绿假单胞菌株亲缘性研究中的应用

目的:了解分离自临床铜绿假单胞菌分子流行病学特性及菌株亲缘性。方法:对分离自临床的32株铜绿假单胞菌采用Kirby-Bauer法测定抗菌药物的敏感性;利用脉冲场电泳和多耐药基因聚类分析菌株的亲缘性。结果:32株铜绿假单胞菌中有17株对8种以上抗生素耐药,占53.1%,8株(25%)铜绿假单胞菌对检测抗生素全部耐药,为同一耐药表型。脉冲场电泳聚类分析显示,铜绿假单胞菌主要为3个克隆株;而多耐药基因聚类分析显示,铜绿假单胞菌主要为2个簇群,二个簇群内已发生衍化,存在3个克隆传播。结论:分离自临床的铜绿假单胞菌耐药严重,亲缘性分析中多基因聚类分析法分辨率高于脉冲场电泳。     

乳酸杆菌及嗜热链球菌脉冲场凝胶电泳分子分型方法建立及应用

目的 建立乳酸杆菌及嗜热链球菌的PFGE分子分型方法,并对北京市售酸奶中分离的乳酸杆菌及嗜热链球菌进行分子分型.方法 选取ApaⅠ、NotⅠ、sfiⅠ、XbaⅠ和SmaⅠ共5种PFGE分析中常用的限制性内切酶,对从北京市售酸奶中分离到的52株乳酸杆菌、嗜热链球菌以及相应的标准菌株进行酶切,优化PFGE限制性内切酶种类及电泳条件,并用优化出的实验条件对菌株进行分子分型,同时进行聚类分析,与生化鉴定及16s rRNA基因鉴定结果进行对比分析.结果 限制性内切酶NotⅠ对保加利亚乳酸杆菌、发酵乳酸杆菌和德氏乳酸杆菌的酶切效果较好,而限制性内切酶Apa Ⅰ对嗜热链球菌、嗜酸乳酸杆菌及干酪乳酸杆菌的酶切效果较好.24株保加利亚乳酸杆菌被分为8个PFGE型,15株嗜热链球菌被分为8个PFGE型,7株嗜酸乳酸杆菌被分为3个PFGE型,2株德氏乳酸杆菌分属于2个不同的PFGE型.结论 建立的PFGE方法分析结果与生化鉴定及16s rRNA基因鉴定结果高度符合,所建方法适用于乳酸杆菌及嗜热链球菌的分子分型.     

2005～2008年鲍氏不动杆菌的耐药性变迁分析

目的了解鲍氏不动杆菌的感染分布及耐药性变迁情况,为临床治疗及预防提供依据。方法回顾性分析2005年1月~2008年12月临床标本中分离的292株鲍氏不动杆菌的临床感染特点及其药敏结果。结果鲍氏不动杆菌感染临床分布以重症监护病房及呼吸科居多,临床标本中以呼吸道标本分离率最高,占81.5%;体外药敏试验结果显示:4年间鲍氏不动杆菌对13种临床常用抗菌药物的耐药率总体呈先上升后下降趋势,到2008年,哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南、复方新诺明、环丙沙星、美罗培南、头孢吡肟等耐药率均50.0%;介于30.0%~50.0%的有阿米卡星、妥布霉素,多黏菌素E的耐药率最低,为4.9%。结论鲍氏不动杆菌对抗菌药物存在多药耐药性,该菌耐药率高,临床上应根据其临床分布特点和药敏试验结果选用合理抗菌药物。     

致呼吸机相关性肺炎的鲍曼不动杆菌分子分型

目的了解引起呼吸机相关性肺炎(VAP)的鲍曼不动杆菌(Ab)分子流行病学特征。方法对分离自VAP患者下呼吸道分泌物标本中的7株Ab菌株进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型及耐药性检测。结果7株Ab的PFGE电泳条带相似度为57%～100%, 分为A、B、C、D 4个PFGE型别,其中A、B、D型各2株（28.57%）,C型1株（14.29%）。Ab对头孢他啶、亚胺培南和妥布霉素等13种抗菌药物产生不同程度的耐药性,均为泛耐药菌株,其中C型Ab为全耐药菌株。结论PFGE分型技术可以准确和快速地用于Ab引起的医院感染溯源、分型。     

鲍氏不动杆菌感染及耐药性变化的趋势

目的了解鲍氏不动杆菌感染及耐药性变化的趋势.方法分析2000～2002年分离自住院患者标本的鲍氏不动杆菌及其耐药性资料.结果 3年间共分离到鲍氏不动杆菌111株,以ICU内下呼吸道感染为主,对亚胺培南耐药率最低,平均5.4%,对其他抗生素均有较高的耐药率,以头孢菌素类尤甚.结论警惕并重视鲍氏不动杆菌感染,注意病原菌及耐药率的监测,规范抗生素应用,保持敏感抗生素的抗菌活性.     

多重耐药鲍曼不动杆菌DNA同源性与耐药基因研究

目的研究邵阳市中心医院多重耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学特征与相关耐药基因流行情况。方法对临床分离的40株多重耐药鲍曼不动杆菌经采用肠杆菌科间一致重复序列PCR方法同源性分析获得的A、B、C、D 4种克隆株,应用聚合酶链反应及序列分析方法分析耐药基因类型。结果本院多重耐药鲍曼不动杆菌共检测出TEM-1、OXA-23和PER-1三种耐药基因,未检出SHV、DHA、OXA-24、GES、IMP、VIM耐药基因。TEM-1检出率为100%,OXA-23(45%),PER-1(10%),其中2株菌同时检测到TEM-1、OXA-23和PER-1三种耐药基因,分别为A型和C型各1株,另2株菌同时检测到TEM-1和PER-1两种耐药基因,分别为C型和D型各1株,有16株菌同时检测到TEM-1和OXA-23两种耐药基因。结论携带TEM-1和OXA-23耐药基因多重耐药鲍曼不动杆菌是本院主要流行菌株,且存在克隆流行。携带TEM-1、OXA-23、PER-1三种耐药基因的菌株和携带TEM-1、PER-1两种耐药基因的菌株在临床分离株中已不鲜见。临床应加强鲍曼不动杆菌医院感染的控制,防止耐药菌株在医院暴发流行。     

医院内鲍曼不动杆菌感染调查及泛耐药情况分析

目的:了解某院近3年来医院内鲍曼不动杆菌感染现状,分析其耐药谱变迁及泛耐药情况,为临床了解及防控院内感染提供依据。方法:对医院2007年-2009年分离的鲍曼不动杆菌分布及耐药情况进行回顾性分析。细菌鉴定采用美国德灵细菌鉴定仪。结果:3年间共分离到鲍曼不动杆菌305株,其中2007年72株2,008年91株,2009年142株,其中通过呼吸道感染占82.12%。泛耐药菌株感染率呈现出逐年上升趋势,2007年5株(占6.94%)2,008年9株(占9.89%)2,009年有19株(占13.38%)。结论:鲍曼不动杆菌感染呈逐年上升趋势,以呼吸道感染方式为主,其泛耐药菌株感染率呈上升趋势。应加强病房环境和人员消毒,加强抗生素的合理使用,控制鲍曼不动杆菌在医院内的定值和播散,重视泛耐药鲍曼不动杆菌监测。