慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞免疫功能的研究

目的　研究慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞 (DC)表面分子HLA -DR、CD1a、CD80 、CD86表达水平及其与DC免疫功能的相关性。方法　临床确诊的慢性乙型肝炎轻度患者 1 0例 ,从其外周血中分离单个核细胞 ,体外培养扩增DC ,流式细胞仪检测DC表型HLA -DR、CD1a、CD80 、CD86。以健康成人 1 0例作为对照。结果　慢性乙型肝炎患者DC表面HLA -DR、CD1a、CD80 、CD86分别为 :48.63± 6.34,2 7.73±7.1 9,2 1 .0 5± 8.33,1 8.5 8± 5 .5 1 ,明显低于对照组 :83.1 1± 6.46,5 2 .80± 1 1 .70 ,36.1 1± 7.5 5 ,40 .83± 5 .48,两者相比差异显著 (P <0 .0 0 1 )。结论　慢性乙型肝炎患者外周血DC表面HLA -DR、CD1a、CD80 、CD86表达水平下降 ,并与DC免疫功能低下密切相关     

辛伐他汀对人单核源树突状细胞成熟及免疫功能影响的研究

目的：探讨辛伐他汀对人单核源树突状细胞（Dendriticcell，DC）成熟和免疫功能的影响．方法：梯度离心法分离人外周血单核细胞（peripheralblood monoucleav cells，PBMC），经含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（recombinanthumangranulocyte—macrophagecolony—stimulatingfactor，rhGM—CSF）和重组人白介素-4（recomlfinanthumaninterleukin-4，rhIL-4）的Cellgro培养，使其分化为Dc。以PBS组作阴性对照，LPS组作阳性对照，将Dc与Dil染料标记的氧化低密度脂蛋白共同孵育48h及Dc与100μmol／L辛伐他汀和50mg/LDiI染料标记的氧化低密度脂蛋白（oxy—LowDensityLipoprotein，Ox—LDI。）共同孵育48h作实验组，流式细胞术（FluorescenceActivatedCellSorting，FACS）检测DC表型（CDla、CD80、CD86、HLA—DR）的表达，同时镜下观察DC吞噬Ox—LDL的形态变化。结果：经辛伐他汀处理的DC可下调CDla、HLA—DR的表达，抑制DC对Ox—LDI．的吞噬作用。结论：辛伐他汀可明显抑制Dc的免疫活性，他汀类药物可能具有免疫调节的新机制。     

Semaphorins分子与树突状细胞的免疫功能

Semaphorins是一大类具有保守Seam结构域的信号蛋白,除了在神经系统中具有重要作用外,在肿瘤生长、血管内皮细胞迁移、免疫反应等方面也有重要的生物学功能。树突状细胞（dendritic cells,DCs）在免疫应答的首要环节抗原提呈中扮演着重要的角色,是目前公认的体内功能最强大的专职性抗原提呈细胞（antigen-presenting cell,APC）。文章主要阐述了Semaphorins与DCs的结构、分型、功能等,以及他们之间在免疫系统中的作用。     

脓毒血症对大鼠外周血树突状细胞免疫功能的影响

目的探讨脓毒血症大鼠外周血树突状细胞(DC)数量和免疫功能的变化及意义。方法将SD大鼠随机分为正常对照组和致伤组,正常对照组只麻醉不致伤,并取外周血1次;致伤组以盲肠结扎穿孔制作脓毒症动物模型,分别于伤后4、12、24 h活杀动物取标本。分离两组外周血DC,通过流式细胞仪检测各组的DC数量,DC表面HLA-DR、CD80、CD86表达水平以及DC诱导的T细胞反应性增殖,并检测各组外周血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平。结果致伤组DC数量较正常对照组明显下降;DC表面HLA-DR、CD80、CD86表达水平也较正常对照组明显降低。致伤组DC诱导的T细胞增殖能力明显低于正常对照组;伤后血清IL-1β、IL-6显著升高,与正常对照组比较差异有统计学意义。结论脓毒血症早期大鼠外周血DC数量下降,功能降低,与伤后免疫系统功能低下密切相关。     

反复呼吸道感染患儿树突状细胞水平和免疫功能的研究

目的检测反复呼吸道感染（RRI）患儿树突状细胞（DC）水平及与树突状细胞活性密切相关的细胞免疫及体液免疫功能指标的变化,并探讨其临床指导意义。方法分别检测53例反复呼吸道感染患儿外周血CD3、CD4、CD8、CD4/CD8淋巴细胞亚群及免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的含量变化,其中42例测DC水平,并与具有可比性的36例健康儿童进行对照研究。结果病例组外周血DC水平[（5.21±1.74）×106/L）]显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;CD3、CD4、CD4/CD8与对照组比较均明显下降（P〈0.05）;CD8无显著性变化;免疫球蛋白IgG、IgA含量显著性下降（P〈0.01）,IgM无显著性变化。结论 RRI患儿存在DC活性下降和免疫功能失调,细胞免疫和体液免疫功能均有不同程度的下降,并可能与患儿的发病、病情转归、预后等有关,这些指标的变化可作为评价疗效的参考指标。DC计数及活性分析可作为RRI研究的一个新视角。     

自体树突状细胞疫苗对非小细胞肺癌患者术后免疫功能的影响

目的:对非小细胞肺癌的患者手术后进行自体树突状细胞(DC)疫苗的回输,评价机体的免疫反应、临床应用后的不良反应.方法:10例肺癌患者行肺癌根治术,术中收集患者肺癌标本.术后取患者外周血,收获DC细胞.同时将肺癌标本经热休克法诱导肿瘤细胞凋亡,负载于DC,制成DC疫苗.术后采用患者双侧腹股沟皮下注射DC疫苗,每周1次,共4次.并于每次疫苗回输后1周做外周血免疫细胞T细胞亚群(CD4 、CD8 )、NK细胞的水平和细胞因子(肿瘤坏死因子-α、γ-干扰素、白介素-2、白介素-12)水平的免疫指标检测,并观察DC疫苗临床应用后的不良反应.结果:术后第1次DC疫苗回输后各免疫指标检测值与术前比较无显著差异(P0.05).第2、3、4次回输后各免疫指标检测值与术前比较有显著差异(P<0.05).10例患者在DC疫苗回输后未出现发热寒战、注射部位红肿、皮肤过敏等不良反应.结论:自体DC疫苗回输后能有效提高患者的各项免疫指标,证实了DC疫苗在肺癌生物治疗的临床应用的可行性.     

甲状腺炎与免疫功能紊乱

甲状腺炎与免疫功能紊乱中国医科大学第二临床学院（１１０００３）韩萍甲状腺炎是包括一组炎症性及非炎症性的甲状腺疾病。根据对疾病的认识大体可分为：感染性甲状腺炎（包括细菌、分支杆菌、真菌、原虫等），亚急性甲状腺炎，慢性淋巴细胞性甲状腺炎，慢性纤维性甲状腺...     

树突状细胞与肿瘤免疫

机体的免疫首先是由抗原提呈细胞(antigen presenting cells, APC)捕获抗原,经其加工、处理后将抗原信息传递给T、B淋巴细胞,并通过APC膜表面所表达的共刺激分子向T、B淋巴细胞提供第二信号进而诱发特异性免疫应答.APC是机体免疫反应的首要环节,能否进行有效的抗原呈递直接关系到免疫激活或免疫耐受的诱导.     

雷帕霉素对人单核细胞来源的树突状细胞免疫功能的影响

目的：研究雷帕霉素对人树突状细胞（DC）免疫功能的影响。方法分离外周血单个核细胞,在含粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGM- CSF）、IL-4、胎牛血清及有或无雷帕霉素的培养条件下制备DC。用流式细胞仪检测DC表型（CD1a、CD83、CD86、HLA- DR）;混合淋巴细胞反应（MLR）检测DC对同种异体T淋巴细胞的刺激能力;流式细胞仪检测DC吞噬功能和凋亡细胞数;ELISA法测定MLR上清液中的细胞因子。结果与对照组比较,经雷帕霉素处理的DC表面CD1a、CD83、CD86、HLA- DR的表达明显降低（均P＜0.01）;对T淋巴细胞刺激的能力下降（P＜0.01）;细胞吞噬能力下降（P＜0.01）;凋亡细胞数增加（P＜0.01）,MLR中细胞因子（TNF-α、IL-10、IL-12）浓度降低（均P＜0.01）。结论雷帕霉素对人树突状细胞免疫功能有明显的抑制作用,可能是其防止冠状动脉支架术后再狭窄的机制之一。     

辛伐他汀对人单核源树突状细胞成熟及免疫功能影响的研究

目的:探讨辛伐他汀对人单核源树突状细胞(Dendritic cell,DC)成熟和免疫功能的影响。方法:梯度离心法分离人外周血单核细胞(peripheral blood monouclear cells,PBMC),经含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,rhGM-CSF)和重组人白介素-4(recombinant human interleukin-4,rhIL-4)的Cellgro培养,使其分化为DC。以PBS组作阴性对照,LPS组作阳性对照,将DC与Dil染料标记的氧化低密度脂蛋白共同孵育48 h及DC与100μmol/L辛伐他汀和50 mg/L DiI染料标记的氧化低密度脂蛋白(oxy-Low Density Lipoprotein,0x-LDL)共同孵育48 h作实验组,流式细胞术(Fluorescence Activated Cell Sorting,FACS)检测DC表型(CDla、CD80、CD86、HLA-DR)的表达,同时镜下观察DC吞噬0x-LDL的形态变化。结果:经辛伐他汀处理的DC可下调CDla、HLA-DR的表达,抑制DC对0x-LDL的吞噬作用。结论:辛伐他汀可明显抑制DC的免疫活性,他汀类药物可能具有免疫调节的新机制。     

Effect of growth hormone on the immune function of dendritic cells

Background Dendritic cells （DCs） are one of the most important antigen presenting cells in the human body, and DCs at various stages of maturation possess different or even opposite functions. The aim of this study was to investigate the influence of growth hormones on the functional status of cord blood-derived DCs encompassing immunophenotype, ability to excrete interleukin （IL）-12 and provoke autologous leukomonocyte. Methods Mononuclear cells were isolated from fresh cord blood, with IL-4 and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor （GM-CSF） used to induce and stimulate the mononuclear cells. Growth hormone at different concentrations was used to modify DCs, and then DCs morphology, number and growth status were observed. The immunophenotype of DCs was detected with a flow cytometer. The concentration of IL-12 in the DCs supematant was determined by enzyme linked immunosorbent assay （ELISA） and DCs functional status was evaluated by autologous mixed lymphocyte reactions. Results Mononuclear cells from cord blood can be differentiated into DCs by cytokine induction and growth hormone modification. With the increase in growth hormone concentrations （5-100 pg/L）, the expression of DCs HLA-DR, CDla, CD80 and CD83 were significantly increased （P 〈0.05）. The ability of DCs to secrete IL-12 was significantly improved （P 〈0.05）, and the ability of DCs to activate autologous lymphocytes was significantly enhanced （P 〈0.05）. Pegvisomant was able to ablate the effects of growth hormone on DCs. Conclusions Growth hormone may facilitate DCs induction and maturation, and improve the reproductive activity of autologous lymphocytes in a dose-dependent manner. Growth hormone may serve as a factor of modifying DCs to achieving maturity.     

树突状细胞(DC)疫苗对胰腺癌患者免疫功能的影响

目的: 探讨负载胰腺癌抗原的树突状细胞(DC)疫苗对胰腺癌患者免疫功能的影响?方法:从胰腺癌患者外周血单个核细胞中诱导DC,并用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和白细胞介素4(rhIL-4)刺激活化,经热休克凋亡胰腺癌细胞致敏制备DC疫苗?将30例胰腺癌患者随机分为化疗加用DC瘤苗治疗(A)组15例,单纯化疗对照(B)组15例?对两组患者治疗前后T细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞及血清IL-2?IL-12?γ干扰素(IFN-γ)水平进行比较,并进行迟发性超敏反应(DTH)试验?结果:A组治疗后外周血CD3+?CD3+CD4+?CD4+/CD8+及NK细胞比率较治疗前明显升高(P < 0.05),且明显高于B组(P < 0.05);A组治疗后血清IL-2?IL-12?IFN-γ水平较治疗前明显升高(P < 0.05),A组中有4例患者DTH试验呈阳性?结论:负载胰腺癌抗原的DC疫苗治疗可改善患者的免疫功能?     

结核分枝杆菌感染对小鼠树突状细胞功能的影响

目的：：探讨结核分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染对小鼠骨髓来源的树突状细胞( DC)功能的影响。方法：将DC分为4组,即脂多糖( LPS)感染组、Mtb感染组、灭活Mtb感染组和正常细胞对照组。以LPS、Mtb及灭活的Mtb与小鼠骨髓来源的DC建立小鼠体外感染模型,用酶联免疫吸附法测定白细胞介素( IL)-6、IL-12及肿瘤坏死因子-α的表达;流式细胞术检测DC表面主要组织相容性复合体Ⅱ类分子、CD40、CD80和CD86的表达。结果：每只小鼠的股骨骨髓可扩增获得5×106~1×107个具有典型细胞形态的DC,纯度达85%以上;与对照组比较,流式细胞术结果显示LPS、Mtb和灭活Mtb感染组均能促进DC表面分子的表达(P<0.01)。 Mtb感染组DC表面分子上调显著低于LPS感染组与灭活Mtb感染组(P<0.01);LPS、Mtb或灭活Mtb作用后,DC的IL-6、IL-12和肿瘤坏死因子-α分泌量显著增加(P<0.01),Mtb感染组DC的细胞因子分泌量显著低于LPS感染组与灭活Mtb感染组(P<0.01)。结论：Mtb活菌可干扰DC的细胞因子分泌,抑制DC成熟,从而削弱其抗原递呈的功能,影响抗原特异性细胞的免疫活化。     

人骨髓间质干细胞对树突状细胞成熟和功能影响的实验研究

目的探讨人骨髓间质干细胞对树突状细胞成熟和功能的影响以及人骨髓间质干细胞发挥免疫抑制作用的可能机制。方法以Friedenstein法分离培养骨髓间质干细胞,以密度梯度离心法分离培养外周血单个核细胞,在重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子和重组人白介素-4的培养条件下制备树突状细胞。在LPS(1ng/mL)诱导下获得成熟树突状细胞。将骨髓间质干细胞与成熟树突状细胞共培养48h后,混合淋巴细胞反应检测经骨髓间质干细胞处理前后树突状细胞对同种异体T细胞的增殖能力,流式细胞仪检测处理前后其表面共刺激分子CD86和成熟标记物抗原CD83的表达,ELISA法测定混合淋巴细胞反应上清中细胞因子的表达。结果与未成熟DCs组比较,成熟DCs组表面抗原CD86,CD83的表达均增加,对T淋巴细胞刺激能力增强,致炎细胞因子分泌(IL-12,IFN-γ)增多,而抑炎因子(IL-10)分泌减少,成熟DCs组经hMSCs处理后,表面抗原表达水平明显下降,致炎细胞因子分泌减少,而抑炎因子分泌增加,对T淋巴细胞刺激能力减弱,与未处理成熟组比较差异具有显著性,而与未成熟组比较差异无显著性。结论hMSCs能逆转成熟DCs为未成熟DCs状态,从能间接抑制DCs启动的T淋巴细胞增殖,抑制炎症因子的分泌,发挥免疫抑制作用。     

慢性粒细胞白血病树突状细胞诱导及其抗肿瘤功能的体外研究

目的 探讨人慢性粒细胞白血病(CGL)来源的树突状细胞(DC)的免疫功能。方法 应用重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)联合重组人白介素(rhIL)-4在体外诱导培养CGL细胞,获得DC。应用流式细胞仪(FACS)检测诱导前、后的细胞表型,观察其诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)的体外抗肿瘤效应。采用酶联免疫吸附试验(ELIS)测定DC培养及DC与外周血单个核细胞(PBMNC)共同培养的上清液中IL-12及干扰素(IFN)-γ的量。结果 联合rhGM-CSF及rhIL-4可诱导CGL细胞分化为DC;CGL-DC体外激活的CTL对CGL细胞具有特异性细胞毒活性;分别从诱导DC培养上清液和DC PBMNC培养的上清液中检测出一定量IL-12及IFN-γ。结论 CGL-DC具有抗原提呈细胞的免疫功能,可望用于CGL的免疫治疗。     

血透患者细胞免疫功能的变化

目的；探讨血透对患TI林巴细胞免疫功能的影响。方法：观察19例尿 毒症血透患透析前，透析5h,24h,48h,72h后外周血中T淋巴细胞亚群和白细胞，淋巴细胞计数，进行各时点指标与术前比较的方差分析，组间两两比较配对t检验，结果：患透析5h,24h的血白细胞，淋巴细胞显低于血透前水平，透析48h,72h后接近透析前水平，两差异无显性，透析前T淋巴细胞CD3^ ,CD4^ ,CD57^ 水平低于正常对照组，CD8^ 高于正常对照组，CD4^ /CD8^ =0.86,透析48h后CD3^ ,CD4^ ,CD57^ 较透析前明显增高CD4^ /CD8^ =1.26，CD8＋水平在透析前后无显改变，结论：血液透析对机体细胞免疫功能影响是多方面的，一方面由于血透后血浆中尿毒症毒素部分清除使T细胞免疫功能可获暂时性改善，同时由于血液透析过程对白细胞趋化，聚集和粘附作用的影响，外周血白细胞数量下降致使机体的免疫就答作用降低，应当重视对血透患免疫机能调节。     

免疫耐受型树突状细胞对变应性鼻炎免疫调节的研究进展

树突状细胞（DC）作为目前世界公认最有效的专职抗原提呈细胞,其通过识别、摄取和呈递抗原来调节初始CD4+Th细胞的分化,进而影响Th1/Th2平衡,在变应性鼻炎免疫调节反应中起重要作用。耐受型树突状细胞（tDC）既可以有效抑制效应T细胞来引起免疫耐受,也能诱导调节性T细胞活化来产生免疫耐受,从而减轻上呼吸道炎症反应,这使tDC能应用于变应性鼻炎的临床免疫防治中。从变应性鼻炎发病的免疫机制上来解释tDC与机体免疫细胞的相互关系,掌握t DC的基本生物学特征、形成的必要条件、与炎症细胞的相互作用关系等,将为tDC应用于变应性鼻炎的临床防治提供新的理论支持。该文将从t DC的表型和生物学特征、对Th1/Th2平衡的调节、诱导免疫耐受的机制与应用前景进行系统性分析总结,并对近年来的相关研究进行综述。     

肝癌细胞对树突状细胞线粒体功能的抑制作用

目的探索肝癌细胞(hepatocellular carcinoma cells,HCCs)分泌的可溶性细胞因子营造的微环境对树突状细胞(dendritic cells,DCs)线粒体功能状态的影响,以进一步理解肿瘤的免疫逃逸机制。方法用免疫磁珠从人外周血分离CD14+单核细胞,加入粒-巨噬细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage CSF,rhGM-CSF)、白介素4(IL-4)将单核细胞诱导分化为未成熟DCs(immature DCs,imDCs),利用肿瘤坏死因子α(recombinant human tumor necrosisfactor-α,rhTNF-α)将imDCs诱导为成熟DCs(mature DCs,mDCs),分别将imDCs和mDCs与肝癌细胞在Transwell中共培养48h,正常培养和撤生长因子培养的DCs作为对照,利用免疫荧光和MTT比色法研究HCCs对DCs的线粒体膜电位、酶活力和胞内钙离子浓度的影响。结果与HCCs共培养后,流式细胞仪的检测结果显示:imDCs和mDCs的线粒体膜电位分别从(659.991±17.052)和(473.741±11.676)下降到(482.681±7.935)和(407.189±5.051)(P0.05),imDCs和mDCs胞内钙离子浓度分别从(427.983±3.358)和(232.587±3.815)增加到(517.308±0.249)和(413.062±2.981)(P0.05,P0.01),MTT比色法的检测结果显示imDCs和mDCs的酶活力分别从(0.764±0.089)和(0.708±0.019)下降到(0.291±0.019)和(0.218±0.019)(P0.01)。结论HCCs可能通过抑制DCs的线粒体功能来损伤其免疫功能。     

他克莫斯对树突状细胞分化、成熟和功能的影响

目的:探讨他克莫斯(tacrolimus, FK506)对大鼠骨髓源性树突状细胞(DCs)分化、成熟和免疫学活性的影响.方法:收集大鼠骨髓源性DCs,加入不同浓度的FK506进行培养,采用流式细胞术行DCs表型分析,ELISA法检测培养上清中IL-12 的水平并行体外混合淋巴细胞反应(MLR),观察DCs对同种T细胞的刺激能力.构建大鼠肾移植模型,于移植前7 d输注FK506处理的DCs,观察移植肾存活时间.采用ELISA法检测MLR培养上清和移植大鼠血清中TH1/TH2细胞因子IFN-γ,IL-2,IL-4 和IL-10的表达水平.结果:FK506对DCs表面分子(Iad,CD80和CD86)的表达无明显影响(P＞0.05),而IL-12的分泌水平降低(P＜0.05),并显著抑制DCs对T细胞的激活能力(P＜0.05).大鼠移植肾存活时间分别为对照组(6.3±0.7) d,DCs组(7.2±1.4) d与FK506-DCs组(19.0±2.3) d,对照组与DCs组之间差异无统计学意义,而FK506-DCs组与DCs组之间差异有统计学意义(P＜0.05).在体外MLR和动物实验中,FK506-DCs组与DCs组比较,IL-2,IFN-γ表达水平均显著降低( P＜0.05),IL-4表达水平显著升高(P＜0.05),而IL-10的表达水平在体外显著升高(P＜0.05),但在动物实验中与DCs组差异无统计学意义(P＞0.05).结论:FK506不影响DCs的分化与成熟,对其免疫学功能起负性调节作用.可能机制为FK506通过抑制DCs IL-12的分泌,来促使Th1/Th2亚群分化倾向于Th2方向.     

高血压病患者外周血树突状细胞亚群的变化

目的 研究高血压病患者外周血树突状细胞(DCs)的表达情况及其在高血压病发生发展过程中的作用.方法 用流式细胞仪四色荧光标记技术检测29例高血压病(HT)患者(实验组)及31例非高血压患者(对照组)外周血树突状细胞亚群的比例及数量,评价组间差异,并分析高血压病患者外周血浆细胞样树突状细胞(pDC)与血压(blood p...