稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响

目的研究稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响。方法通过正交试验,以石斛小苗为外植体,培养在附加了3种不同稀土元素组合的1/2MS 20%的香蕉提取物的培养基上进行培养。结果3种稀土元素中的镧(La)对试管苗增质量、叶绿素b、总叶绿素和石斛多糖的量都有显著的影响;3种稀土元素都对试管苗的叶片数、根数、分蘖数以及叶绿素a的量影响不显著。结论为铁皮石斛试管苗的壮苗以及品质的提高提供了科学的依据。     

稀土元素应用于培养高含量DHA螺旋藻的试验研究

目的：研究利用稀土元素培养高含量DHA螺旋藻的试验条件。方法：以稀土元素：镧（La）、铈（Ce）、钕（Nd）、钐（Sm）为4个因素,以每种稀土元素的3个不同添加剂量作为水平,以采收时螺旋藻内DHA含量作为评价指标,设计L9（34）正交试验,并进行对比试验。结果：在La3＋10mg/L,Ce3＋1mg/L,Sm3＋2mg/L,Nd3＋10mg/L的条件下培养,螺旋藻内DHA含量较高,与未加稀土元素培养的螺旋藻相比,螺旋藻内DHA含量提高58.0%.结论：在螺旋藻养殖过程中,添加适量的稀土元素对于提高螺旋藻中DHA含量具有一定促进作用。     

萘乙酸浓度对铁皮石斛组培苗生长发育的影响

目的 研究培养基中添加不同浓度的萘乙酸(NAA)对诱导铁皮石斛组培苗的影响.方法 以铁皮石斛种子为材料,在4种培养基(Ⅰ ～Ⅳ)中诱导出原球茎,再以预实验优选出的1/2MS+活性炭1.0g/L+蔗糖30g/L+琼脂7.0g/L为基本培养基,配制成0～5.0 mg/L的6种不同NAA浓度的培养基(Ⅴ ～Ⅹ)进行原球茎增殖分化和继代培养,筛选促进组培苗根茎叶生长发育最佳的NAA浓度和培养基配方.结果种子在Ⅳ号培养基中的萌发率最高,达94.2％以上;在NAA添加量为4.0 mg/L的Ⅸ号培养基中,原球茎分化后根长、叶长、叶宽、株高、茎粗、单株鲜重分别为1.516 cm、0.943 cm、0.365em、2.991 cm、0.264 cm、0.102 g,各指标均显著优于其它NAA浓度的培养基.另外,在Ⅸ号培养基中添加100 g/L土豆和80g/L香蕉能够显著地促进生根壮苗阶段组培苗根茎叶的生长发育,各指标可增加1～3倍.结论培养基1/2MS+NAA0.2 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂7.0g/L最适宜铁皮石斛种子萌发,当NAA浓度为4.0 mg/L时更能促进组培苗根茎叶的生长发育.     

铁皮石斛组培快繁技术研究

目的 通过研究铁皮石斛种子萌发、小苗增殖和生根的适宜培养基,建立一套铁皮石斛组织培养的快速繁殖体系.方法 以铁皮石斛种子为外植体,研究激素（6-benzylaminopurine和1-naphthleetic acid）不同质量浓度配比、天然添加物（马铃薯汁和香蕉汁）对铁皮石斛种子萌发、小苗增殖和壮苗生根的影响.结果 铁皮石斛种子萌发最适培养基为1/2MS ＋0.2 mg/L NAA＋ 100 g/L马铃薯汁＋25 g/L蔗糖汁,小苗增殖最适培养基为1/2MS ＋0.2 mg/L NAA＋ 100 g/L马铃薯汁（或香蕉汁）＋25g/L蔗糖汁＋0.5g/L活性炭,壮苗与生根最适培养基为1/2MS＋ 0.2 mg/L NAA＋ 100 g/L香蕉汁＋25 g/L蔗糖汁＋0.5g/L活性炭.结论 建立了一套铁皮石斛组培快繁体系,可用于大规模生产铁皮石斛组培苗.     

铁皮石斛复方制剂的抗氧化和延缓衰老作用研究

目的 研究铁皮石斛复方制剂的抗氧化和延缓衰老作用.方法 通过二苯代苦味酰基自由基(DPPH)和羟自由基清除实验检测铁皮石斛复方制剂的体外抗氧化活性.利用秀丽线虫氧化应激模型,验证铁皮石斛复方制剂的体内抗氧化活性,同时在正常条件下检测铁皮石斛复方制剂对寿命的影响.在氧化应激条件下,测定铁皮石斛复方制剂对秀丽线虫活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活力以及丙二醛(MDA)含量的影响.结果 铁皮石斛复方制剂对DPPH和羟自由基均有较好的清除作用,在16.0 mg/mL质量浓度下对DPPH和羟自由基清除率均达到60%.铁皮石斛复方制剂能提高秀丽线虫在高浓度百草枯(50 mmol/L)氧化胁迫条件下的存活率,同时也能延长其在正常条件下的寿命.在低浓度百草枯(2 mmol/L)氧化胁迫下,铁皮石斛复方制剂能显著降低秀丽线虫ROS含量并增强SOD活力,但对CAT活力和MDA含量没有明显影响.结论 铁皮石斛复方制剂具有抗氧化活性,能提高秀丽线虫在氧化胁迫条件下的存活率并延长寿命,其机制可能与提高秀丽线虫SOD活力有关.     

水杨酸对白桦悬浮细胞中齐墩果酸积累及防御酶活性的影响

目的 研究水杨酸（SA）对白桦悬浮细胞生长、齐墩果酸积累及防御酶活性的影响。方法 在白桦悬浮培养第7、10、13、15天,分别添加不同质量浓度（10、25、50、100、250 mg/L）的SA,进行细胞生长、齐墩果酸量及抗逆酶活性分析。结果 添加低质量浓度SA（10～25 mg/L）对细胞活力和生长量影响不大,高质量浓度的SA（100～250 mg/L）处理可显著抑制细胞活力和生长,但可促进齐墩果酸的积累,在第7天添加250 mg/L SA后齐墩果酸量最高,达1.71 mg/g（干质量）,是对照的3.1倍;而第7天添加50 mg/L SA后齐墩果酸的产量为0.473 mg,比对照提高了42.04%。悬浮培养第7天添加50 mg/L SA,过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）两种酶活性分别在0～24 h和0～48 h比对照显著提高,而PAL活性在SA处理12 h后始终高于对照。结论 适宜浓度的SA可刺激白桦细胞防御酶活性提高,并促进白桦悬浮细胞中齐墩果酸的积累。     

珍稀濒危药材铁皮石斛组培快繁关键技术研究

目的研究珍稀濒危药材铁皮石斛组织培养快速繁殖技术。方法以铁皮石斛茎段为试材,比较植物激素浓度配比、人工光源、炼苗驯化方法等对铁皮石斛组培快繁的影响,摸索出一套可进行组培快繁工厂化生产的技术体系,优选出铁皮石斛组培快繁的最适条件。结果 (1)组培各阶段最佳培养基:原球茎诱导:MS+BA 2.5 mg/L+IBA0.2 mg/L;原球茎分化:MS+BA1.5 mg/L+NAA1.2 mg/L+5%香蕉汁;壮苗生根:MS+NAA 0.15 mg/L+5%香蕉汁、MS+NAA 0.20 mg/L+7.5%香蕉汁、MS+NAA 0.25 mg/L+10%香蕉汁(分阶段补加);(2)人工光源:组培特定光谱节能灯;(3)炼苗方法:水培驯化炼苗。结论通过上述技术的应用,缩短了种苗组培育苗周期,解决了从组培苗到大量栽培的技术,该方法简便易用,且降低了生产成本。     

铁皮石斛快繁技术体系研究

目的 以铁皮石斛Dendrobium officinale带芽茎段为材料,对铁皮石斛的组织培养进行系统研究,以期建立铁皮石斛的快繁技术体系。方法 采用植物组织培养的方法对铁皮石斛外植体的消毒方法、原球茎的诱导、增殖、分化、幼苗生根及瓶苗移栽等进行研究。结果 铁皮石斛外植体最佳的消毒方式为75%乙醇消毒30 s,再用0.1% HgCl₂消毒10 min;铁皮石斛带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA＋2 g/L AC,诱导率达到34.98%;原球茎增殖的最佳培养基为MS＋0.5 mg/L 6-BA＋0.8 mg/L 2, 4-D＋2 g/L AC,增殖率达到89.6%;原球茎分化的最佳培养基为MS＋1.2 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L IBA＋2 g/L AC,分化率达到89.6%;幼苗生根的最佳培养基配方为1/2 MS＋2.5 mg/L NAA＋15%土豆汁＋2 g/L AC,生根率达到90.4%～92.8%;瓶苗移栽最佳方式为大苗、树皮块苔藓草做基质、基质中添加0.03 mg/L赤霉素,并接种适量菌根真菌Epulorhiza sp.。结论 建立了铁皮石斛的快繁技术体系,为铁皮石斛的工业化生产奠定技术基础。     

稀土元素镧对掌叶大黄毛状根和非转化根生长及葸醌产量的影响

目的 研究不同浓度的稀土元素镧(La2 )对3种大黄根生物量和蒽醌次生代谢产物产量的影响。方法采用统计学分析方法,研究稀土元素La3 对两种掌叶大黄单克隆毛状根DH5c、DH7a和液体培养非转化根NOR生物量和蒽醌化合物合成的影响。结果 La3 浓度对大黄根生物量积累有显著影响,培养基中La3 为10 mg/L时,对大黄根生长表现出明显的抑制作用;La3 浓度对3种大黄根的蒽醌产量有极显著影响,当培养基中La3 1.0mg/L时,蒽醌产量最高;经稀土离子处理的3种大黄根中芦荟大黄素和大黄酸显著高于大黄素、大黄酚和大黄素甲醚。结论 培养基中添加适宜浓度的稀土离子La3 对掌叶大黄单克隆毛状根的生物量积累和蒽醌类化合物的合成具有明显的促进作用。     

铁皮石斛人工种子制作及影响因素研究

目的 建立铁皮石斛人工种子制作方法,并考察相关影响因素,为铁皮石斛的繁育提供一条新途径。方法 以铁皮石斛原球茎为包埋体制作人工种子,考察胚乳、种皮组分对人工种子萌发和成苗的影响。结果 以MS＋0.5 mg/L BA＋0.5 mg/L NAA＋3 g/L AC＋30 g/L海藻酸钠＋3 g/L百菌清为基本胚乳,在2% CaCl₂中反应15 min是铁皮石斛人工种子制作的较佳条件,胚乳中分别添加15 g/L木薯淀粉和10 g/L保水剂能明显提高人工种子的萌发率和成苗率,种皮中添加10 g/L纳米SiO₂和10 g/L纳米TiO₂均能明显提高萌发率,但添加10 g/L纳米SiO₂成苗率最高。结论 建立了铁皮石斛人工种子制作方法,获得了较高的萌发率和成苗率。     

热变性和有机溶剂沉淀联合法提纯超氧化物歧化酶

以抗凝马血为原料，分三组分别采用热变性法、有机溶剂沉淀法及热变性与有机溶剂沉淀联合法对超氧化物歧化酶进行分离提纯，对三组方法所得的粗酶和经ＤＥＡＥ－３２层析后的纯酶分别进行蛋白浓度、酶活力等检测，综合结果与分析表明，热变性与有机溶剂沉淀联合法是提纯ＳＯＤ的优选方法。     

放射酶分析法检测红细胞胰岛素降解酶活性

本文采用放射酶分析法检测红细胞胰岛素降解酶活性（ＥＩＤＥＡ）。该方法应用方便、灵敏度极高、结果准确。并对酶反应最佳条件进行了实验探讨，底物Ｋｍ为０．０９ｍＵ／ｍｌ，最适ｐＨ值７．４０，延滞期２５分钟，２５～４０分钟测得ＢＩＤＥＡ基本一致。批内ＣＶ为３．０的，批间ＣＶ为３．３％。氯化物、ＥＤＴＡ可抑制该酶活性。５０例健康人红细胞胰岛素酶活性为８０，１８±１３．８０Ｕ／ｍｇＨｂ，无性别、年龄差异。     

影响产气肠杆菌EAM-Z1中嘧啶核苷磷酸化酶活力的因素

目的:研究影响产气肠杆菌EAM-Z1的嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)酶活力的因素。方法:分别考察添加底物、金属离子、速效碳源和磷酸盐对菌体浓度及PyNPase活力的影响。结果:加入4 g/L胞苷,菌体的量增加了19.30%,综合考虑对菌体量和比酶活,加入3 g/L胞苷可使PyNPase活力增加10.46%;4 mg/L Ca2 使菌体量增加了10.90%,PyNPase活力增加了30.25%;低浓度的速效碳源可以增加菌体浓度,但均使PyNPase的活力降低;1 g/L磷酸盐使PyNPase活力增加了17.40%。结论:底物诱导、金属离子、速效碳源和磷酸盐均对PyNPase的活力有一定的影响。     

问号钩端螺旋体胶原酶体内和体外的活性研究

目的 通过检测致病性钩端螺旋体(钩体)胶原酶在体内、外的活性,探讨问号钩体黄疸出血群赖型赖株(赖株)假定的胶原酶(LA0872)在钩体病出血中的可能作用.方法 在大肠杆菌中克隆、表达重组赖株la0872,并行相关鉴定及蛋白酶学活性检测.比较不同毒力菌株赖株、赖株减毒株和双曲钩体三宝垄群montevalerio型Monte Valerio株钩体胶原酶的基因序列特异性及转录和酶活水平的差异.测定豚鼠和沙鼠赖株感染模型的血清胶原酶活性水平变化.结果 成功构建的重组质粒经酶切和测序鉴定显示位点连接正确,插入序列与GenBank公布的la0872序列完全一致,并证实其具有胶原酶活性;不同毒力菌株中的钩体胶原酶基因序列一致,转录和酶活水平均无显著性差异;豚鼠和沙鼠感染赖株后,宿主体内血清胶原酶活性水平与未感染赖株动物比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 首次表达和鉴定了有活性的钩体胶原酶,但其在钩体病出血中的作用尚待证实和探讨.     

两种皮肤损害性卟啉病患者酶活性的研究

目的 :研究和比较先天性红细胞生成性卟啉病 (CEP)患者、迟发性皮肤卟啉病 (PCT)患者和正常健康者的红细胞酶活性。方法 :荧光分光光度法和反相高效液相色谱法。结果 :CEP患者的红细胞尿卟啉原Ⅲ同合成酶 (URO -COS)的活性仅为正常健康者的 17% ,而PCT患者的尿卟啉原脱羧酶 (UROD)活性仅为正常健康者的4 9%。结论 :URO -COS和UROD可能是引起CEP和PCT的主要原因     

问号钩端螺旋体胶原酶体内和体外的活性研究

目的通过检测致病性钩端螺旋体（钩体）胶原酶在体内、外的活性,探讨问号钩体黄疸出血群赖型赖株（赖株）假定的胶原酶（LA0872）在钩体病出血中的可能作用。方法在大肠杆菌中克隆、表达重组赖株la0872,并行相关鉴定及蛋白酶学活性检测。比较不同毒力菌株赖株、赖株减毒株和双曲钩体三宝垄群montevalerio型Monte Valerio株钩体胶原酶的基因序列特异性及转录和酶活水平的差异。测定豚鼠和沙鼠赖株感染模型的血清胶原酶活性水平变化。结果成功构建的重组质粒经酶切和测序鉴定显示位点连接正确,插入序列与GenBank公布的la0872序列完全一致,并证实其具有胶原酶活性;不同毒力菌株中的钩体胶原酶基因序列一致,转录和酶活水平均无显著性差异;豚鼠和沙鼠感染赖株后,宿主体内血清胶原酶活性水平与未感染赖株动物比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论首次表达和鉴定了有活性的钩体胶原酶,但其在钩体病出血中的作用尚待证实和探讨。     

肺炎患儿血清心肌酶活性的改变及意义

目的　探讨小儿肺炎时血清心肌酶活性改变及其临床意义。方法　测定肺炎组 2 4例患儿及对照组 18例体检正常儿的血清心肌酶活性 ,并进行两组间的比较。结果　肺炎组患儿的血清乳酸脱氢酶 (LDH)、α-羟丁酸脱氢酶 (α-HBDH)、磷酸肌酸激酶 (CPK)的活性与对照组的比较 ,差别有显著性意义 (P <0 0 5 )。轻症肺炎患儿仅有LDH或LDH和α -HBDH或LDH和CPK活性轻度增加。重症肺炎患儿LDH和α-HBDH或LDH和CPK或其中的三项活性明显增加 ,临床可表现为心力衰竭、心肌病变、中毒性肠麻痹等。结论　肺炎时常有一项或多项心肌酶活性呈不同程度增高 ,以LDH活性增高最常见 ,重症肺炎时常有二项或三项心肌酶活性同时增高 ,因此临床上应进行心肌酶活性测定 ,以便早期发现心肌损害 ,及时对心肌采取保护性治疗。     

银染的端粒重复序列扩增法检测人细胞端粒酶活性的研究

目的：探讨应用简便，快速及无害化的非核素银染端粒重复序列扩增法（ＴＲＡＰ）检测人细胞端粒酶活性。方法：与枝素ＴＲＡＰ相比较，采用非核素银染ＴＲＡＰ检测了２９３细胞，并检测了经ＲＮａｓｅ和加热处理的阴性对照标本和ＱＧＹ７７０１、ＳＭＭＣ－７７２１ ２株人肝癌细胞。     

脑脊液LDH、AST、ADA活性和蛋白含量对脑膜炎的诊断意义

目的 探讨不同类型脑膜炎时脑脊液酶活性与蛋白含量变化.方法 对62例脑膜炎患者脑脊液(CSF)LDH、AST、ADA活性和蛋白含量进行测定.结果 结核性脑膜炎组(简称结脑组)、化脓性脑膜炎组(简称化脑组)和病毒性脑膜炎组(简称病脑组)CSF LDH、AST、ADA活性和总蛋白含量较正常对照组明显升高(P<0.05).结脑组CSF ADA活性升高程度较化脑组和病脑组高(P<0.01).结脑组和化脑组CSF AST、LDH活性升高程度较病脑组高(P<0.05).CSF蛋白质含量升高程度化脑组＞结脑组＞病脑组.结脑组、化脑组和病脑组CSFβ2-MG和CRP较正常对照组均有明显升高,且以病脑组升高最为显著.结论 CSF AST、LDH活性有助于细菌性脑膜炎的诊断,CSF ADA活性和蛋白质含量有助于结核性脑膜炎(结脑)、化脓性脑膜炎(化脑)和病毒性脑膜炎(病脑)的鉴别诊断,对CSF的LDH和ADA活性同时测定对结脑的诊断具有重要意义.     

冷冻保存血清对7种酶活性的影响

目的　研究冷冻保存对血清酶活性测定结果的影响。方法　对采自 5 0名健康体检者的血清冷冻前后几种酶蛋白的活性进行测定 ,了解冷冻对 7种酶蛋白测定结果的影响。结果　谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶、γ 谷氨酰转移酶、淀粉酶冷冻保存血清测定值与当日测定值之间无显著性差异 ,乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶冷冻保存测定值与当日测定值之间无显著性差异。结论　冷冻保存可能对血清中大部分酶的活性无影响 ,而对某些酶却有影响。临床工作中应予注意