p27kip1、Skp2及Survivin在乳腺癌组织中的表达及意义

近期,我们观察了p27^Kip1、S期激酶伴随蛋白2（Skp2）和Survivin蛋白在乳腺癌组织中的表达,并探讨其与临床病理特征的关系。     

泛素、Skp2、p27在大肠癌组织中的表达及意义

采用组织芯片技术制作80例大肠癌癌组织芯片。S-P免疫组织化学方法检测芯片中泛素、S期激酶相关蛋白2（Skp2）和p27表达。结果泛素表达阳性率为45．0％,Skp2阳性率为47．5％,p27阳性率为38．8％,不同组织学类型大肠癌中泛素、skp2、p27的表达未见明显差异（P〉0．05）;有淋巴结转移者Skp2阳性率显著高于无淋巴结转移者（P〈0．01）,p27阳性率显著低于无淋巴结转移者（P〈0．01）。提示Skp2高表达和p27低表达与大肠癌的进展相关,Skp2和p27的表达可以作为评估大肠癌预后的参考指标;泛素和Skp2在p27的表达调控中起重要作用;应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的,具有快速、方便、经济、准确的特点。     

前列腺癌组织中Skp2、p27、PCNA的表达变化及意义

目的观察前列腺癌（PCa）组织中细胞S相激酶相关蛋白2（Skp2）、p27、增殖细胞核抗原（PCNA）的表达变化,并探讨其临床意义。方法免疫组化SABC法检测57例PCa组织及25例良性前列腺增生（BPH）组织中的Skp2、p27、PCNA。结果 Skp2、p27、PCNA在PCa组织中的阳性表达率分别为57.89%（33/57）、36.84%（21/57）、68.42%（39/57）,在BPH组织中分别为20.00%（5/25）、92.00%（23/25）、32.00%（8/25）,两种组织中三个指标的阳性表达率相比,P均〈0.01。Skp2、p27、PCNA的表达与PCa患者术前血清前列腺特异性抗原（PSA）水平、肿瘤是否穿透前列腺被膜及前临床分期有关（P均〈0.05）;在PCa组织中p27与Skp2、PCNA的表达呈负相关（r分别为-0.640、-0.728,P均〈0.01）,Skp2与PCNA的表达呈正相关（r=0.814,P〈0.01）。结论 PCa组织中Skp2、p27、PCNA的表达发生变化,联合检测这三个指标可以对PCa的发生、发展、预后判断及药物治疗提供参考依据。     

Skp2蛋白与原发性胃癌预后的关系

目的 探讨细胞S期激酶相关蛋白(Skp)2蛋白与原发性胃癌预后的关系。方法 选择原发性胃癌患者67例为观察组,并纳入63例病理组织检查正常非癌性胃黏膜患者为对照组,收集两组性别、年龄、病程、病理分期等一般资料,所有患者出院后随访1年,绘制生存曲线,分析Skp2蛋白与原发性胃癌的预后关系。结果 观察组Skp2蛋白表达强阳性21例,中度阳性10例,弱阳性6例,阴性30例;对照组Skp2蛋白表达强阳性3例,中度阳性4例,弱阳性3例,阴性53例;Skp2蛋白在正常胃组织中的阳性表达率为15.87%,在胃癌患着中的阳性表达率为55.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。Skp2蛋白表达阳性患者肿瘤TNM分期、肿瘤大小明显大于Skp2蛋白表达阴性患者(P<0.05),而性别、年龄、病程、浸润深度无明显差异(P>0.05)。Logistic回归分析结果显示淋巴结转移、TNM分期、分化程度是Skp2蛋白阳性表达的危险因素。Kaplan-Meier生存曲线发现Skp2蛋白表达阳性中位生存时间为13个月(95%CI:10.4～16.2个月),2年生存率为32.64%;Skp2蛋白表达...     

沉默G250基因对肾癌786-0细胞移植瘤Skp2表达的影响

目的探讨沉默G250基因对肾癌786-0细胞移植瘤S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达的影响。方法构建靶向G250的siRNA表达质粒pshRNA-G250并转染肾癌786-0细胞,12只BALB/c裸鼠分为阴性对照组和干扰成瘤组,干扰成瘤组每只裸鼠皮下接种5×106个G250基因沉默后的肾癌786-0细胞(786-0/si-G250-b),以转染空质粒的细胞(786-0/si-G250-0)为对照。成瘤3 w后,处死裸鼠后切取瘤块,采用组织芯片技术及免疫组化SP法检测Skp2的表达。结果 5×106个细胞皮下接种BALB/c裸鼠3 w后均成瘤,Skp2在阴性对照组和干扰成瘤组裸鼠的肿瘤组织中表达率分别为83.33%(5/6)和16.67%(1/6),两者有显著性差异(P=0.04)。结论 G250基因表达沉默抑制了肾癌细胞移植瘤Skp2的表达。     

S期激酶相关蛋白2及细胞周期抑制蛋白p27在老年甲状腺癌患者癌组织中的表达及临床意义

目的研究S期激酶相关蛋白(Skp)2和细胞周期抑制蛋白p27在甲状腺癌癌组织中的表达及临床意义。方法首次就诊的老年甲状腺癌患者85例、甲状腺腺瘤老年患者40例和结节性甲状腺肿老年患者40例,采用免疫组织化学法检测甲状腺癌、甲状腺腺瘤和甲状腺肿组织中Skp2和p27蛋白的表达情况。结果 (1)甲状腺癌组织Skp2蛋白阳性表达率显著高于甲状腺腺瘤组织和甲状腺肿组织(P<0.001),甲状腺腺瘤组织和甲状腺肿组织Skp2蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);(2)甲状腺癌组织p27蛋白阳性表达率显著低于甲状腺腺瘤组织和甲状腺肿组织(P<0.001),甲状腺腺瘤组织和甲状腺肿组织p27蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);(3)Skp2蛋白的表达与肿瘤分期、周围组织侵犯情况及淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01),而与性别和肿瘤大小无关(P>0.05);(4)p27蛋白的表达与肿瘤分期、周围组织侵犯情况及淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01),而与性别和肿瘤大小无关(P>0.05);(5)甲状腺癌组织中Skp2与p27蛋白表达评分呈负相关(r=-0.657,P=0.016)。结论 Skp2和p27蛋白分别在甲状腺癌组织的表达呈负相关,两者参与了甲状腺癌的发生和发展。     

胰腺癌组织中SKP2和P27蛋白表达及其相互关系

目的:研究胰腺导管癌和慢性胰腺炎组织中(S期激酶相关蛋白-2)SKP2和P27表达,探讨其临床病理意义及两者在胰腺导管癌中表达的相互关系．方法:51例胰腺导管癌和10例慢性胰腺炎手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,SKP2和P27染色方法为SP免疫组化法．结果:51例胰腺导管癌SKP2阳性表达28例(54．9％)和P27阳性表达25例(49．0％),10例慢性胰腺炎SKP2阳性2例(20．0％) 和P27阳性9例(90．0％),两者之间均存在显著差异(P<0．05), 高分化腺癌(7／20,35．0％)和未转移(5／16,31.2％)病例SKP2表达阳性率明显低于低分化腺癌(14／19,73．7％)和转移(23／35, 65．7％)病例,均存在显著差异(P<0．05);高分化腺癌(13／20, 65．0％)和未转移(12／16,75．0％)病例P27表达阳性率明显高于低分化腺癌(6／19,31．5％)和转移(13／35,37．1％)病例,有显著或高度显著差异(P<0．05或P<0．01)．SKP2和P27在胰腺导管癌中表达呈密切相关(x2=14．33,P<0．01)．结论:SKP2和P27表达是反映胰腺导管癌发生,发展及预后的重要生物学标记物,SKP2阳性表达或P27阴性表达者恶性度高、易发生转移及预后不良,且两者表达存在相互调控作用．     

肝细胞癌患者肝癌组织S期激酶相关蛋白2、p27表达与临床病理特征的关系

目的探讨S期激酶相关蛋白(Skp)2、p27两种蛋白在肝细胞癌发生、发展及转移过程中的作用及相关性,为深入研究肝细胞癌发生发展机制及靶向治疗提供理论基础。方法应用EnVision法检测80例肝细胞癌Skp2、p27表达情况,并比较与不同临床病理特征间关系。结果肝细胞癌Skp2和p27阳性表达率明显高于正常对照组(P<0.05)。肝细胞癌Skp2和p27阳性表达与组织学分级、临床分期、肿瘤大小、肝内转移密切相关。肝细胞癌Skp2阳性表达与淋巴结转移和甲胎蛋白密切相关。肝细胞癌Skp2表达与p27表达呈明显负相关。结论 Skp2蛋白与肝细胞癌发生发展有关,并可能是反映肿瘤细胞增殖标志物和新的肿瘤基因治疗靶点。肝细胞癌中p27阳性表达与肿瘤发生、发展相关。     

胃癌组织中PTEN、Cx43及Skp2的表达及其相关性

采用免疫组化方法检测PTEN、Cx43及skp2蛋白在胃癌及正常胃组织中的表达。结果发现,胃癌组织中PTEN、Cx43、skv2蛋白的阳性表达率分别为51．81％（43183）、46．99％（39／83）和69．88％（58／83）,与正常胃黏膜组织比较,有统计学差异（P均〈0．05）。PTEN、Cx43、Skp2蛋白的表达均与为癌细胞的病理分期、组织分化类型和有无淋巴结转移显著相关（P〈0．05）。胃癌组织中PTEN、Cx43与Skp2蛋白的表达呈负相关（r别为-0．582和-0．382,P均〈0．001）,FIEN与Cx43的表达呈正相关（r=0．570,P〈0．1301）。认为胃癌组织中skp2蛋白水平的高表达和FTEN、Cx43蛋白的低表达可能与胃癌组织的浸润和转变有关,且联合监测可以用于判断胃癌的生物学行为。     

Skp2与肺癌的研究进展

肿瘤的发生的病因及机制尚未完全明确,目前所知除抑癌基因的失活,原癌基因的异常激活,DNA转录表达失控等原因外,细胞周期调控机制紊乱也是一重要因素。S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase—associated protein2,Skp2）是新近发现的对细胞周期调控具有重要作用的基因,参与细胞的增殖与凋亡,与肿瘤的发生发展关系密切。[第一段]     

采用组织芯片技术检测胃癌组织中泛素、S相激酶相关蛋白2、p27的表达

组织芯片应用范围涵括了整个生命科学中各个基础研究、临床研究、应用研究以及药物开发的相关领域，具有广阔的发展前景。我们采用组织芯片技术制作了60例胃癌的组织芯片，并用免疫组织化学技术进行泛素(Ubiquitin)、S期激酶相关蛋白2(Skp2)、p27的检测，探讨胃癌组织中泛素、Skp2和p27表达的意义。     

骨肉瘤组织中Skp2、p27蛋白的表达变化及意义

目的观察p27和Skp2蛋白在骨肉瘤组织中的表达变化,并探讨其意义。方法选取40例骨肉瘤组织标本作为骨肉瘤组,另选40例正常骨组织作为对照组。用免疫组化SP法检测两组中的p27和Skp2蛋白。结果骨肉瘤组中Skp2的阳性表达率明显高于、p27的阳性表达率明显低于正常骨组织(P均<0.05)。Skp2表达与骨肉瘤组织类型、分化程度及淋巴结转移有关(P均<0.05);p27蛋白表达与骨肉瘤组织类型、分化程度有关(P均<0.05)。Skp2、p27蛋白在骨肉瘤组织中的表达呈负相关(r=-0.34,P<0.05)。结论 p27蛋白在骨肉瘤组织中呈低表达,Skp2蛋白在骨肉瘤组织中呈高表达,二者呈负相关关系,且与骨肉瘤的发生和转移有关,有可能成为了解骨肉瘤生物学行为的参考指标。     

肺癌中PI3K／AKT信号通路对Skp2调控机制的研究

目的探讨肺癌中磷脂酰肌醇-3-激酶（P13K）／AKT信号通路对S期激酶相关蛋白2（Skp2）的调控机制。方法体外培养4种类型肺癌细胞系H460、LK2、H446和A549,经LY294002处理细胞24h后实时RT—PCR法检测Skp2基因表达变化;Westernblot检测E2F1蛋白表达变化。结果实时RT—PCR显示LY294002作用后4种肺肿瘤细胞系中skp2基因表达均下降;Westernblot结果表明在小细胞肺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌中E2F1蛋白表达降低,肺腺癌中E2F1蛋白未表达。结论肺癌中P13K／AKT通路可在转录水平调节Skp2表达,在小细胞肺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌中此种调节可能通过转录因子E2F1发挥作用,而肺腺癌中E2F1不参与此种调节。     

Skp2 mRNA及蛋白在大肠腺瘤组织中的表达

目的:研究细胞S期激酶相关蛋白2(S-phasekinase-asociated protein 2,Skp2)在大肠腺瘤组织中的表达.方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法检测20例管状腺瘤、15例绒毛状腺瘤、18例混合性腺瘤和20例正常黏膜组织中SKq2的表达情况.结果:绒毛状腺瘤和混合性腺瘤Skp2 mRNA的表达水平显著高于正常对照组(0.71±0.34,0.63±0.20vs0.34±0.20,P＜0.01),而管状腺瘤Skp2 mRNA的相对含量与正常对照组无显著差异,绒毛状腺瘤和混合性腺瘤Skp2 mRNA的相对含量与管状腺瘤组亦有显著差异(0.71±0.34,0.63±0.20 vs0.43±0.22,P＜0.05);但是绒毛状腺瘤和混合性腺瘤间无显著差异.大肠管状腺瘤、绒毛状腺瘤、混合性腺瘤及正常组Skp2蛋白表达阳性率分别为15%(3/20)、46.7%(7/15)、27.8%(5/18)和5.0%(1/20),各组间有显著差异(P＜0.05).结论:从基因及蛋白水平证明,skp2的阳性表达与大肠腺瘤的组织学类型有关,可能对大肠腺瘤的发生发展起促进作用.     

非小细胞肺癌中PI3K/Akt信号通路通过Cdh1调控Skp2表达的机制研究

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中Cdc20同源蛋白1（Cdh1）参与磷脂酰肌醇三羟基激酶（PI3K）/Akt信号通路对S期激酶相关蛋白2（Skp2）表达调控的机制。方法体外培养NSCLC细胞系A549、LK2和H460,LY294002特异性阻断PI3K/Akt信号通路后,Western blot检测Skp2、Cdh1及p-Akt蛋白表达的变化,免疫荧光（IF）检测Cdh1在NSCLC中的定位变化。结果 LY294002处理后,与对照组相比3种细胞中Skp2蛋白表达和Akt磷酸化水平均降低（P〈0.01）,Cdh1在3种细胞的核内表达均增多。结论 NSCLC中PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002使Skp2蛋白表达下调与Cdh1由细胞质向细胞核转位有关。     

SKP2在大肠癌组织中的表达及预后意义

目的:探讨SKP2在大肠癌中的表达和预后作用．方法:采用SP免疫组化法检测68例大肠癌手术切除组织标本中SKP2和P27的表达,用Kaplan-Meier和Cox回归分析法进行生存分析．结果:在68例大肠癌组织中,SKP2和P27的阳性表达率分别为41．2％(n=28)和52．9％(n= 36)．SKP2的表达与组织分级显著相关(X2= 14．073,P=0．001)．SKP2表达与年龄、性别和AJCC分期无关(P>0．05)．SKP2和P27负相关(r=-0．528,P=0．0001)．SKP2高表达组的总生存期较SKP2低表达组短(31．5±4．0 mo vs 54．5±2．1 mo,P<0．01)．多因素Cox回归分析表明,SKP2表达是大肠癌的独立预后因素(RR= 6．227．P=0．033)．结论:SKP2表达可以作为大肠癌患者预后的指标．     

JNKMAPK信号通路在食管癌细胞系Eca-109细胞中的作用机制

目的探讨c-jun氨基末端激酶1/2（c-jun N-teuninal kinase,JNK 1/2）信号通路在食管癌细胞系Eca-109细胞中的作用。方法体外培养Eca-109细胞,以特异性JNK信号转导通路抑制剂SP600125处理Eca-109细胞;RT-PCR的方法检测JNK1和JNK2基因的表达,Western blot法检测JNK和p-JNK蛋白的表达,MTT（3-（4,5-Dimethylthiazol-2-yl）-2,5-di-phenyltetrazolium bromide）法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 Eca-109细胞经SP600125分别处理24h和48 h后,分别与对照组比较,JNK1 mRNA的表达无统计学差异（均P〉0.05）,JNK2 mRNA的表达也无统计学差异（均P〉0.05）,但活化的JNK即P-JNK1/2蛋白的表达显著减少,细胞的增殖显著被抑制,细胞的凋亡率有统计学差异（均P〈0.05）。结论 JNK信号通路可能在Eca-109细胞的发生发展中发挥重要作用。     

Skp2与p27蛋白的表达与肺癌的关系

目的 探讨S期蛋白激酶相关蛋白(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)和p27蛋白在肺癌中表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学S-P法检测Skp2和p27在60例肺癌(鳞癌25例.腺癌20例,小细胞肺癌15例)和15例经手术证实、病理检测肺良性病变(炎性假瘤、局灶性肺脓肿、包裹性肺霉菌病、错构瘤和支气管腺瘤)正常细胞中的表达.结果 Skp2仅在肺癌组织中表达,且在吸烟者、鳞癌和低分化患者中过表达,而与患者年龄、性别、肿瘤位置和病理分期无关.p27在正常支气管上皮中均有表达,在肺癌中表达降低,但其表达仅与淋巴结转移和病理分期有关.Skp2阳性表达患者中.p27表达降低.结论 Skp2与p27蛋白的表达与肺癌的发生、发展有一定关系,在肺癌中二者存在某种相互作用机制.     

胃癌组织CDK7和SKP2的表达变化及意义

目的研究细胞周期素依赖性激酶7(CDK7)和S期激酶相关蛋白2(SKP2)在胃癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组织化学方法检测120份胃癌和30份正常胃黏膜组织中CDK7和SKP2的表达,分析二者表达变化与胃癌患者临床病理参数的关系。结果 CDK7在胃癌组织中表达增多,与肿瘤分化程度、淋巴结转移和TNM分期呈正相关(分别为χ2=7.425,P=0.006;χ2=13.899,P=0.000;χ2=5.725,P=0.017)。SKP2在胃癌组织表达增多,其阳性表达仅与肿瘤的分化程度呈正相关(χ2=9.875,P=0.002)。CDK7和SKP2的表达呈正相关(r=0.832,P<0.05)。结论 CDK7、SKP2在胃癌组织中表达升高,其正向协同参与胃癌的发生、发展。     

ALA-PDT对人食管癌Eca-109细胞相关凋亡蛋白表达的影响

目的 探讨5-氨基乙酰丙酸—光动力疗法(ALA-PDT)对人食管癌Eca-109细胞相关凋亡蛋白表达的影响.方法 将人食管癌Eca-109细胞经过培养、处理后分为两组,ALA-PDT组(PDT组)细胞用ALA孵育6h后在光动力治疗系统下进行光照,光照后24h提取细胞总蛋白和胞质蛋白;对照组细胞不进行光动力治疗.采用Western blot法检测两组细胞中的Bcl-2、Cytc蛋白表达.结果 ALA-PDT作用于人食管癌Eca-109细胞后,与对照组比较,PDT组胞质中的Bcl-2蛋白表达量明显降低,Cytc蛋白表达量明显升高(P均＜0.05).结论 线粒体凋亡通路可能是ALA-PDT诱导Eca-109细胞凋亡的主要通路,Bcl-2可能为该凋亡通路的靶基因之一,释放Cytc进而诱导细胞凋亡可能为ALA-PDT诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡的线粒体通路终末效应之一.