凝血因子检测对肝脏疾病的临床应用

[目的 ]探讨肝脏疾病对凝血机制和纤溶活化功能的影响 ,分析其与肝脏损害程度的关系。[方法 ]采用ACL - 2 0 0型美国库尔特全自动血凝仪分别检测肝炎 33例 ;肝硬化 4 0例 ;肝癌 2 8例 ;正常人 4 0例 ,血凝血酶原时间 (PT)、活化部分凝血活酶时间 (APTT)和纤维蛋白原 (FIB ) ;采用胶体金方法测定血浆D -二聚体。[结果 ]肝炎组的PT(1 3.6± 1 .0 6 )s ,APTT (32 .4± 4 .5 7)s ,FIB(2 .5 7± 0 .4 6 )g/L ,D -二聚体 (0 .89± 0 .2 2 )mg/L ;肝硬化组PT (1 7.7± 5 .6 0 )s ,APTT(4 3.4± 1 3.3)s,FIB (2 .1 0± 0 .88)g/L ,D -二聚体 (2 .4 6± 0 .6 1 )mg/L ;肝癌组PT(1 5 .0 5± 2 .74 )s,APTT (36 .8± 5 .5 5 )s ,FIB(3.5 0± 1 .1 6 )g/L ,D -二聚体 (2 .31± 0 .8)mg/L ;它们与正常组PT(1 3.0 2± 0 .6 2 )s ;(APTT32 .0± 2 .0 )s;FIB (2 .81± 0 .78)g/L ;D -二聚体 (0 .4 5± 0 .1 1 )mg/L比较有不同程度的差异。 [结论 ]不同病程肝脏疾病患者PT、APTT、FIB、D -二聚体均可异常 ,其中肝硬化患者的各项指标变化最为显著。     

阿米福汀在肺癌放射治疗时对机体正常细胞和肺癌细胞的影响

目的　探讨阿米福汀对体外培养的中国仓鼠V79细胞和C5 7BL/ 6小鼠造血系统的放射保护作用及其在肺癌放射治疗时对肺癌组织生长的影响。方法　将体外培养的中国仓鼠V79细胞接种于培养皿后,分别给予2～10Gy的γ射线照射,用药组在照射前30min暴露于阿米福汀(1 2mmol/L) ,评价阿米福汀对照射后V79细胞存活分数的影响;给予C5 7BL/ 6无瘤小鼠腹腔注射阿米福汀(2 0 0mg/kg) 30min后进行全身照射(8Gy) ,在照射后不同时间观察外周血白细胞数量的变化;给予荷Lewis肺癌C5 7BL/ 6小鼠肿瘤局部照射10Gy ,照射前30min腹腔注射阿米福汀(2 0 0mg/kg) ,评价阿米福汀对肿瘤放疗效果的影响。结果　用药组V79细胞的集落存活分数高于单纯放射组(P <0 0 5 ) ;用药组无瘤小鼠外周血白细胞数较单纯放射组下降幅度小且恢复快(P <0 0 5 ) ;在观察的2 0d内,比较用药组和单纯放射组荷Lewis肺癌小鼠肿瘤体积,在相同时间点两组之间比较无显著性差异(P >0 0 5 )。结论　本研究从离体和在体两方面证实了阿米福汀对机体正常细胞产生放射保护的同时,对肿瘤组织细胞无放射保护作用     

健康人肝组织麦胚凝集素亲和型糖蛋白表达谱分析

目的分析健康人肝组织麦胚凝集素(wheatgermagglutinin,WGA)亲和型糖蛋白表达谱。方法从30例健康人肝组织混合样本的总蛋白中用WGA凝集素亲和层析分离纯化糖蛋白,再利用双向电泳结合SYPRO Ruby荧光染色进一步分离WGA亲和型糖蛋白。目的蛋白质点经质谱鉴定后对其进行生物信息学分析及功能分类。结果初步建立WGA亲和型糖蛋白的双向电泳图谱,图谱均点数为(650±50)个,质谱鉴定并去冗余共获116个蛋白。经生物信息学分析104个蛋白具有不同程度的N糖基化位点,最后按Gene Ontology的分类原则进行功能分类。结论凝集素亲和层析结合双向电泳荧光染色、质谱鉴定是一种高通量的检测方法,WGA亲和型糖蛋白表达谱的初步构建为后续研究奠定了基础。     

利用原子力显微镜观察大肠癌细胞与癌旁正常组织细胞

目的利用原子力显微镜（AFM）观察大肠癌癌细胞与癌旁正常组织的细胞膜的纳米级超微结构,并进行对比,旨在为早期诊断大肠癌提供帮助。方法选取大肠癌细胞及相应的癌旁正常组织细胞30例,每例随机选取10个细胞作为观察对象,应用原子力显微镜（轻敲模式）扫描并利用软件自动分析系统进行分析。结果通过观察发现大肠癌细胞和癌旁正常组织细胞细胞膜存在明显差异,大肠癌细胞细胞膜表面平均粗糙度、平均峰高度及表面积差值均明显高于癌旁正常组织细胞（P〈0.05）。结论实验证明原子力显微镜可以明显区别大肠癌细胞与癌旁正常组织细胞,为临床早期诊断大肠癌提供新的技术手段。     

结直肠癌组织浸润免疫细胞组成及特征

目的：研究结直肠癌（CRC）患者和健康人大肠组织中免疫细胞的浸润情况,为后续开展肿瘤微环境的研究提供前期的分析结果和数据。方法：通过GEO数据库对51例正常人结直肠组织和333例CRC患者肿瘤组织的基因表达谱数据进行计算分析,通过CIBERSORT方法将基因表达谱数据转化为组织中22种免疫细胞的浸润比例,对比这些免疫细胞在两者中的分布情况。结果：肠道浸润的免疫细胞组成在CRC患者与健康人之间有较大差异。T细胞和B细胞在肿瘤组织中的浸润数量少于健康人,而巨噬细胞、中性粒细胞、肥大细胞和树突状细胞在肿瘤组织中的浸润数量大于健康人。结论：CRC患者和健康人的结直肠组织中免疫细胞浸润存在较大的差异,这些具有差异的免疫细胞在癌症进展中可能发挥重要作用。     

正常肝与肝癌细胞表达差异的cDNA克隆的研究

采用信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）差异显示技术（ｍＲＮＡＤｉｆｆｒｅｎｔｉａｌＤｉｓｐｌａｙｍＲＮＡＤＤ），寻找人正常肝与肝癌细胞表达差异的互补脱氧核糖核酸（ｃＤＮＡ）克隆。人正常肝组织及人肝癌细胞株（Ｈｅｐ３Ｂ）ｍＲＮＡ用３＇端二个引物分别与五种不同５＇端引物进行逆转录─聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），以３５Ｓ－α（ｄＡＴＰ）参入产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）及放射自显影。获得一批表达差异的ｃＤＮＡ克隆。选择其中３１个克隆进行部分ＤＮＡ序列分析，除一个为已知序列外其余３０个克隆为ＧｅｎｅＢａｎｋ中无匹配序列。经斑点杂交证明二个克隆在肝癌中高表达，一个克隆在正常肝中高表达。目前正在对有意义的克隆做进一步论证。     

苯甲酸雌二醇对植入裸鼠体内的人正常乳腺组织的影响

目的观察苯甲酸雌二醇对人正常乳腺的影响。方法将9只裸鼠随机分为A、B、C3组,每组3只。取3例人正常乳腺组织标本,并将每例标本分为3份,分别植入各组中的1只裸鼠。植入2周后,从A组取出部分植入组织作对照组,之后A、B、C组裸鼠开始分别肌肉注射苯甲酸雌二醇3、6、9μg,每天1次,共28d;后处死裸鼠,取出植入组织。采用免疫组化方法检测各组植入组织的增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)、雌激素受体(estrogenreceptor,ER)、孕激素受体(progesteronereceptor,PR)的蛋白表达。结果与对照组相比,B、C组乳腺上皮细胞PCNA表达明显升高(P<0.05),A组乳腺PCNA无明显改变。随苯甲酸雌二醇剂量升高,ER表达逐渐下降(P<0.05),PR表达则逐渐上升(P<0.05)。结论一定剂量的苯甲酸雌二醇可促进正常乳腺的增生。     

骨桥蛋白在人结肠癌组织中的表达研究

骨桥蛋白(osteopontin,0PN)是最先从骨基质中分离出来的分泌型磷酸化糖蛋白,具有多种生物学活性,与骨质代谢有关[1].它也在多种腔上皮,如消化道粘膜中过表达,在细胞信号传导、细胞的粘附和迁移等方面起重要作用.近年来人们发现OPN在多种肿瘤中皆呈现过表达,而且与肿瘤的浸润、转移等密切相关,而对于-OPN在结肠癌组织中的表达情况研究较少,本研究通过免疫组织化学法检测OPN在人结肠癌组织中的表达情况,分析其与肿瘤临床病理学特征同的关系,从而探讨OPN在结肠癌中的意义.     

P27在乳腺癌及正常乳腺组织中的表达及其意义

目的探讨P27在乳腺癌及正常乳腺组织中的表达变化与临床病理意义。方法应用免疫组织化学方法,分别检测71例乳腺癌及32例正常乳腺组织P27的表达情况,并分析它与相关临床病理参数的关系。结果在乳腺癌中P27的阳性表达率28.2%(20/71),正常乳腺组织中P27的阳性表达率84.4%(27/32),差异有统计学意义(P<0.05);同时P27阳性表达率与乳腺癌的分化程度及有无淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论 P27蛋白的低表达可增加肿瘤细胞增殖活性,促进肿瘤的发生;同时过度增殖活跃的肿瘤细胞也是乳腺癌淋巴结转移的因素之一。     

肝硬化患者凝血因子和血小板参数检测结果分析

1 临床资料我院住院病毒性肝炎患者286(男224,女62)例,年龄9～65(平均36.2)岁. 其中肝硬化62例,急性肝炎98例,慢性肝炎102例,重症肝炎24例,临床诊断符合《2000年(西安)病毒性肝炎诊断标准》[1].     

应用等电聚焦电泳对乳癌雌孕激素受体的分析

本文对26例乳癌标本雌、孕激素受体分析结果表明,约有近半数乳癌组织中存在雌,孕激素受体。受体含量高低与病理类型无关,二者的等电点与糖皮质激素受体(pH6.1—6.15)比稍偏高(pH6.5—6.7),应用胰蛋白酶后在等电点P位均可出现一锐型峰,被检测的乳癌患者年龄在50岁以下者雌、孕激素受体含量为高。对雌、孕受体含量高的患者抗雌激素治疗做为综合治疗的重要手段,可望获得更好的效果。     

Expression of Resistin Protein in Normal Human Subcutaneous Adipose Tissue and Pregnant Women Subcutaneous Adipose Tissue and Placenta

Resistinisanovelpolypeptidehormoneintheadiposetissue,whichcharacterizedbyacysteine richmotif(CX12CX8CXCX3CX10CXCXCX9CC).Resistinismainlyexpressedinthewhiteadiposetissueandweakinthebrownadiposetissue.Re sistinlinksobesitytodiabetes[1,2].Serumresistinlevelsismarkedlyincreasedinob/obanddb/dbmouse[1].Thiazolidinedionescanobviouslyreduceresistinexpressioninmouse.Duringthepregnan cy,pregnantwomenhavephysiologicalinsulinre sistance,decreaseglucosetoleranceandinsulinsensitivityandareeasytoget…     

金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP—1）的克隆与序列分析

目的：用基因工程技术构建金属蛋白酶组织抑制剂的克隆质粒。方法：从人乳腺癌细胞中分离提取总RNA,经逆转录PCR（RT－PCR）扩增出金属蛋白酶抑制因子1（TIMP－1）的c DNA,插入经NdeI和XhoI双酶切的PET19b载体中,构建了克隆质粒PET19bTIMP－1。结果：对此克隆质粒进行了限制性酶切鉴定和DNA序列分析,结果在扩增出的cDNA中624个碱基中与发表的TIMP－1cDNA序列相比,除361位碱基由A变为G外,其余均完全相同。结论：该突变导致编码的氨基酸由苏氨酸变为丙氨酸,不影响本课题后期用该克隆化基因表达蛋白作为抗原制备单克隆抗体的目的。该DNA全长624bp,编码207个氨基酸。     

人胰腺癌组织中增殖诱导配体蛋白的表达及意义

目的:观察人胰腺癌组织中增殖诱导配体(APRIL)蛋白的表达情况,探讨其与胰腺癌生物学行为的关系.方法:免疫组化染色法检测人胰腺癌组织(n=20)及正常胰腺组织(n=10)APRIL蛋白的表达,分析不同临床病理指标下胰腺癌组织中APRIL蛋白的表达.结果:胰腺癌组织中APRIL阳性率为90.0%(18/20),明显高于正常胰腺组织0(0/10).胰腺癌组织不同临床病理指标下(肿瘤分化程度、有无淋巴结转移、有无远处转移、肿瘤大小),APRIL蛋白表达无显著差异.结论:APRIL蛋白表达可能与胰腺癌的发生、发展有关.     

前列腺调强放射治疗中摆位对正常组织剂量的影响

目的量化利用计划危及器官区(PORV)对股骨头的剂量影响,同时评估虽因临床上小的摆位误差但运用计划危及器官区(PORV)却能约束正常组织的剂量.方法首先给十位前列腺癌患者用五野调强计划进行优化,然后用外扩股骨头5 m的计划危及器官区再优化.模拟治疗最差的情况下,将治疗等中心上下、左右、前后六个方面移动5 mm以模拟系统摆位的不确定性,对每一计划不进行优化,剂量分布重新计算,每个病人产生六个不用计划危及器官区(PORV)的计划和六个用计划危及器官区(PORV)的计划.结果增加了计划危及器官区(PORV)及进行再优化并没有很大程度影响PTV、直肠、膀胱及股骨头的受照射剂量,相反,没移动等中心位置,用计划危及器官区(PORV)可限制股骨头的剂量升高,同时减少股骨头毗邻区域的面积.模拟移动等中心位置,对侧股骨头的剂量会因向对侧移动中心位置而提高很多,如右股骨头用计划危及器官区(PORV)其超过50Gy的剂量会从8.07%减少到5.95%.结论运用计划危及器官区(PORV)可以限制正常组织结构的体积及受照射量,如右股骨头,从而减少因摆位误差而造成剂量的改变.     

食管癌组织中存活蛋白的异常表达

目的 通过比较食管癌组织和癌旁组织中存活蛋白的表达情况,探讨凋亡抑制因子存活蛋白与食管癌之间的关系.方法 T-A 克隆制备存活蛋白定量PCR 标准品pTA/存活蛋白;采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和免疫组织化学法检测33例经病理证实的食管癌组织(实验组)及其相应的癌旁组织(对照组)中存活蛋白的mRNA和蛋白质表达水平,并分析存活蛋白表达与食管癌临床病理特征间的关系.结果 FQ-PCR结果 显示,实验组中存活蛋白的阳性表达率为81.82%(27/33),对照组中阳性表达率为39.40(14/33),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);免疫组织化学结果 在实验组和对照组中