HMGB1及JAK2/STAT3通路在急性胰腺炎大鼠肾组织中的表达及罗格列酮的调节机制研究

目的:研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和JAK2/STAT3在急性胰腺炎模型大鼠肾组织表达及PPAR-γ激动剂罗格列酮的调节机制。方法:72只SD大鼠随机分为三组:假手术组(SO)、模型组(SAP)和罗格列酮组(ROSI),每组各24只。SAP组及ROSI组采用L-精氨酸法成功制备SAP模型,ROSI组制模后30min静脉注射罗格列酮6mg/kg,SO组腹腔及静脉分别注射等量生理盐水。各组注射后再分为6、12、24h三组(n=8)。观察肾脏病理变化,肾组织JAK2、STAT3、HMGB1蛋白表达,血清TNF-α、IL-1β、IL-6、BUN、Cr浓度作为检测指标。结果:与SAP组比较,ROSI组大鼠肾小管细胞病理损害较轻,肾组织内JAK2、STAT3、HMGB1蛋白明显下降(P<0.05),外周血IL-1β、IL-6、TNF-α和BUN、Cr含量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:罗格列酮能减轻急性胰腺炎大鼠肾小管及间质损伤,同时抑制HMGB1蛋白和JAK2/STAT3的表达,降低外周血促炎细胞因子水平,保护肾功能。     

JAK/STAT通路在脂多糖诱导肝细胞HMGB1释放中的作用

目的:探讨Janus激酶/信号转导和转录激活子(JAK/STAT)信号通路在内毒素脂多糖诱导肝细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)释放中的作用?方法:观察100 μg/L 脂多糖诱导后,大鼠肝细胞BRL-3A细胞HMGB1 mRNA表达水平和细胞培养上清液中HMGB1含量的变化,及不同浓度的JAK/STAT通路抑制剂tyrphostin AG 490?氟达拉滨的影响?结果:脂多糖诱导BRL-3A细胞24 h后HMGB1 mRNA表达水平和培养上清液中HMGB1含量明显升高(P < 0.01),25 μmol/L tyrphostin AG 490和50 μmol/L氟达拉滨对以上2个指标显示一定程度的抑制作用(P < 0.05)?结论:内毒素脂多糖可诱导肝细胞HMGB1的表达和释放,其机制可能与细胞JAK/STAT信号通路有关?     

血浆置换对系统性红斑狼疮患者外周血中高迁移率族蛋白-1水平的影响

目的 探讨血浆置换(Plasmapheresis)对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血高迁移率族蛋白-1(highmobility group box chromosomal protein 1,HMGB1)、肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)等炎症介质水平的影响,同时观察血浆置换对患者临床症状及预后的影响.方法 随机选取2008 ～ 2010年收治于山东大学附属省立医院肾内科的重症狼疮患者22例,依据1997年修订的SLE分类标准的诊断标准,在糖皮质激素及其冲击疗法基础上给予血浆置换.分别留取血浆置换治疗前(T0)、治疗开始后2 h(T1)及血浆置换停止后12 h(T2)各时间点的右侧桡动脉血标本5mL,高速离心后取血清-20℃保存,采用ELSIA方法检测动脉血清的HMGB1浓度,放射免疫法检测其中TNF-α的浓度.结果 患者血浆置换前血清的HMGB-l浓度为(6.924±2.832)ng/mL,血浆置换2h为(4.166±2.172)ng/mL,下降到最低,血浆置换停止后12h稍有回升,为(4.872±2.098)ng/mL,仍低于血浆置换前浓度,差异均有统计学意义(P＜0.05).血浆置换前血清中的TNF-α浓度为(81.11±14.06)pg/mL,血浆置换2h为(50.46±12.99)ng/mL,血浆置换停止后12h稍有回升,为(61.87±14.09)ng/mL,仍低于血浆置换前,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 血浆置换可显著降低系统性红斑狼疮患者外周血中HMGB-1及TNF-α浓度,有利于控制患者病情恶化,为进一步应用免疫抑制剂治疗争取时间.     

HMGB1在系统性红斑狼疮中的表达及其与感染的关系

目的 检测在系统性红斑狼疮患者及合并感染时单核细胞培养上清液中HMGB1的变化,探讨其在疾病活动及继发感染中的意义.方法 2007年8月01日～2008年01月31日,从湘雅医院门诊及住院病人中选取SLE稳定期、活动期、活动期并发细菌感染组及正常对照组各20例作为本次研究的对象.对研究对象的外周静脉血处理培养,采用ELISA方法检测上清液HMGB1的浓度,并用Western检测SLE患者血清HMGB1蛋白表达.采用SPSS15.0软件对资料进行统计分析.结果 ①单核细胞未加入LPS培养上清液以及加入LPS培养上清液,两种情况的统计结果均为:SLE稳定组HMGB1的浓度与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05),而SLE活动组高于稳定组及正常对照组,感染组高于活动组(P<0.05).②单核细胞加入LPS前后培养的上清液中,稳定组与正常对照组HMGB1的浓度差异均有统计学意义(P<0.05),而活动组以及感染组HMGB1的浓度差异均无统计学意义(P>0.05).③SLE活动组(75%)与SLE活动合并肺部感染组(85%)的血清中通过Western方法可检测到HMGB1的表达,且SLE活动合并肺部感染组血清中HMGB1的蛋白表达水平较SLE活动组显著增高(P<0.05).结论 SLE活动患者单核细胞培养后上清液中HMGB1浓度升高,且其升高与疾病的活动有关;继发感染时HMGB1浓度进一步升高;SLE活动并肺部感染能使患者血清中HMGB1的表达增高.     

JAK-STAT信号途径和肾细胞癌干扰素抵抗的研究进展

肾癌是泌尿系统常见恶性肿瘤,干扰素免疫治疗是治疗晚期肾癌的主要方案之一,但是总体应答率不高。Janus蛋白酪氨酸激酶/信号转导和转录激活因子(JAK-STAT)信号途径是干扰素发挥其生物学作用的经典途径,肾癌的干扰素抵抗主要与JAK-STAT途径表达异常相关。另外,VHL(Von Hippel-Lindau)基因突变和干扰素相关调节基因的表达异常可能在干扰素抵抗中发挥了一定的作用。寻找能预测干扰素疗效的分子标志物成为研究热点,STAT3的多态性有望成为潜在的预测指标。     

信号转导和转录活化因子3与系统性红斑狼疮的研究进展

<正>系统性红斑狼疮(SLE)是以全身免疫异常而致多器官受累为特征的疾病,病理表现为自身抗体产生和免疫复合物沉积。SLE发病机制复杂,为多种基因和环境因素相互作用的结果。这种相互作用激活T细胞,活化的T细胞反过来再激活B细胞,导致过多的自身抗体产生。T细胞和B细胞的功能是通过细胞内信号转导来实现的。信号转导和转录活化因子3(signal     

缺氧诱导肺泡巨噬细胞HMGB1的释放及其可能机制

目的:研究缺氧对肺泡巨噬细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1,HMGB1)释放的作用及其信号通路?方法:采用大鼠肺泡巨噬细胞NR8383,观察不同时间缺氧培养对细胞HMGB1 mRNA表达和培养上清液中HMGB1含量的影响,及不同浓度JAK2抑制剂tyrphostin AG 490和STAT1抑制剂氟达拉滨对HMGB1释放的抑制作用?HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测?结果:培养上清液中HMGB1含量和mRNA表达水平分别于缺氧培养6?12 h后明显升高(P < 0.01),并随缺氧培养时间延长而进一步升高和增强;tyrphostin AG 490和氟达拉滨对缺氧培养肺泡巨噬细胞释放HMGB1有不完全的抑制作用,并呈剂量依赖性?结论:缺氧诱导肺泡巨噬细胞释放HMGB1,JAK/STAT信号通路可能参与其释放过程?     

系统性红斑狼疮患者信号转导及转录激活因子4基因单核苷酸多态性与其mRNA表达水平的相关性研究

目的探讨系统性红斑狼疮中信号转导和转录激活因子4(STAT4)基因rs7574865位点单核苷酸多态性(SNP)与其mRNA表达水平之间的相关性。方法以TaqMan MGB探针法在163例SLE患者中对STAT4基因rs7574865位点的SNP进行分型,用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应法检测以上患者外周血单个核细胞(PBMC)中STAT4 mRNA表达水平,并分析两者之间的关系。结果 SLE患者中G等位基因频率为49.7%,T等位基因频率为50.3%,G/G型纯合子患者的比例为22.7%,G/T型杂合子患者的比例为65.0%,T/T型纯合子患者的比例为12.3%。具有G/T型的SLE患者的STAT4 mRNA表达水平显著高于具有G/G型或T/T型的SLE患者(P<0.05)。结论 STAT4 rs7574865位点SNP与STAT4 mRNA表达水平具有相关性,具有G/T型的SLE患者的STAT4 mRNA表达水平显著增高。     

系统性红斑狼疮患者外周血T细胞磷酸肌醇3激酶信号通路异常活化

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T细胞中磷酸肌醇3激酶(PI3K)信号通路活化情况及其临床意义.方法 检测28例SLE患者的T细胞PI3K通路活性.8例类风湿关节炎患者为对照,另以15名健康者为正常对照组.外周血T细胞分离采用RosettSep T细胞提取试剂盒提取,PI3K活性采用免疫沉淀和ELISA法,Akt及其磷酸化蛋白运用免疫印迹法,T细胞增殖采用MTT法,细胞因子水平采用ELISA检测.结果 新鲜分离的SLE患者外周血T细胞PI3K和Akt活性均显著高于正常对照组和类风湿关节炎组;SLE患者T细胞在体外培养24 h后PI3K和Akt活性与正常对照组差异无统计学意义,而正常对照组T细胞用SLE患者血清孵育24 h后PI3K和Akt活性显著增高;PI3K特异性抑制剂LY294002显著抑制SLE患者T细胞增殖(125±21 vs 197±26,P<0.05)及分泌白细胞介素(IL)-6和IL-10[分别为(425±69)ng/L vs(816±116)ng/L,P<0.05;(114±18)ng/L vs(207±31)ng/L,P<0.05].新鲜分离的SLE患者外周血T细胞PI3K和Akt活性与SLEDAI无相关关系.结论 SLE患者T细胞存在PDK信号通路异常活化,并与T细胞增殖和细胞因子分泌有关,SLE外周血中可能存在激活该通路的血清因子.     

高迁移率族蛋白B1及其糖基化终产物受体在系统性红斑狼疮患者中的变化及其临床意义

目的：探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）及其糖基化终产物受体（RAGE）在系统性红斑狼疮（SLE）发病中可能的作用。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测52例SLE女性患者（SLE组）及40例体检健康女性（HC组）血浆HMGB1水平;同时采用实时荧光定量PCR（RT‐qPCR）检测外周血单核细胞（PBMCs）HMGB1及RAGE mRNA表达水平;并分析SLE患者血浆HMGB1及 PBMCs HMGB1、RAGE mRNA 水平与临床指标的相关性。结果 SLE 组患者血浆 HMGB1及 PBMCs HMGB1 mRNA水平高于HC组,差异均有统计学意义（P＜0．01）;而PBMCs RAGE mRNA水平比较,差异无统计学意义（P＞0．05）;Spearman相关性分析显示,SLE患者血浆 HMGB1水平与抗核抗体滴度、SLE活动性指数（SLEDAI）评分均呈正相关（P＜0．05）,与其他临床和实验室指标无明显相关性（P＞0．05）;HMGB1 mRNA表达水平与RAGE mRNA表达水平、SLEDAI评分均呈正相关（P＜0．01,P＜0．05）,与其他临床和实验室指标无明显相关性（P＞0．05）。结论血浆 HMGB1及 PBMCs HMGB1 mRNA在SLE患者的异常表达提示其可能在SLE的发生、发展中发挥作用,可能参与了SLE的免疫炎症调节。     

狼疮性肾炎患者HMGB1和RAGE的表达及意义

目的：探讨高迁移率族蛋白B1( HMGB1)及晚期糖基化终产物受体(RAGE)在狼疮性肾炎(LN)中的作用。方法 ELISA法检测系统性红斑狼疮( SLE )患者及正常对照者血清、尿液中 HMGB1的表达水平,免疫组化法检测 SLE患者及正常对照者肾组织中HMGB1及RAGE的表达水平。结果 SLE患者血清及尿液的HMGB1水平与正常对照者比较均升高(P<0．01),活动期SLE患者较稳定期SLE患者明显升高(P<0．05)。狼疮肾损害者血清HMGB1水平明显高于狼疮非肾损害者(P<0．05)且与SLE疾病活动指数(SLE-DAI)评分、24 h尿蛋白定量、白细胞计数呈正相关性( P<0．05),尿液中HMGB1水平与 SLEDAI评分呈正相关性(P<0．05)。正常对照者肾组织肾小管上皮细胞可中等强度表达HMGB1和RAGE,肾小球未见表达;而在SLE患者可见肾小管中表达有所增强,肾小球中也明显表达,其肾内的HMGB1和RAGE的表达水平较正常对照者明显增加( P<0．05);Ⅳ型、Ⅳ+Ⅴ型SLE患者肾内HMGB1的表达量均明显高于Ⅱ型(P<0．05),Ⅳ型SLE患者肾内RAGE的表达量高于Ⅱ型(P<0．05)。结论 HMGB1和RAGE可能参与了LN的发病过程,与疾病的病理变化有关。     

血清抗C1q抗体在系统性红斑狼疮患者中的临床价值

目的 探讨血清抗C1q抗体在系统性红斑狼疮(SLE)患者狼疮肾炎(LN)以及疾病活动中的临床价值.方法 采用ELISA法检测102例SLE患者以及35例正常对照组血清中抗C1q抗体水平,比较分析其与SLE病情活动指数(SLEDAI)评分、疾病活动性指标抗双链DNA(ds-DNA)抗体、补体C3、C4水平、超敏C反应蛋白(hs-CRP)以及肾脏损害指标24 h尿蛋白定量(24 h UPQ)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)的相关性,以及通过联合检测抗ds-DNA抗体以及抗核小体抗体(AnuA)判断其在SLE中的临床价值.结果 总体SLE患者抗C1q抗体敏感性为55.9%,特异性为94.3%,在SLE中其抗体水平显著高于正常对照组,其中疾病活动LN组、疾病稳定LN组和疾病活动非LN组抗 C1q 抗体水平明显高于疾病稳定非LN组水平,差异有统计学意义(P<0.01),而疾病稳定LN组、疾病活动LN组与疾病活动非LN组之间比较,差异无统计学意义.在疾病活动期中,抗C1q抗体水平与SLEDAI评分、ds-DNA、hs-CRP呈正相关性(P<0.05),与C4呈负相关性(P<0.05),C3和24 h UPQ仅在疾病活动LN组中呈相关性;在疾病稳定期中,抗C1q抗体水平只有在疾病活动和疾病稳定LN组中与24 h UPQ呈正相关性,与C3、C4呈负相关性.联合检测抗ds-DNA抗体、AnuA、抗C1q抗体显著提高稳定期LN的诊断价值.结论 抗C1q 抗体对SLE的诊断和LN判断有重要临床价值,抗C1q 抗体参与了SLE肾脏损害的发病机制,联合检测抗ds-DNA抗体、AnuA、抗C1q抗体有助于SLE稳定期肾脏损害的诊断.     

系统性红斑狼疮患者血清MMP-3与TIMP-1的检测

目的:探讨基质金属蛋白酶-3(MMP-3)以及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在系统性红斑狼疮(SLE)中的作用和意义.方法:采取双抗体夹心ELISA法检测45名SLE患者及30名正常对照者血清MMP-3、TIMP-1水平.结果:①与正常对照组相比患者血清MMP-3水平明显增高(P＜0.01);经糖皮质激素治...     

不完全系统性红斑狼疮患者的随访研究及病情进展预测

目的 观察不完全系统性红斑狼疮（ILE）患者的临床随访研究结果，探索其病情进展预测因素。方法 对ILE患者定期随访，记录其临床资料及实验室检查结果，随访结束时分析病情进展预测因素。结果 共有19例ILE患者入选本项研究。在3年的随访研究中，有11例ILE患者发展为SLE。危险因素分析显示颡部红斑、光过敏、抗dsDNA抗体阳性与SLE进展相关。结论 在本次随访研究中，虽有58％的ILE患者最后进展为SLE，但所有患者的SLEDAI分值都较低，提示ILE为狼疮的一种比较轻的亚型。颡部红斑、光过敏及抗ds—DNA抗体阳性预示这些患者可能发展为SLE．     

赖诺普利治疗系统性红斑狼疮患者尿蛋白的临床研究

目的探讨赖诺普利对系统性红斑狼疮(SLE)患者尿蛋白的作用。方法将72例SLE患者随机分为两组,赖诺普利治疗组(治疗组)39例及非赖诺普利治疗组(对照组)33例。治疗组给予赖诺普利10 mg/d,总疗程为8周。治疗8周后,与治疗前及对照组比较,观察24 h尿蛋白定量等指标的变化。结果在降尿蛋白的疗效比较中,治疗组显著优于对照组(P<0.01)。治疗组在治疗后24 h尿蛋白明显下降(P<0.01)。对照组下降不明显(P>0.05)。两组血压均有下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。主要不良反应是咳嗽、血钾轻度升高,但不影响治疗。结论赖诺普利可有效地降低SLE患者的尿蛋白,对SLE患者的肾脏有较好的保护作用。     

系统性红斑狼疮患者血清对氧磷脂酶-1的测定及其临床意义

目的探探讨系统性红斑狼疮患者血清对氧磷脂酶-1(PON-1)活性水平及其临床意义。方法测定48例SLE患者(33例活动期和15例非活动期)、30例健康正常者血清PON-1活性、ox-LDL等指标。结果SLE患者PON-1活性为(131.5±45.2)IU/ml,显著低于健康正常者(223.4±65.8)IU/m(lP<0.01);且SLE患者活动期PON-1活性低于非活动期,相反血清ox-LDL水平则高于非活动期,有显著性差异(P<0.05)。PON-1与ox-LDL存在负相关性(r=-0.552,P<0.001),而PON-1与HDL-C不存在相关性(r=0.173,P>0.05)。结论SLE患者血清PON-1活性下降;PON-1与血清ox-LDL水平、高脂质过氧化有关。PON-1活性下降可能是SLE早发动脉粥样硬化的一大因素。     

89例系统性红斑狼疮患者免疫指标测定的分析

目的：分析免疫学指标对诊断系统性红斑狼疮患者及病情监测的意义。方法：分别应用单向免疫扩散法,间接免疫荧光法、快速斑点免疫印迹技术、形状学方法。结果：活动期ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ升高,Ｃ３、Ｃ４下降ＡＮＡ抗体、ｄｓＤＮＡ抗体及ＥＮＡ抗体阳性,淋巴细胞转化率下降;非活动期ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、Ｃ３、Ｃ４近似参考值,ＡＮＡ抗体、ｄｓＤＮＡ抗体滴度下降或转阴,ＥＮＡ抗体及淋巴细胞转化率无明显变化。结论：