佐剂对日本血吸虫31/32kDa蛋白保护性免疫力的影响

本实验用纯化的日本血吸虫３１／３２ｋ Ｄａ 蛋白（ Ｓｊ３１／３２ 蛋白）辅以ｐｏｌｙａｌｐｈａｏｌｅｆｉｎ（ Ｐ Ａ Ｏ）佐剂免疫小鼠,同时比较了 Ｓｊ３１／３２ 蛋白辅以福氏完全佐剂（ Ｆ Ｃ Ａ）对小鼠保护性免疫力的影响。 Ｓｊ３１／３２ 蛋白＋ Ｐ Ａ Ｏ 组小鼠减虫率为３７５５％ ,肝减卵率为６７０２％ ; Ｓｊ３１／３２ 蛋白组小鼠减虫率为２１１８％ , 肝减卵率为 ４９０３％ ; Ｓｊ３１／３２ 蛋白＋ Ｆ Ｃ Ａ 组小鼠减虫率为 ２４０２％ , 肝减卵率为５２２４％ 。结果提示, Ｓｊ３１／３２ 蛋白辅以 Ｐ Ａ Ｏ 佐剂的减虫作用优于 Ｓｊ３１／３２ 辅以 Ｆ Ｃ Ａ 的减虫作用（ Ｐ＜ ００５）,且明显强于单纯 Ｓｊ３１／３２ｋ Ｄａ 蛋白的保护性免疫作用（ Ｐ＜ ００１）。     

佐剂对日本血吸虫31／32kDa蛋白保护性免疫力的影响

本实验用纯化的日本血吸虫３１／３２ｋＤａ蛋白辅以ｐｏｌｙａｌｐｈａｏｌｅｆｉｎ（ｐａｏ）佐剂免疫小鼠，同时比较了Ｓｊ３１／３２蛋白辅以福氏完全佐剂对小鼠保护性免疫力的影响。     

日本血吸虫成虫31/32 kDa蛋白的纯化及保护性免疫力的研究

本文采用制备型聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和电渗析方法分离纯化日本血吸虫成虫 31/32 kDa 蛋白(Sj 31/32蛋白)。SDS-PAGE、免疫印迹试验(EITB)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果表明采用该方法分离纯化的 Sj 31/32 蛋白纯度高,且具有较高的活性。用纯化的 Sj 31/32 蛋白加福氏佐剂免疫的小鼠,不仅可减少虫负荷(减虫率 28.1％),还可降低血吸虫成虫的产卵量(减卵率 71.4％),抑制虫卵肉芽肿的形成。结果提示:Sj 31/32 蛋白具有较高的减卵率,可望作为混合多价疫苗候选组分。     

吡喹酮治疗对日本血吸虫病人抗幽门螺杆菌抗体的影响

目的探讨吡喹酮治疗对日本血吸虫病患者血清抗幽门螺杆菌HpIgG水平的影响。方法利用Hp全菌抗原对流行区94例日本血吸虫病人治疗前后血清抗HpIgG进行检测。结果治疗后3、6个月,Hp感染阳性率分别为73.4％和70.2％(治疗前为75.5％),HpIgG抗体水平分别为0.71±0.30和0.65±0.21(治疗前为0.80±0.23),对照组均有轻度升高。各年龄组Hp感染阳性率和血清HpIgG水平均随治疗进展而降低,其中0～20岁年龄组血清HpIgG下降最快。血清抗HpIgG和同期对应的日本血吸虫31／32kDa(Sj31／32)IgG抗体平均水平及阴转值之间高度相关(治疗后3个月r分别为0.85和0.65,治疗后6个月r分别为0.85和0.50)。结论日本血吸虫病人经吡喹酮治疗后Hp感染阳性率及血清HpIgG水平降低,日本血吸虫与Hp感染高度相关,血吸虫可能作为Hp感染的危险因素之一。     

左旋吡喹酮与右旋吡喹酮治疗对体内日本血吸虫皮层…

感染日本血吸虫３５ｄ的小鼠用左旋吡喹酮（Ｌ－Ｐｒａ）１５０ｍｇ．ｋｇ＾－１，或右旋吡喹酮（Ｄ－Ｐｒａ）１５０．６００ｍｇ．ｋｇ＾－１次灌胃治疗，在给药后的１５ｍｉｎ，１、２、４、８、２４ｈ分别解剖取虫，以扫描电镜观察血吸虫的皮层变化。结果，发现，Ｌ－Ｐｒａ１５０ｍｇ．ｋｇ＾－１对血吸虫可引起明显和广泛的损害，包括皮层的严重肿胀、融合、糜烂和剥落，并伴有宿主白细胞的粘附；盘状感觉器官亦示有明显的肿胀     

日本血吸虫31／32kDa抗原纯化及诊断应用的研究

采用超凝胶柱层析结合超滤、透析、沉淀等方法分离纯化了日本血吸虫成虫３１／３２ｋＤａ抗原。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、银染和免疫印迹分析，证明免疫及生化纯度。银染及ＰＡＳ证实此抗原是一种不含糖的多肽类组分。用于ＥＬＩＳＡ和ＩＨＡ诊断日本血吸虫病，与ＳＥＡ同样敏感，而特异性明显较优。     

日本血吸虫31／32kDa纯化诊断抗原现场应用研究

为了解洪灾后日本血吸虫病的流行情况,探讨日本血吸虫３１／３２ ｋＤａ纯化诊断抗原（Ｓｊ３１／３２）现场应用的价值,我们于 １９９８年 ９～１２月,应用 Ｓｊ３１／３２对流行区赤壁镇进行了人群日本血吸虫感染状况的调查。 材料和方法１检测对象 遭受洪灾的日本血吸虫病疫区的湖北赤壁镇八把刀村１、２组常住居民,共３４５人,其中,男性１８９人,女性 １５６人,年龄 ３～７０岁。抽取被检者静脉血５ ｍｌ,分离血清,低温冰箱保存备检,同时留取粪便作虫卵检查。２ Ｓｊ３１／３２诊断抗原的抽提和初步纯化 利用制备型 ＳＤＳ－…     

吡喹酮对日本血吸虫毛蚴攻击力的影响

吡喹酮对血吸虫虫卵无直接杀伤作用，但可促进血吸虫虫卵毛蚴的孵出，对毛蚴有明显的杀伤作用［１］。经吡喹酮作用后的毛蚴对钉螺的攻击力如何，国内外尚未见报道。本文观察了吡喹酮在体内条件下对日本血吸虫毛蚴攻击力的影响。材料与方法昆明种小鼠１８只，感染日本血吸...     

不同阶段日本血吸虫对吡喹酮敏感性的研究

目的探索成虫、尾蚴、毛蚴、虫卵等不同阶段日本血吸虫对吡喹酮的敏感性.方法于血吸虫病非流行季节,在江西、湖北、湖南6个村,采用吡喹酮40 mg/kg顿服治疗粪检阳性者363例,以观察日本血吸虫成虫对吡喹酮的敏感性.采集阳性粪便收集虫卵,孵化毛蚴,感染钉螺收集尾蚴.观察尾蚴在10-5、6×10-7、4×10-7、10-7mol/L4种浓度吡喹酮溶液中断尾率.毛蚴在5×10-6、10-6、5×10-7、10-7 mol/L 4种浓度吡喹酮溶液中的形态改变.以及虫卵在5×10-6、10-6、5×10-7、10-7mol/L 4种浓度吡喹酮溶液浸泡24 h后的孵出率.结果治疗6～7周后复查334例,319例阴性,阴转率95.5%,2次治疗阴转率达100%.尾蚴在10-5mol/L吡喹酮溶液中出现强烈挛缩、断尾,40 min断尾率为96.6%～100%.毛蚴在5×10-7mol/L吡喹酮溶液中发生形态改变,5 min形态改变率92.3%～100%.虫卵在5×10-6mol/L吡喹酮溶液中浸泡24 h后孵出率为0.结论与曼氏血吸虫相比较,日本血吸虫成虫、尾蚴、毛蚴和虫卵对吡喹酮更为敏感.     

吡喹酮治疗对血吸虫感染小鼠免疫病理变化的影响

目的 :阐明吡喹酮治疗对血吸虫感染宿主免疫病理的影响。方法 :应用免疫组织化学和图像分析技术 ,观察日本血吸虫感染小鼠在吡喹酮治疗后肝组织内可溶性虫卵抗原 ( SEA)及抗体水平和虫卵肉芽肿的变化。结果 :治疗后 5wk,与对照组相比 ,治疗组减虫率为 98.3% ,平均肝重量和体积均显著减小 ,治愈小鼠的肝表面结节明显减少 ,组织内沉积的虫卵已钙化 ,部分虫卵肉芽肿已呈纤维疤痕样改变 ,对照组肝内仍可见慢性和少量急性虫卵肉芽肿。治疗组肝组织内抗原水平下降 ,而其抗体水平不受影响 ,肝内虫卵肉芽肿的平均直径和面积均较对照组显著缩小 ( P<0 .0 1)。结论 :吡喹酮治疗可使肝组织内 SEA水平下降 ,从而抑制了虫卵肉芽肿的病变 ,但不能逆转已形成的虫卵肉芽肿病变。     

吡喹酮治疗对血吸虫感染鼠血清抗SEA循环免疫复合物水平的影响

采用CaptureELISA方法检测日本血吸虫感染鼠血清中抗SEA循环免疫复合物（SEAIC）水平在吡喹酮治疗后的变化。结果表明，感染鼠血清SEAIC水平在吡喹酮治疗后逐周下降。至治疗后第5wk时，15只小鼠中13只治愈，小鼠的血清SEAIC水平已显著下降，吸光度从治疗前的0．358±0．074（0．22－0．46）降至0．165±0．049（0．10－0．23），有非常显著差异（P＜0．01）；至治疗后第7wk时，有10只小鼠的血清SEAIC水平已转为阴性（吸光度小于0．097），另3只小鼠也降至近阴性水平。而2只虽经治疗但未治愈的小鼠血清SEAIC水平无显著变化（P＞0．05）。并且，感染后未予吡喹酮治疗的小鼠血清SEAIC，直至实验观察结束时仍维持在较高水平（0．266±0．076）。     

日本血吸虫成虫31/32kD抗原诱导小鼠产生抗卵免疫的初步研究

本文采用超凝胶柱层析法分离纯化日本血吸虫31/32kD抗原.免疫小鼠诱导保护性免疫力.结果表明,这种保护性免疫力仅有抗卵效果,无抗成虫作用.31/32kD免疫小鼠后可使小鼠粪卵减少63.8%—78.3%;雌虫子宫内虫卵降低53.2%;肝、肠中死卵量明显增加,说明31/32kD抗原可诱导小鼠产生抗卵免疫干扰虫卵形成,加速虫卵死亡,提示它可能是一种有希望的抗血吸虫病理疫苗的候选抗原.     

吡喹酮和硝硫氰胺对日本血吸虫酚酶影响的研究

本文首次报道用日本血吸虫酚酶分子生物化学、酚酶组织化学和雌虫形态学三者相结合的方法,对日本血吸虫雌虫酚酶的变化过程进行动态观察.实验发现:经吡喹酮和硝硫氰胺口服1剂治疗后,兔体内日本血吸虫酚酶同功酶的含量逐渐减少,与组织化学定位观察酚酶反应的变化同步,雌虫子宫虫卵数也逐渐减少,出现变形虫卵或只见卵黄腺颗粒或无虫卵.实验充分表明,吡喹酮和硝硫氰胺治疗后,可进行性、不可逆地破坏雌虫酚酶,使雌虫不能形成正常虫卵或抑制雌虫产卵.说明上述药物的杀虫机理与破坏雌虫酚酶有密切关系.     

吡喹酮治疗对实验小鼠日本血吸虫循环SJ70抗原的影响

采用双夹心酶联免疫吸附试验(双夹心ELISA)检测实验感染日本血吸虫小鼠体内循环SJ70抗原。发现感染后第4wk,即可检出此种抗原。此后,循环SJ70抗原的检出量与检出率逐周增高;至感染第7wk,全部小鼠均检出SJ70抗原,且其检出量达高峰。并持续到感染第16wk。吡喹酮治疗后,小鼠体内SJ70抗原水平逐周下降。至治疗后第5wk时,16只小鼠中14只已不再检出SJ70搞原。另2只小鼠的循环抗原水平降至近消失水平。而2只虽经吡喹酮治疗但未治愈小鼠的SJ70抗原水平无明显变化。     

左旋吡喹酮、右旋吡喹酮和消旋吡喹酮的体外与体内抗不同发育期日本血吸虫的作用

目的：测定消旋吡喹酮（Ｐｒａ）、左旋吡喹酮（Ｌ－Ｐｒａ）和右旋吡喹酮（Ｄ－Ｐｒａ）对不同发育期日本血吸虫的作用。方法：用含２０％小牛血清的ＰＲＭＩ１６４０培养不同发育期的血吸虫，测定上述三种药物的体外抗血吸虫作用。体内试验系于小鼠感染血吸虫尾蚴后不同时间灌服（ｉｇ）Ｐｒａ、Ｌ－Ｐｒａ或Ｄ－Ｐｒａ，根据残留平均虫数评估药效。结果：依据药物引起虫的皮层损害程度，虫龄为２８ｄ（ｄ２８）和３５ｄ（ｄ３５）的成虫对Ｌ－Ｐｒａ最敏感，而１４ｄ（ｄ１４）童虫则最不敏感。在药物浓度为０．１－１μｇ／ｍｌ时，Ｌ－Ｐｒａ的抗血吸虫作用较Ｐｒａ的为强，即使Ｌ－Ｐｒａ的浓度减至Ｐｒａ最低有效药浓度的１／２亦有效。在体外，上述浓度的Ｄ－Ｐｒａ对不同发育期血吸虫无明显作用。感染小鼠ｉｇ单剂量的Ｌ－Ｐｒａ，Ｐｒａ或Ｄ－Ｐｒａ３００ｍｇ／ｋｇ或５００ｍｇ／ｋｇ，仅前２种药物对３ｈ（ｄｏ）、２１ｄ（ｄ２１）童虫和ｄ２８及ｄ３５成虫有较明显的疗效，而对３ｄ（ｄ３）、７ｄ（ｄ７）和ｄ１４童虫的疗效甚差或无效。与Ｌ－Ｐｒａ和Ｐｒａ相比，Ｄ－Ｐｒａ仅对ｄ３５成虫有较差的疗效。感染ｄ３５血吸虫成虫的小鼠用Ｌ－Ｐｒａ１５０ｍｇ／ｋｇｉｇ治疗，其疗效与用Pra 300mg/kg 治疗的相仿。D-Pra 的总剂量增至L -Pra 的2—6 倍时亦仅示很差的疗效。结论: 在消旋Pra 中,L-Pra 是抗血吸虫的活性成分。