NP-DA-Dextra-FA靶向纳米分子探针对人肝癌细胞的体外磁共振成像研究

目的利用叶酸受体(folate receptor,FR)阳性的Bel7402人肝癌细胞及磁共振成像系统来探讨超顺磁性氧化铁-多巴胺-葡聚糖-叶酸(NP-DA-Dextra-FA)靶向纳米复合物的细胞靶向性并监测其体外成像的可行性。材料与方法研制叶酸靶向纳米分子探针(NP-DA-Dextra-FA)及非靶向纳米分子探针(NP-DADextran)。将人肝癌细胞Bel7402与叶酸靶向纳米分子探针及非靶向探针分别孵育2h后,行普鲁士蓝染色实验及细胞MR成像扫描,分析其T2WI信号强度及信号强度变化率的改变,并行竞争抑制实验。结果不同Fe浓度NP-DA-DextraFA及NP-DA-Dextran纳米分子探针分别与Bel7402细胞孵育后,靶向分子探针组结果显示Bel7402细胞T2信号强度随着铁浓度的升高明显减低,普鲁士蓝染色实验表明大量蓝色铁颗粒沉积位于Bel7402细胞内;非靶向组结果表明Bel7402细胞信号强度减低相对不明显,普鲁士蓝染色示Bel7402细胞内仅见少量蓝色铁颗粒沉积。竞争抑制实验结果表明随着叶酸浓度的升高,T2信号强度逐渐升高。结论叶酸靶向磁性纳米分子探针对人肝癌细胞Bel7402有靶向性,体外磁共振成像可对其靶向性监测。     

制备anti-EGFR-PEG-SPIO靶向纳米分子探针对肺腺癌细胞行体外靶向MR成像

目的 探讨anti-EGFR-PEG-SPIO纳米分子探针对表皮生长因子受体（EGFR）高表达肺腺癌细胞的靶向性及利用MRI对其监测的可行性。方法 制备anti-EGFR靶向纳米分子探针（anti-EGFR-PEG-SPIO）及非靶向纳米分子探针（PEG-SPIO）,行电镜（TEM）观察,并测量水合粒径及弛豫率等表征。之后将不同Fe浓度（0、10、20、40、60、80 μg/ml）的anti-EGFR-PEG-SPIO和PEG-SPIO分别与H460细胞孵育2 h后,进行体外MR成像,观察其T2WI信号强度及信号强度变化率。行H460细胞普鲁士蓝染色和电镜观察细胞摄取Fe情况。结果 不同Fe浓度anti-EGFR-PEG-SPIO及PEG-SPIO探针分别与H460细胞孵育2 h后,前者显示H460细胞的信号强度随Fe浓度的升高而明显减低,Fe浓度为60 μg/ml时,相对于0、10、20、40、80 μg/ml,信号强度变化率约为-58.2%、-82.7%、-94.4%和-98.3%;而后者显示H460细胞信号强度减低相对不明显。普鲁士蓝染色及TEM结果显示anti-EGFR-PEG-SPIO的H460细胞内可见大量铁颗粒沉积,而PEG-SPIO的肿瘤细胞内仅可见少量铁颗粒沉积。结论 自行制备的anti-EGFR-PEG-SPIO分子探针对H460肺腺癌细胞具有靶向效应,采用3.0T MR扫描仪可对其进行监测。     

叶酸介导APTMS包被的超小超顺磁性氧化铁的制备及体外MR成像

目的探究叶酸介导的超小超顺磁性氧化铁(USPIO)对于人乳腺癌MCF-7细胞表面叶酸受体的靶向性及MR成像的可行性。方法①制备叶酸介导的耦联3-氨基丙基-三甲氧基硅烷(APTMS)的USPIO(FA-APTMS-US-PIO),通过TEM、FTIR等技术对其进行表征。②USPIO组、竞争抑制组(FA-APTMS-USPIO+叶酸)及叶酸介导的耦联APTMS的靶向组(FA-APTMS-USPIO)分别与MCF-7细胞孵育不同时间,通过普鲁士蓝染色观察不同组别铁颗粒的摄取情况。③对与纳米铁孵育后的细胞采用3.0TMR仪进行体外MR成像。④采用MTT法进行细胞活性检测。结果透射电镜照片显示FA-APTMS-USPIO外形较规则。普鲁士蓝染色观察,靶向组细胞摄取的氧化铁较多,可见大量蓝色沉淀。竞争抑制组与USPIO组细胞内蓝色颗粒较少。体外MRI结果显示,与MCF-7孵育的靶向组T2信号降低显著,竞争抑制组和USPIO组无明显变化。MTT实验显示,靶向组不同时间对细胞生存能力无显著影响。结论 FA-APT-MS-USPIO对MCF-7细胞有良好的靶向性,对早期诊断乳腺癌具有重大应用潜力。     

制备MRI双靶向分子示踪剂细胞黏附分子-微米级氧化铁颗粒及体外实验

目的 观察新型MRI双靶向分子示踪剂细胞黏附分子-微米级氧化铁颗粒（CAM-MPIO）与体外内皮细胞的结合能力。方法 制备单靶向分子示踪剂细胞间黏附分子（ICAM）-MPIO、血管细胞黏附分子（VCAM）-MPIO和双靶向分子示踪剂CAM-MPIO,将其与肿瘤坏死因子-α炎性激活的内皮细胞结合,采用普鲁士蓝染色法、免疫荧光法及MR检测其特异性结合能力。结果 普鲁士蓝染色结果显示CAM-MPIO组的蓝染铁颗粒分布较ICAM-MPIO组、VCAM-MPIO组明显增多。CAM-MPIO组细胞周围黄色荧光面积分别为ICAM-MPIO、VCAM-MPIO组的（2.00±0.31）倍和（2.46±0.45）倍。T2WI信号强度和T2值随靶向分子示踪剂浓度增高呈不同程度减低,且以CAM-MPIO组减低为著。结论 制备的双靶向分子示踪剂与内皮细胞结合能力优于单靶向分子示踪剂,有望用于早期影像学诊断放射性脑损伤。     

超顺磁性纳米氧化铁颗粒标记胰腺癌细胞的MR分子成像

目的 探讨超顺磁性纳米氧化铁颗粒（SPION）靶向标记胰腺癌细胞（BxPC-3）行MR分子成像的可行性。方法 制备黏蛋白1（MUC1）靶向修饰的探针MUC1-SPION（靶向组）,并以牛血清蛋白（BSA）制备非靶向探针BSA-SPION（非靶向组）。采过噻唑蓝（MTT）法测试不同MUC1-SPION浓度下（铁浓度为0、6.25、12.50、25、50、100、200 μg/ml）的细胞毒性。并分别于铁浓度为50、100、200 μg/ml条件下,对靶向组及对照组与BxPC-3细胞共同孵育2 h后的细胞悬液进行MR成像,测定横向弛豫时间（T2）,计算T2强化率。以普鲁士蓝染色观察靶向探针与细胞结合情况。结果 MTT法细胞毒性实验显示,不同MUC1-SPION浓度下BXPC-3细胞增殖率差异无统计学意义（F=1.74,P=0.183）。铁浓度50、100、200 μg/ml条件下,2组间T2值和T2强化率的差异均有统计学意义（P均<0.05）。普鲁士蓝染色显示靶向组的蓝染颗粒更多。结论 MUC1-SPION对BxPC-3细胞具有良好的靶向性,以SPION靶向标记BxPC-3细胞进行MRI安全、可行。     

载超顺磁性氧化铁和DiI荧光高分子微球巨噬细胞MR成像

目的 制备载超顺磁氧化铁(SPIO)纳米粒和DiI荧光高分子微球(DiI-SPIO-PLGA),探讨其作为MRI对比剂体外巨噬细胞成像的效果和作为荧光示踪剂体外示踪巨噬细胞的可行性。 方法 采用双乳化法制备DiI-SPIO-PLGA微球,并检测其理化性质。培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,与DiI-SPIO-PLGA微球共孵育12 h后行普鲁士蓝染色和荧光显微镜观察,将吞噬了微球的细胞和空白细胞分别重悬于0.5 ml 1%琼脂糖Eppendof管中,行MR扫描。 结果 所得样品为外壳装载SPIO颗粒和DiI荧光的微球,粒径(868.00±68.73)nm。普鲁士蓝染色结果显示,几乎所有细胞内都有蓝染颗粒分布,部分区域聚集成堆;倒置荧光显微镜下可见细胞内有大量红色微球。MRI显示吞噬了DiI-SPIO-PLGA微球的实验组管内信号显著降低,管内信号值/背景信号值明显低于对照组(P<0.05)。 结论 DiI-SPIO-PLGA微球能有效加强MR成像效果,荧光信号强烈,可同时作为MRI阴性对比剂和荧光示踪剂。     

超小超顺磁性氧化铁体外标记SD大鼠脂肪来源干细胞

  目的  评估超小超顺磁性氧化铁(ultrasmall superparamagnetic iron oxide, USPIO)标记SD大鼠脂肪来源干细胞(adipose derived stem cells, ADSCs)的有效性及安全性, 探讨标记细胞体外磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)特点。  方法  将USPIO 40 μg/ml及多聚赖氨酸(poly-L-lysine, PLL)1.5 μg/ml的培养基与ADSCs共孵育培养24 h, 检测USPIO标记的有效性及安全性, 并用MRI对标记细胞进行体外成像。  结果  普鲁士蓝染色显示USPIO标记ADSCs的阳性率为99%, 透射电镜提示USPIO颗粒主要位于胞质内溶酶体中; 台盼蓝染色实验显示活细胞数大于95%, MTS[3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-5(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfopheny)-2H-tetrazolium, 溴化噻唑蓝四氮唑]实验提示USPIO浓度为10、20、40、80和160 μg/ml时不影响ADSCs增殖。ELISA结果表明标记细胞与未标记细胞组间培养液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)水平无显著差异; 体外条件下, MRI图像信号强度与标记细胞数量呈正相关。  结论  USPIO标记ADSCs安全有效, MRI图像信号强度与标记细胞数量存在一定相关性, 提示USPIO可用于在体条件下MRI成像示踪标记细胞。     

LyP-1标记超顺磁性氧化铁的制备及体外成像

目的 探讨LyP-1标记超顺磁性氧化铁(SPIO)与乳腺癌细胞结合进行体外成像的可行性。方法 以共沉淀法制备SPIO,用LyP-1与3-氨丙基三甲氧基硅烷(APTMS)包被的SPIO耦联,以乳腺癌MDA-MB-231细胞株为研究对象,设立LyP-1-SPIO组、竞争组、SPIO组和对照组,普鲁士蓝染色,评价不同组中铁颗粒在细胞中的分布情况,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活性并观察其体外MR成像效果。结果 成功制备SPIO。 LyP-1-SPIO组有较多铁颗粒进入细胞内,竞争组和SPIO组仅有少量铁颗粒进入细胞中,对照组细胞中无铁颗粒。MTT比色法检测结果显示不同作用时间LyP-1-SPIO和SPIO对细胞的生长均无显著影响;体外MR成像提示LyP-1-SPIO能够显著增强阴性对比效果。结论 LyP-1-SPIO对MDA-MB-231细胞具有较好的靶向作用,可用于对肿瘤细胞的影像学诊断。     

人骨髓间充质干细胞靶向纳米基因载体制备及体外细胞磁共振成像

目的 探讨靶向纳米基因载体单链神经节苷脂抗体-聚乙二醇-聚乙烯亚胺-超顺磁性氧化铁（scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION）转染人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）的可行性、效率及体外细胞MR显像能力。方法 合成scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION后,采用凝胶阻滞实验评估其复合外源性基因的能力;动态光散射法测量scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION/pDNA纳米复合物的粒径大小及表面电位;体外细胞毒性实验检测其对hBMSCs的细胞毒性。采用流式细胞仪检测scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION靶向转染hBMSCs的效率,并设置PEG-g-PEI-SPION组、cAbGD2-PEG-g-PEI-SPION组、抗体竞争抑制（scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION+free AbGD2）组和同型抗体（scAbIgG2a-PEG-g-PEI-SPION）组,通过激光共聚焦显微镜及普鲁士蓝染色观察hBMSCs对纳米复合物的摄入。通过体外细胞MR扫描验证scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION的MR成像功能。结果 scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION细胞毒性小,复合外源性基因后能够形成稳定的纳米复合物,粒径80~100 nm。在相同的N/P比值下,scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION组的转染率明显高于其他组（P<0.001）。N/P=20时,靶向组具有最高转染率[（59.60±4.50）%]。同时,scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION中的SPION可有效标记hBMSCs,在MR T2/T2^*加权图像上呈低信号。结论 scAbGD2-PEG-g-PEI-SPION是一种MRI可视的、可有效转染hBMSCs的靶向纳米基因载体。     

超声微泡-阳离子纳米脂质体复合体制备的实验研究

目的 RI示踪剂动态观察大鼠C6脑胶质瘤的生物学行为及抗肿瘤生成因子治疗的效果。方法 实验对照组:25μg/ml浓度USPIO 标记的C6脑胶质瘤(1×106)细胞采用立体定向方法接种6只大鼠右侧额叶。实验组Ⅰ:150μg反义VEGF核酸与C6脑胶质瘤细胞混合液,立体定向方法接种6只大鼠右侧额叶。实验组Ⅱ:C6脑胶质瘤(1×10⁶)细胞采用立体定向方法接种6只大鼠右侧额叶后3天,肿瘤内注射150μg反义VEGF核酸+脂质体。载体MRT2WI、T2^* 、R2^* ,GRE序列扫描分别于24h、3、7、14、21天进行,测定其信号强度,测定肿瘤大小。获取标本进行大体切片,普鲁士蓝染色光镜分析染色数量、深度与肿瘤生长的关系。测定VEGF表达强度。结果 25μg/ml浓度USPIO 标记大鼠C6胶质瘤细胞,信号强度与接种时间有关(t=5.16、2.35、4.41,P<0.05)。普鲁士蓝染色镜下观察,USPIO 标记大鼠C6胶质瘤细胞在MR成像中清楚显示病变的范围及信号强度,随着脑内肿瘤的不断生长,信号强度随之降低,低信号的铁颗粒逐渐减少、迁徙到肿瘤的边缘,逐渐消失。反义VEGF核酸在C6脑胶质瘤细胞接种前、后使用7、14天均有抑制脑胶质瘤生长的作用,2周后MRI表现、肿瘤生长速度及镜下分析差异无统计学意义(P<0.05)。结论 USPIO 可以成功地载体标记大鼠C6胶质瘤细胞,活体接种脑内完全可以达到MRI示踪的目的,随着肿瘤不断生长,铁颗粒信号逐渐减少而升高,USPIO早期对肿瘤定位具有重要意义。反义VEGF核酸对脑胶质瘤的生长有短时间调控作用,VEGF反义核酸可在分子水平上有效抑制VEGF表达。     

Transvaginal color Doppler imaging

Transvaginal color Doppler was used to assess circulation in pelvic vessels in a group of 64 patients including 15 patients with fertility problems, 18 patients with pelvic tumors, 2 cases of suspected ectopic pregnancy, and 29 pregnant patients with fetuses between 6 weeks and 10 weeks, menstrual age. Blood flow was successfully displayed by color Doppler in the external and internal iliac arteries, and the uterine arteries, but flow in ovarian arteries could not be visualized. In the subgroup of patients with pelvic tumors, neovascularization of tumor tissue was documented in 6 out of 10 cases of uterine fibroma and in 2 cases of ovarian cancer. In 6 cases involving benign ovarian pathology, no abnormal blood supply was observed. A comparison between the characteristics of blood flow within uterine fibromas and ovarian malignancies showed lower impedance and higher blood velocity in cases of malignancy. In early pregnancy blood flow in the umbilical artery could be visualized by color Doppler starting from the 6th week and flow in the aorta from the 8th week. Flow in the trophoblasts was observed with an overall success rate of 59% and successfully demonstrated in 1 out of 2 cases of ectopic pregnancy.     

分段读出扩散加权成像在鼻咽癌检查中的价值

目的探讨分段读出扩散加权成像(RS-EPI DWI)相对于单次激发平面回波扩散加权成像(SS-EPI DWI)在鼻咽癌检查中的价值。方法收集30例经病理证实的未做任何治疗的鼻咽癌患者,采用Siemens 3.0 T Skyra磁共振扫描仪对患者常规平扫加增强扫描基础上加做鼻咽的轴位RS-EPI DWI及SS-EPI DWI序列,分别计算出鼻咽肿瘤区域的信噪比(SNR)、对比噪声比(CNR),以T_1增强轴位图像为参考,计算鼻咽层面图像的变形百分比,测量鼻咽肿瘤长、短径,比较SS-EPI DWI、RS-EPI DWI图像上肿瘤大小的准确性,比较颅底层面磁敏感伪影幅度。结果RS-EPI DWI较SS-EPI DWI图像的SNR(t=34.074,P0.01)、CNR(t=23.120,P0.01)值高,图像变形较轻,相同解剖层面,RS-EPI DWI图像测出的肿瘤大小更接近增强后T1轴位上病灶大小,颅底层面RS-EPI DWI图像磁敏感伪影明显较弱(b值为0 s/mm~2时t=10.634,P0.01,b值为1000 s/mm~2时t=8.219,P0.01),两名医师分别对SS-EPI DWI、RS-EPI DWI的ADC图病灶区进行测值,两组测值在判断病灶扩散受限上统计学差异(t=0.00,P=1.000.05)。结论分段读出扩散加权成像较传统的弥散加权成像图像质量更佳,其临床应用更有价值,对于诊断的准确性具有积极的作用。     

生物光声—超声—磁声联合成像的研究进展

生物超声（US）、光声（PA）和磁声（MA）成像均以超声波作为载体,将其结合可获得生物组织的组合图像,充分发挥各成像手段的优势。与单一成像技术相比,联合成像具有更好的分辨率及更高的对比度和敏感度,可更精准地定位病变组织,并辨识出其形态和成分。本文对光声—超声、磁声—超声及磁光声联合成像,尤其内窥式联合成像的研究进展及应用现状进行综述。     

Multimodality Rodent Imaging Chambers for Use Under Barrier Conditions with Gas Anesthesia

Purpose  The ability to reproducibly and repeatedly image rodents in noninvasive imaging systems, such as small-animal positron emission tomography (PET) and computed tomography (CT), requires a reliable method for anesthetizing, positioning, and heating animals in a simple reproducible manner. In this paper, we demonstrate that mice and rats can be reproducibly and repeatedly imaged using an imaging chamber designed to be rigidly mounted on multiple imaging systems. Procedures  Mouse and rat imaging chambers were made of acrylic plastic and aluminum. MicroCT scans were used to evaluate the positioning reproducibility of the chambers in multimodality and longitudinal imaging studies. The ability of the chambers to maintain mouse and rat body temperatures while anesthetized with gas anesthesia was also evaluated. Results  Both the mouse and rat imaging chambers were able to reproducibly position the animals in the imaging systems with a small degree of error. Placement of the mouse in the mouse imaging chamber resulted in a mean distance of 0.23 mm per reference point in multimodality studies, whereas for longitudinal studies the mean difference was 1.11 mm. The rat chamber resulted in a mean difference of 0.46 mm in multimodality studies and a mean difference of 4.31 mm in longitudinal studies per reference point. The chambers maintained rodent body temperatures at the set point temperature of 38°C. Conclusions  The rodent imaging chambers were able to reproducibly position rodents in tomographs with a small degree of variability and were compatible with routine use. The embedded anesthetic line and heating system was capable of maintaining the rodent’s temperature and anesthetic state, thereby enhancing rodent health and improving data collection reliability.     

体素内不相干运动成像的原理及前景展望

体素内不相干运动(intravoxel incoherent motion,IVIM)成像是指体素内信号衰减的同时包括真性水分子弥散和毛细血管网中随机血流微循环灌注,它可以更加全面地分析组织扩散成像数据,揭示疾病的病理生理学改变。近年来,IVIM逐渐被应用于临床研究中,在各个器官及系统的疾病诊断中发挥重要作用。     

背景信号抑制弥散加权成像技术的临床应用

DWIBS是MR成像技术近年来发展的一种新方法.本文对DWIBS的发展、原理及目前在颅脑、神经、胸部、肝脏及腹盆部等部位的临床应用研究进行了全面综述.     

组织谐波成像诊断胰腺占位性病变的临床应用

目的：通过常规基波成像(FI)与组织谐波成像(THI)的对比观察，探讨组织谐波成像在胰腺占位性病变诊断中的价值。方法：对比分折62例胰腺占位病变的基波成像和组织谐波成像的结果。结果：在观察胰腺病灶的边界、内部回声及胰管回声方面，在确定占位性病变的物理性质方面，组织谐波成像优于基波成像。结论：本研究表明，组织谐波成像可提高病变的清晰度及对比度，提高胰腺占位性病变的图像质量，从而提高诊断准确率。