猪苓汤对阿霉素肾病大鼠血清AVP及肾脏γ-ENaC的影响

目的:探讨猪苓汤对阿霉素肾病大鼠血清精氨酸加压素(AVP)及肾脏γ亚型上皮钠通道(γ-ENaC)蛋白的影响.方法:110只雄性SD大鼠随机分为空白组30只、假手术组5只、模型组75只,尾静脉注射阿霉素14 d后,再将模型复制成功的大鼠随机分为模型组20只、猪苓汤组21只、呋塞米组20只,分别于灌胃2,4,6,8周处死部分大鼠,半自动生化仪检测血清白蛋白、肝肾功能及尿蛋白等,HE染色观察肾脏病理改变,ELISA法检测血清AVP,免疫组化法检测γ-ENaC.结果:①与空白组比较,模型组大鼠尿蛋白、肌酐、尿素氮、血脂、血Na+、AVP逐渐增高(P＜0.05),血清白蛋白逐渐降低(P＜0.05);与模型组比较,连续猪苓汤灌胃8周可增加大鼠尿量(P＜0.05),下调AVP(P ＜0.05);②细胞形态学:空白组无异常,模型组、猪苓汤组、呋塞米组均可见肾小球局灶阶段性硬化,肾小管内蛋白管型明显,肾间质水肿、成纤维细胞及炎细胞浸润.③肾脏γ-ENaC:模型组大鼠肾脏γ-ENaC呈现先增高后下降趋势,组内比较具有统计学差异(P＜0.05),连续猪苓汤灌胃8周,肾脏γ-ENaC表达量低于模型组(P＜0.05).结论:猪苓汤的利尿作用可能与降低血清AVP含量和下调肾脏γ-ENaC蛋白表达有关.     

丹参对糖尿病肾病大鼠肾脏水通道蛋白-2表达的影响

目的 探讨肾脏水通道蛋白-2(AQP-2)的表达与糖尿病肾病大鼠水液代谢异常及丹参防治作用的机制.方法 60只健康SD大鼠分为正常组(10只),剩余50只采用高糖高脂饲料刺激加小剂量STZ诱导糖尿病大鼠模型成功30只,随机分为模型组、对照组、观察组每组各10只;免疫组织化学检测AQP-2在各组大鼠肾脏中的分布及蛋白质的表达;RT-PCR方法检测各组大鼠AQP-2 mRNA的表达,并以β-actin相对定量.结果 肾脏免疫组化显示,AQP-2主要在肾脏的集合管表达.在4组动物的肾脏AQP-2蛋白质[相对阳性面积:正常组(0.119±0.035),模型组(0.188±0.027),对照组(0.158±0.036),观察组(0.154±0.033)]和mRNA[正常组(0.51±0.004),模型组(0.81±0.059),对照组(0.78±0.090),观察组(0.70±0.027)]的表达上观察组较模型组均下调(P＜0.01).结论 在糖尿病模型大鼠肾脏组织中AQP-2表达增多,AQP-2的增多可能参与了糖尿病多尿的形成.丹参对水通道蛋白的表达有下调作用,这可能是其利水作用的机制,也是其防治糖尿病肾病的基础.     

真武汤对阿霉素肾病大鼠治疗作用研究

目的:通过检测阿霉素肾病(adriamycin nephropathy,AN)大鼠的肾比重、血液生化指标及观察肾脏组织病理切片,探讨真武汤对AN大鼠的治疗作用。方法:将大鼠随机分为5组,除正常对照组外,其余大鼠尾静脉注射阿霉素造模大鼠随机分为4组:模型组、缬沙坦组(24mg/kg)、真武汤低剂量组(5.3g生药/kg)、真武汤高剂量组(15.9 g生药/kg),检测其尿蛋白含量。采用HE染色的方法观察肾脏组织形态学变化,检测大鼠的肾比重及0、14、28d大鼠24h尿量及血液生化指标。结果:真武汤5.3g生药/kg可增加AN大鼠24h尿量,真武汤15.9g生药/kg不仅可增加24h尿量而且可以缓解低蛋白血症、降低肾比重、改善肾小球萎缩硬化充血及髓质区蛋白管型等病理变化。结论:真武汤对AN大鼠肾水肿、肾功能下降、肾组织病理性变化具有正相调节作用。     

益气活血利水法对心衰大鼠血管加压素-水通道蛋白2系统的影响

目的:研究益气活血利水法对于心衰大鼠精氨酸血管加压素-V2受体-水通道蛋白2系统的影响,以探讨本法对心衰水液潴留的作用机制。方法:选择健康Wistar大鼠,应用腹腔注射阿霉素(3 mg/kg,每周1次,连续6周)及睡眠剥夺,造成心衰大鼠模型,然后分空白组、模型组,芪苈强心组、中药高剂量、中剂量、低剂量6组,服药4周后观察6组大鼠服药后血浆精氨酸血管加压素(AVP)浓度;血管加压素V2受体(V2R)、水通道蛋白2(AQP2)蛋白表达情况。结果:益气活血利水法可降低心衰大鼠血浆中升高的AVP浓度,与模型组比较,有统计学差异;可部分减弱肾脏组织V2R、AQP2蛋白表达。结论:益气活血利水法通过降低血浆中AVP浓度,下调V2R、AQP2蛋白表达来作用于精氨酸血管加压素-V2受体-水通道蛋白2系统的每个环节而起到改善水液潴留之目的。     

大黄对大鼠肾脏水通道蛋白2、4表达的影响

目的 探讨大黄对大鼠肾脏水通道蛋白 2、4（AQP2、AQP4）表达的影响。方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组,大黄低、中、高剂量组,分别给予生理盐水不同剂量的大黄提取物（大黄总蒽醌）灌胃,测定大鼠6 h及24 h尿量,运用免疫组化、Western blot和RT PCR法检测肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达变化。结果 与正常对照组比较,大黄高、中剂量组大鼠尿量明显增加,肾脏AQP2、AQP4蛋白表达及mRNA表达明显下降,差异有统计学意义（均P＜0.01）;与正常对照组比较,大黄低剂量组大鼠尿量及肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达变化不明显,差异无统计学意义。结论 大黄能抑制大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达水平,这可能是其利尿功效的机制之一。     

真武汤对阿霉素肾病大鼠血AVP含量的影响

目的探讨真武汤对阿霉素肾病大鼠水钠潴留的影响及其可能的作用机制。方法40只大鼠随机分成正常对照组（Nc组），阿霉素肾病组（NS组），阿霉素肾病＋真武汤干预组（A组）和阿霉素肾病＋福辛普利干预组（F组），每组10只，分别在第1、2、3、4周末时检测各组大鼠尿蛋白，同时在第4周末检测了大鼠血AVP含量。结果①阿霉素大鼠在1周末尿蛋白明显升高，真武汤能明显减少大鼠尿蛋白；②真武汤能下调阿霉素肾病大鼠血AVP含量。结论真武汤能改善阿霉素肾病大鼠水钠潴留状态，其机制可能与其调节血AVP含量有关。     

真武汤对大鼠阿霉素肾病的治疗作用及其机理研究

目的：观察真武汤对阿霉素（ADR）肾病大鼠尿蛋白及血脂的影响并对其作用机理进行初步探讨。方法：制备阿霉素肾病大鼠模型，实验结束时测定模型组和治疗组动物24h尿量、尿蛋白含量、血浆胆固醇、甘油三酯、肾组织的内皮素、血栓素B2、以及血管紧张素Ⅱ的水平，并与正常组进行比较分析。结果：真武汤给药组可明显降低肾病大鼠24h尿蛋白含量、血浆胆固醇、甘油三酯及肾组织的内皮素、血栓素B2、血管紧张紊Ⅱ的水平（与模型组比较，P〈0．05）。结论：真武汤可改善阿霉索肾病大鼠的高血脂和蛋白尿，其机理与影响了肾组织局部内皮素、血栓素B2、血管紧张素Ⅱ的水平有关。     

真武汤对渗透泵恒释ADR肾病综合征大鼠的干预作用

目的:通过渗透泵恒释技术建立阿霉素肾病综合征(NS)模型,以真武汤干预治疗,评价真武汤对NS大鼠的治疗效果。方法:阿霉素(14.5 mg.kg-1)按渗透泵灌注要求填充,手术植入大鼠腹腔,通过渗透压恒释阿霉素诱发肾病综合征模型,将大鼠随机分为真武汤高、低剂量组(24,12 g.kg-1.d-1),地塞米松组(0.9 mg.kg-1.d-1),给药4周,观察动物一般情况,尿蛋白、血压、血脂、血清蛋白及肾功能指标变化,肾小球IgG表达,评价阿霉素渗透泵肾病综合征模型以及真武汤的干预作用。结果:阿霉素渗透泵NS大鼠成活率显著提高,实验过程中无动物死亡;模型组大鼠第2周出现典型的肾病综合征症状,与空白组比较,24 h尿蛋白、血压、血脂明显升高,血清蛋白及肾功能明显降低(P<0.01);与模型组比较,真武汤高、低剂量组能显著改善NS大鼠精神、活动、摄食量、毛色等状况,明显减轻NS大鼠24 h尿蛋白(109.85±14.65),(49.75±5.14),(51.43±4.46)mg,恢复大鼠血清总蛋白(TP):(57.64±3.64),(61.26±2.21),(60.85±1.91)g.L-1,白蛋白(ALB):(21.70±2.18),(25.93±2.74),(25.00±2.64)g.L-1水平,降低大鼠血清总胆固醇(2.91±0.50),(2.17±0.26),(2.12±0.31)mmol.L-1、甘油三酯(1.05±0.29),(0.49±0.12),(0.61±0.15)mmol.L-1水平,降低大鼠血压、血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)(P<0.05或P<0.01);减少大鼠肾小球系膜区IgG的沉积。结论:通过渗透泵恒释阿霉素建立肾病综合征模型,可提高造模成功率和模型稳定性,真武汤能减少NS大鼠尿蛋白,提高血浆蛋白水平,减少血液高凝状况,恢复肾功能及肾小球结构,改善NS症状。     

六味地黄汤对肾阴虚大鼠水通道蛋白2的影响

目的: 从尿液浓缩机制方面研究六味地黄汤的滋阴作用机制。 方法: 36只成年雄性SD大鼠分为正常对照组、模型组和中药组。采用放免法测定血浆血管升压素(AVP)水平、免疫组化法检测肾髓质水通道蛋白2(AQP₂)表达。 结果: 与正常对照组相比,模型组大鼠的体重、尿量明显减少,AVP水平上升,AQP₂表达增加;中药组上述指标恢复到接近正常组或正常组水平。 结论: 肾阴虚时机体尿液浓缩机制亢进,六味地黄汤的滋阴作用与其抑制亢进的尿液浓缩机制有关。     

真武汤中不同附子剂量对肾病综合征大鼠蛋白代谢及疗效影响的研究

目的:探讨真武汤中不同附子剂量对肾病综合征(Nephrotic syndrome,NS)大鼠疗效的影响,并研究其作用机制。方法:50只大鼠随机分成附子高剂量组、附子中剂量组、附子低剂量组、模型组、空白组,每组10只,除空白组外,其余大鼠按5 mg/kg的剂量一次性尾静脉注射阿霉素溶液构建NS模型,第3周末检测造模是否成功。附子高、中、低剂量组大鼠每天给予含附子生药1.52 g/kg、0.92 g/kg、0.52 g/kg的真武汤灌胃,模型组和空白组予等量生理盐水灌胃,均灌胃4周,第7周末检测各组大鼠的24 h尿蛋白、血清白蛋白(Serum albumin,Alb)、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(Serum creatinine,SCr)含量。结果:与空白组比较,模型组3周后24 h尿蛋白明显升高(P 0.01);与模型组比较,附子高、中剂量组NS大鼠的精神、活动、毛色、摄食量等状况显著改善,24 h尿蛋白、BUN、SCr明显降低,血清白蛋白升高(P 0.05,P 0.01),附子低剂量组效果不明显。结论:附子高、中、低剂量组均能降低NS大鼠24 h尿蛋白、血清BUN、SCr,升高Alb,且附子高剂量组效果更为显著。     

真武汤和越婢汤对阿霉素肾病大鼠AQP1/AQP2的影响

目的:分别观察真武汤、越婢汤对阿霉素肾病大鼠肾组织AQP1、AQP2表达的影响,以探讨中医不同利水法的作用机制及差异。方法:选用雄性SD大鼠48只按随机数字表法分为空白组、模型组、真武组及越婢组,采用尾静脉注射阿霉素建立肾病模型,药物灌胃6周后生化检测各组大鼠24 h尿蛋白定量、肝功(ALB,ALT)、肾功(Scr,BUN)及血脂(CHOL,TG)等,HE染色观察大鼠肾脏病理,免疫组化检测肾组织AQP1、AQP2表达。结果:与模型组比较中药2组24 h尿蛋白定量、血脂均明显下降,白蛋白升高,肾脏病理均明显改善,肾组织AQP1、AQP2表达均明显升高,但中药2组比较差异无统计学意义。结论:真武汤和越婢汤均可上调阿霉素肾病大鼠肾组织AQP1、AQP2的表达,改善上述生化指标,减轻肾脏病理损害,但中药2组之间比较差异无统计学意义。     

抗纤灵方对阿霉素肾病大鼠肾纤维化作用机制的研究

目的观察抗纤灵方对阿霉素肾病模型大鼠肾纤维化的作用机制。方法将SD雄性大鼠随机分为7组,每组8只。其中正常组不做处理,假手术组仅于右侧肾切除,注射0.9%NaCl溶液,余下40只SD大鼠均采取右侧肾切除加尾静脉注射阿霉素制备大鼠阿霉素肾病模型。将造模成功后的大鼠分成模型组,科素亚组,抗纤灵低、中、高剂量组,分别给予相应药物共8周。观察大鼠血清肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)表达,HE染色观察肾组织病理。结果抗纤灵方能抑制模型大鼠α-SMA的表达,并减少FN的生成,差异有统计学意义(P0.05);同时降低24 h蛋白尿,降低血清肌酐、尿素氮,改善肾功能,延缓肾纤维化发展,差异有统计学意义(P0.05);随着抗纤灵剂量增加,其抗纤维化效应更明显,差异有统计学意义(P0.05)。结论抗纤灵方能降低24 h尿蛋白定量,改善肾功能,使肾脏病理组织形态学改善,并且呈剂量效应。其机制可能是通过下调α-SMA的表达,抑制FN的生成,从而改善肾纤维化。     

真武汤的药效学研究

探讨真武汤对老龄小鼠在自由基代谢等方面的影响。结果表明 ,真武汤可明显提高老龄小鼠红细胞 SOD活性 ,降低老龄小鼠血清及肝组织中的 MDA含量。此外 ,该方能增加老龄小鼠耐疲劳及抗缺氧能力 ,提示真武汤具有抗氧化及抗应激作用 ,对延缓衰老有一定作用。     

真武汤治疗糖尿病肾病的系统评价研究

目的：系统评价真武汤治疗糖尿病肾病的疗效及安全性。方法：电子检索CNKI、万方、CBM、维普等数据库（检索期限为各数据库建库至2013年9月）。运用Cochrane系统评价员手册5.2版的评估标准和GRADE标准,评估纳入研究的质量,用RevMan5.2软件进行统计学分析。结果：共纳入10个随机对照试验,包括703例患者,各研究样本量30～136例。因对照组采用方法不同,所以将研究分为3个亚组。但方法学质量评价显示纳入研究文献质量不高,均为低级和极低级证据。Meta分析显示,真武汤对糖尿病肾病治疗总有效率、减少24h尿蛋白定量、血清肌酐,中医症候积分方面与西药相当;个别研究显示真武汤优于西药。结论：目前真武汤治疗糖尿病肾病的疗效证据仍十分有限,尚需高质量的研究以增加证据强度。     

真武汤对比温脾汤加减治疗慢性肾功能衰竭56例临床观察

目的:观察真武汤对比温脾汤加减治疗慢性肾功能衰竭临床疗效。方法:符合诊断标准的慢性肾功能衰竭的56人,随机分为真武汤组28人和温脾汤组28人,观察显效率,结果:真武汤组显效15例,占53.6%;有效6例,占21.4%;无效7例;总有效率75.0%。温脾汤组显效10例,占40.0%,有效2例占12.0%,总有效率43.0%,两组相比有明显的统计学差异(P0.05)。结论:真武汤治疗慢性肾衰较温脾汤有明显的效果。     

鲤鱼汤对阿霉素肾病大鼠CD2相关蛋白及肾病蛋白的影响

目的:观察阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)和肾病蛋白(nephrin)的表达及鲤鱼汤对其表达的影响,进而探讨鲤鱼汤治疗肾病综合征的作用机制。方法:70只Wistar大鼠随机分为5组:正常对照组(N组)、模型组(M组)、福辛普利组(F组)、鲤鱼汤低剂量组(YD组)和鲤鱼汤高剂量组(YG组)。M组、F组、YD组和YG组大鼠采用尾静脉注射阿霉素6.5mg/kg复制阿霉素肾病模型。第3周开始进行干预,YG组和YD组分别予以高、低剂量鲤鱼汤(2.25、1.13g/mL)灌胃7周;F组予以0.09mg/mL福辛普利灌胃;N组和M组予以等量自来水灌胃。采用免疫组化方法检测各组大鼠肾脏中CD2AP、nephrin的表达,并计算其阳性表达的平均光密度值(AOD)。结果:与模型组相比,鲤鱼汤高剂量和鲤鱼汤低剂量组大鼠血清总蛋白水平、血清白蛋白水平等均有一定升高,尤其鲤鱼汤高剂量组差异均有统计学意义(P0.05);各治疗组肾小球中CD2AP与nephrin的表达较N组均降低,但与M组比较,都有不同程度的增加(P0.05)。结论:鲤鱼汤可不同程度地增强阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞CD2AP和nephrin的表达,改善阿霉素肾病大鼠肾小球的损伤,进而起到治疗作用。     

真武汤加减治疗缓慢性心律失常的临证经验

目的:总结真武汤加减治疗缓慢性心律失常的临证经验。方法:通过研究古今医家文献对于缓慢性心律失常的病因病机记载,现代医家的经方论治及典型案例,进行临证经验总结。结果:缓慢性心律失常当属迟脉证,以心肾阳虚为主,临证合理化裁经方真武汤疗效显著。结论:真武汤加减治疗缓慢性心律失常临床疗效显著,值得推广。     

新加生脉饮对阿霉素所致心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响

目的通过观察新加生脉饮对阿霉素所致大鼠心肌细胞凋亡的逆转和防治作用,为阿霉素心肌损伤的临床治疗奠定实验基础。方法利用阿霉素的心脏毒性诱导心肌细胞凋亡大鼠模型。将40只雄性SD大鼠随机分成4组:对照组、阿霉素模型组、卡托普利(10 mg/kg)组、新加生脉饮(3.75 g/kg)组,ig给予相应药物,每日1次,共给药6周。实验过程中观察大鼠的精神、活动、进食、毛色等情况,治疗6周后测定心功能、大鼠左室肥厚指标,HE染色观察心肌病理变化,TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况,免疫组化法检测心肌Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠心功能显著降低。与模型组比较,各药物治疗后可不同程度改善大鼠心功能情况,其中新加生脉饮组疗效显著。与对照组比较,模型组大鼠心体比、左室肥厚指数、心肌细胞凋亡指数均明显升高。与模型组比较,卡托普利及新加生脉饮可不同程度地改善大鼠心肌肥厚及心肌细胞凋亡情况。与对照组比较,模型组大鼠心肌Bcl-2蛋白表达水平降低,Bax、Caspase-3蛋白表达水平升高;与模型组比较,卡托普利及新加生脉饮可不同程度地增加大鼠心肌Bcl-2蛋白表达水平,减低Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结论新加生脉饮能改善心肌细胞凋亡大鼠心功能情况,通过降低心肌细胞中Caspase-3蛋白的表达或抑制其活性,增加Bcl-2蛋白的表达,降低Bax蛋白的表达,上调Bcl-2/Bax,从而抑制心肌细胞凋亡。     

海昆肾喜对阿霉素肾病大鼠肾组织PDGF-BB蛋白及其mRNA表达的影响

目的：研究海昆肾喜(fucoidan)对阿霉素肾病大鼠肾组织血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)蛋白及mRNA表达的影响。方法：采用阿霉素肾病模型,将54只大鼠随机分为6组：正常组、假手术组、模型组、苯那普利组、海昆肾喜低及高剂量组(0.77,3.08 mg·kg^-1)。实验第10周观察各组大鼠24 h尿蛋白定量,肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平及肾组织形态学变化；应用免疫组化及原位杂交方法分别观察PDGF-BB蛋白及mRNA在肾组织中的表达。结果：海昆肾喜低及高剂量组24 h尿蛋白定量和Scr,BUN水平较模型组均明显降低。PDGF-BB蛋白及mRNA的表达见于肾小管上皮细胞胞浆及肾小球系膜细胞,其表达较模型组显著减少。结论：海昆肾喜能抑制阿霉素肾病大鼠肾组织PDGF-BB蛋白及mRNA的表达,这可能是该药物防治肾小球硬化的作用机制之一。