固本健脑法对老年健忘大鼠模型海马组织中Aβ/RAGE信号通路的影响

目的:比较固本健脑法、补脾健脑法、补肾健脑法对健忘大鼠海马组织中Aβ/RAGE信号通路的影响,初步揭示固本健脑法改善记忆的部分分子机制。方法:腹腔注射D-半乳糖及Na NO2建立老年健忘大鼠模型,分别灌胃固本健脑方、归脾丸、六味地黄丸和石杉碱甲;并设空白组和模型组,灌以生理盐水。给药结束后,取大鼠海马组织,采用Western blot检测晚期糖化终产物受体(RAGE)、核转录因子p65(NF-κB p65)的表达,ELISA检测β-淀粉样肽1-42(Aβ1-42)、白介素-1β(IL-1β)的含量。结果:与空白组比较,模型组、西药组、补脾组、补肾组上述指标的表达均上调,固本组RAGE、NF-κBp65、IL-1β的表达上调,Aβ1-42则差异无统计学意义。西药组、补脾组、补肾组与模型组比较,上述指标的表达均下调,与固本组比较则上调;补脾组、补肾组、西药组组间比较,差异无统计学意义。结论:固本健脑法、补脾健脑法、补肾健脑法均能在一定程度上改善记忆功能,但固本健脑法作用最佳,固本健脑法改善记忆功能的分子机制与Aβ/RAGE信号通路密切相关。     

固本健脑法对Alzheimer病模型大鼠海马区树突棘及P-tau的影响

目的：本课题在成功建立AD大鼠模型基础上,观察固本健脑法治疗AD的作用及机制。方法：12月龄衰老大鼠行脑立体定位手术于双侧海马注射Aβ1-42,制备复合AD大鼠模型,并用固本健脑液灌胃干预,以安理申组为对照。4周后,高尔基染色法观察大鼠海马区神经元树突棘形态及密度;Western Blot法检测大鼠海马区Caveolin-1、P-tau（Thr231、Ser396位点）蛋白表达改变。结果：高尔基染色法结果显示：固本健脑液高、低剂量组神经元细胞及树突棘形态明显改善,数目及密度显著增加（P<0.01）。Western Blot法检测结果显示：固本健脑液高、低剂量组可使Caveolin-1的表达不同程度的升高,而tau磷酸化水平下降,差异有显著性（P<0.01）。结论：固本健脑法能显著改善AD大鼠海马神经元树突棘形态及密度,显著提高AD模型大鼠海马区Caveolin-1的表达,抑制tau蛋白过度磷酸化。     

蛇床子催眠活性组分对对氯苯丙氨酸致失眠大鼠海马钟基因与氨基酸类神经递质表达的影响

目的观察蛇床子催眠活性组分(SCZ)对失眠大鼠海马神经递质及钟基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法采用ip对氯苯丙氨酸(PCPA)建立大鼠失眠模型,ig给予低(25 g/kg)、中(50 g/kg)、高(100 g/kg)剂量SCZ,并设阳性对照(地西泮)组,给药3 d,免疫组织化学法检测大鼠海马齿状回γ-氨基丁酸(GABA)和谷氨酸(Glu)受体蛋白的表达;高效液相色谱法和免疫组化法检测大鼠海马GABA和Glu含量的变化;实时荧光定量PCR检测大鼠海马Clock、Bmal1、Cry1、Cry2、Per1、Per2、Per3等生物钟基因的表达水平。结果免疫组化结果显示,与对照组比较,模型组大鼠海马齿状回GABA表达水平显著降低,Glu表达水平显著升高(P0.05、0.01);与模型组比较,SCZ中、高剂量组大鼠海马齿状回GABA表达水平显著升高,Glu表达水平显著降低(P0.01)。HPLC结果显示,与对照组比较,模型组大鼠海马GABA表达水平显著降低,Glu表达水平显著升高(P0.05、0.01);与模型组比较,SCZ中、高剂量组大鼠海马组织Glu表达水平显著降低(P0.05),SCZ高、低剂量组大鼠GABA表达水平显著升高(P0.01)。生物钟基因表达水平检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠Clock、Bmal1基因表达水平显著升高(P0.05),Cry1、Per1、Per2基因表达水平显著降低(P0.05、0.01)。与模型组比较,SCZ中剂量组大鼠Clock、Bmal1基因表达水平显著降低(P0.01);SCZ高剂量组大鼠Cry1、Per1、Per2基因表达水平显著增高(P0.05、0.01),SCZ低剂量组大鼠Per1基因表达水平显著增高(P0.01)。结论蛇床子催眠活性组分通过降低海马Clock、Bmal1表达,提高Cry1、Per1、Per2基因的表达水平,增加抑制性、减少兴奋性氨基酸类神经递质的表达,从而调节睡眠-觉醒周期,达到治疗失眠的效果。     

不同经穴组合针刺对失眠大鼠下丘脑生物钟基因Clock和Bmal 1表达的影响

目的:观察不同经穴组合针刺对失眠大鼠下丘脑生物钟基因Clock和Bmal 1表达的影响,探索循经选穴对腧穴配伍效应的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为空白组(n=12)、模型组(n=8)、百会+神门组(n=12)、百会+三阴交组(n=11)、百会+非经非穴组(n=10)。连续2d腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)混悬液(500mg/kg)建立失眠模型。百会+神门组、百会+三阴交组、百会+非经非穴组每日针刺1次,每次30min,连续7d。治疗后比较各组大鼠睡眠潜伏期及睡眠时间;实时荧光定量PCR法检测下丘脑腹外侧视前区(VLPO)与视交叉上核(SCN)的Clock及Bmal 1mRNA的表达水平。结果:与空白组比较,模型组睡眠潜伏期延长、睡眠时间减少(P0.05),VLPO区与SCN内的Clock及Bmal 1mRNA表达水平均降低(P0.01)。与模型组比较,百会+神门组睡眠时间延长(P0.05);3个治疗组睡眠潜伏期均缩短(P0.05),VLPO区与SCN内Bmal 1mRNA表达水平均升高(P0.05);百会+神门组和百会+三阴交组VLPO区与SCN内Clock mRNA表达水平均升高(P0.01)。与百会+神门组比较,百会+三阴交组和百会+非经非穴组睡眠时间减少(P0.05)。与百会+三阴交组比较,百会+神门组VLPO区与SCN内Clock及Bmal 1mRNA表达水平均升高(P0.01,P0.05);百会+非经非穴组VLPO区与SCN内Clock及Bmal1mRNA表达水平均降低(P0.01,P0.05)。结论:针刺"百会"配伍"神门"穴可延长失眠大鼠的睡眠时间并缩短潜伏期,提高VLPO区与SCN内生物钟基因Clock及Bmal 1表达水平,循经选穴可以提高腧穴配伍效应。     

固本健脑法对老年性痴呆模型大鼠SorLA、VPS35的影响

目的:探讨固本健脑法干预老年性痴呆即阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用及机制。方法:12月龄衰老大鼠行脑立体定位手术于双侧海马注射Aβ_(1-42)制备复合AD大鼠模型,并用固本健脑液灌胃干预,以安理申组为对照。4周后,Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习记忆能力,Westen Blot检测SorlA、VPS35、APP的表达,ELISA法检测Aβ_(1-42)的表达。结果:通过大鼠双侧海马注射Aβ_(1-42),可诱导出大鼠AD样学习记忆能力减退模型。水迷宫检测显示固本健脑液中剂量能改善大鼠学习记忆能力。Westen Blot显示固本健脑液高剂量能提高海马区SorlA的表达量。ELISA显示给药后各给药组Aβ_(1-42)含量降低,固本健脑液高剂量Aβ_(1-42)含量最低。结论:固本健脑法可通过影响SorLA、VPS35的表达,影响APP的转运,减少Aβ_(1-42)的生成,加速Aβ_(1-42)的清除。     

固本健脑液对阿尔茨海默病大鼠学习记忆及睡眠时相的影响

目的：通过观察固本健脑液对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆、睡眠持续时间、行为次数以及睡眠-觉醒时相的影响,探索固本健脑液可能的调节机制。方法：将实验大鼠随机分成空白组、模型组、固本健脑液组以及褪黑素(MT)组4组,每组10只。HomecageScan3.0实时监测系统检测各组模型大鼠在笼内的行为活动情况并进行24 h分析,采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习及空间记忆能力;使用Sleepsign3.0进行24 h脑电肌电描记。结果：Morris水迷宫结果显示,模型组较空白组大鼠逃避潜伏期延长,找到目标平台区域的游泳时间百分比下降(P<0.05);固本健脑液组以及MT组逃避潜伏期明显减少,找到目标平台区域的游泳时间百分比显著上升(P<0.05);HomeCage监测显示,与空白组比较,模型组觉醒次数多且昼夜节律颠倒,睡眠持续时间降低(P<0.05),干预后,固本健脑液组觉醒次数减少且昼夜节律正常,睡眠持续时间延长;Sleepsign脑电肌电描记结果显示：模型组较空白组快速眼球运动(REM)睡眠累积量降低(P<0.05),非快速眼球运动(NREM)睡眠降低(...     

基于明确靶标及分子对接验证技术探究五味子醇甲对阿尔茨海默病的作用机制

目的：明确五味子醇甲对阿尔茨海默病的作用机制。方法：选取24只大鼠按体质量随机分为空白组、模型组和给药组，每组8只。采用对大鼠海马CA1区注射Aβ_1-40的方法制备阿尔茨海默病大鼠模型，造模1 d后灌胃给予30 mg/kg的五味子醇甲溶液，造模7 d后，进行Morris水迷宫行为学测试。在此基础上，对与阿尔茨海默病明确相关的β-分泌酶、雌激素受体β(ERβ)、谷氨酸受体1(NMDAR1)等蛋白进行验证，以蛋白表达量及药物成分与靶标作用的分子对接能进行评价，并通过分子对接技术计算五味子醇甲与各蛋白的对接能，达到理论验证的目的。结果：与空白组比较，模型组大鼠海马组织匀浆中β-分泌酶的活性含量明显增加(P<0.01),大鼠海马组织中ERβ表达显著降低(P<0.01),P-P38/P38表达明显升高(P<0.01),BACE1表达显著升高(P<0.01),NMDAR1表达明显降低(P<0.01);与模型组比较，给药组大鼠海马组织匀浆中β-分泌酶的活性含量明显减少(P<0.01),给药组大鼠海马组织中ERβ表达显著升高(P<0.01...     

黑逍遥散干预APP/PSI双转基因小鼠海马区Aβ降解相关基因和蛋白表达效应的研究

目的观察黑逍遥散对阿尔茨海默症(Alzheimer disease,AD)小鼠海马区β淀粉样蛋白前体(Amyloid beta precursorprotein,APP)、β淀粉样多肽1-42(β-amyloid1-42 Peptide,Aβ1-42)、糖原合成酶激酶-3β(Glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、脑啡肽酶(Neprilysin,NEP)、胰岛素抵抗酶(Insulin-degrading enzyme,IDE)基因和蛋白表达的影响。方法 42只APP/PS1双转基因雄性小鼠称重后,按随机原则分为模型组(10只)、阳性对照组(10只)、黑逍遥散高剂量组(11只)、黑逍遥散低剂量组(11只)。10只同月龄、同种系的野生型C57BL/6雄性小鼠为空白组。连续灌胃3个月后,采用Morris水迷宫进行行为学检测,采用qRT-PCR和Western Bloting分别检测小鼠海马区APP(Aβ1-42)、GSK-3β、NEP、IDE基因和蛋白的表达。结果干预3个月后,小鼠逃避潜伏期:模型组较空白组显著延长,用药各组较模型组显著缩短,差异具有统计学意义(P<0.01);小鼠跨原平台次数:模型组较空白组显著减少,用药各组较模型组显著增多,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与空白组相比,模型组小鼠海马区APP基因和Aβ1-42蛋白,以及GSK-3β基因和蛋白相对表达量显著升高,NEP与IDE基因和蛋白相对表达量显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与模型组相比,各用药组小鼠海马区APP基因和Aβ1-42蛋白以及GSK-3β基因和蛋白相对表达量显著降低,NEP与IDE基因和蛋白相对表达量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论黑逍遥可通过调节Aβ在海马区的异常代谢等作用,减缓AD小鼠认知能力的损伤。     

生慧汤对APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠下丘脑区生物钟基因Bmal1及海马IL-6，TNF-α的影响

目的:通过观察生慧汤对APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠学习记忆、下丘脑区生物钟基因Bmal1及海马白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探索生慧汤改善学习记忆和睡眠障碍的可能机制。方法:将实验小鼠随机分为模型组、正常组、褪黑素组、生慧汤高剂量组和生慧汤低剂量组。采用自主活动分析系统检测各组小鼠自主活动;采用Morris水迷宫检测各组小鼠学习能力及空间记忆能力;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组小鼠下丘脑区钟基因Bmal1 mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠Bmal1蛋白表达;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠海马区IL-6,TNF-α含量;采用皮尔森(Pearson)分析方法分析IL-6,TNF-α与Bmal1的相关性。结果:自主活动结果显示,与正常组比较,模型组小鼠活动次数和活动路程显著减少(P 0. 01);与模型组比较,各给药组小鼠活动次数和活动路程均明显增加(P 0. 05,P 0. 01),生慧汤低剂量组无显著性差异。Morris水迷宫结果显示,与正常组比较,模型组小鼠上平台潜伏期与游泳总路程显著延长(P 0. 01),穿越平台次数与目标象限时间显著减少(P 0. 01),第1次抵原平台时间明显增加(P 0. 05);与模型组比较,各给药组小鼠上平台潜伏期与游泳总路程明显减少(P 0. 05,P 0. 01),穿越平台次数与目标象限时间明显增加(P 0. 05,P 0. 01),第1次抵原平台时间明显减少(P 0. 05,P 0. 01)。Real-time PCR结果显示,与正常组比较,模型组小鼠Bmal1 mRNA表达上调;与模型组比较,各给药组小鼠Bmal1 mRNA表达下调。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组小鼠Bmal1蛋白表达显著升高(P 0. 01);与模型组比较,褪黑素组、生慧汤高、低剂量组Bmal1蛋白表达显著降低(P 0. 01)。ELISA结果显示,与正常组比较,模型组小鼠IL-6,TNF-α含量显著升高(P 0. 01);与模型组比较,各给药组IL-6,TNF-α含量显著降低(P 0. 01)。Pearson分析结果显示,IL-6,TNF-α与Bmal1具有相关性,且呈负相关关系。结论:生慧汤可能通过上调下丘脑区Bmal1基因的表达来降低海马区炎症因子IL-6,TNF-α蛋白含量,从而改善阿尔兹海默症(AD)和昼夜节律紊乱。     

酸枣仁汤对抑郁模型大鼠海马DKK-1与β-catenin、GSK-3β的影响

目的：探讨酸枣仁汤的抗抑郁作用及机制。方法：48只大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、酸枣仁汤低、中、高剂量组及氟西汀组,采用慢性轻度不可预见性应激制备抑郁大鼠模型,酸枣仁汤与氟西汀连续治疗28 d后观察各组大鼠体质量、糖水消耗、旷场实验得分,免疫组化法检测海马中DKK-1蛋白表达,荧光定量PCR法检测海马组织中β-catenin及GSK-3β的mRNA表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠体质量、糖水偏爱百分比和旷场试验得分均显著降低(P<0.01),海马区DKK-1蛋白表达明显上升(P<0.01),GSK-3β的mRNA表达明显下降(P<0.01);与模型组比较,酸枣仁汤中、高剂量组、氟西汀组较模型组体质量、糖水偏爱百分比和旷场试验得分均明显升高(P<0.05,P<0.01),酸枣仁汤低、中、高剂量组及氟西汀组大鼠海马中DKK-1蛋白表达显著下降(P<0.01),酸枣仁汤高剂量组大鼠海马中β-catenin、GSK-3βmRNA表达明显上升(P<0.05,P<0.01)。结论：酸枣仁汤能够调节抑郁模型大鼠海马组织中DKK-1蛋白与β-...     

基于“肠-脑轴”理论探讨固本健脑复方对AD模型大鼠肠道菌群、TLR4/NF-κB通路的影响

目的 基于“肠-脑轴”理论探讨固本健脑复方对阿尔茨海默症(alzheimer’s disease, AD)模型大鼠肠道菌群、TLR4/NF-κB通路的影响。方法 将50只雄性SD大鼠随机数字表法分为正常对照组(Control)、模型组(Model)、固本健脑复方低剂量组(TCM-low, TL)、高剂量组(TCM-high, TH)、阳性对照组(Psoitive control, PC),每组10只。采用双侧海马注射Aβ25-35建立AD模型,低剂量组、高剂量组分别给予1.035 g/kg/d、2.070 g/kg/d固本健脑复方水煎液灌胃,阳性对照组灌胃113.4g/kg/d双歧杆菌三联活菌肠溶胶囊水溶液,正常对照组、模型组灌胃等体积生理盐水,持续8w。Morris水迷宫检测动物学习记忆和能力,western blot检测海马Aβ、BACE1、TLR4/NF-κB通路相关蛋白表达,16SrRNA测序技术检测肠道菌群丰度,免疫组化检测大脑皮质大肠杆菌(Escherichia coli, E.coli)含量。结果 与正常对照组相比,模型组动物逃避潜伏期延长,穿越平台次数下降(P<0...     

基于PP2A与GSK-3β探讨丹栀逍遥散对阿尔茨海默病模型大鼠tau蛋白磷酸化水平的作用机制

目的：研究丹栀逍遥散对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马中tau蛋白磷酸化水平与糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、磷酸丝氨酰/磷酸苏安酰蛋白磷酸酶2A(PP2A)不同位点的影响及作用机制。方法：选用90只SPF级Wistar雄性大鼠,用双侧海马区注射冈田酸的方式建立AD大鼠模型。筛选出造模成功的大鼠,随机分为模型组,安理申组(0.5 mg·kg^-1),丹栀逍遥散高、中、低剂量组(17.55、8.77、4.38 g·kg^-1),连续灌胃42 d,1次/d。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,尼氏染色观察海马区神经元形态结构,实时荧光定量聚合链式反应(Real-time PCR)检测tau蛋白、GSK-3β、PP2A mRNA表达情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测tau蛋白、GSK-3β、PP2A及相关蛋白的表达。结果：与空白组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低(P<0.01),海马CA3区细胞结构异常,排列杂乱,数量减少,GSK-3β mRNA、GSK-3β、p-GSK-3β-Tyr216、p-PP2A、p-tau表达...     

电针对链脲佐菌素AD模型大鼠海马区Aβ阳性细胞表达和脑内SOD活性的影响

[摘 要] 目的：探讨电针对AD大鼠学习记忆能力改善的可能机制。方法：将Wistar大鼠随机分成正常组、盐水组、模型组、西药组和电针组,每组12只。侧脑室注射STZ制备动物模型,以Morris水迷宫评价大鼠学习记忆能力,用免疫组法和可见光分光光度计比色法观测大鼠海马区Aβ阳性细胞表达情况和脑内SOD活性情况。结果：与正常组及盐水组比较,模型组海马区Aβ蛋白表达水平升高(P<0.01),SOD活性降低(P<0.01)。治疗后电针组与模型组比较,Aβ蛋白表达水平降低(P<0.01) ,SOD活性升高(P<0.01)。结论：电针可能通过降低Aβ蛋白表达,提高SOD活性来改善学习记忆能力。     

Aβ海马注射对大鼠学习记忆影响及加减地黄饮子的干预作用

目的:观察加减地黄饮子对β-淀粉样蛋白1-40(Aβ-1-40)诱导的AD模型大鼠学习记忆障碍的改善作用及对胆碱乙酰化转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)表达的影响。方法:采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ-1-40诱导老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)动物模型。采用Morris水迷宫测试大鼠寻找平台所需时间和通过原平台次数评价大鼠学习记忆能力及加减地黄饮子的干预作用。采用免疫组织化学染色法和计算机图像分析技术测定海马区ChAT表达。结果:模型组大鼠在定位航行试验中寻找隐匿平台平均逃避潜伏期较正常组显著延长,空间探索试验中跨越原平台位置次数明显减少(P<0.01),加减地黄饮子组平均逃避潜伏期较模型组显著缩短,跨越原平台位置次数明显增加(P<0.01),但多奈哌齐组和加减地黄饮子组比较差异无显著性(P>0.05)。免疫组化实验结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠海马区ChAT蛋白表达下降(P<0.01)。与模型组比较,加减地黄饮子组ChAT蛋白表达升高(P<0.01)。结论:加减地黄饮子对AD模型大鼠的学习记忆功能减退具有改善作用,可能与增强海马神经元ChAT表达,进而使Ach的合成增加有关。     

基于“心与小肠相表里”探讨回肠菌群在七圣丸抗阿尔茨海默病中的变化

目的:在"心与小肠相表里"理论指导下,探究七圣丸治疗阿尔茨海默病的作用及其对回肠菌群的影响。方法:采用双侧脑室注射β-淀粉样蛋白1-42(Aβ_1-42)的方法建立阿尔茨海默病(AD)模型,将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组及七圣丸低、中、高剂量组(5.6,11.2,22.4 g·kg^-1·d^-1)和多奈哌齐组(多奈哌齐,0.46 mg·kg^-1·d^-1),连续给药28 d后,采用水迷宫实验观察大鼠的空间记忆能力,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测海马组织中的Aβ_1-42和核转录因子-κB(NF-κB),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)含量。另取其回肠内容物采用16S r RNA高通量测序技术检测各组大鼠回肠菌群的变化。结果:与正常组和假手术组比较,模型组的大鼠的目标象限停留时间、目标象限穿越次数与平台穿越次数明显降低(P<0.05,P<0.01),海马中的Aβ_1-42含量显著升高(P<0.01),中枢炎症因子NF-κB,TNF-α,IL-6水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,七圣丸各给药组可明显回调其空间记忆功能损伤(P<0.05,P<0.01),改善大鼠海马组织的Aβ_1-42沉积(P<0.05,P<0.01),明显降低中枢神经炎症因子表达(P<0.05,P<0.01),对AD大鼠有较好的治疗作用。16S分析结果表明模型组大鼠的回肠菌群结构相对于正常组和假手术组显著偏离,且毛螺菌科NK4A136(Lachnospiraceae NK4A136 group)的丰度显著升高(P<0.01),埃希氏菌-志贺氏菌(Escherichia-Shigella)的丰度明显降低(P<0.05,P<0.01)。而七圣丸给药组可显著调节大鼠回肠的菌群结构,同时调节Lachnospiraceae NK4A136 group,Escherichia-Shigella,瘤胃菌科(Ruminococcaceae)等菌群的相对丰度。结论:七圣丸对阿尔茨海默病有良好的治疗效果,可明显增强AD大鼠的记忆认知能力,其作用机制可能与调节大鼠回肠菌群结构以及Lachnospiraceae NK4A136 group,Escherichia-Shigella,Ruminococcaceae等菌群的相对丰度,减轻中枢神经炎症反应,降低中枢Aβ_1-42沉积有关。     

脑益康对高胆固醇血症致Aβ增高大鼠的作用研究

目的观察脑益康对高胆固醇血症致Aβ增高大鼠的作用并分析其作用机制。方法高胆固醇饲料喂饲大鼠建立高胆固醇血症模型,脑益康灌胃,Y电迷宫测试,测定血脂、血流变及脑海马区Aβ表达。结果与模型对照组相比,脑益康高剂量组大鼠电刺激尝试次数显著减少(P<0.01),血清总胆固醇显著降低(P<0.01),大鼠脑海马区Aβ表达积分光密度显著降低(P<0.01)。结论脑益康可改善大鼠学习、记忆,其机制与降低血脂水平、改善血液流变学、减少脑Aβ生成有关。     

温针灸对骨关节炎大鼠软骨组织Clock、Bmal1蛋白的影响

目的探讨温针灸对骨关节炎(OA)大鼠软骨组织Clock、Bmal1蛋白表达的影响。方法 60只3月龄SPF级雄性SD大鼠,按随机数字表法分为对照组、模型组、针刺组、温针灸组,每组15只。以手术方法制备OA大鼠,温针灸组于造模第1天取足三里、犊鼻和内膝眼穴温针灸治疗,采用手针及悬灸法,15 min/次,1次/天,共21天。针刺组采用针刺方法同温针灸组,不用艾灸。对照组大鼠自由饮水,正常饲养。所有大鼠于相应处理结束后,采用排水法测大鼠膝关节部体积,HE染色观察软骨组织病理结构,Western Blot检测软骨组织Clock、Bmal1蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠右膝关节肿胀明显(P0.01);模型组大鼠软骨组织Clock、Bmal1蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,针刺和温针灸均能显著改善大鼠右膝关节肿胀程度(P0.05),提高OA大鼠软骨组织中Clock、Bmal1蛋白表达水平(P0.05),温针灸组较针刺组改善更为明显(P0.05)。结论相对于针刺,温针灸更能有效调节OA大鼠关节炎性损伤状况,促进OA大鼠软骨组织中Clock、Bmal1蛋白表达,从而调节软骨细胞生物钟,抑制了软骨细胞骨架破坏的进程,减缓膝关节的关节退变。     

清心开窍方多糖对AD大鼠脑组织凋亡信号传导分子Caspase-3及凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达的影响

目的:探讨清心开窍方多糖成分对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠脑组织凋亡信号传导分子Caspase-3及凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组和多糖组,每组8只。采用双侧杏仁核注射Aβ25-35制造AD大鼠模型,造模后第2天起及灌胃给药2周后,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,免疫组化方法研究脑组织Caspase-3、Bax、Bcl-2及βAPP的表达。结果:中药各组能明显改善AD大鼠学习记忆能力(P<0.05,P<0.01);清心开窍方组、多糖组大鼠大脑皮层、海马区Bax、Caspase-3、βAPP表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论:清心开窍方能显著改善AD大鼠学习记忆的能力,可能是通过降低皮质、海马Bax、Caspase-3、βAPP表达而发挥作用。     

固本健脑方调节健忘大鼠海马组织中AGEs/RAGE信号通路的探讨

目的:基于晚期糖基化终末产物(AGEs)/高级糖基化终产物受体(RAGE)信号通路,探讨固本健脑方对老年健忘大鼠海马脑区神经炎性反应的调控作用。方法:腹腔注射D-半乳糖(120 mg·kg-1)及Na NO2(90 mg·kg-1)建立老年健忘大鼠模型,分别ig固本健脑方(16.7 g·kg-1),归脾丸(16.3 g·kg-1),六味地黄丸(12.5 g·kg-1)和石杉碱甲(100μg·kg-1),并设正常组和模型组,ig等体积生理盐水。给药共20 d后,取海马组织,采用免疫组化法检测AGEs蛋白的表达,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测RAGE及核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL~(-1)β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠海马组织AGEs蛋白,RAGE及NF-κB p65蛋白的表达,IL~(-1)β及TNF-α含量均明显上调(P0.05,P0.01);与模型组比较,各给药组明显下调大鼠海马组织AGEs蛋白,RAGE及NF-κB p65蛋白的表达,IL~(-1)β及TNF-α含量(P0.01);与固本健脑方组比较,其余给药组上述指标的表达上调(P0.05);归脾丸组、六味地黄丸组、石衫碱甲组组间比较,差异无统计学意义。结论:上述方药均能在一定程度上改善老年健忘大鼠的记忆功能,但固本健脑方作用最佳,其分子机制与AGEs/RAGE信号通路密切相关。     

加味不忘散对AD模型大鼠海马区NLRP3炎症通路中相关因子表达的影响

目的:通过观察加味不忘散对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马区NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)炎症通路中相关分子NLRP3,天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和白细胞介素-1β(IL^-1β)表达的影响,探讨其作用机制。方法:通过Morris水迷宫筛选出合格SD大鼠52只,随机均分为假手术组,AD模型组,加味不忘散低剂量组(1.5 g·kg^-1),加味不忘散高剂量组(3 g·kg^-1)。采用双侧海马注射β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)5μL(2 g·L^-1)建立AD模型大鼠。造模后分别予低、高剂量加味不忘散灌胃,每日1次,连续4周。灌胃结束后通过Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆能力,判断造模是否成功;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马组织中NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,AD模型组大鼠学习记忆能力明显下降(P<0.05);与AD模型组比较,加味不忘散低剂量组大鼠学习记忆能力无改善,NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达水平均无统计学差异,加味不忘散高剂量组大鼠学习记忆能力明显改善,NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达均明显下降(P<0.05)。结论:高剂量加味不忘散可改善大鼠学习记忆能力,其机制可能与下调NLRP3炎症通路中NLRP3及下游Caspase-1,IL^-1β的表达,抑制海马组织内的炎症反应有关。