促红细胞生成素对发育期小鼠脑损伤后脑源性神经营养因子和酪氨酸受体激酶B表达的影响

目的 探讨促红细胞生成素（EPO）对鹅膏蕈氨酸（Ibo）致不同发育期小鼠脑损伤后脑源性神经营养因子（BDNF）和酪氨酸受体激酶B（Trk B）mRNA及蛋白表达的影响。方法 以120只昆明白小鼠作为实验动物,其中7日龄（P7）、21日龄（P21）和42日龄（P42）小鼠各40只;再将同日龄小鼠随机分为Ibo组（n=15）、Ibo+EPO组（n=15）和对照组（n=10）。Ibo组采用微量注射法向左侧海马注射Ibo 1 μL;Ibo+EPO组注射Ibo 1 μL后,腹腔注射5 000 U/（kg·d）EPO,连续5 d;对照组注射等体积生理盐水。各组小鼠在建模后第5天进行Y-电迷宫测试;Cresyl Violet染色观察海马神经元病理学变化;Real-Time PCR检测海马BDNF mRNA和TrkB mRNA的表达;ELISA法检测BDNF和TrkB蛋白的表达。结果 术后Ibo组小鼠寻找安全区的正确率明显低于对照组（P<0.05）,而EPO+Ibo组小鼠寻找安全区的正确率明显高于Ibo组（P<0.05）。光学显微镜观察结果显示：Ibo组小鼠海马组织神经元发生明显变性和细胞死亡。Ibo+EPO组和Ibo组海马神经元死亡率明显高于对照组（P<0.05）;而Ibo+EPO组损伤较轻。Ibo组和Ibo+EPO组海马组织BDNF和TrkB的mRNA及蛋白表达量均显著高于对照组（P<0.05）;其中,Ibo+EPO组BDNF和TrkB的mRNA及蛋白表达量均显著高于Ibo组（P<0.05）。结论 Ibo致脑损伤时,海马组织BDNF和TrkB mRNA及蛋白表达均明显增强,可能是一种保护性反应。EPO可减轻Ibo所致脑损伤,其机制可能与上调BDNF和TrkB的mRNA及蛋白的表达有关。     

砷暴露对子代小鼠肺组织ERα表达性别差异的初步研究

目的 观察亲代母鼠砷染毒后子代不同发育时期肺组织内雌激素受体α（ERα）的表达变化规律及性别间的差异,探讨砷暴露在肺癌发生性别差异中的作用。方法 亲代母鼠在孕第8 d至子代断乳期砷灌胃染毒,子代在断乳期后砷饮水染毒至成年期。通过实时荧光定量PCR和Western blot技术检测子代雌雄小鼠在不同发育时期、不同剂量（低、中、高）亚砷酸钠染毒情况下,肺组织中\ERα mRNA和蛋白的表达水平。 结果 胚胎期雌性肺组织中\ERα mRNA表达水平低于雄性(\P\ERα mRNA表达水平高于雄性（断乳期中剂量组\P\P\ERα mRNA的表达水平差异无统计学意义;断乳、成年期雌性肺组织内\ERα mRNA的表达水平均高于胚胎期雌性（低、中、高剂量组\P\P\P<0.05)。 结论 亲代母鼠砷染毒可使子代雌性小鼠在断乳期、成年期时肺组织内ERα表达水平均高于雄性小鼠,对阐明环境污染物在肺癌发生性别差异中的作用具有重要的意义。     

诺卡酮对抑郁样行为和海马中PKA/CREB/BDNF信号通路的影响

目的 观察诺卡酮(nootkatone)对慢性不可预知应激(CUS)模型小鼠抑郁样行为、海马脑区神经再生及蛋白激酶A(PKA)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路的影响,以探讨诺卡酮的抗抑郁作用及其分子机制。方法 将雄性C57BL/6小鼠随机分为3组：对照组(0.9%氯化钠溶液),CUS组(CUS+0.9%氯化钠溶液),CUS+诺卡酮组(CUS+诺卡酮)。用糖水偏好和强迫游泳试验来评价小鼠的抑郁行为表型;用RT-PCR检测海马BDNF的mRNA表达,用Western blot法检测海马BDNF、PKA及磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)的表达;用免疫荧光检测海马齿状回脑区神经元的再生情况。结果 与对照组相比,CUS组小鼠糖水偏好降低(P<0.05),强迫游泳潜伏期减少和不动时间增加(P<0.05),海马BDNF mRNA和蛋白表达量、PKA和p-CREB蛋白表达量降低(P<0.05);与CUS组小鼠相比,CUS+诺卡酮组小鼠糖水偏好增加(P<0.05),强迫游泳潜伏期增加和不动时间减少(P<0.05...     

cAMP/CREB/BDNF信号通路在沃替西汀抗小鼠抑郁样行为中的作用

目的：研究新型抗抑郁药沃替西汀对环磷酸腺苷/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子（cAMP/CREB/BDNF）信号转导通路的影响。方法将昆明小鼠随机分为对照组和慢性不可预知性温和应激（CUMS）造模组进行造模,采用糖水偏爱试验考察模型是否成功建立。造模结束后将CUMS组小鼠随机分为模型组、氟西汀组和沃替西汀组。采用悬尾试验、强迫游泳试验和旷场试验,考察沃替西汀对抑郁小鼠的抗抑郁作用。采用ELISA试剂盒检测小鼠海马组织中cAMP的含量。采用蛋白免疫印迹法检测小鼠海马组织中磷酸化CREB（pCREB）和BDNF的蛋白表达。结果沃替西汀显著缩短小鼠在悬尾和强迫游泳试验中的不动时间（P<0.01）,而对其在旷场试验中的自主活动行为没有影响（P>0.05）,表明沃替西汀可改善抑郁小鼠的抑郁样行为;ELISA结果显示沃替西汀能显著增加小鼠海马组织内cAMP的含量（P<0.01）;蛋白免疫印迹结果表明沃替西汀可以促进pCREB和BDNF的蛋白表达（P<0.01）。结论沃替西汀产生抗抑郁作用机制可能与影响cAMP/CREB/BDNF信号转导通路有关。     

氯胺酮与乙醇对小鼠海马PKA-CREB信号通路的影响

目的:研究氯胺酮与乙醇对小鼠海马PKA-CREB信号通路的影响,探讨氯胺酮与乙醇致学习记忆障碍的分子学机制。方法:40只ICR小鼠随机分为4组:对照组、氯胺酮组、乙醇组、氯胺酮乙醇合用组,每组10只。氯胺酮和乙醇分别采取腹腔注射和灌胃的给药方式,1次/d,连续14 d。通过RT-PCR检测海马中c-AMP反应单元结合蛋白(c-AMP response element binding protein,CREB)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)及腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)mRNA的表达;Western Blot检测pCREB/CREB的蛋白表达。结果:RT-PCR检测结果 :氯胺酮乙醇合用组可显著降低海马区CREB、PKA及AC mRNA的表达(P<0.05),Western Blot检测显示pCREB/CREB的蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:氯胺酮与乙醇可协同抑制小鼠的学习记忆行为,其机制可能与大脑海马区CREB信号通路相关。     

开心散对小鼠抑郁样行为及海马中脑源性神经营养因子的影响

目的 观察开心散对悬尾模型小鼠行为学、脑内单胺类递质及海马中脑源性神经营养因子(BDNF)水平的影响,探究开心散的抗抑郁效果与海马中BDNF含量的相关性.方法 采用小鼠悬尾实验,观察不同剂量开心散对小鼠不动时间的影响;HPLC法测定脑内去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)的含量;蛋白质印迹法检测小鼠海马中cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、p-CREB、BDNF的表达;RT-PCR检测海马中BDNF mRNA的表达,Pearson相关性检验确定开心散的抗抑郁作用与海马中BDNF蛋白和mRNA水平的相关性.结果 开心散可缩短悬尾小鼠不动时间(P＜0.05),可增加小鼠脑内单胺类递质(DA、5-HT)和海马中CREB、p-CREB、BDNF的含量(P＜0.05),其抗抑郁作用与海马中BDNF水平呈良好相关性(蛋白质:r＝－0.694,P＜0.01;mRNA:r＝－0.547,P＜0.01).结论 开心散对小鼠的抗抑郁作用与海马BDNF水平呈正相关性,提示开心散可能通过增加海马中BDNF表达发挥抗抑郁作用.     

邻苯二甲酸二丁酯围生期暴露对子代大鼠认知功能的影响及机制

目的：研究邻苯二甲酸二丁酯（di-n-butyl phthalate,DBP）暴露对子代大鼠的神经毒性并探索其可能机制。方法：妊娠SD大鼠随机分为DBP低剂量（n=10）和高剂量染毒组（n=10）,分别给予DBP 50 mg/（kg·d）和200 mg/（kg·d）从妊娠第6天到产后23 d连续灌胃染毒,并予以同等体积玉米油灌胃为对照组（n=8）。除观察DBP染毒后孕鼠、子鼠的一般情况外,采用水迷宫实验检测子鼠认知功能、皮质脑电图记录脑电活动,观察海马形态变化,并以Western blot测定子代海马脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）、神经肽Y（neuropeptide Y,NPY）、雌激素受体β（estrogen receptor β,ERβ）蛋白的表达情况。结果：与对照组比较,高剂量染毒组子鼠的体质量均低于同性别对照组（P<0.05）。DBP染毒后子鼠的逃避潜伏期延长（P<0.05）,在目标象限的停留时间缩短（P<0.05）,跨越平台次数减少（P<0.05）;染毒后子鼠δ波比例增加（P<0.05）,θ、α波比例减少（P<0.05）,δ波+θ波（慢波总和）比例增加（P<0.01）。HE染色显示,高剂量染毒组海马CA3区和DG区细胞层数稍减少,细胞密集度轻度降低。低剂量和高剂量染毒组子鼠海马BDNF、NPY、ERβ蛋白表达下降（P<0.01）。结论：DBP围生期染毒后可引起子代大鼠认知功能障碍,脑电节律慢化,其机制可能与BDNF、NPY、ERβ表达下调有关。     

香萱解郁方对血清剥夺诱导HT22细胞损伤模型的神经保护作用

探讨香萱解郁方含药血清对血清剥夺致小鼠海马神经元HT22细胞损伤模型的影响。方法 采用血清剥夺培养HT22细胞建立神经损伤体外模型,实验分为对照组、模型组和中药组［中药组A（含药血清15%浓度）、中药组B（含药血清20%浓度）］,各组血清剥夺12 h后,通过CCK8法检测各组细胞活力,确定15%浓度含药血清干预后细胞的存活率最高,设定为后续实验中药组的药物浓度。免疫荧光染色法检测神经元特异性微管蛋白（β-Tubulin Ⅲ）在各组中的表达,蛋白质免疫印迹法及qPCR法检测脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白及其mRNA在各组中的表达。结果 在加药后培养12 h,中药组的细胞活力明显高于对照组与模型组（P＜0.001）。培养24 h,模型组细胞活力较对照组明显下降（P＜0.001）,中药组较模型组明显提高（P＜0.001）。培养36 h,模型组细胞活力较对照组显著下降（P＜0.001）,中药组较模型组明显提高（P＜0.001）。模型组BDNF蛋白含量及 BDNF mRNA表达量较对照组显著降低（P＜0.05,P＜0.001）,模型组少数神经元长出突起;中药组BDNF蛋白含量及BDNF mRNA表达量较模型组显著增加（P＜0.05）,中药组HT22细胞轴突突起长度和分支增加,β-Tubulin Ⅲ阳性表达明显增多。结论 香萱解郁方含药血清对血清剥夺诱导小鼠海马神经元HT22细胞损伤具有神经保护作用,可能与促进BDNF蛋白表达有关     

越鞠甘麦大枣汤调节小鼠海马PKA-CREB-BDNF信号通路的抗抑郁作用

目的 探讨越鞠甘麦大枣汤（YG）的抗抑郁功效及其与PKA-CREB-BDNF信号通路的关联。方法 强迫游泳（FST）检测越鞠甘麦大枣汤单次给药后抗抑郁的时效性。慢性不可预测模型（CMS）进一步检测越鞠甘麦大枣汤在抑郁模型上的抗抑郁作用。蛋白印迹表达法检测越鞠甘麦大枣汤单次给药30 min和24 h后海马中PKA、CREB、BDNF的蛋白表达。结果 YG在FST中显示出持久的抗抑郁潜力,并且快速逆转了慢性应激小鼠的抑郁样行为。在慢性小鼠模型中,海马中PKA,CREB和BDNF的表达显著上调。结论 越鞠甘麦大枣汤（YG）显示出快速和持久的抗抑郁样作用,其抗抑郁功能与PKA-CREB-BNDF通路有关。     

电针对抑郁大鼠海马组织CREB/BDNF/TrkB信号通路的影响

目的：探讨电针对抑郁大鼠海马组织CREB/BDNF/TrkB信号通路的影响。方法：采用孤养结合慢性不可预知应激（CUMS）方法建立抑郁大鼠模型，随机分为空白组、模型组、电针组、氟西汀组，每组10只。电针组选取“百会”、“神庭”、“合谷”、“太冲”，每日造模前1 h针刺，留针20 min,1次/d，持续21 d；氟西汀组：每日造模前1 h氟西汀（10 mg/kg, 1 mg/mL）灌胃给药，持续21 d。观察大鼠的体质量变化、旷场实验的站立次数和运动距离、强迫游泳实验的不动时间，ELISA法检测血清5-HT、DA、NE的含量；Western blot检测海马组织中BDNF、CREB、TrkB的表达；实时荧光定量PCR检测海马组织中BDNF、CREB mRNA的表达。结果：造模干预后：与空白组比较，模型组大鼠体质量、站立次数、运动距离、血清5-HT、DA、NE的含量、海马组织中BDNF、CREB、TrkB的表达显著下降（均P<0.01），不动时间显著升高（P<0.01）；与模型组比较，电针组、氟西汀组大鼠体质量、站立次数、运动距离、血清5-HT、DA、NE的含量、海马组织中BD...     

脑外伤小鼠海马TNF-α表达的变化

  目的 探讨脑外伤小鼠海马肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达的变化。方法 60只Balb/c小鼠随机分为2组,假手术组（30只）和脑外伤组（30只）。每组依据手术后不同时间点再分6 h、1 d、3 d 3组,每组10只。免疫组化和Western blot检测各组小鼠海马TNF-α蛋白的表达。RT-PCR方法检测各组小鼠海马TNF-α mRNA的表达。结果 免疫组化和Western blot结果发现,脑外伤组小鼠海马TNF-α蛋白表达量明显高于假手术组（P<0.05）;RT-PCR结果也显示脑外伤组小鼠海马TNF-α mRNA表达量明显高于假手术组（P<0.05）。结论 脑外伤小鼠海马TNF-α表达明显升高。     

肝豆汤改良方调控PKR/eIF2α通路改善Wilson病模型TX小鼠突触功能障碍的机制研究

目的 探究肝豆汤改良方调控双链RNA依赖蛋白激酶（double-stranded RNA-dependent protein kinase，PKR）/真核细胞起始因子 2α（eukaryotic initiation factor 2α，eIF2α）通路改善Wilson病模型毒牛奶（toxic milk,TX）小鼠突触功能障碍的机制。方法 实验分为正常组、正常加肝豆汤改良方组、模型组、模型加肝豆汤改良方组，每组20只小鼠；正常组和模型组每日分2次予生理盐水灌胃，每次20 mL/kg，正常加肝豆汤改良方组与模型加肝豆汤改良方组每日分2次予中药肝豆汤改良方各20 mL/kg灌胃给药，连续4周，末次给药结束后取各组小鼠海马组织进行检测；采用旷场实验、Barnes迷宫实验检测Wilson病模型小鼠认知功能；采用TUNEL染色法检测小鼠海马组织中神经细胞凋亡情况；采用免疫荧光染色检测各组小鼠海马8-羟化脱氧鸟苷（8-hydroxylated deoxyguanosine，8-OHdG）的表达水平；采用Western blot法检测海马组织PKR/eIF2α通路以及突触相关蛋白表达水平。结果 模型组小鼠的认知功能显著低于正常组（P<0.05），模型加肝豆汤改良方组小鼠的认知功能显著高于模型组（P<0.05）；与正常组比较，模型组小鼠海马神经细胞凋亡数目显著增加（P<0.05）；与模型组比较，模型加肝豆汤改良方组小鼠海马神经细胞凋亡数量显著降低（P<0.05），8-OhdG表达水平显著降低（P<0.05）；小鼠海马内突触相关蛋白突触蛋白1、突触素、突触后致密物-93、突触后致密物-95表达水平显著增加（P<0.05），小鼠海马PKR/eIF2α通路相关蛋白PKR、磷酸化eIF2α、转录激活因子4、促凋亡分子C/EBP同源蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。结论 肝豆汤改良方可通过调控PKR/eIF2α通路，促进突触相关蛋白表达，减轻高铜诱导的突触功能障碍，改善TX小鼠认知功能损伤症状。     

GPR30激动剂对Aβ1-42所致认知功能障碍的 治疗作用及其机制研究

目的 探讨G蛋白耦联受体30（G protein coupled receptor 30,GPR30）激动剂对β淀粉样蛋白（amyloid β-protein,Aβ）1-42所致小鼠认知功能障碍的治疗作用。方法 将72只ICR小鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组、G1低剂量组、G1中剂量组和G1高剂量组。采用双侧海马脑立体定位注射Aβ1-42建立阿尔茨海默病认知功能障碍模型,48h后给予GPR30激动剂G1（1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg）。进行Morris水迷宫实验、避暗实验和新物体识别实验测试小鼠的认知能力,采用蛋白质印迹法检测小鼠海马组织中Bcl-2、Bax、caspase-3、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）、cAMP效应元件结合蛋白（cAMP response element binding protein,CREB）、p-CREB的表达水平。结果 Morris水迷宫实验中,G1高剂量组小鼠的目标象限停留时间百分比和穿越平台次数显著高于模型组（P<0.05）;避暗实验中,G1中、高剂量组小鼠的错误次数均显著少于模型组（P<0.05）,避暗潜伏期均显著长于模型组（P<0.05）;新物体识别实验中,G1中、高剂量组小鼠的识别指数均显著高于模型组（P<0.05）。G1高剂量组小鼠海马组织中的p-CREB/CREB、mBDNF/proBDNF、Bcl-2/Bax的比例显著高于模型组（P<0.05）,活化的caspase-3/pro-caspase-3的比例显著低于模型组（P<0.05）。结论 GPR30激动剂可通过激活CREB/BDNF通路对Aβ1-42诱导的小鼠认知障碍和神经元凋亡产生保护作用。     

趋化因子配体5在脓毒症相关脑病小鼠海马炎症反应中的作用

目的：研究趋化因子配体5(CCL5)在脓毒症相关脑病(SAE)小鼠海马炎症反应中的作用。方法：SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠38只,采用随机数字法分为两组：假手术组（Sham组）和脓毒症相关脑病组（SAE组）。SAE组小鼠单次腹腔注射脂多糖（LPS）5 mg/kg,Sham组小鼠予以同等体积的无菌生理盐水。于给药后第4天进行旷场实验和Morris水迷宫实验;给药后第6天取双侧海马组织,采用qPCR法检测CCL5 mRNA表达,免疫荧光法检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达,Western Blot法检测突触后致密蛋白95(PSD-95)表达。结果：与Sham组相比,SAE组小鼠活动总路程缩短,不动时间延长,逃逸潜伏期延长,平台穿越次数减少,且目标象限停留时间缩短,伴随海马区CCL5 mRNA表达增加,星形胶质细胞激活,PSD-95蛋白表达下调（P<0.05）。结论：SAE小鼠空间学习记忆功能受损,伴随海马CCL5 mRNA表达上调和星形胶质细胞炎症反应。     

乳腺癌根治术后采血模式与采血异常现象之间的相关性分析

目的探讨丙戊酸钠对精神分裂大鼠环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）/脑源性神经营养因子（BDNF）/酪氨酸激酶受体B（TrkB）通路及神经元损伤的影响。方法将50只雄性Wistar大鼠按随机数表法分为对照组、模型组、丙戊酸钠低剂量组、丙戊酸钠高剂量组和氯氮平组,每组10只。模型组、丙戊酸钠低剂量组、丙戊酸钠高剂量组和氯氮平组腹腔注射地卓西平（MK-801）制备精神分裂症模型。造模结束后24 h,丙戊酸钠低剂量组和丙戊酸钠高剂量组同时分别灌胃150 mg/kg和300 mg/kg的丙戊酸钠;氯氮平组灌胃20 mg/kg的氯氮平;对照组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给予14 d。采用Morris水迷宫实验检测大鼠的学习和记忆能力,观察大鼠海马组织病理学情况,检测海马组织细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法检测海马组织中CREB、磷酸化-CREB（p-CREB）、BDNF、TrkB和磷酸化-TrkB（p-TrkB）蛋白表达水平。结果对照组大鼠海马组织细胞多且排列紧密,层次清晰;模型组和丙戊酸钠低剂量组大鼠海马组织排列紊乱,细胞明显肿胀、细胞核固缩、核碎裂;丙戊酸钠高剂量组和氯氮平组大鼠海马组织趋于正常,但见少量核固缩和核碎裂的细胞。与对照组比较,其余各组大鼠目标象限游泳时间、穿越平台次数、海马组织中CREB、p-CREB、BDNF、TrkB和p-TrkB蛋白表达水平降低,海马组织细胞凋亡率增加（P<0.05）;与模型组相比,各丙戊酸钠剂量组和氯氮平组大鼠目标象限游泳时间、穿越平台次数、海马组织中CREB、p-CREB、BDNF、TrkB和p-TrkB蛋白表达水平增加,海马组织细胞凋亡率降低（P<0.05）;且丙戊酸钠高剂量组大鼠目标象限游泳时间、穿越平台次数、海马组织中CREB、p-CREB、BDNF、TrkB和p-TrkB蛋白表达水平高于丙戊酸钠低剂量组,海马组织细胞凋亡率低于丙戊酸钠低剂量组（P<0.05）;但作用没有氯氮平组显著（P<0.05）。结论丙戊酸钠可以缓解精神分裂症大鼠神经元损伤,抑制海马细胞凋亡,其作用机制可能与CREB/BDNF/TrkB通路激活有关。     

微小RNA-155和脑源性神经生长因子在砷对PC12细胞损伤中的表达及意义

目的 探讨微小RNA-155(miR-155)和脑源性神经营养因子(BDNF)在砷对PC12细胞损伤中的作用及机制。方法 培养大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤12(PC12)细胞株,将细胞分为对照组和2.5、5、10、 20μmol/L NaAsO₂染毒组;MTT检测细胞存活率,电镜观察各组细胞的超微结构,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-155和BDNF mRNA表达,蛋白印迹(Western blot)检测BDNF蛋白的表达。结果 电镜下发现各染毒组出现不同程度的细胞器损伤;与对照组比较,NaAsO₂各染毒组(除2.5μmol/L组外)随染毒剂量的增加,PC12细胞存活率逐渐下降(P<0.05)、miR-155的表达量逐渐增加(P<0.05)、BDNF mRNA和蛋白表达量逐渐降低(P<0.05)。结论 NaAsO₂对PC12细胞有直接毒性作用,miR-155及BDNF表达水平随染砷浓度增加而改变,其可能是致PC12细胞损伤的机制。     

越鞠甘麦大枣汤调节小鼠海马PKA-CREB-BDNF信号通路的抗抑郁作用（英文）

目的探讨越鞠甘麦大枣汤(YG)的抗抑郁功效及其与PKA-CREB-BDNF信号通路的关联。方法强迫游泳(FST)检测越鞠甘麦大枣汤单次给药后抗抑郁的时效性。慢性不可预测模型(CMS)进一步检测越鞠甘麦大枣汤在抑郁模型上的抗抑郁作用。蛋白印迹表达法检测越鞠甘麦大枣汤单次给药30min和24h后海马中PKA、CREB、BDNF的蛋白表达。结果YG在FST中显示出持久的抗抑郁潜力,并且快速逆转了慢性应激小鼠的抑郁样行为。在慢性小鼠模型中,海马中PKA,CREB和BDNF的表达显著上调。结论越鞠甘麦大枣汤(YG)显示出快速和持久的抗抑郁样作用,其抗抑郁功能与PKACREB-BNDF通路有关。     

针刺对抑郁症大鼠海马CREB mRNA、BDNF mRNA表达的影响

【目的】探讨针刺对抑郁症大鼠海马cAMP反应结合蛋白(CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的影响。【方法】选用SD成年大鼠32只随机分为空白组、模型组、针刺组和西药组(盐酸氟西汀,剂量为1.8 mg·kg-1·d-1),每组8只。空白组进行正常饲养,不给予其他处理;模型组大鼠采用长期不可预见性温和刺激法复制抑郁症模型;针刺组大鼠造模后针刺合谷穴和太冲穴,并加电针,每日1次,每次15 min,左右两侧穴位交替进行,持续21 d。西药组大鼠造模后以氟西汀灌胃,每日1次,持续3周。应激后22 d以颈椎脱臼法处死大鼠,取大鼠海马组织存储于-70℃备用,采用实时荧光定量PCR方法检测海马CREB mRNA、BDNF mRNA的表达。【结果】抑郁症模型组大鼠海马中的CREB mRNA、BDNF mRNA表达较空白组显著下降(P0.01);西药组和针刺组大鼠海马CREB mRNA表达较模型组显著升高(P0.05);西药组和针刺组大鼠海马BDNF mRNA表达与模型组比较,差异无统计学意义(P0.05)。【结论】针刺能改善抑郁症大鼠海马CREB mRNA表达,这可能是针刺抗抑郁作用的机理之一。     

磷酸二酯酶5 抑制剂淫羊藿次苷II 通过BDNF/TrkB/CREB 信号通路减轻淀粉样蛋白25-35 片段诱导的大鼠学习记忆减退作用及机制研究

目的：观察淫羊藿次苷Ⅱ（icariside Ⅱ,ICS Ⅱ）抗淀粉样蛋白25-35 片段（Aβ25-35）诱导的大鼠学习记忆减退模型和PC12 细胞损伤的作用,并探索其可能的作用机制。方法：60 只健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为5 组：假手术组、模型组、ICS II 低剂量组、ICS II 高剂量组、阳性药组,每组12 只。模型组大鼠双侧海马注射5 μL（2 μg·μL-1）Aβ25-35 诱导大鼠学习记忆减退模型,假手术组大鼠同法注入等体积生理盐水。造模后开始给药,给药组每日分别灌胃ICSII 低、高剂量,阳性药组每日灌胃西地那非,假手术组及模型组灌胃等体积蒸馏水,连续给药15 天。造模10 天后Morris 水迷宫检测大鼠学习记忆功能,连续5 天。行为学检测结束后,ELISA 法测定海马PDE 5 及cGMP 的含量;采用MTT 法和ELISA 法分别检测细胞的活力和细胞死亡情况,通过TUNEL染色检测细胞凋亡情况,通过流式细胞术和Mito-SOX 染色法分别测定细胞内和线粒体内活性氧含量。通过Westren Blot 检测Bcl-2、Bax、BDNF、TrkB 蛋白表达及active-Caspase-3 和p-CREB 的水平。结果：模型组较假手术组大鼠的逃避潜伏期明显延长,象限时间和穿越平台次数明显减少;海马PDE 5 水平增加,cGMP 水平降低,BDNF 及TrkB 蛋白表达明显降低,其相关调控信号CREB磷酸化水平明显降低。然而,ICS Ⅱ高剂量组大鼠逃避潜伏期较模型组显著缩短,象限时间和穿越平台次数明显增加;海马PDE 5 水平降低,cGMP 水平明显升高。BDNF、TrkB 蛋白表达明显增高,其相关调控信号CREB 磷酸化水平明显增加。ICS Ⅱ能够减少Aβ25-35 诱导的PC12 细胞氧化损伤,下调Bax 的表达及active-Caspase-3 的水平,并 上调BCl2、BDNF、TrkB 蛋白表达和CREB 的磷酸化水平。此外,TrkB 抑制剂ANA-12 可阻断ICS II 对Aβ25-35 诱导的PC12 细胞氧化损伤的保护作用。结论：在本实验条件下,ICS Ⅱ可明显减轻Aβ25-35 诱导的大鼠学习记忆减退和PC12 细胞凋亡,
其机制可能与降低PDE 5 和线粒体内活性氧的含量及上调BDNF/TrkB/CREB 信号通路有关。     

邻苯二甲酸二丁酯对原代培养海马神经元的毒性及机制

目的 本研究探讨邻苯二甲酸二丁酯（DBP）暴露对原代培养海马神经元的神经毒性及可能机制。方法 海马神经元原代培养4 d后将海马神经元暴露在含有终浓度为0.0（对照）、1 g/LDBP的培养基中，选取染毒24、48、96 h 3个时相点，免疫荧光及透射电子显微镜下观察DBP染毒后海马神经元轴突及超微结构的形态变化；膜片钳测定海马神经元的动作电位；cck-8检测DBP染毒后海马神经元活性。Western blot测定脑源性神经营养因子（BDNF）、神经肽Y（NPY）、雌激素受体β（ERβ）核酸及蛋白的表达情况。高效液相色谱串联质谱检测神经递质GABA的释放。结果 DBP染毒96 h后神经元网络稀疏、轴突长度变短（P<0.01），电镜下细胞核呈圆形，染色质聚集，细胞质空泡化；膜片钳测定发现DBP染毒96 h后细胞出现去极化漂移、放电频率增加（P<0.01）；cck-8检测发现DBP染毒24、48、96 h的细胞活性均低于同时间点正常对照组（P<0.01）。DBP染毒48、96 h的ERβ、BDNF、NPY蛋白表达显著低于对照组（P<0.05）。DBP染毒96 h后神经递质GABA的释放显著低于对照组（P<0.05）。结论 DBP染毒后可导致海马神经细胞形态受损，并导致功能改变，这可能与神经递质GABA参与的ERβ-BDNF-NPY信号通道受阻相关。