昆明地区慢性乙型肝炎患者替诺福韦酯耐药突变位点情况调查

目的分析昆明地区慢性乙型肝炎患者,不同HBV基因型和替诺福韦酯耐药相关位点的突变情况,并分析替诺福韦酯耐药位点突变与HBV-DNA量和HBe Ag之间的关系。方法选取昆明市第三人民医院2017年5月至2019年3月期间,住院及门诊就医的2707例慢性乙肝患者,采用Sanger测序法进行常见的核苷(酸)类治疗乙肝病毒的相关耐药基因突变位点检测,分析不同HBV基因型和替诺福韦酯耐药相关位点的突变情况,并分析替诺福韦酯耐药位点突变与HBV-DNA量和HBe Ag之间的关系。结果 2707例患者中,共有52例(1.92%,52/2707)患者检测到替诺福韦酯耐药相关位点的突变,变异率为1.92%。52例患者中HBV基因型以C型为主65.38%(34/52),B型次之占34.62%(18/52)。检出与替诺福韦酯(TDF)耐药相关位点突变(A194T、N236T、A181T/V),耐药不敏感性I (1.92%,52/2707)。其中A181T/V位点单独突变率最高(19.23%),N236T位点单独突变率次之(15.38%);检出与替诺福韦酯耐药相关位点单独变异情况,在HBV-DNA中、低水平两... 更多     

拉米夫定耐药慢性乙型肝炎患者HBV P基因区突变序列分析

目的 探讨拉米夫定耐药慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV P基因逆转录酶区(RT区)序列突变特点.方法 收集115例接受拉米夫定治疗的CHB患者的临床资料,采用PCR产物直接测序法检测HBV P基因RT区序列耐药变异.结果 人选的115例患者中103例检测到拉米夫定基因型耐药变异,最主要的耐药变异模式为rtL180M rtM204V和rtM204I,分别占58.3％和22.3％,其他耐药位点包括rtL80V/I、rtT184S和rtA200V,并在5例患者中检测到RT区3个位点的联合变异.结论 对拉米夫定治疗患者的耐药检测除了HBV P基因区常见的rtL180和rtM204位点变异外,还应考虑其他位点的联合耐药变异.     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎不同病毒基因型患者的疗效

目的探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）基因型与拉米夫定疗效的关系。方法选用200例HBV DNA、HbeAg阳性,血清丙氨酸氨基转氨酶（ALT）异常的慢性乙型病毒性肝炎患者,口服拉米夫定（100mg／d）24个月。采用荧光探针定量PCR（FQ—PCR）检测HBVDNA,分析乙肝病毒野生型YMDD及突变耐药型YIDD／YVDD,HBV基因分型。结果200例慢性乙肝患者C基因型占39％,B基因型占26％,D基因型占22％,B＋C混合基因型占10％,其他占3％,包括1例出现YIDD耐药株。口服拉米夫定12个月后,YMDD变异发生率为6％（12／200）;口服拉米夫定24个月后,YMDD变异发生率为15％（30／200）。结论本研究中乙肝患者HBV基因型以C型为主,其次为B型及D型：服用拉米夫定后大多数患者的DNA水平明显降低,拉米夫定治疗可加速病毒YMDD变异发生,且与服药时间呈正相关;YMDD突变与乙肝病毒的基因型无关。     

乙肝病毒拉米夫定耐药基因变异情况分析

目的了解本地区乙肝病毒拉米夫定耐药基因变异情况。方法对我院临床怀疑服用拉米夫定耐药的乙肝患者进行耐药基因检测,并将检测到的126例耐药基因各变异株进行统计分析。结果 126例样品中,YVDD变异株55例,占43.65%;YIDD变异株57例,占45.24%;YVDD、YIDD共生株14例,占11.11%。结论服用拉米夫定发生YVDD和YIDD的变异频率相似,二种变异共生株也存在11.11%的比例。     

慢性乙肝不同基因型与拉米夫定耐药关系的探讨

目的探讨连云港市慢性乙肝基因型分布及其与拉米夫定的耐药关系,以利于临床医生针对不同基因型的患者采取不同的治疗方法,使患者可以用很少的投入得到更好的治疗。方法对63例高HBV-DNA的慢性乙型肝炎患者作微流芯片基因型检测,并对其进行拉米夫定治疗48周后作YMDD检测。结果基因分型为B型12例,C型45例,B＋C混合型4例,未分型2例;其中B型YMDD检测阳性1例,C型12例,B＋C混合型及未分型1例。结论我市HBV基因型以C型为主,B型次之。C型拉米夫定耐药水平显著高于B型。     

山东地区乙型肝炎病毒感染者乙肝病毒基因型和亚型的分布

目的:了解山东地区乙型肝炎病毒（HBV）基因型和亚型的分布。方法：采用特异性引物巢式PCR法,检测140例HBV感染者基因型和基因亚型。结果：140例标本中,129例(92.1%) 可检出基因型,其中B基因型12例(9.3%),C基因型109例(84.5%),B/C混合基因型8例(6.2%),未检出A、D、E、F基因型。 在B基因型中,均为Ba基因亚型,未检出Bj亚型;C基因型中,C2基因亚型81例(74.3%),非C1/C2基因亚型28例(25.7%);8例B/C混合基因型中,Ba+C2亚型5例,Ba+非C1/C2基因亚型3例。结论：山东地区HBV感染者中,存在HBV基因B、C、B/C型,其中B型均为Ba亚型,C型中以C2基因亚型为主。     

乙型肝炎病毒基因耐药突变位点的异质性分析

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)核苷(酸)类药物(NAs)相关基因耐药突变的异质性及其临床意义.方法 收集249例接受NAs治疗且出现病毒学突破的慢性乙型肝炎(CHB)患者的HBV逆转录酶区(RT区)耐药突变位点数据、临床数据及随访数据,根据NAs耐药突变与否分为非耐药组和耐药组.结果 非耐药组和耐药组年龄、治疗后HB...     

PCR产物直接测序检测乙型肝炎病毒耐药变异位点

目的研究采用PCR产物直接测序技术在乙型肝炎病毒(HBV)耐药变异位点检测的特异性和实用性。方法 166例经过核苷类似物治疗至少2年以上的慢性乙肝患者,提取血清HBVDNA,采用巢式PCR扩增,将所得的PCR产物进行琼脂糖电泳检测,阳性PCR产物直接测序。对测序成功的样本进行耐药变异分析。结果 166例中有120例HBV DNA扩增电泳产物阳性,测序确定基因耐药变异位点有40例(24.1%,40/166);其具体分布为:L180M和M204V/I均变异17例(42.5%,17/40)、M204V/I变异lO例(25%,10/40)、N236T变异8例(20%,8/40)、L180M变异3例(7.5%,3/40)、A181V/T变异1例(2.5%,1/40)、A181V/T和N236T变异1例(2.5%,1/40)。120例患者测序确定基因耐药未测出变异位点有80例(66.66%,60/120)例。结论本院核苷类似物治疗2年以上患者,控制病毒疗效并不佳,有24%患者出现基因耐药。PCR产物直接测序法是目前检测HBV耐药变异的一种较好的方法,可用于专科医院临床检测。     

PCR产物直接测序检测乙型肝炎病毒耐药变异位点

摘要：目的研究采用PCR产物直接测序技术在乙型肝炎病毒（HBV）耐药变异位点检测的特异性和实用性。方法166例经过
核苷类似物治疗至少2年以上的慢性乙肝患者,提取血清HBV DNA,采用巢式PCR扩增,将所得的PCR产物进行琼脂糖电泳
检测,阳性PCR产物直接测序。对测序成功的样本进行耐药变异分析。结果166例中有120例HBV DNA扩增电泳产物阳性,
测序确定基因耐药变异位点有40例（24.1%,40/166）;其具体分布为：L180M和M204V/I均变异17例（42.5%,17/40）、M204V/I
变异10例（25%,10/40）、N236T变异8例（20%,8/40）、L180M变异3例（7.5%,3/40）、A181V/T变异1例（2.5%,1/40）、A181V/T和
N236T变异1例（2.5%,1/40）。120例患者测序确定基因耐药未测出变异位点有80例（66.66%,60/120）例。结论本院核苷类似
物治疗2年以上患者,控制病毒疗效并不佳,有24%患者出现基因耐药。PCR产物直接测序法是目前检测HBV耐药变异的一种
较好的方法,可用于专科医院临床检测。
     

治疗基线乙型肝炎病毒BCP区和PC区变异对拉米夫定耐药预测的探讨

目的探讨慢性乙型肝炎患者治疗基线乙型肝炎病毒(HBV)BCP区和PC区基因变异对拉米夫定耐药的影响。方法收集接受拉米夫定(100mg/片)初治2年内耐药的26例(耐药组)和2年内无耐药的16例(对照组)慢性乙型肝炎患者治疗基线的血清标本,采用型特异性多引物对巢式PCR法检测HBV基因型,用PCR产物直接测序技术检测治疗基线HBV的BCP区、PC区和P区变异位点,对发生频率较高的两组位点变异进行统计学分析。结果两组病人无1例发生P区rt204/180变异;在HBV BCP/PC区突变中,耐药组与对照组在点突变A1762T(38.48%vs 68.75%,P>0.05)、G1764A(26.92%vs50.00%,P>0.05)和G1896A(19.23%vs 18.75%,P>0.05)差异无统计学意义;对照组在点突变C1799G(43.75%vs 0,P<0.05)、T1802C(18.75%vs 0,P<0.05)、G1838A(25.00%vs 0,P<0.05)、A1846C(37.50%vs 0,P<0.05)、C1856T(31.25%vs 0,P<0.05)、G1888A(25.00%vs 0,P<0.05)明显高于耐药组。结论治疗基线HBV BCP区的A1762T/G1764A变异和PC区的G1896A变异对拉米夫定的2年疗效影响不大;治疗基线HBV BCP区的C1799G、T1802C、G1838A、A1846C的变异和PC区的C1856T、G1888A的变异可能是接受拉米夫定初始治疗获得长期维持应答的预测因素之一。     

乙型肝炎病毒基因型、拉米夫定耐药突变的RFLP检测及临床相关性分析

目的对乙型肝炎（简称乙肝）肝病毒进行基因分型,检测患者服用拉米夫定后血清中乙肝病毒突变情况,并进行临床相关性分析。方法设计乙肝病毒突变及基因分型特异性引物和酶切位点,系用限制性片断长度多态性（RFLP）分析法检测突变类型并对乙肝病毒进行基因分型。结果在115份被检测的血清标本中,75份（65%）标本为野生型,18份（15.7%）标本为YIDD突变,10份（8.7%）标本为YVDD突变;在混合型突变中,YIDD+YVDD 存在于6份（5.2%）标本中,YMDD+YIDD存在于4份（3.5%）标本中,2份（1.7%）标本为YMDD+YVDD混合突变型;未检测到YSDD突变型。在180位点的突变检测中,98份（85%）标本为野生型,5份(4.3%)标本为rtL180M,L180M+M204I存在于8份(6.96%)标本中,另4份(3.5%)标本为L180M+M204V混合突变型。在115份标本中,102份标本为C基因型,13份标本为B基因型,未发现其他基因型。通过χ²检验,乙肝病毒YMDD突变与患者的性别、血清DNA水平、病毒基因型之间没有相关性(P＞0.05),而乙肝病毒YMDD变异与患者服用拉米夫定的时间长短有相关性（P＜0.05）,用药时间越长,发生突变的几率越大。乙肝患者服用拉米夫定后,180位点的突变和204位点突变具有相关性（P＜0.05）。结论采用RFLP分析法可以有效地检测乙肝病毒YMDD突变并对乙肝病毒进行基因分型。     

乙型肝炎病毒P区耐药突变与基因型及临床相关性分析

目的探讨HBV的P基因耐药突变的分布特征以及与基因型、临床的相关性。方法对慢性乙肝患者的血液样本进行P基因核苷类似物作用靶区进行聚合酶链反应,扩增产物进行测序,比较序列差异性,同时对其进行基因分型检测。结果 79例乙型肝炎患者共检测出B基因型61例（79.2%）,C基因型18例（20.8%）。通过对HBV-DNA进行P区测序表明耐药突变以拉米夫定耐药为主,为27例（51.9%）;其中B基因型对拉米夫定和阿德福韦的耐药率分别为31.1%（19/61）和9.8%（7/61）,二者交叉耐药率为6.6%（4/61）;而C基因型对拉米夫定和阿德福韦的耐药率分别为44.4%（8/18）和22.2%（4/18）,二者交叉耐药率为16.7%（3/18）,明显高于B型基因（P〈0.05）。慢性肝炎患者中,B型显著多于C型,为89.4%（59/66）;肝癌、肝硬化等重症中,B型感染者则明显少于C型感染者,为15.4%（2/13）（P〈0.05）。结论 79例患者HBV基因型以B型为主,C型次之,耐药突变主要以拉米夫定耐药为主,临床与基因型及耐药突变有显著性关联。     

天津地区丙型肝炎病毒基因型与临床的相关性研究

目的：研究丙型肝炎病毒（HCV）基因型,了解天津地区丙型肝炎的分布情况。方法：收集252例丙型肝炎患者的血清标本,采用基因测序法进行HCV基因型的检测,并对基因型与其他临床指标进行分析。结果：252例丙型肝炎患者分别感染1b、1a、1c、2a、2i、3a、3b、4a和6a共9种基因亚型,其中1b型占59．9％,其次是3a型,占12．7％。对1型、2型、3型和4型4种基因型进行肝功能、HCVRNA病毒载量比较,经单因素方差分析有明显统计学差异（P〈0．05）;对HCV感染的不同肝病程度患者的基因型分布进行分析,无显著性差异（P〉0．05）。结论：天津地区丙型肝炎病毒感染以1b型为主,其次为3a型。HCV基因型与HCVRNA病毒载量、肝脏损伤指标有明显统计学差异。     

杭州地区部分乙型肝炎患者HBV基因型分析

目的了解浙江杭州地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布,初步评价基因芯片技术在HBV基因分型中的应用特点。方法设计多条寡核苷酸探针,用点样仪将探针固定于芯片特定位置上,并与PCR扩增的106例HBV感染者血清HBV基因相应区段杂交,经过显色反应,分析杂交结果,判定基因类型。结果106例HBV感染者中,基因型B者37例,占34.91%,基因型C者69例,占65.09%,未发现其他基因型。结论杭州地区存在HBV基因型B、C型,基因型A、D、E、F是否存在须扩大样本,进一步深入研究。基因芯片技术在同类检测方法中具有灵敏、准确、快速的优势,适用于临床。     

高通量测序检测拉米夫定抗乙肝病毒治疗的耐药突变

目的：建立一种高通量、快速检测拉夫米定耐药突变的新方法,指导临床抗病毒治疗药物的选择。方法：选取 150例慢性乙型肝炎患者血清标本为研究对象,乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）DNA定量结果均阳性（拷贝数≥１03拷贝/ml）,设计针对聚合酶P区的扩增引物,经 PCR扩增及磁珠分离,制备焦磷酸测序单链模板,并在 PyroMark ID遗传分析系统上进行焦磷酸测序,检测拉夫米定耐药突变位点。结果：PCR扩增得到 HBV P区产物,焦磷酸测序检测突变频率具有极高的灵敏性、特异性、稳定性的高通量的特征且与拉夫米定用药时间存在相关性。用药时间越长,突变率越高,易出现耐药。结论：新型、高通量焦磷酸测序法用于拉米夫定耐药突变检测,能满足临床批量用药检测及治疗方案设计的需要。     

河北省石家庄地区HBV基因分型及耐药突变分析

目的 探讨石家庄地区经各种核苷(酸)类似物治疗的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因型、基因耐药突变位点分布和基因耐药情况.方法 选择CHB患者1157例,收集患者的基本资料,采用基因测序技术检测患者基因分型和基因耐药突变位点,...     

认识乙型肝炎耐药

随着核苷类似物用于慢性乙型肝炎治疗和治疗方案的不断优化，其对乙型肝炎的疗效得到肯定，但耐药成为困扰患者和医生的问题。乙型肝炎病毒（HBV）是一个高变异的病毒，在它逆转录复制过程中，因RNA聚合酶和逆转录酶缺乏校正功能，可使病毒在复制过程中发生一个或多个核苷酸的变异。HBV可以在慢性持续性感染过程中自然变异；     

昆明地区幽门螺杆菌耐药情况分析

幽门螺杆菌（helicobacter pylori,Hp）的根除治疗在临床上已有20余年的历史,在我国由于抗生素的大量和不规范应用,Hp的耐药菌株不断出现,耐药率日渐增高,根除率大大降低,Hp对抗生素耐药已成为治疗失败的主要原因^[1,2]．由于受地域、经济及生活习惯等多因素的影响,Hp的具体耐药情况存在地域差异,本研究通过检测昆明地区就医人群Hp对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林的耐药情况并对其进行分析,了解Hp对上述抗生素的耐药现状,以指导本地区临床医师在根除Hp治疗中合理选择抗生素．     

武威地区丙型肝炎基因分型情况分析

目的:了解武威地区丙型肝炎基因分型特征,为HCV感染者的个体化治疗提供科学依据.方法:实时荧光定量RT-PCR检测70例抗-HCV阳性血清标本,并对血清标本PCR扩增基因片段,测定核苷酸序列进行基因分型.结果:70例标本中HCV1b型38例,占54%;HCV2a型21例,占30%;HCV1b/2a混合型9例,占13%;HCV2b型2例,占3%.结论:武威地区HCV基因型主要为1b型,其次为2a型,同时存在1b/2a混合型和2b型,与相邻城市HCV基因型分布比较有一致和差异.