核苷酸结合寡聚化结构域样受体3炎症小体与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病(AD)是一种慢性神经退行性疾病,发病原因至今未明。聚集在大脑内部的β淀粉样蛋白斑块是AD的主要病理特征之一,然而靶向细胞外β淀粉样蛋白斑块的药物均未能治愈疾病。固有免疫应答与神经炎症在AD的发病及进展中发挥重要作用。小胶质细胞作为中枢神经系统中的巨噬细胞,参与细胞外β淀粉样蛋白沉积、细胞内tau蛋白形成神经原纤维缠结和神经元损伤过程。越来越多的研究显示,小胶质细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎症小体的激活与AD的发生和发展相关,提示该信号通路可能是治疗AD的新靶点。本文总结了NLRP3炎症小体激活与调节在AD中的作用机制及以该通路为靶标治疗AD的研究现状,以期为未来该领域的研究提供参考。     

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性体的调控机制

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性体是介导人体固有免疫反应的重要蛋白,其可被广泛的外源性和内源性刺激物所激活,并通过胱天蛋白酶1(caspase-1)信号通路调节白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的活化,从而在许多炎症性疾病的发病过程中发挥着重要作用。近年来针对NLRP3炎性体的调控机制做了大量的研究,发现了许多对NLRP3炎性体具有调控作用的物质,这些研究有助于加深对炎症性疾病的认识和治疗。该文对NLRP3炎性体的组成结构、激活和调控机制予以综述。     

核苷酸结合寡聚化结构域样受体3炎症复合体在疾病中的作用

核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎症复合体属于一种常见的模式识别受体,在调节先天免疫和保护性免疫中均发挥重要作用。近年来,大量文献报道,NLRP3炎性复合体及其激活的下游信号级联,例如白细胞介素(IL)1β、IL-18等,可以有效地阻止病毒和微生物的入侵,并帮助修复损伤细胞和组织。然而,近来也有文献报道IL-1β等活动的异常调节可以参与多种疾病的发生、发展。炎症复合体通过激活一系列下游信号转导通路,参与多种炎症疾病的发展。因此,NLRP3炎症复合体在机体疾病的发生中的起关键作用。     

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎症小体在脑卒中后认知障碍中的研究进展

脑卒中后认知障碍(PSCI)是脑卒中患者常见的并发症,严重影响患者的生活质量。目前,PSCI在临床治疗中尚未发现有效的针对性治疗措施。大量研究证实核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的活化在PSCI中起关键作用,且对其进行的许多抑制性治疗显示出了改善认知障碍的功效。为此,本文总结了NLRP3炎症小体的活化和影响因素及其与PSCI的关系,发现在PSCI的细胞和动物模型中,针对NLRP3或其炎症小体成分的抑制措施可以减轻炎性反应和相应的病理特征,从而促进其认知功能的恢复,因此,靶向NLRP3炎症小体可能是PSCI治疗的新趋势。然而到目前为止,尽管许多药物和治疗措施已成功鉴定出能够抑制NLRP3炎症小体的活化,但其在临床中的治疗效果和安全性仍有待进一步验证。     

云南省宣威地区肺癌患者的炎症小体核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3基因多态性

目的 探讨云南省宣威地区肺癌患者的炎症小体核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)基因多态性及其临床意义.方法 纳入来自云南省宣威地区的80例肺癌患者(观察组)及100例健康体检者(对照组).收集所有研究对象的基本资料,检测外周血白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平,使用TaqMan探针法对NLRP3进行单...     

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用

目的 探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性体在2型糖尿病并发冠心病过程中的作用.方法 选取第三军医大学新桥医院心血管内科的住院患者共130例,分为单纯冠心病组(n=40)、单纯2型糖尿病组(n=20)、2型糖尿病并发冠心病组(n=40)及正常对照组(n=30).分离外周血单个核细胞及血浆.采用RT-qPCR、Western blot分别检测各组外周血单个核细胞中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein,ASC)、半胱天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1) mRNA及蛋白表达情况,ELISA法检测各组血浆中IL-1β含量.结果 单纯冠心病组、单纯2型糖尿病组及2型糖尿病并发冠心病组外周血单个核细胞中NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平均较正常对照组显著增高(P＜0.05),其中,2型糖尿病并发冠心病组ASC、Caspase-1 mRNA在外周血单个核细胞中的表达显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P＜0.05),而2型糖尿病并发冠心病组NLRP3蛋白在外周血单个核细胞中的表达显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P＜0.05).同时,测得单纯冠心病组、单纯2型糖尿病组及2型糖尿病并发冠心病组血浆中IL-1β含量分别为(24.05±1.00)、(22.86±1.66)、(26.85±1.45) ng/L,较正常对照组(12.53±2.79) ng/L均显著升高(P＜0.05),其中,2型糖尿病并发冠心病组血浆中IL-1β含量显著高于单纯冠心病组及单纯2型糖尿病组(P＜0.05).结论 NLRP3炎性体的异常激活可促进2型糖尿病并发冠心病病理过程的发生、发展,其可能成为防治2型糖尿病并发冠心病的新靶点.     

Kruppel样因子15通过调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3表达影响胰岛素抵抗实验研究

目的:探讨Kruppel样因子15(KLF15)是否通过调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)表达影响胰岛素抵抗。方法:建立小鼠模型和细胞模型,细胞蛋白电泳检测细胞内目的蛋白表达,聚合酶链反应(PCR)检测KLF15表达量,Western blot检测NLRP3相对表达量,免疫组化法检测组织KLF15表达,免疫荧光染色检测细胞增殖相关蛋白。结果:在链脲佐菌素(STZ)诱导小鼠模型中,小鼠诱导后1～4个月,血清KLF15 mRNA表达量水平被抑制。用10、20、40 mmol/L葡萄糖诱导HepG2细胞24 h后,细胞内KLF15 mRNA表达量水平随葡萄糖浓度升高而减少(均P<0.05)。小鼠组织中,KLF15、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、胰岛素受体底物1(IRS1)在空白组表达最高,其次分别为1、2、4个月组;NLRP3在空白组表达最低,1、2、4个月组依次升高(均P<0.05)。在体外模型中,si-NLRP3质粒可以降低NLRP3表达量;抑制NLRP3表达可以减少干扰素-γ(INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL...     

血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3水平与心力衰竭患者心电图QRS波时限关系

目的:探讨心力衰竭(HF)患者血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)水平与心电图QRS波时限的关系。方法:选择高血压性心力衰竭患者66例作为心力衰竭组,同期选择单纯高血压患者66例作为对照组,心电图检查两组QRS波时限,检测血清NLRP-3表达水平并进行相关性分析。结果:心力衰竭组的QT间期和QRS波时限都高于对照组(均P<0.05)。心力衰竭组的血清NLRP3水平高于对照组(P<0.05)。在心力衰竭组中,Pearson分析显示血清NLRP3水平与QRS波时限存在相关性(r=0.711,P=0.000)。受试者工作特征曲线(ROC)分析显示血清NLRP3水平与QRS波时限诊断心力衰竭的曲线下面积分别为0.762和0.777,灵敏度与特异度都超过了70.0%。Logistic回归分析显示血清NLRP3水平与QRS波时限均为导致心力衰竭发生的重要因素(均P<0.05)。结论:心力衰竭患者多伴随有血清NLRP3的高表达与心电图QRS波时限延长,两者存在相关性,可共同影响与预测心力衰竭的发生。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3水平与肺功能、病情程度和预后的关系

目的 分析慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)水平与肺功能、病情程度和预后的关系。方法 选择邯郸市中心医院2018年1月至2019年6月收治的COPD患者102例为研究对象(观察组),另选择同期来院体检健康者40例作为对照组。根据预后情况将观察组患者又分为死亡组(n=37)和存活组(n=65)。观察组患者于入院第2天、对照组受试者于体检当日采用肺功能仪测定第一秒用力呼气容积(FEV₁)占预计值(Pred)的百分比(FEV₁%/Pred)、FEV₁占用力肺活量(FVC)的百分比(FEV₁/FVC)。观察组患者于入院第2天清晨、对照组受试者于体检当日抽取空腹外周静脉血约5 mL,采用酶联免疫吸附试验法测定血清中NLRP3水平。结果 观察组患者血清中NLRP3水平显著高于对照组,FEV₁%/Pred和FEV₁/FVC显著低于对照组(P<0.05)。随着COPD患者病情严重程度分级的增加,患者血清中NLRP3...     

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3介导细胞焦亡在痛风性关节炎中的作用机制研究

目的:探讨血清核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化Gasdermin D(GSDMD)蛋白介导的细胞焦亡在痛风性关节炎中的作用及其机制.方法:分别收集40例急性痛风性关节炎患者(试验组)和40例健康体检者(对照组);采用血常规检测仪和全自动生化分析仪检测两组血清中生化指标(肾功、血脂)及白细胞计...     

獐牙菜苦苷可减轻糖尿病大鼠的周围神经痛:基于抑制NOXS/ROS/NLRP3通路实验

目的 基于NOXS/ROS/NLRP3信号通路探讨獐牙菜苦苷对糖尿病周围神经痛（DPN）大鼠的治疗作用及分子机制。方法 采用链脲佐菌素(STZ)法构建大鼠模型,造模成功后第1、7、14天分别按大鼠体质量腹腔注射干预制剂。将32只SD大鼠随机分为4组：空白对照组、DPN模型组、獐牙菜苦苷治疗组、NOXS抑制剂治疗组。空白对照组：给予10 mL/kg生理盐水;DPN模型组：给予10 mL/kg生理盐水;獐牙菜苦苷治疗组：给予5 mg/kg獐牙菜苦苷;NOXS抑制剂治疗组：给予10 mL/kg二苯基氯化碘盐。在给药完毕30 min后,对各组大鼠进行触觉过敏试验,采用ELISA检测NOXS/ROS/NLRP3以及炎性因子表达水平,采用Western blot方法检测各组大鼠脊髓组织的NOXS/ROS/NLRP3表达水平。结果 与空白对照组比较,DPN模型组大鼠在造模后出现痛觉过敏（P<0.001）,促炎因子TNF-α以及IL-6表达升高（P<0.001）,抑炎因子TGF-β表达下降（P<0.001）,NOXS/ROS/NLRP3通路各因子表达升高（P<0.001）。獐牙菜苦苷干预后有效减轻触觉过敏（P<0.001）,且抑制促炎因子TNF-α（P=0.03）以 及IL-6（P=0.002）的表达,促进抑炎因子TGF-β的表达（P=0.04）;并且下调NOXS（P<0.001）、ROS（P<0.001）以及NLRP3（P= 0.002）通路各因子的表达水平。獐牙菜苦苷对炎性因子及NOXS/ROS/NLRP3通路各因子的表达影响与NOXS抑制剂治疗组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论 獐牙菜苦苷有效缓解触觉过敏,治疗DPN,通过抑制NOXs/ROS/NLRP3信号通路表达,纠正DPN炎性因子失衡是其分子机制之一。     

实验性糖尿病大鼠坐骨神经损伤后神经再生微环境变化

目的观察实验性糖尿病大鼠在坐骨神经挤压伤后神经生长相关蛋白的表达水平;探讨神经元分子微环境变化对神经再生修复的重要意义。方法制作实验性糖尿病大鼠模型,在此基础上制作双侧坐骨神经挤压伤模型。观察神经挤压损伤后7、14、21和28d大鼠背根神经节TUNEL标记阳性细胞百分比变化;利用免疫组化和蛋白印迹技术(Western-blot),观察神经生长相关蛋白(GAP-43)和神经生长因子受体(trkA)表达水平变化。结果实验性糖尿病大鼠坐骨神经损伤后,所有时程背根神经节细胞均有较多的TUNEL标记细胞,但以14～21d显著;各时程背根神经节细胞GAP-43和trkA蛋白均有一定水平的表达,但其表达水平低于非糖尿病组。结论实验性糖尿病大鼠坐骨神经背根神经节存在凋亡应激,其神经再生相关基因表达体系不完整,对神经损伤的再生修复能力下降。     

NLRP3炎症体与糖尿病并发症的研究进展

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症体包含NLRP3、细胞凋亡相关的斑点样蛋白质和caspase-1前体,可以通过激活胱天蛋白酶caspase-1,促进白细胞介素(IL)1β和IL-18的成熟和分泌,引起炎性反应。糖尿病及其并发症(如动脉粥样硬化、糖尿病肾病)通过高血糖、高胆固醇血症、高尿酸血症等激活NLRP3炎症体,引起IL-1β、IL-18水平升高,诱发炎性反应。目前研究发现,减少对NLRP3炎症体激活的刺激,可以预防和减轻糖尿病并发症,为糖尿病及其并发症的防治开拓了新的空间。     

电针对糖尿病大鼠坐骨神经NGF mRNA和IGF-1 mRNA表达的影响

目的观察电针对糖尿病大鼠坐骨神经组织中神经生长因子(NGF)mRNA和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)mRNA表达的影响,初步探讨电针治疗糖尿病周围神经病变的机制。方法SD大鼠115只,随机分成空白组35只、造模组80只。后者经腹腔注射链脲佐菌素(STZ)造模,成模动物共73只。随机抽取70只,分成模型组与电针组各35只,电针组每天电针45min。所有动物分批于试验开始后第1、2、4、6及10周后处死,取坐骨神经,抽提总RNA。采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测坐骨神经组织中NGF、IGF-1的水平。结果模型组NGFmRNA及IGF-1mRNA的表达水平比空白组显著降低(P0.05)。电针组NGFmRNA及IGF-1mRNA的表达随电针的干预时间而逐渐升高;第4周NGFmRNA明显高于空白组和模型组,差异有统计学意义(P0.05),至第10周时仍维持较高水平,明显高于空白组和模型组,差异有统计学意义(P0.05);在第2周时电针组IGF-1mRNA的表达开始显著上升,第4周达到高峰,明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05),至第10周时仍维持较高水平,明显高于空白组和模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论NGFmRNA和IGF-1mRNA在糖尿病大鼠坐骨神经中表达降低,电针刺激促使大鼠坐骨神经的NGFmRNA和IGF-1mRNA的表达增加可能是电针治疗糖尿病神经病变的机制之一。     

DPN大鼠坐骨神经NGF的动态表达及胰岛素和人NGF的干预作用

目的观察糖尿病多发性神经病(DPN)大鼠坐骨神经NGF的动态表达以及胰岛素和人神经生长因子(hNGF)的干预作用。方法以链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,通过RT-PCR和免疫组化技术,观察造模后4和8周大鼠坐骨神经NGF mRNA和蛋白的表达,并观察DPN4周时用胰岛素或hNGF干预4周后坐骨神经NGF mRNA和蛋白的表达。结果NGF mRNA表达在DPN4周无明显改变,8周时明显减少;NGF蛋白表达在DPN4周和8周均减少。hNGF干预能增加DPN大鼠坐骨神经NGF mRNA和蛋白表达,胰岛素则无明显调节作用。结论DPN大鼠坐骨神经NGF表达减少,外源性NGF可弥补这种缺陷。     

推拿对坐骨神经损伤大鼠NT-3、TrkC的影响

目的研究推拿对坐骨神经损伤大鼠感觉功能及NT-3、TrkC表达的影响。方法采用夹持法建立坐骨神经损伤模型,将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、模型对照组、推拿组,以按摩推拿手法模拟仪进行干预,通过热痛阈实验观察各组大鼠行为学变化;通过免疫组织化学染色观察各组大鼠背根节内NT-3、TrkC表达情况。结果模型组、模型对照组大鼠的PWL值与正常组相比明显延长,推拿组与模型组相比PWL值明显缩短,与正常组相比无显著差异。模型组、模型对照组及推拿组NT-3免疫组化表达与正常组比较均有明显提高,推拿组与模型组比较有显著性差异(P0.05)。结论中医推拿可以改善神经损伤大鼠的行为学表现,通过促进NT-3及其受体TrkC的表达,发挥抑制细胞凋亡,对神经元胞体和突起的生长产生积极的影响,促进损伤神经的修复,改善坐骨神经损伤大鼠的感觉功能。     

银杏叶提取物对坐骨神经损伤后运动神经元超微结构的影响

目的　研究银杏叶提取物 (EGb761)对大鼠坐骨神经损伤后脊髓前角运动细胞超微结构的影响。方法　SD大鼠 18只 ,随机分成两组 ,银杏叶提取物 (EGb761)组和生理盐水 (SAL)组。切断大鼠坐骨神经并将神经远近端分别反折结扎 ,术后经腹腔分别注射EGb761( 10 0mg (kg·d)和同体积的SAL ,于 2、4、6周取材L4～ 6 节段脊髓 ,电镜下观察前角大型运动神经元细胞核及细胞器的超微结构形态变化 ,用体视学方法计算每张照片线粒体、内质网及溶酶体面积密度变化。结果　两组脊髓前角大型运动神经元超微结构均发生损伤性改变 ,实验组超微结构形态以及线粒体、内质网及溶酶体体积密度变化程度明显好于对照组。结论　银杏叶提取物能减轻大鼠坐骨神经损伤后前角运动神经元超微结构的损伤性改变 ,对运动神经元有一定的保护作用     

层粘连蛋白和纤连蛋白在大鼠视神经和坐骨神经的表达

目的 观察层粘连蛋白(LN)和纤连蛋白(FN)在大鼠不同发育时期视神经及坐骨神经的表达，探讨视神经与坐骨神经细胞外基质的差异。方法 50只SD大鼠按出生后天数分成5组，取视神经和坐骨神经，免疫组织化学方法和计算机图像分析技术，测定大鼠视神经和坐骨神经LN和FN表达。结果 LN和FN在坐骨神经表达水平明显高于视神经，出生后7d组明显高于其他年龄组。结论 大鼠视神经和坐骨神经LN和FN表达差异有显著性。     

“双固一通”灸法对DPN大鼠坐骨神经传导速度和超微结构影响的研究

目的:观测双固一通灸法对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经传导速度和超微结构的影响,探讨双固一通灸法对糖尿病周围神经病变的防治作用。方法:大鼠分为正常对照组(A组)、糖尿病周围神经病变模型组(B组)、模型双固一通灸法15min防治组(C组)和模型双固一通灸法30min防治组(D组)。治疗8周后,用血糖仪检测各组血糖,用神经电生理和透射电镜方法检测大鼠坐骨神经传导速度和神经组织超微结构。结果:与正常组相比,B组血糖水平升高,神经传导速度明显减慢;与模型组相比,C组血糖水平降低,坐骨神经传导速度加快,差异显著(P<0.05);D组血糖水平和坐骨神经传导速度都有明显改善,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。同时,电镜观察C、D组坐骨神经有髓纤维髓鞘损伤程度均有明显减轻。结论:双固一通灸法对糖尿病周围神经病变具有防治作用。