Beclin-1、LC3和mTOR在肺癌中的表达及意义

目的:探究自噬蛋白在良性胸腔积液和肺癌引起的恶性胸腔积液中的表达有无差异.方法:采用实时荧光定量PCR技术和Western-blot技术检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3和mTOR在良性胸腔积液标本和恶性胸腔积液标本中的表达及意义.结果:自噬相关蛋白Bec-lin-1和LC3在恶性积液组中的表达量均低于良性积液组,差异具有统计学意义(P<0.05);mTOR在恶性积液组中表达量高于良性积液组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:联合检测Beclin-1、LC3和mTOR三种蛋白有助于临床化验室对胸腔积液进行性质鉴别,也有利于肺癌的早期筛查,可为临床诊断和治疗提供新思路.     

LC3Ⅱ、Beclin1在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其与相关病理因素的关系

目的 通过检测正常宫颈组织、宫颈低级别上皮内瘤变(LSIL)组织、宫颈高级别上皮内瘤变(HSIL)组织和宫颈鳞状细胞癌组织中自噬基因LC3Ⅱ和Beclin1的表达水平,分析LC3Ⅱ、Beclin1与宫颈鳞状细胞癌临床病理特征之间的关系及其相关性,探讨自噬基因在宫颈鳞状细胞癌发生、发展中的作用及其对患者生存的影响.方法 ...     

自噬相关蛋白 LC3-Ⅱ在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的：本研究检测微管轻链Ⅰ蛋白3-Ⅱ型(LC3-Ⅱ)在不同卵巢肿瘤组织中的表达情况,探讨其与浆液性卵巢癌及粘液性卵巢癌发生、发展的相关性和意义。方法选取204例上皮性卵巢肿瘤标本,其中,卵巢浆液性囊腺瘤46例,交界性浆液性肿瘤28例,浆液性囊腺癌40例,黏液性囊腺瘤32例,交界性黏液性囊腺瘤30例,黏液性囊腺癌28例,另选取正常卵巢上皮组织28例作为对照。使用 SP 法检测正常卵巢上皮组织、上皮性卵巢肿瘤组织中 LC3-Ⅱ的表达,并结合浆液性癌、黏液性癌临床病理因素进行分析。结果①正常卵巢上皮中 LC3-Ⅱ无表达,卵巢良性浆液性囊腺瘤、交界性浆液性肿瘤及浆液性癌中 LC3-Ⅱ的阳性率分别为4．5%、71．0%、95．0%,交界性浆液性肿瘤和浆液性癌中 LC3-Ⅱ的表达明显高于良性浆液性囊腺瘤,差异有统计学意义(P <0．01)。卵巢良性黏液性囊腺瘤、交界性黏液性肿瘤及黏液性癌中 LC3-Ⅱ的阳性率分别为6．7%、66．7%、92．9%,交界性浆液性肿瘤和浆液性癌中 LC3-Ⅱ的表达明显高于良性浆液性囊腺瘤,差异有统计学意义(P <0．01);②在40例卵巢浆液性癌、28例卵巢黏液性癌中,LC3-Ⅱ表达与患者年龄、FIGO 分期及病理学分级等临床病理特征均无关。结论 LC3-Ⅱ在卵巢上皮性交界性肿瘤、癌中表达增高,自噬活性增强,可能与卵巢上皮性恶性肿瘤的进展有关。     

自噬相关基因Beclin-1和MAP1LC3表达与口腔癌生物学特征的关系

目的:研究自噬相关基因Beclin-1和MAP1LC3表达与口腔癌生物学特征的关系。方法:取口腔癌组织和癌旁组织,检测Beclin-1和MAP1LC3的mRNA表达量;培养舌癌细胞株CTST-2和正常颊粘膜的原代上皮细胞,检测自噬标志分子(Beclin-1、MAP1LC3)以及促凋亡基因(P53、Caspase-3)、抗凋亡基因(生存素、Bcl-2、Bmi-1)的mRNA表达量。结果:舌癌、颊粘膜癌、牙龈癌、口底癌组织中Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量显著低于相应的癌旁组织;舌癌细胞CTST-2中Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量均低于正常粘膜细胞;舌癌细胞CTST-2中P53、Caspase-3的mRNA含量均低于正常粘膜细胞,与Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量呈正相关;CTST-2中生存素、Bcl-2、Bmi-1的mRNA含量均高于正常粘膜细胞,与Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量呈负相关。结论:口腔癌中自噬相关基因Beclin-1和MAP1LC3的表达量异常降低且与癌细胞的促凋亡基因、抗凋亡基因的表达具有显著相关性。     

自噬基因Beclin-1在前列腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨自噬基因Beclin-1在前列腺癌组织中的表达及其相关临床意义,并分析其与根治性前列腺切除术后生化复发的相关性.方法 采用免疫组化Super Vision两步法检测132例前列腺癌组织及癌旁组织中Beclin-1的表达,并分析其与相关临床因素的关系.结果 在前列腺癌组织及癌旁组织中Beclin-1的表达率分别为38.6％及54.5％,差异有统计学意义(P=0.01).Beclin-1在Gleason评分中表现为评分越高,阳性表达率越低(P=0.011).前列腺癌组织中Beclin-1的表达与不同年龄(P=0.138)、家族史(P=0.686)及是否患者前列腺炎病史(P=0.895)等临床因素比较,差异无统计学意义.但在有无淋巴结转移(P =0.017)、有无骨转移(P =0.002)及行根治性前列腺切除术后有无生化复发(P =0.024)间差异均有统计学意义.结论 自噬基因Beclin-1在前列腺癌组织中表达下调,并与淋巴结转移、骨转移及生化复发有关,其表达下调可能参与前列腺癌的发生、发展.     

脓毒症患者外周血淋巴细胞自噬相关基因 Beclin-1和LC3的变化研究

目的 观察脓毒症患者外周血淋巴细胞自噬的变化,并探讨其临床意义。 方法 选取10例健康人、20例普通感染患者和20例脓毒症患者,分别设为H组、I组和S组,根据预后再将S组亚组分析分为存活组(14例)和死亡组(6例),收集年龄、性别、感染部位、原发病、白细胞(WBC)、血小板(PLT)、谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)、白蛋白、血糖和APACHEⅡ评分等资料,同时抽取外周血分离淋巴细胞,检测Beclin-1和LC3 mRNA相对表达量。 结果 3组年龄、性别、原发病和感染部位比较差异无统计学意义(均P>0.05),3组WBC、PLT、ALT、Cr、白蛋白和血糖比较差异有统计学意义(均P<0.01);I组和S组APACHEⅡ评分比较差异有统计学意义(P<0.01);3组外周血淋巴细胞中Beclin-1和LC3 mRNA的相对表达量比较差异有统计学意义(均P<0.01),存活组和死亡组之间Beclin-1和LC3 mRNA的相对表达量比较差异有统计学意义(均P<0.01);APACHEⅡ评分与Beclin-1具有线性负相关(r=-0.452,P<0.001),APACHEⅡ评分与Beclin-1之间的线性模型方程式:Y=-20.83+41.67X;APACHEⅡ评分与LC3具有线性负相关(r=-0.641,P<0.001),APACHEⅡ评分与LC3之间的线性模型方程式:Y=-6.25+62.5X。在诊断脓毒症方面,Beclin-1:ROC曲线下面积为0.791,标准误为0.070,P<0.001,LC3:ROC曲线下面积为0.851,标准误为0.066,P<0.001。 结论 脓毒症外周血淋巴细胞自噬水平明显降低,可以反映脓毒症的免疫状态,并且在临床上可以作为普通感染和脓毒症的判断指标,为脓毒症诊断提供新思路。      

Beclin1和 LC3在胃癌组织中的表达水平和临床意义

目的：探讨胃癌相关组织中自噬相关基因 Beclin1和微管相关蛋白轻链 LC3的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化 PV 法检测61例胃癌组织及相应的癌旁组织中 Beclin1和 LC3的表达水平,分析其与胃癌多种临床病理参数的关系。结果：免疫组化染色结果示,胃癌中 Beclin1的阳性表达率为37.7%,LC3的阳性表达率为41.0%,癌旁组织的阳性表达率分别为98.4%、93.4%,癌组织明显低于癌旁组织;Beclin1和 LC3的表达水平与胃癌的淋巴结转移、浸润深度、分化程度、肿瘤 TNM分期有关,而与年龄、性别和肿瘤生长部位无相关性;胃癌组织中 Beclin1和 LC3表达成正相关。结论：胃癌组织中 Beclin1和 LC3的表达率显著低于癌旁组织,两者之间的关系呈正相关,两者均与胃癌的发生发展有重要的关系。利用自噬调节药物对胃癌的治疗也许具有可行性。     

电针对脑缺血再灌注大鼠自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Bec-lin1表达的影响

目的 观察电针对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能的改善程度及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin1表达的影响.方法 根据随机数字表法,将72只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和电针组,每组24只.采用Longa线栓法建立改良的急性局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,并在缺血1h后进行再灌注.参照改良的Zea Longa 8级神经...     

Beclin 1、LC3在恶性纤维组织细胞瘤中的表达

目的 研究自噬蛋白Beclin 1、LC3在恶性纤维组织细胞瘤的表达.方法 选取云南省肿瘤医院2011年11月至2014年10月经手术切除的MFH组织标本, 应用免疫组织化学SP方法检测恶性纤维组织细胞瘤组织中Beclin 1、LC3蛋白表达情况.结果 在本组21例标本中Beclin 1、LC3基因表达均显著升高, P<0.05.结论 Beclin 1、LC3在恶性纤维组织细胞瘤组织中呈高表达, 并且两者间显著相关, 可能与恶性纤维组织细胞瘤的发生及发展密切相关.     

Beclin-1、P62、LC3B在肺炎链球菌感染小鼠肺部中的表达变化

目的：探讨自噬相关蛋白Beclin-1、P62及微管相关蛋白轻链3B（microtubule-associated protein light chain 3B,LC3B）在肺炎链球菌感染小鼠肺部中的表达及意义。方法：生长至对数生长期的肺炎链球菌标准株D39用无菌PBS调节浓度为1.5×109 CFU/mL,采用鼻滴的方法对50只SPF级雌性Balb/c鼠（6~8 周,16~20 g）进行处理,分别在感染后0、6、12、24、48 h收集Balb/c小鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）及肺组织,瑞氏-吉姆萨染色进行BALF细胞计数,HE染色观察肺组织病理学改变,Western blot 检测自噬相关蛋白Beclin-1、P62、LC3B在肺组织中的表达水平,免疫荧光观察LC3B在肺组织中的表达情况。结果：HE染色显示,小鼠鼻饲肺炎链球菌后12 h及24 h后肺组织内出现大量炎症细胞浸润。BALF中总细胞数量及中性粒细胞数量于感染后6 h开始增高[（1.280±0.506） vs. （6.272±1.312）,P=0.000;（0.000±0.000） vs. （3.456±1.308）,P=0.000],在12 h时达到高峰[（1.280±0.506） vs. （19.456±0.997）,P=0.000;（0.000±0.000） vs. （15.040±1.012）,P=0.000],48 h后基本恢复正常水平[（1.280±0.506） vs. （3.520±0.933）,P=0.005;（0.000±0.000） vs. （0.128±0.175）,P=0.835]。Western blot结果显示：自噬相关蛋白Beclin-1于感染后6 h开始增加[（0.626±0.078） vs. （0.921±0.093）,P=0.002],48 h时达到最高水平[（0.626±0.078） vs. （1.884±0.158）,P=0.000];自噬相关蛋白P62于感染后6 h开始减少[（2.915±0.094） vs. （2.275±0.269）,P=0.000],48 h时降低至最低水平[（2.915±0.094） vs. （1.178±0.142）,P=0.000];自噬相关蛋白LC3B于感染后12 h开始升高[（0.747±0.197） vs. （1.429±0.318）,P=0.006],24 h时达到高峰[（0.747±0.197） vs. （2.002±0.451）,P=0.000],48 h后降低[（0.747±0.197） vs. （1.563±0.501）,P=0.002]。免疫荧光显示：小鼠感染后12 h与24 h,肺组织中LC3B蛋白表达水平增加。结论：肺炎链球菌感染小鼠肺部后激活自噬的发生,且自噬在免疫调节过程中发挥着重要作用。     

自噬相关基因在慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型中的表达及意义

目的 检测慢性非细菌性前列腺炎(CNP)大鼠模型中自噬相关基因表达的水平及时序变化,探讨自噬在CNP病程中的可能作用.方法 取3月龄雄性SD大鼠40只,随机分为正常对照组和2、4、6周CNP模型组,每组10只.HE染色观察各组前列腺组织炎性细胞浸润情况,采用Western blot、免疫组化SABC法检测各组前列腺组织中自噬微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1的表达.结果 HE染色结果提示成功构建大鼠CNP模型,Western blot法、免疫组化法检测显示各实验组LC3、Beclin-1蛋白的表达均高于正常对照组,并随时间的推移表达量逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 自噬相关基因可能在CNP的发病过程中发挥重要作用.     

自噬相关蛋白Beclin1和LC3在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨自噬相关蛋白Beclin1和LC3在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法收集2011年1月—2014年1月结肠癌患者80例,取结肠癌组织标本及相应的正常组织标本各80份。用免疫组化法检测结肠癌和正常结肠组织中自噬相关蛋白Beclin1和LC3的表达,分析二者和结肠癌临床病理学参数,包括年龄、分化程度、TNM分期和淋巴结转移等的关系。结果结肠癌和正常结肠组织中Beclin1的阳性表达率分别为33.8%(27/80)、73.8%(59/80),LC3阳性表达率分别为22.5%(18/80)、68.8%(55/80),Beclin1和LC3在结肠癌的阳性表达率显著低于正常结肠组织(P<0.01)。不同年龄、分化程度结肠癌组织中Beclin1和LC3的表达差异无统计学意义(P>0.05),而不同TNM分期(P<0.01)和淋巴结转移结肠癌组织中Beclin1和LC3表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论自噬相关蛋白Beclin1和LC3的低表达可能与结肠癌的发生发展和预后不良有关。     

IGF-Ⅱ在宫颈病变组织中的表达

胰岛素样生长因子-Ⅱ（IGF-Ⅱ）是一种多功能生长因子,并且是一种强烈的致有丝分裂剂,在体内外都有很强的促进细胞增殖分化的能力,参与肿瘤细胞的调控及恶性肿瘤的发生及发展,是促进肿瘤生长的重要因子之一。国外有研究报道IGF-Ⅱ在多种癌组织中呈高水平表达,本文研究IGF-Ⅱ在宫颈病变中的表的情况。     

Beclin-1在非小细胞肺癌中的表达与意义

目的 探讨白噬重要调控因子Beclin-1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其临床意义.方法 收集150例非小细胞肺癌患者的癌组织及癌旁组织并制成组织芯片,应用免疫组化的方法检测Beclin-l在肺癌组织及癌旁组织中的表达情况.分析Beclin-1的表达与肺癌不同临床参数之间的关系并对病例进行生存分析.结果 Beclin-1在肺癌组织的阳性表达率(26.00％)显著低于癌旁组织(82.00％)(P＜0.05);肺鳞癌组织中Beclin-1的阳性表达率(34.66％)显著高于肺腺癌(17.34％)(P＜0.05);Beclin-1的表达率在不同性别、年龄、分化程度、淋巴结转移、远处转移组间无显著差异(P＞0.05);Beclin-1阴性表达的非小细胞肺癌患者的生存率显著低于阳性表达的患者(P＜0.05).结论 Beclin-1可能是一个非小细胞肺癌治疗的新的靶点,有可能成为非小细胞肺癌病理类型判断的辅助指标和预后评估候选指标之一.     

自噬基因 LC3在卵巢子宫内膜异位症中的表达及意义

目的：研究自噬基因LC3在卵巢子宫内膜异位症患者中的表达情况,探讨其与卵巢子宫内膜异位症发生、发展的相关性及意义。方法用Real-time PCR方法,对正常子宫内膜组织以及卵巢子宫内膜异位症患者的在位内膜组织、异位内膜组织进行LC3 mRNA定量分析,探讨其与临床分期的关系。结果 LC3 mRNA在卵巢子宫内膜异位症患者在位内膜组、异位内膜组和正常子宫内膜组中的表达存在显著差异（ P＜0.05）。异位内膜组表达显著低于正常内膜组,异位内膜组与在位内膜组相比表达明显下调（ P＜0.05） ,在位内膜组和正常内膜组间比较无明显差异（ P＞0.05）。 LC3 mRNA 在卵巢子宫内膜异位症不同临床分期中,异位内膜组Ⅲ～Ⅳ期LC3 mRNA表达显著低于Ⅰ～Ⅱ期（ P＜0.05）。在月经周期不同时相,正常内膜组增殖期的LC3 mRNA表达明显高于分泌期（ P＜0.05） ,卵巢子宫内膜异位症在位内膜组、异位内膜组增殖期与分泌期比较,差异无统计学意义（ P＞0.05）。结论自噬参与了卵巢子宫内膜异位症的发病,自噬活性的改变可能与子宫内膜异位症的发展及病损程度相关。     

Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA的影响

目的 探讨Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达的影响.方法 用线栓法建立大鼠大脑中动脉脑缺血(MCAO)缺血再灌注模型.大鼠随机分为假手术组、模型组、Salubrinal组(Sal组),各组又分为再灌6、12、24、72 h 4个亚组.各组于再灌相应时间点行神经功能缺损评分,并断头取脑行HE染色及Real time-PCR检测.结果 神经功能缺损:与假手术组比较,模型组、Sal组各时间点均有神经功能缺损(P<0.01);与模型组比较,再灌24、72 h Sal组神经功能缺损评分降低(P<0.05).HE染色:模型组神经元减少、缺失,细胞肿胀,部分破裂,细胞核固缩、偏移、深染,胶质细胞增生,经Salubrinal干预后,再灌各时间点神经元增多,胞膜较完整,核固缩现象较轻,水肿轻微.Real time-PCR检测:与假手术组比较,模型组、Sal组各指标于再灌各时间点均增高(P<0.01).与模型组比,Sal组LC3-ⅡmRNA表达于再灌12、24、72 h下降明显(P<0.05);Sal组LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA于再灌后各时间点下降均明显(P<0.01).结论 Salubrinal通过下调LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA比值,对大鼠脑缺血再灌注损伤起保护作用.     

大鼠急性肾损伤后自噬相关蛋白Beclin-1的表达

目的研究自噬相关蛋白Beclin-1在大鼠急性肾损伤伤后肾组织中的表达情况,并探讨其意义。方法选用24只雄性大鼠sD大鼠,体重250±30g,按随机数字表法分为两组,假手术组（Sham组）和缺血-再灌注组（I／R组）;各组于再灌注后12、24、48h3个相应时间点收获肾脏标本。HE染色观察肾脏病理变化,免疫组化法测定自噬相关蛋白Beclin-1的表达情况,透射电镜观察。肾脏组织自噬现象。结果与假手术组比较,大鼠急性肾损伤48h,肾小管细胞Beclin-1蛋白的表达最强（P〈0．05）,再灌注损伤后48h,自噬体数量显著增多,细胞内出现染色质块状边集,核形态不规则的明显凋亡现象。结论大鼠急性肾损伤后自噬相关蛋白Beclin-1的表达上调,说明大鼠肾急性。肾损伤后肾脏组组织自噬活性上调。     

IDO在不同宫颈病变组织中的表达及意义

目的：研究吲哚胺2，3-二氧酶在不同宫颈病变组织中表达情况。方法：采用免疫组化染色检测35例正常宫颈组织、36例CIN宫颈组织、34例宫颈癌Ⅰ期宫颈组织、35例宫颈癌Ⅱ期-Ⅳ期宫颈组织中IDO表达。结果：正常宫颈组织中IDO表达呈阴性，在宫颈上皮内瘤变中IDO表达逐渐增高，宫颈癌时IDO表达最高，各组IDO表达情况相比较，差异有统计学意义（x2=73．9834，P=0．0000〈0．01）。结论：IDO可作为宫颈癌治疗的新靶点。     

Bcl-2和Beclin-1在胰腺癌中的表达及其相关性研究

目的探讨Bcl-2和Beclin-1在胰腺癌发生发展过程中的作用,分析胰腺癌组织中Bcl-2和Beclin-1的蛋白表达是否具有相关性。方法收集胰腺癌、胰腺外分泌良性肿瘤、慢性胰腺炎、正常胰腺组织各6例,分别标记为A组、B组、C组、D组。采用实时荧光定量PCR检测各组中Bcl-2mRNA和Beclin-1mRNA表达情况。采用免疫组织化学法检测各组中Bcl-2蛋白及Beclin-1蛋白的表达情况。结果 A、B、C 3组Bcl-2mRNA和蛋白表达水平均高于D组,其中A组表达水平最高,与其它各组比较差异有统计学意义(P<0.05)。A组Beclin-1mRNA和蛋白表达水平低于D组,差异有统计学意义(P<0.05),但与C组比较差异无统计学意义(P>0.05);其中A组表达水平最低,D组表达水平最高。胰腺癌中Bcl-2和Beclin-1蛋白的表达呈负相关(r=-0.827,P=0.042)。结论胰腺癌组织中Bcl-2表达水平上调,抑制凋亡,Beclin-1表达水平下调,抑制自噬。Bcl-2和Beclin-1在胰腺癌中表达呈负相关,两者共同作用可促进胰腺癌的发生发展。     

自噬相关基因在早产儿视网膜病变模型视网膜组织中的表达及临床意义

[目的]探讨自噬相关基因P62、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(microtubule associated protein light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)和自噬相关基因5(autophagy related genes 5,ATG5)在早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity,ROP)动物模型视网膜组织中的表达情况及其临床意义。[方法]将18只出生7d的C57BL/6乳鼠分为3组,ROP模型组6只乳鼠放入高氧装置构建ROP模型,自噬干预组6只乳鼠玻璃体腔注射自噬激活剂雷帕霉素(rapamycin,RAPA)后放入高氧装置,正常对照组6只乳鼠饲养在正常环境中。采用荧光造影视网膜血管灌注观察各组小鼠视网膜血管的变化;定量即时聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测各组P62、LC3-Ⅱ和ATG5的mRNA表达水平的变化。[结果]ROP模型构建成功,ROP模型组小鼠视盘周围大片无灌注区,周边视网膜血管异常迂曲;自噬干预组玻璃体腔注射RAPA后,视盘周围无灌注区减少。与正常对照组比较,ROP模型组P62 mRNA表达升高(P0.01),LC3-Ⅱ和ATG5 mRNA表达降低(P0.05,P0.05);与ROP模型组比较,自噬干预组P62 mRNA表达降低(P0.05),而LC3-Ⅱ和ATG5 mRNA表达水平升高,但差异无统计学意义(P0.05,P0.05)。[结论]ROP的发生发展可能与视网膜组织自噬活性降低有关。