HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中曲马多和文拉法辛

［摘要］　目的：建立高效液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中曲马多和文拉法辛的浓度。方法：血浆样品经NaOH碱化后，用CH2Cl2萃取；流动相为CH3OH-5 mmol•L-1醋酸铵缓冲液（90∶10，10%甲酸调pH值为6.0），流速：0.2 mL•min-1，采用电喷雾离子源（ESI），以多反应离子监测（MRM）方式进行检测。结果：曲马多和文拉法辛的线性范围分别为6.250～1600和1.562～400.0 μg•L-1，最低定量限分别为6.250和1.562 μg•L-1。方法回收率分别为97.6%~103.8％和96.2%~102.1％，萃取回收率分别为55.1%~74.0％和50.4%~53.6％，日内和日间RSD均＜10％。结论：本法准确，灵敏，重现性好，可用于曲马多和文拉法辛血药浓度的检测和药动学等相关研究。     

UPLC-MS/MS法同时检测人血浆中拉莫三嗪和卡马西平浓度

目的采用高效液相色谱-质谱联用技术同时检测人血浆中拉莫三嗪和卡马西平浓度。方法采用UPLC-MS/MS法,以西替利嗪为内标,血浆经甲醇直接沉淀后进样分析。色谱柱为ACQUITY BEH C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为甲醇-含0.1%甲酸的水溶液(70∶30,v/v),流速为0.2 ml/min,进样体积为10μl。质谱采用ESI离子源,正离子MRM模式扫描分析,拉莫三嗪、卡马西平和内标西替利嗪的离子对分别为m/z 256.0→211.2、m/z 237.0→194.1、m/z 389.2→201.2。结果拉莫三嗪和卡马西平线性范围分别为5～1 000 ng/ml (r=0.999 5)和5～1 000 ng/ml (r=0.997 5),定量下限均为5 ng/ml。批内、批间精密度RSD<15%;平均提取回收率分别为81.3%～84.9%和82.7%～87.3%。结论本方法样品前处理简便、快速,检测准确、灵敏度高,适用于临床治疗药物检测和药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS同时定量检测血浆中多种农药浓度及临床意义

目的 建立高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法同时测定人血浆中11种农药(乐果、氧乐果、敌敌畏、毒死蜱、辛硫磷、丙溴磷、三唑磷、甲基硫菌灵、稻瘟灵、溴鼠隆、阿维菌素)含量的方法及分析中毒物检测的临床意义。方法 新鲜血样离心后得到的血浆用4℃～8℃冷藏的75%乙腈沉淀蛋白,再用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)进行测定,色谱柱采用ACQUITY UPLC C₁₈(2.1×50 mm, 1.7μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,采用正离子多反应监测(MRM)模式检测。结果 血样中11种农药的线性范围为2～100 ng·mL^-1,相关系数(r)>0.9952,血样的最低检测限<0.5 ng·mL^-1。添加标样浓度水平为10 ng·mL^-1、50 ng·mL^-1、100 ng·mL^-1时,回收率为64.34%～106.81%;低、高2种浓度水平的日内、日间相对标准偏差(RSD)小于10%。结论 本方法检测方便快捷...     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中千金藤素的浓度

目的建立人血浆中千金藤素浓度的HPLC-MS/MS测定法。方法血浆样品1.0 mL经甲基叔丁基醚萃取后,以2.5 mmol/L醋酸铵(含0.05%甲酸)-甲醇(40∶60)为流动相,采用ZORBAX Eclipse XDB-C8(150 mm×4.6 mm,5μm)柱分离,采用电喷雾电离化(ESI)方式和多反应离子监测(MRM)模式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 607.2→365.1(千金藤素)和m/z 247.2→98.0(内标甲哌卡因)。结果千金藤素血药浓度线性范围为0.10～208.40 ng/mL,定量下限为0.10 ng/mL。低、中、高3个浓度提取回收率分别为72.3%、76.8%、79.5%。结论该法操作简便、快速、灵敏,适用于千金藤素在人体内的药代动力学研究。     

HPLC-MS/MS法测定新生儿血浆中奥美拉唑的浓度

目的建立一种测定新生儿血浆中奥美拉唑浓度的HPLC-MS/MS法。方法新生儿血浆样品用乙腈沉降蛋白后,以兰索拉唑为内标,色谱柱为C18(4. 6 mm×150. 0 mm,3. 5μm),流动相为乙腈-水(0. 1%甲酸)=85∶15,流速为0. 3 m L·min^-1,柱温为35℃,进样量为10μL。用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测(MRM)扫描方式进行监测。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率,以及稳定性。结果血浆中奥美拉唑的浓度在5～4000 ng·m L^-1内线性关系良好,标准曲线为y=1. 20×10^-3x+2. 06×10^-2(r=0. 998 7),定量下限为5 ng·m L^-1。批内、批间RSD均小于15%,相对偏差为-7. 36%～3. 62%,提取回收率为77. 94%～93. 12%,无明显的基质效应。结论该方法简便快速,灵敏度好,准确度高,专属性强,适用于新生儿血浆中奥美拉唑浓度的测定。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中穿心莲内酯的浓度

目的:建立HPLC-MS/MS法测定人血浆中穿心莲内酯的浓度。方法:血浆样品经甲醇沉淀后,以甲醇-水（69:31,v/v）为流动相,流速为0.7 ml·min^-1,色谱柱为Hedera-C₁₈（4.6 mm×150 mm,5μm）,柱温为25℃,选择性离子检测（SIM）,穿心莲内酯[M-H₂O-H]-和内标脱水穿心莲内酯[M-H]-均为m/z 331.10。结果:血浆内源性杂质不干扰待测物测定,穿心莲内酯的线性范围为0.987～148.050 ng·ml^-1,定量下限为0.987 ng·ml^-1,批内、批间精密度（RSD）均<8%。样品稳定性良好。结论:该法灵敏、快速、简便,可用于穿心莲内酯的药动学研究。     

HPLC-MS/MS测定人体血浆和尿液中罗通定的浓度

目的 建立一种简便、灵敏的测定人体血浆和尿液中罗通定浓度的高效液相色谱串联质谱( HPLC-MS/MS)方法.方法 血浆、尿液样品分别采用乙腈沉淀处理后,进样分析.采用Agilent-ECLIPSE-C18柱(2.1mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.2％甲酸溶液=85∶15为流动相,采用正离子,多反应监测方式测定样品浓度.检测离子为m/z356.3→192.3(罗通定)和m/z 285.0→193.0(地西泮,内标).结果 罗通定血浆及尿样均在2.5～1000 ng· mL-1与峰面积线性关系良好(r=0.999 4);最低定量浓度均为2.5 ng·mL-1.日内与日间RSD均＜10％,血浆样品回收率在91.4％～109.2％,尿样回收率在88.63％～115.8％.结论 本方法简便快速、灵敏准确,适用于罗通定在人体内的药物动力学研究.     

HPLC-MS/MS测定大鼠血浆中丹参素钠的浓度

目的建立液质联用色谱法（HPLC-MS/MS）测定SD大鼠血浆中丹参素钠的浓度。方法血浆样品采用液液萃取方法进行预处理。色谱柱为Diamonil C18柱（4.6mm×200mm,5μm）;流动相为甲醇-水（含0.01‰甲酸）=（80：20）;流速为1.0ml/min;质谱条件：采用ESI离子源,负离子检测,选择MRM测定丹参素钠和酮洛芬197→135m/z和253→209m/z。结果丹参素钠在10.6～1060ng/ml检测浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.9996）,最低定量限为10.6ng/ml,日内和日间精密度的RSD〈7.8%,回收率在99%到102%之间。结论该方法灵敏度高、快速、简单、准确,适用于血浆样品中丹参素钠的含量测定以及临床前实验研究     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中灯盏乙素的浓度

目的:建立测定人血浆中灯盏乙素浓度的HPLC-MS/MS法。方法:采用Platisil ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.3%甲酸水溶液-甲醇(40∶60),流速为1.0 mL.min-1,以黄芩苷为内标,经乙酸乙酯萃取后,采用电喷雾电离化(ESI)方式和多反应离子监测(MRM)模式进行负离子检测,用于定量分析离子反应分别为m/z 461.1→285.1(灯盏乙素)和m/z 445.1→269.1(黄芩苷)。结果:线性检测范围为0.20～50.00μg.L-1,最低定量浓度0.20μg.L-1,r=0.999 3。低、中、高3个浓度的提取回收率分别为63.5%,69.5%,66.8%,基质效应分别为105.7%,97.5%,96.5%。结论:本法样品处理简单、快速,专属性强,灵敏度高,可用于灯盏乙素在人体内的药代动力学研究。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中卡马西平、文拉法辛、罗格列酮和硝苯地平的浓度

目的:建立同时测定人血浆中卡马西平、文拉法辛、罗格列酮和硝苯地平浓度的方法。方法:血浆样品经甲醇(含0.1%甲酸)沉淀蛋白后,以盐酸吡格列酮为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS C_(18),流动相为含0.01%甲酸的水溶液-含0.01%甲酸的甲醇溶液(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温为50℃,进样量为5μL;采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 237.00→194.05(卡马西平)、m/z 278.20→58.10(文拉法辛)、m/z 358.08→135.04(罗格列酮)、m/z 347.15→315.17(硝苯地平)、m/z 357.09→134.06(内标)。结果:卡马西平、盐酸文拉法辛、盐酸罗格列酮、硝苯地平血药浓度的线性范围分别为2.00~2 000.00、2.12~2 120.00、2.00~2 000.00、2.04~1 020.00 ng/mL(r分别为0.995 9、0.990 5、0.991 5、0.991 0,n=5),最低检测限分别为0.200、0.106、0.100、1.020 ng/mL;日内、日间RSD均小于15%,相对误差的绝对值小于15%;提取回收率为65.66%~96.36%(RSD<15%,n=5),基质效应为80.99%~114.33%。采用该法测得2例癫痫患者体内卡马西平的血药浓度分别为(1 500.41±169.11)、(1 159.01±59.24)ng/mL(RSD分别为11.27%、5.60%,n=3),2例高血压患者体内硝苯地平的血药浓度分别为(14.68±1.92)、(21.18±3.59)ng/mL(RSD分别为16.98%、13.10%,n=3)。结论:该方法操作简便,专属性强,灵敏度、准确度高,可用于上述药物的血药浓度监测及药动学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中甲氧氯普胺的浓度

目的建立测定人血浆中甲氧氯普胺浓度的LC-MS/MS方法。方法采用Alltech Alltima C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3μm),以5 mmol.L-1乙酸铵-乙腈-甲醇(体积比为50∶40∶10)为流动相,流速为0.2 mL.min-1,血浆样品在碱性条件下液-液萃取,通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,以多离子反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量分析的离子对分别为m/z300.20→m/z227.00(甲氧氯普胺)和m/z152.20→m/z134.00(内标,苯丙醇胺)。结果甲氧氯普胺线性范围为0.5~200.0μg.L-1,最低定量限为0.5μg.L-1,平均回收率为(71.38±6.35)%,日内和日间精密度均小于15%。结论该法适用于临床药物浓度监测和药物动力学的研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中霉酚酸浓度

目的:建立测定人血浆中霉酚酸浓度的液相色谱-串联质谱法。方法:以托吡酯为内标,待测血浆用甲基叔丁基醚萃取后,采用ZORBAX SB-C18色谱柱(50 mm×4.6 mm,5μm),以0.01 mol.L-1醋酸铵溶液-甲醇梯度洗脱以多反应离子监测,扫描模式进行HPLC-MS/MS分析。结果:血浆中无干扰测定的内源性物质;霉酚酸在19.91~14 934 ng.mL-1范围内与内标物峰面积之比线性关系良好,定量下限为19.91 ng.mL-1。提取回收率为77.8%~83.6%。结论:该方法简便、准确、灵敏度高、专属性强,适用于人血浆中霉酚酸的测定。     

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中6种抗抑郁药的浓度

目的:建立HPLC-MS/MS同时测定人血浆中西酞普兰、米氮平、曲唑酮、氟伏沙明、氯米帕明、文拉法辛血药浓度的方法。方法:血浆经含内标(伏立康唑)乙腈沉淀蛋白后进样测定,采用Kinetex C18柱(50 mm×2.1 mm,2.6μm)进行色谱分离,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min……-1,柱温40℃,进样量2μL;采用电喷雾离子源,正离子模式,多反应监测进行测定。结果:西酞普兰和米氮平质量浓度范围为4~400 ng·mLmL-1(r>0.9986),曲唑酮、氟伏沙明、氯米帕明和文拉法辛质量浓度范围为10~1000 ng·mL-1(r>0.9984);所有分析物日内、日间精密度(n=6)RSD<11.52%,准确度RE在-3.89%~8.14%,符合生物样品分析要求。氯米帕明在高脂血基质及溶血基质中有明显基质效应,其余待测物无明显基质效应。结论:经方法学考察,该方法灵敏、简便、准确、快速,可用于6种抗抑郁药的临床血药浓度检测。     

HPLC-MS/MS法同时测定人血清中8种酪氨酸激酶抑制剂的浓度

目的： 建立一种高效液相色谱-质谱法（HPLC-MS/MS）同时检测人血清中8种酪氨酸激酶抑制剂（TKI）和1种活性代谢产物的浓度,并应用于临床检测。方法： 以甲醇为沉淀剂将被分析物与生物基质分离,采用Kinetex XB-C₁₈色谱柱（3.0 mm×50 mm, 2.6μm）进行色谱分离,0.1%甲酸水溶液与乙腈溶液进行梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1,柱温40℃,进样量5μL;采用电喷雾正电离模式多反应监测进行检测和定量。结果： 本方法色谱分离和质谱检测的单针分析时长为6.5 min,特异性良好,待测化合物阿法替尼、阿帕替尼、克唑替尼、吉非替尼、埃克替尼、伊马替尼、厄洛替尼、舒尼替尼以及N-去乙基舒尼替尼在0.4~200, 0.8~400, 1~500, 4~2 000, 2~1 000, 4~2 000, 8~4 000, 0.4~200, 0.4~200 ng·mL^-1范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999。精密度和准确度、基质效应、回收率和稳定性均符合2020年版《中国药典》要求。结论： 该方法专属性强、灵敏度高,可用于上述8种TKI药物和1种活性代谢产物的临床血药浓度测定。     

HPLC-MS／ESI同时测定人血浆中文拉法新及其3种代谢产物

目的:建立一种快速灵敏的反相高效液相色谱-质谱联用法同时测定人血浆中文拉法新(VEN)和其3种代谢产物:氧云甲基文拉法新(ODV)、氮去甲基文托法新(NDV)和氮、氰双去甲基文拉法新(DDV)的浓度。方法:以艾司唑仑为内标,样本碱化后用乙醚捉取2次,合并有机相,40℃氮气吹干,100μL流动相定容;用 BDS HYPERSIL C_(18)反相色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)进行分离,以乙腈-缓冲溶液(30 mmol·L~(-1)醋酸铵 2.6mmol·L~(-1)甲酸 0.13 mmol·L~(-1)三氟乙酸)(40:60,v/v)为流动相,采用梯度洗脱程序,柱温为50℃,流速为1.0 mL·min~(-1)。采用质谱电喷雾电离源(ESI)将样品离子化,选择性离子监测(SIM)准分子离子和/或主要碎片离子峰。结果:VEN、ODV、NDV、DDV 以及内标艾司唑仑在6min 内完全分离;各物质在2～900 ng·mL~(-1)时线性关系良好,相关系数均大于0.9991;萃取回收率均大于77%;方法回收率均大于91%;最低检测浓度:VEN 0.4 ng·mL~(-1)、ODV0.2 ng·mL~(-1)、NDV 0.3 ng·mL~(-1)、DDV 0.2 ng·mL~(-1);日内日间RSD 均小于11%。结论:本方法简单快速,灵敏准确,可用于药物动力学、药物代谢机制以及血药浓度的临床监护、中毒分析的研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中抗肿瘤化合物WJD-A-1及其药动学研究

目的：建立大鼠血浆中抗肿瘤化合物WJD-A-1的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）测定方法，并研究静脉注射WJD-A-1后在大鼠体内的药动学特征。方法：以苯海拉明为内标，大鼠血浆样品经甲醇-乙腈处理，用色谱柱Waters ACQUITY UPLC^® BEH C₁₈（2.1 mm×50 mm，1.7 μm）进行分离，以甲醇-0.1%甲酸（80∶20）为流动相，采用电喷雾离子源（ESI）正离子模式及多重反应监测模式，检测离子对分别为WJD-A-1（m/z 480.6→334.6，480.6→164.3）以及苯海拉明（m/z 256.0→166.8）。将建立的检测方法应用于测定大鼠静脉注射化合物WJD-A-1后的血浆浓度。结果：大鼠血浆中化合物WJD-A-1在5.40~5.40×10³ ng·mL^-1浓度范围内线性关系良好；低、中、高3个质控浓度下的日内、日间精密度均小于10%，质控样品的准确度为97.45%~106.80%；提取回收率为95.40%~96.17%，无明显基质效应且稳定性良好。大鼠静脉给与化合物WJD-A-1三个剂量75，150，300 μg·kg^-1后，血浆中WJD-A-1的半衰期t_1/2分别为（0.10±0.05） h、（0.24±0.02） h、（0.51±0.06） h；其浓度-时间曲线下的面积AUC_（0-t）分别为（150.60±21.69）μg·h·L^-1、（883.07±135.68）μg·h·L^-1、（3 311.59±418.15）μg·h·L^-1。结论：该检测方法简单、快速、灵敏、准确，适用于抗肿瘤化合物WJD-A-1在大鼠血浆内的浓度测定及其药动学研究。药动学参数表明大鼠静脉注射该化合物后体内消除较快，且该化合物在大鼠体内的暴露量与给药剂量成正比。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中地佐辛和罗哌卡因的浓度

目的 建立一种人血浆中地佐辛和罗哌卡因浓度测定的UPLC-MS/MS法.方法 血浆样品经乙腈沉淀蛋白后提取处理,以利多卡因为内标.色谱柱:Agilent Zorbax Eclipse Plus C18;流动相:0.1％甲酸铵溶液-甲醇(75:25,用甲酸调节pH至4.5),流速:0.2 mL·min-1,柱温:35℃,...     

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中3种抗结核药物的浓度

目的 建立快速、灵敏的高效液相色谱-质谱/质谱联用（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中异烟肼、利福平和左氧氟沙星的浓度.方法 血浆样品以加替沙星为内标采用甲醇沉淀蛋白法萃取,采用C4色谱柱（250 mm×4.6 mm,5.0 μm,Welch materials,USA）,流动相为0.05%甲酸溶液-甲醇（v/v）梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温25℃,进样量20μL,采用ESI＋多反应选择离子检测（MRM）.结果 异烟肼在0.18～9.0μg·mL-1与峰面积线性关系良好（r=0.999 8）,利福平在0.8～40μg·ml-1与峰面积线性关系良好（r=0.999 6）,左氧氟沙星在0,09～4,5μg·mL-1与峰面积线性关系良好（r=0.999 0）,萃取回收率均〉70%,方法回收率在85%～115%,日内、日间精密度RSD均〈9.3%（n=5）.结论 该方法专属性强、灵敏准确,适用于同时测定人血浆样品中异烟肼、利福平和左氧氟沙星的浓度.