嗜黏蛋白阿克曼菌与肥胖的关系

嗜黏蛋白阿克曼菌（A.muciniphila）是一种人类肠道的正常菌群,肥胖患者肠道菌群中的A.muciniphila丰度明显降低。许多证据表明A.muciniphila与肥胖、糖尿病、心血管疾病和低度炎症呈负相关。A.muciniphila不仅可以保护肠道上皮细胞及黏液层的完整性发挥代谢保护作用,在炎症反应过程中A.muciniphila也能通过调节性T细胞、内源性大麻素系统以及非经典Toll样受体发挥抗炎作用。本文就A.muciniphila与肥胖的相关性及分子机制、临床应用等作一综述。     

嗜黏蛋白阿克曼菌及Amuc＿1100对高脂饮食联合链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的保护作用

目的探究嗜黏蛋白阿克曼菌活菌、巴氏灭活菌及Amuc₁100蛋白干预对高脂饮食联合链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导的糖尿病大鼠的预防保护作用。方法将96只SD大鼠随机分成8组,包括6组实验组和2组对照组,每组12只。采用高脂饲料喂养联合STZ注射模拟大鼠2型糖尿病进展。同时用不同剂量的嗜黏蛋白阿克曼菌活菌、巴氏灭活菌及Amuc₁100蛋白灌胃干预8周。收集大鼠血浆样本测定脂质和葡萄糖代谢、炎症相关指标因子,收集结肠组织样本进行HE染色。收集大鼠粪便样本进行16S rRNA基因测序。结果与高脂饮食对照组相比,嗜黏蛋白阿克曼菌干预组大鼠体质量增加减少(P<0.01)、血浆肿瘤坏死因子-α水平降低(P<0.05);嗜黏蛋白阿克曼菌或Amuc₁100干预可导致杯状细胞数量和黏蛋白分泌增加。各干预组样本β多样性分析显示总体上无差异。结论口服嗜黏蛋白阿克曼菌可以有效减轻高脂饮食引起的代谢紊乱,包括体质量增加和全身炎症等。嗜黏蛋白阿克曼菌及Amuc₁100干预对改善肠道屏障功能具...     

嗜黏蛋白阿克曼菌与肥胖相关代谢性疾病的研究进展

肠道微生物群在调节宿主免疫和能量代谢等方面起着至关重要的作用,与肥胖、糖尿病以及心血管疾病等疾病的发生有关。目前,多种动物模型和人体研究证明,嗜黏蛋白阿克曼菌（Akkermansia muciniphila/A. muciniphila）水平与肥胖、糖尿病、肥胖性肝病、动脉粥样硬化等代谢性疾病的发生呈负相关。A. muciniphila通过增加肠道黏液层厚度、减轻全身炎症、改善糖耐量和胰岛素抵抗,在治疗代谢紊乱方面具有广阔前景,被认为是新一代的治疗药物。就A. muciniphila与代谢性疾病及宿主之间相互作用的基本机制作系统性综述。     

嗜黏蛋白阿克曼菌对腺嘌呤诱导慢性肾病大鼠作用的研究

目的 探讨嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila,A.muciniphila)对腺嘌呤诱导的慢性肾脏病大鼠肾功能的改善及可能机制。方法 6周龄SD大鼠按随机数字表法分为3组,即正常组、模型组、实验组。正常组及模型组分别灌胃0.9%氯化钠溶液、阿克曼菌,实验组同时灌胃腺嘌呤及阿克曼菌。4周后收集大鼠血清检测肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN),评估肾功能。Masson染色及过碘酸希夫(PAS)染色观察肾脏组织肾间质纤维化和肾小管基膜厚度。免疫印迹法及免疫组化染色检测结肠组织ZO-1、Occludin、Claudin-1的表达。PAS染色观察结肠组织黏液层厚度、杯状细胞数量。结果 与正常组比较,模型组Scr、BUN均升高(P<0.01),实验组Scr、BUN均低于模型组(P<0.01)。肾脏组织Masson染色及PAS染色结果表明,与正常组比较,模型组纤维化程度严重,肾小管扩张、基膜增厚,可见部分炎性细胞浸润(P<0.01);与模型组比较,经阿克曼菌干预的实验组纤维化及肾小管扩张程度减轻(P<0.05)。结肠组织免疫印迹及免疫组化结果表明,模型组紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的表达量较正常组减少(P<0.05),而实验组上述蛋白表达量均高于模型组(P<0.05)。结肠组织PAS染色结果,与正常组比较,模型组大鼠结肠腺体萎缩、变形,黏液层厚度明显减低,杯状细胞密度明显减少(P<0.01);与模型组比较,实验组结肠组织黏液层增厚(P<0.05)、杯状细胞密度增多(P<0.01)。结论 阿克曼菌可改善慢性肾脏病大鼠的肾功能以及肾间质纤维化,其机制可能与阿克曼菌保护肠道屏障功能有关。     

VEGF对大鼠胰岛瘤细胞增殖、凋亡及胰岛素分泌功能的影响

目的 探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）对大鼠胰岛瘤细胞（INS-1）增殖、凋亡、胰岛素分泌以及相关基因表达的影响。方法 用不同浓度（0、40、80、160 ng/mL)VEGF对大鼠INS-1细胞进行处理,采用CCK-8试剂盒检测INS-1细胞增殖,用Annexin Ⅴ及碘化丙啶(PI)双染试剂检测细胞凋亡;INS-1细胞经VEGF处理后做标准葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验, ELISA法检测胰岛素,实时定量PCR技术检测胰岛分泌过程中相关基因表达,Western blot检测VEGF对Insulin蛋白表达的影响。结果 不同浓度VEGF对INS-1细胞作用24 h、48 h、72 h,其细胞活性均无明显变化（P>0.05）。但当VEGF浓度为80 ng/mL和160 ng/mL时对细胞凋亡具有抑制作用(PSur)、内向整流性钾离子通道基因 (inwardly rectifying potassium channel 6.2, Kir6.2)的表达随VEGF浓度增高呈下降趋势,葡萄糖激酶基因（glucokinase,GCK）的表达先降低后升高,葡萄糖转运蛋白基因2（glucose transporter 2,Glut2）表达呈先升高后降低趋势,Insulin蛋白的表达量随VEGF浓度增高呈逐渐下降趋势。结论 VEGF在高糖状态下对细胞凋亡和胰岛素分泌有抑制作用,为探索VEGF在糖代谢中的作用提供了新的线索。     

嗜黏蛋白艾克曼菌在防治糖尿病中的作用研究进展

肠道菌群与疾病的相关性成为近年来的研究热点,糖尿病的发病与慢性低度炎症及肠道菌群失调密切相关,干预肠道菌群失调成为目前预防及治疗糖尿病的研究热点。嗜黏蛋白艾克曼菌(Akkermansiamuciniphila,A.muciniphila)可通过改善肠道屏障功能、抑制机体慢性炎症、上调血糖调节相关激素如胰高血糖素样肽-1(GLP-1)水平等作用机制改善糖尿病相关症状,是预防及治疗糖尿病的潜在靶点。A.muciniphila丰度降低还是糖尿病早期诊断的标志。目前研究表明单独运用A.muciniphila后糖尿病患者机体炎症状态等相关症状明显改善,且已有研究显示人体对A.muciniphila有较好的安全性和耐受性。因此,A.muciniphila可作为一种潜在的新型益生菌治疗糖尿病。临床上用于治疗糖尿病的措施如二甲双胍、中医药及功能性饮食等的作用机制均发现与A.muciniphila丰度升高有关,其中中医药治疗糖尿病效果显著,具有多靶点、多途径、系统性等优势。研究发现A.muciniphila是中药干预糖尿病的潜在靶点,中药干预后,糖尿病相关指标改善与A.muciniphila丰度呈正相关...     

国产格列美脲对2型糖尿病胰岛分泌功能及胰岛素敏感性的影响

目的 :探讨国产格列美脲对 2型糖尿病 (DM)病人的胰岛素分泌功能和胰岛素敏感性的影响。方法 :对按 1 998年 WHO诊断标准判定的 2型 DM病人 2 9例 ,给予国产格列美脲片 2～ 6 m g/ d,疗程 8周 ,治疗前后测定空腹血糖 (FBS) ,餐后 2 h血糖 (PBS) ,空腹胰岛素 (FINS)、餐后胰岛素 (PINS)、糖化血红蛋白 (Hb A1 c)、按胰岛素抵抗稳态模型公式 :FINS× FBS/ 2 2 .5计算出胰岛素抵抗指数 (IRI)。结果 :经治疗 8周 ,FBS降低 (1 .4 2± 1 .6 0 ) mm ol/ L (P <0 .0 0 1 ) ,PBS降低 (3.2 5± 2 .97) mmol/ L(P <0 .0 0 1 ) ,FINS无明显改变 (P >0 .0 0 5 ) ,PINS增加 (33.96± 1 9.4 6 ) m IU / L (P <0 .0 0 1 ) ;IRI为 1 .5 2± 0 .4 7,较治疗前明显降低 (P <0 .0 0 1 )。结论 :国产格列美脲可以在刺激 PINS分泌的同时明显改善周围组织对胰岛素的敏感性     

糖尿病胰岛素及胰岛β细胞功能的研究

目的比较新诊断的老年2型糖尿病患者与中年2型糖尿病患者胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能。方法将113名40岁以上新诊断的T2DM患者分为两组，其中40-59岁（中年组）64例，60岁以上（老年组）49例。分别测量体质指数、腰臀比、检测口服葡萄糖耐量试验、甘油三酯、总胆固醇，观察指标为OGTF各点血糖和胰岛素，根据血糖和胰岛素计算HOMA-IR、HOMA-IS、△Ins30／△Glu30等。结果新诊断老年组OGTF2～3h血糖高于中年组同点血糖（P〈0．05），老年组OGTF2-3h胰岛素值高于中年组同点胰岛素值（P〈0．05）。老年T2DM患者与中年T2DM患者相比HOMA-IR、HOMA-IS、△Ins30／△Glu30均有明显差异。结论与中年发病的糖尿病患者相比，老年2型糖尿病患者在胰岛素抵抗及胰岛素早期分泌缺陷方面有明显的差异。     

国产那格列奈对2型糖尿病血糖、血脂及胰岛素分泌的影响

目的:探讨国产那格列奈对2型糖尿病患者血糖、血脂及胰岛素分泌的影响。方法:对按1999年WHO诊断标准诊断为2型糖尿病患者23例,给予国产那格列奈270mg/d,分三餐前15min口服,疗程为12周,治疗前后测空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(PBG)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)以及空腹及餐后0.5、1、2h血浆胰岛素(INS)。结果:治疗12周后FBG降低(1.17±1.67)mmol/L(P<0.001),PBG降低(3.76±2.70)mmol/L(P<0.001);TC降低(0.16±0.79)mmol/L(P>0.05),TG降低(0.81±2.32)mmol/L(P>0.05);胰岛素分泌高峰提前至餐后0.5～1h,空腹INS水平无明显改变(P>0.05)。结论:国产那格列奈能增加2型糖尿病患者胰腺β细胞早期相胰岛素的分泌,有效改善FBG及PBG,但对TC及TG无明显影响。     

Akk菌在消化道疾病中的研究进展

Akk菌及其衍生物作为下一代益生菌中的明星菌株,已被证实与炎症性肠病（IBD）、结直肠癌（CRC）、肝病等消化道疾病具有相关性,且其在上述疾病中的积极作用及具体机制也逐渐被揭晓。该文在最新试验的基础上,从Akk菌株及其主要衍生物的生化特征,Akk菌在IBD、CRC、肝病中的保护性作用及机制等方面入手,对这些疾病的临床诊断和治疗做出了展望。     

实时荧光PCR定量检测粪便中Akkermansia muciniphila方法研究

目的 建立实时荧光PCR定量检测粪便中Akkermansia muciniphila （A. muciniphila）的方法,为A. muciniphila的定量检测及深入研究提供技术支持。 方法 建立SYBR Green Ⅰ 荧光PCR 定量检测A. muciniphila的方法,利用A. muciniphila标准品制备标准曲线,评价该方法的灵敏度、特异性、抗干扰性及重复性,并对30例人粪便样本进行检测。 结果 标准曲线线性关系良好（R2=0.999）;方法灵敏度可达到1.0×102CFU/mL;该方法可特异性扩增A. muciniphila,不受其他肠道细菌的影响;组内和组间重复性较好,Ct值的变异系数均小于2%;30例人粪便样品中A. muciniphila阳性率为73%,Ct值为17.40～31.77。 结论 本研究建立的实时荧光PCR定量检测粪便中A. muciniphila的方法简便、快速、经济,且具有良好的灵敏度、特异性、抗干扰性和重复性,适用于实际粪便样品的检测。     

曲格列酮影响大鼠系膜细胞增殖和凋亡的实验研究

目的 探讨曲格列酮对大鼠系膜细胞(mesangial cell,MC)增殖和凋亡的影响.方法 以体外培养大鼠系膜细胞为研究对象,应用不同浓度曲格列酮刺激系膜细胞.采用流式细胞仪检测系膜细胞凋亡,并用DNA倍体分析检测细胞周期,采用锥虫蓝染色检测系膜细胞增殖.结果 系膜细胞经低浓度曲格列酮(1、5 μmol/L)干预后出现明显凋亡,与正常对照组相比,差异有统计学意义(均P<0.05).经不同浓度曲格列酮干预后,系膜细胞增殖明显抑制,与正常对照组相比,差异有统计学意义(均P<0.05).同时5 μmol/L曲格列酮干预系膜细胞后可将细胞周期阻滞于G2/M期.结论 曲格列酮可明显抑制系膜细胞增殖,促进系膜细胞凋亡.     

肾康丸对体外大鼠系膜细胞增殖、细胞外基质分泌和细胞周期的影响

【目的】观察肾康丸对体外高糖培养的大鼠系膜细胞(MC)增殖、细胞外基质分泌(ECM)和细胞周期的影响。【方法】将16只Wistar雄性大鼠随机分为4组,即正常血清组,开博通组(剂量为5 mg/kg),肾康丸高、低剂量组(剂量分别为2.4、1.2 g/kg),灌服相应药物7 d,分离制备药物血清。将体外高糖(30 mmol/LGlu)培养的MC分为5组:高糖模型组(30 mmol/LGlu),正常血清组(体积分数5%正常血清),开博通组(体积分数5%开博通含药血清)及肾康丸高、低剂量组(体积分数5%肾康丸高、低剂量含药血清),另设低糖模型组(10 mmol/LGlu)。培养72 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定各组细胞增殖,双抗夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清纤维连接蛋白(FN)含量,流式细胞仪检测细胞周期。【结果】高糖培养的MC显著性增殖,上清FN含量显著性增加,并出现细胞周期异常,肾康丸能抑制MC增殖,减少FN分泌,并使G0/G1期细胞比例显著性增加,而S期及G2/M期细胞比例减少。【结论】肾康丸可通过调整MC细胞周期异常,进而抑制高糖诱导的MC增殖和ECM分泌。     

传代对大鼠胚胎神经干细胞增生、凋亡和分化影响

目的探索传代对胚胎神经干细胞的增生、分化和凋亡等生物学性状的影响。方法原代培养后(P0)和经过两次传代后(P2)的神经干细胞用BrdU细胞增生检测试剂盒检测增生能力;用Annexin V-FITC凋亡试剂盒检测早期凋亡率;诱导分化7天后,分别进行MAP2和GFAP免疫荧光标记和Hoechst 33342核染色,计算MAP2 细胞和GFAP 细胞占Hoechst 细胞的各自比例。结果P0神经干细胞的OD值是:1.1899±0.0485(n=13),P2为0.3526±0.1053(n=11,P=0.000);P0的早期凋亡率为40.91%±12.74%(n=8),P2为24.31%±13.01%(n=9,P=0.018);P0和P2的神经元细胞比例分别为:58.81%±9.69%(n=10)和27.84%±5.70%(n=10,P=0.000),星形胶质细胞比例分别为22.85%±4.36%(n=10)和49.32%±6.95%(n=10,P=0.000)。结论传代后的神经干细胞的增生能力和早期凋亡率都会变弱,分化为神经元细胞的比例会降低,而星形胶质细胞的比例增大。     

妊娠期糖尿病患者胰岛素敏感性及胰岛细胞分泌变化对糖化血红蛋白的影响

目的观察妊娠24~32周妊娠期糖尿病(GDM)患者的胰岛素敏感性以及胰岛细胞分泌变化对体内糖化血红蛋白(Hb A1c)和糖化白蛋白(GA)的影响。方法选择2013年1月至2014年3月于邢台县中心医院妇产科就诊的713例妊娠妇女为研究对象,根据糖尿病诊断标准分为GDM组(243组)和非GDM组(470例),通过动态平衡模型分析稳态胰岛素评价指数(HOMA-IR)和胰岛β细胞功能指数(HOMA-β),胰岛素敏感指数(ISOGTT)和早期胰岛素分泌功能指数(ΔI0-30/ΔG0-30)。葡萄糖耐受试验(OGTT)后检测Hb A1c和GA的水平,对比两者在GDM患者中的应用价值。结果GDM组ISOGTT和ΔI0-30/ΔG0-30显著低于非GDM组(P<0.01),而HOMA-IR显著高于非GDM组(P<0.01)。Pearson相关性分析表明,Hb A1c与HOMA-IR呈正相关(r=0.350,P<0.01),GA与ΔI0-30/ΔG0-30(r=-0.219,P=0.001)和HOMA-β(r=-0.171,P=0.01)呈负相关。多因素回归分析结果显示,舒张压、空腹血糖、摄入葡萄糖120 min血糖、HOMA-IR是Hb A1c的影响因素;空腹血糖、摄入葡萄糖120 min血糖是GA的影响因素。结论与Hb A1c相比,GA与口服和餐后血糖水平显著相关,可更好地监测GDM患者胰岛素和饮食治疗的效果。     

秋水仙碱对胶质瘤细胞抑制作用的体外实验研究

目的 研究秋水仙碱对G422胶质瘤细胞生长增殖的抑制作用.方法 传代培养G422胶质瘤细胞,将其分为对照组、秋水仙碱处理组同时进行实验,秋水仙碱处理组的药物浓度分别为2、4、8、16μg/mL.分别在1、2、3d用MTT法测定肿瘤生存率.结果 秋水仙碱能明显抑制G422胶质瘤细胞的生长,而且随着秋水仙碱的浓度增大及时间延长,肿瘤细胞的生存率也降低.秋水仙碱的浓度在64μg/mL,作用3d时,肿瘤细胞的生存率仅(16.97±1.32%.结论 秋水仙碱对G422胶质瘤细胞的生长增值有明显的抑制作用,并表现为浓度和时间依赖性.