针刺对抑郁模型大鼠行为学及海马氨基酸类神经递质的影响

目的 通过观察针刺后抑郁模型大鼠行为学及海马氨基酸类神经递质含量的变化,探讨针刺的抗抑郁机制. 方法 30只成年雌雄各半的SD大鼠随机分为健康对照组、抑郁模型组和针刺组,每组10只.后两组采用孤养和长期不可预见的中等强度应激制作大鼠抑郁模型,针刺组在模型基础上对大鼠进行相应的针刺治疗,以开场试验检测大鼠自主活动,用高效液相色谱-荧光检测法测定大鼠海马氨基酸类神经递质含量. 结果 与健康对照组相比,模型组大鼠自主活动显著减少,海马谷氨酸(Glu)含量显著升高(P<0.01),γ-氨基丁酸(GABA)含量显著降低(P<0.01).而针刺组大鼠所测各项指标与健康对照组相比无显著性差异(P>0.05). 结论 针刺可逆转抑郁模型大鼠的抑郁样行为,其抗抑郁作用与其对海马内氨基酸类递质的调整相关.     

慢性应激所致大鼠海马长时程增强和氨基酸类神经递质的改变及苯妥英钠的效应

目的探讨慢性应激对大鼠海马长时程增强(LTP)和氨基酸类神经递质的影响及苯妥英钠对它们的效应.方法将24只SD雄性大鼠随机分为对照组、应激+生理盐水组和应激+苯妥英钠组,每组8只.采用离体海马脑片结合电生理的方法观测海马CA1区LTP的变化.以群体峰电位(PS)的幅值和场兴奋性突触后电位(fEPSP)的斜率作为观察LTP变化的指标.应用高效液相色谱紫外检测法检测海马氨基酸类神经递质的含量.结果(1)应激+生理盐水组PS幅值和fEPSP斜率在高频串刺激后增大的幅度低于对照组和应激+苯妥英钠组(P<0.05).(2)应激+生理盐水组和应激+苯妥英钠组的天冬氨酸含量[分别为(4.746±0.609)μmol/g和(4.948±0.751)μmol/g]高于对照组[(2.425±0.211)μmol/g,P<0.01];应激+生理盐水组的谷氨酸含量[(8.094±1.035)μmol/g]高于对照组[(6.016±0.677)μmol/g]和应激+苯妥英钠组[(6.970±0.647)μmol/g];P<0.05;应激+苯妥英钠组的GABA含量[(5.142±0.662)μmol/g]高于对照组[(4.229±0.449)μmol/g]和应激+生理盐水组[(4.249±0.463)μmol/g],P<0.01.结论慢性应激使大鼠海马CA1区LTP的形成受抑制,天冬氨酸和谷氨酸水平升高,GABA含量无明显改变;而苯妥英钠使慢性应激大鼠海马CA1区LTP维持正常.     

慢性应激所致大鼠海马长时程增强和氨基酸类神经递质的改变及苯妥英钠的效应

目的探讨慢性应激对大鼠海马长时程增强(LTP)和氨基酸类神经递质的影响及苯妥英钠对它们的效应.方法将24只SD雄性大鼠随机分为对照组、应激+生理盐水组和应激+苯妥英钠组,每组8只.采用离体海马脑片结合电生理的方法观测海马CA1区LTP的变化.以群体峰电位(PS)的幅值和场兴奋性突触后电位(fEPSP)的斜率作为观察LTP变化的指标.应用高效液相色谱紫外检测法检测海马氨基酸类神经递质的含量.结果(1)应激+生理盐水组PS幅值和fEPSP斜率在高频串刺激后增大的幅度低于对照组和应激+苯妥英钠组(P<0.05).(2)应激+生理盐水组和应激+苯妥英钠组的天冬氨酸含量[分别为(4.746±0.609)μmol/g和(4.948±0.751)μmol/g]高于对照组[(2.425±0.211)μmol/g,P<0.01];应激+生理盐水组的谷氨酸含量[(8.094±1.035)μmol/g]高于对照组[(6.016±0.677)μmol/g]和应激+苯妥英钠组[(6.970±0.647)μmol/g];P<0.05;应激+苯妥英钠组的GABA含量[(5.142±0.662)μmol/g]高于对照组[(4.229±0.449)μmol/g]和应激+生理盐水组[(4.249±0.463)μmol/g],P<0.01.结论慢性应激使大鼠海马CA1区LTP的形成受抑制,天冬氨酸和谷氨酸水平升高,GABA含量无明显改变;而苯妥英钠使慢性应激大鼠海马CA1区LTP维持正常.     

RP-HPLC法检测海马脑片灌流液中氨基酸类神经递质

目的　建立一种可同时测定微量谷氨酸 (Glu) ,天门冬氨酸 (Asp) ,牛磺酸 (Tau) ,γ-氨基丁酸 (GABA) 4种氨基酸类神经递质的 HPL C分析方法 .方法　制备大鼠海马脑片 ,灌流取样 ,冻干再溶后 ,采用邻苯二甲醛 (OPA)柱前衍生 ,反相梯度洗脱的高效液相 /荧光检测法 ,测定其中 4种微量氨基酸的含量 .结果　各氨基酸的浓度与峰面积均呈现良好的线性关系 ,相关系数 (r)分别为 :Asp0 .992 0 ,Glu0 .96 6 7,Tau 0 .980 3和 GABA 0 .95 84 ;日内变异系数 (% )为 Glu 4 .3,Asp 4 .6 ,Tau6 .7和 GABA7.1;最低检出限 (pmol· L- 1 )为 :Asp 0 .17,Glu 0 .35 ,Tau 0 .6 8和 GABA 1.12 ,标准加入回收率 (% )分别为 :Asp 10 6± 7,Glu 10 1± 5 ,Tau 94± 6和GABA92± 11.结论　该法具有衍生化反应操作简便 ,流动相成本低 ,灵敏度高 ,特异性强 ,分析时间短的优点 ,而且同样适用于其他生物样品的测定     

睡眠剥夺大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的影响

OBJECTIVE: To investigate the effects of sleep deprivation on the contents of gamma-amino-butyric acid (GABA) and glutamate (GLU) in rat brain. METHODS: Thirty rats were assigned into sleep-deprivation (SD, n=10) group (subjected to treatment on small platforms 6.5 cm of diameter), tank control (TC, n=10) group (treated on large platforms 14 cm of diameter) and control group kept in cages (CC, n=10). Rats in SD group were deprived of rapid eye movement sleep for 96 h by "flower pot" technique. High-performance liquid chromatography was used to determine the GABA and GLU contents in the 3 brain regions of the rats: the frontal cortex, hypothalamus and brain stem. RESULTS: The rats in SD group showed an increase in the contents of GABA and lowered ratio of GLU/GABA in all the 3 brain regions (P<0.01) compared with the rats in CC group; GLU contents were also increased in the brain stem and hypothalamus of the rats in SD group (P<0.05). No significant changes were found in TC group. CONCLUSION: Rapid eye movement sleep deprivation induces significant changes in the contents and proportion of amino-acid neurotransmitter in rat brain.     

HPLC测定脑组织和脑脊液中4种氨基酸类神经递质含量的方法改良研究

谷氨酸和γ－氨基丁酸等神经递质的代谢异常是诱发多种神经系统疾病的因素之一。由于神经递;质在脑内的含量很低,改良建立了一种用ＨＰＬＣ荧光检测Ｇｌｕ,ＧＡＢＡ等４种神经递质的方法,以高丝氨酸为内标,流动相为磷酸缓冲液和甲醇,梯度洗脱２０ｍｉｎ,荧光检测。     

反相高效液相色谱荧光法测定大鼠脑组织中氨基酸类神经递质

目的建立并改良反相高效液相色谱法,测定大鼠不同脑组织分区氨基酸类神经递质含量.方法改良使用JK2CO3缓冲溶液作为稀释液,反相高效液相色谱洗脱,高丝氨酸作为内标,邻苯二甲醛柱前衍生和荧光检测器检测大鼠大脑皮质、海马、纹状体和小脑中4种氨基酸类神经递质:天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(GABA)的含量.结果 4种氨基酸在18 min内洗脱完全,分离效果良好;在0.5～40 μmol/L浓度范围有较好的线性关系,其相关系数不低于0.999 7;4种氨基酸天内精密度范围为0.70%～4.01%,天间精密度为2.78%～9.58%;Asp、Glu和GABA的最低检测限为0.01 μnol/L,而Gly为0.02 μnol/L;海马组织4种氨基酸绝对回收率不低于89.39%.结论改良后的反相高效液相色谱荧光法灵敏度高、重复性好,能有效分离检测大鼠脑组织分区中氨基酸类神经递质.     

高效液相测定氨基酸类神经递质的方法探讨

目的 建立高效液相法测定脑组织氨基酸类神经递质的方法。方法 利用反相高效液相色谱二元梯度洗脱系统,邻苯二甲醛柱前衍生法结合荧光检测器测定脑组织中６种氨基酸类神经递质（天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、γ－氨基丁酸、甘氨酸、牛磺酸）的含量。结果 ６种氨基酸类神经递质在１３ｍｉｎ内得到良好分离,在１～１０ｕｍｏｌ／Ｌ浓度范围内与峰高的线性关系较好。结论 本方法具有快速、准确、灵敏度高、重现性等优点     

复方丹参片对阿尔茨海默病大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响

目的 研究复方丹参片对实验性阿尔茨海默病(AD)大鼠．脑内氨基酸类神经递质含量的影响，揭示其防治AD的作用机制。方法 采用HPLC方法检测：实验性AD大鼠脑内天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)和7一氨基丁酸(GABA)等氨基酸类神经递质的含量。结果 复方丹参片能明显降低实验性AD大鼠脑内兴奋性氨基酸Glu的含量，升高抑制性氨基酸Gy和GABA的含量。结论 复方丹参片降低兴奋性氨基酸含量，以对抗兴奋性氨基酸的毒性，这可能是其防治AD的机制之一。     

氨基酸类神经递质对神经系统的影响及其含量测定方法的研究

氨基酸类神经递质是脑内重要的一类神经递质,调控人脑的功能,神经系统疾病,如阿尔茨海默病与脑内氨基酸关系密切。目前应用较为广泛的氨基酸含量测定方法有高效液相色谱法、氨基酸分析仪测定法、色谱-质谱联用法,气相色谱法等,但这些测定方法都有一定的局限性,因此快速选择并确立一种合适的氨基酸和多肽类神经递质的高效测定方法显得尤为重要。该文综述了近年来血液与组织样品中氨基酸类神经递质的含量测定方法,以期为更多的研究者提供参考。     

N-甲基-D-天冬氨酸受体对清醒大鼠海马谷氨酸释放的调节作用

目的　应用清醒大鼠脑微透析技术 ,通过观察N -甲基 -D -天冬氨酸 (NMDA)受体激动剂和阻断剂对大鼠海马兴奋性氨基酸释放的影响 ,探讨NMDA受体对大鼠海马兴奋性氨基酸释放的自身调节作用。方法　Sprague-Dawley雄性大鼠 ,横跨海马背部植入一自制的透析探头 ,待大鼠清醒后 2 4h用人造脑脊液灌流 ,灌流速度为 5 μl·min-1,每 2 0min收集一次透析液 ,采用邻苯二甲醛 - β -巯基乙醇衍生化反相梯度洗脱荧光检测透析液中谷氨酸的含量。结果　海马内局部灌流NMDA 5 0 0 μmol·L-1可明显增加细胞外基础状态下谷氨酸水平。非竞争性NMDA受体拮抗剂MK - 80 1(10 0 μmol·L-1)可拮抗NMDA引起的谷氨酸释放增加作用。单独应用MK - 80 1(10 0 μmol·L-1)对基础状态下谷氨酸的水平没有影响。局部灌流NMDA受体协同激动剂甘氨酸5 0 0 μmol·L-1也可明显增加细胞外基础状态下谷氨酸的水平。局部灌流NMDA受体上甘氨酸部位的选择性阻断剂 7-氯犬尿烯酸 2 0 0 μmol·L-1可以拮抗甘氨酸引起的谷氨酸释放增加作用。结论　本研究发现兴奋性氨基酸受体NMDA受体的激活可增加海马内兴奋性神经递质的释放 ,这种NMDA受体可能存在于突触前膜 (兴奋性神经末梢膜上 ) ,即自身调节受体正反馈调节兴奋性氨基酸的释放。     

RP－HPLC法测定香菇多糖－十八氨基酸口服液中氨基酸的含量

采用反相高效液相色谱法测定香菇多糖－十八氨基酸口服液中氨基酸含量。以异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,以α－氨基丁醇为内标,采用梯度洗脱。方法简便,快速,１８种氨基酸的回收率为９５．３５％～９８．５４％,ＲＳＤ为０．８７％～３．２％。     

糖皮质激素对大鼠脑皮层、海马及海马脑片神经元膜电位的影响

应用细胞内生物电记录技术,于侧脑室和灌流槽内给予地塞米松,观察了大鼠大脑皮层、海马及海马脑片神经元膜电位的变化。结果如下:（1）在体实验记录的40个神经元中,有24个神经元对地塞米松呈去极化反应.平均幅值为（ 11.80±1.89)mV;有6个神经元的反应为超极化,平均幅值为（ 6.50±1.02）mV;有10个神经元无反应。（2）海马脑片实验,在所记录的7个神经元中有5个神经元对地塞米松呈去极化反应,平均幅值为（4.40±0.89）mV,未引起膜电导变化。结果表明:地塞米松对皮层及海马神经元的作用以去极化反应为主,部分神经元应为超极化。提示糖皮质激素对中枢神经元主要起兴奋作用,部分神经元产生抑制性影响。     

酸枣仁皂苷A对大鼠脑缺血海马区氨基酸递质水平及细胞凋亡的影响

目的：观察酸枣仁皂苷A对大鼠脑缺血海马区兴奋性氨基酸及细胞凋亡的影响,探讨酸枣仁皂苷A对脑缺血损伤保护的作用机制。方法：建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注损伤模型,将健康SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、尼莫地平组、酸枣仁皂苷A组,四组于脑缺血再灌注后12、24、48小时、4天、7天,各取6只大鼠断头取脑,测定大鼠缺血侧脑海马区氨基酸递质水平及细胞凋亡数。结果：除假手术组外,与模型组比较,尼莫地平组和酸枣仁皂苷A组各观察时间点缺血侧脑海马区谷氨酸（Glu）及细胞凋亡均明显降低（P〈0．05）,而γ-氨基丁酸（GABA）在各时间点均明显升高;与尼莫地平组比较,酸枣仁皂苷A组大鼠缺血侧海马区Glu降低（P〈0．05）,酸枣仁皂苷A组细胞凋亡数降低更显著（P〈0．05）,两组GABA比较,差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：酸枣仁皂苷A能调节脑缺血损伤后海马区氨基酸水平的释放,抑制细胞凋亡。     

哌甲酯、氯安酮长期作用对大鼠海马游离氨基酸和皮层下组织多巴胺的影响

本研究利用高效液相色谱分析法测定经两种不同作用机制的拟精神病药（哌甲酯、氯安酮）长期作用后（６周）的大鼠海马游离氨基酸和皮层下组织多巴胺及代谢物的含量。结果发现，哌甲酯和氯安酮长期作用后大鼠海马的γ－氨基丁酸、甘氨酸、天门冬氨酸、游离氨含量降低；氯安酮还使谷氨酸增高、精氨酸降低。两种药物均有使皮层下组织多巴胺活动增高的趋势，且哌甲酯尤明显。     

铅暴露对大鼠大脑皮质和海马NOS的影响

目的 观察铅暴露对大鼠海马和大脑皮质一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨铅暴露对中枢神经系统损害的机制.方法 4周龄Wistar雄性大鼠,按体重用45 mg/kg醋酸铅灌胃30天;第30天时测定大鼠海马和大脑皮质总NOS和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,对大鼠脑组织冰冻切片进行β-NADPH染色,并对海马各区nNOS阳性神经元进行数量统计分析.结果 与空白对照组大鼠比较,染铅组大鼠海马和大脑皮质总NOS活性明显降低,而iNOS活性均升高,海马CA1和齿状回nNOS阳性神经元数量减少,差异有显著性(P＜0.01).结论 铅暴露可以使大鼠海马和大脑皮质总NOS活性降低,iNOS活性升高,海马nNOS阳性神经元数量减少.     

上海地区正常成年男女血清游离氨基酸的测定

我国正常人血清(或血浆)中游离氨基酸浓度分析的报告甚少。本文首次报告用LKB-4400型氨基酸分析仪锂盐系统测定了上海地区52名正常成人(男19名,女33名)血清游离氨基酸浓度,结果17种氨基酸浓度与Armstrong和Stave报道的美国正常人血浆游离氨基酸浓度相近,但天门冬酰胺浓度高于美国人;发现16种氨基酸浓度有男女差别,即男性高于女性,而甘氨酸的男女差别与美国报告相反。差异的原因可能与血清、血浆样品不同或技术上的因索有关。     

马桑内酯致痫大鼠皮层及海马神经元的放电模式

在腹腔注射马桑内酯所致的急性癫痫和慢性点燃癫痫大鼠模型上，观察了大脑皮层和海马神经元膜电位的变化及放电模式。结果显示：皮层脑电图出现明显的阵发性痫样放电，胞内微电极记录皮层及海马神经元放电的模式为：①单纯去极化；②去极化并伴有阵发性或持续性放电；③去极化与超极化交替出现等。表明马桑内酯可以引起大脑皮层及海马神经元生物电活动的改变，其改变形式不一，但主要引起去极化。     

AccQ－Tag法测定复方氨基酸注射液中氨基酸的含量

采用６－氨基喹啉－Ｎ－羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯（ＡＱＣ）为衍生剂,与各种氨基酸柱前定量衍生后,用ＷａｔｅｒｓＨＰＬＣ仪,ＡＱＣ－Ｔａｇ￣ＴＭＣ＿１８柱,以１４０ｍｍｏｌ／Ｌ从醋酸钠溶液（ｐＨ＝４．９５）为溶剂Ａ,乙腈－水（３：２）为溶剂Ｂ进行梯度洗脱,检测波长为２４８ｎｍ,以α－氨基丁酸为内标。所有１８种氨基酸在３７ｍｉｎ内测定完毕,各种氨基酸测定的重现性ＲＳＤ％均小于２．０％（ｎ＝５）,平均回收率为９７．０％６～１０５．０％（ｎ＝５）。