外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例与移植肾长期存活关系的研究

目的研究外周血CD4 CD25 调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)比例对移植肾远期存活的影响及其作用机制,为CD4 CD25 Treg参与移植免疫耐受及临床采用监测CD4 CD25 Treg比例评估移植受者免疫功能状态提供实验依据。方法肾移植受者42例按肾移植术后恢复情况分为移植肾长期存活组28例,慢性排斥组14例,健康志愿者10例,检测外周血CD4 CD25 Treg比例、血清TGF-β1、IL-10水平,所得结果进行相关分析。结果移植肾长期存活组CD4 CD25 Treg比例较正常组及慢性排斥组均显著升高。CD4 CD25 Treg比例和血清IL-10水平显著相关(r=0.77,P<0.01),CD4 CD25 调节T细胞比例和血清TGF-β1水平无相关性。结论移植术后受者外周血CD4 CD25 Treg比例与受者长期存活密切相关,CD4 CD25 Treg有可能参与移植术后受者对同种异体移植肾免疫耐受的形成;外周血CD4 CD25 Treg比例可作为临床反映移植受者免疫功能状态的指标之一。     

肾移植受者外周血中CD4~+ CD25~+ FoxP3~+调节性T细胞比例在评价其免疫状态中的作用

目的结合转移体内迟发超敏反应检测法初步探讨外周血中CD4+CD25+FoxP3+Treg的比例对亲体肾移植受者免疫状态评估的作用。方法收集西南医院肾科门诊随访的2005-2008年间手术的亲体肾移植供者和受者各30例,进行转移体内迟发超敏反应检测(trans-vivodelayed type hypersensitivity-assay,Transvivo-DTH)实验,根据实验结果将患者分为耐受组和排斥组;运用流式细胞技术检测2组中受者外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+CD25+FoxP3+Treg比例。结果耐受组和排斥组裸鼠掌肿胀(同时注入受者PBMCs和供者抗原的脚掌)厚度分别为(1.72±0.44)×10-2、(8.05±2.26)×10-2mm,前者明显高于后者(P<0.05),2组受者外周血中CD4+CD25+FoxP3+Treg的比例分别为(9.23±1.79)%和(1.03±1.04)%,耐受组明显高于排斥组(P<0.05)。耐受组和排斥组裸鼠脚掌皮下炎性水肿的厚度均与外周血中CD4+CD25+FoxP3+Treg的比例呈负相关(P<0.05,r分别为0.82和0.87)。结论受者外周血中CD4+CD25+FoxP3+Treg的比例能够反应受者T细胞对供者抗原发生免疫反应的程度。外周血中CD4+CD25+FoxP3+Treg的比例在发现移植受者是否已有耐受方面有一定的参考价值。     

CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg调节性T细胞与移植肾长期存活的关系

[摘要] 目的 探讨肾移植术患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T 细胞( regulatory T cell , Treg) 百分含量,血清细胞因子IL-10的水平变化对移植肾远期存活的影响及其作用机制。 方法 肾移植术受者30例按肾移植术后恢复情况分为移植肾长期存活组16例,急性排斥组14例。健康志愿者20 例。分别检测外周血CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg 百分含量、血清IL-10 水平、血清肌酐水平,所得结果进行相关分析。 结果　移植肾长期存活组CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量较正常组及急性排斥组均显著升高。CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量和血清IL-10 水平呈正相关(r=0.604,p<0.05),移植肾长期存活组的血清肌酐水平明显低于急性排斥组,CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量和血清肌酐水平呈负相关（r=-0.534,p<0.05）。结论 CD4+CD25+Foxp3+ Treg 有可能参与移植术后受者对同种异体移植肾免疫耐受,与受者长期存活密切相关;外周血CD4+CD25+Foxp3+ Treg 百分含量可作为临床反映移植受者免疫功能状态的指标之一。     

Th17/CD4+CD25+Treg细胞与自身免疫病

CD4+ CD25+ 调节T 细胞(CD4+ CD25+ Treg) 是调节性T 细胞的一个重要亚类,Treg 可以通过IL-2 、TGF-β1等促炎症细胞因子调节Th17 / Treg平衡, 调控Th17 细胞介导的炎症反应、自身免疫反应.本文将Th17细胞/CD4+ CD25+ Treg 细胞与自身免疫性疾病的关系作一综述.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在严重烧伤等应激状态下对免疫系统的影响

严重烧伤后可诱发脓毒症及多器官功能障碍综合征(mul-tiple organ dysfunction syndrome,MODS),是目前大面积烧伤患者的主要死亡原因,而严重烧伤后免疫功能的紊乱则对脓毒症和MODS的发生和发展具有重要作用[1]。CD4+CD25+调节性T(regulatory T,Treg)细胞,是免疫系统中具有抑制活性的T细胞亚群,它在肿瘤免疫、感染免疫及移植耐受等自身免疫性疾病中发挥着重要作用[2-4]。在感染免疫中,CD4+CD25+     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在霍奇金淋巴瘤中的研究进展

1995年,SAKAGUCHI等[1]发现在正常人和小鼠外周血及脾脏组织的CD4+T细胞中有一持续高表达CD25分子(IL-2受体a链)的亚群,去除该类细胞可诱导各种自身免疫性疾病的发生,反之,将这种细胞输入去除胸腺的有自身免疫缺陷的裸鼠体内则可减轻甚至防止自身免疫性疾病的发生,由此表明这群细胞是一类重要的免疫调节细胞,遂将其命名为CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg).此后,逐步研究发现其在诱导维持自身免疫耐受、维持T细胞自稳、防止自身免疫性疾病、抗移植排斥、抗感染免疫,甚至在加强对肿瘤的免疫应答中都起重要作用.CD4+CD25+ Treg数量和功能异常是人类和动物自身免疫性疾病和其他炎性疾病的重要原因之一.     

外周血CD4+CD25+ 调节性T细胞在大鼠肾移植中的动态变化及应用研究

目的监测CD4+CD25+调节性T细胞在大鼠同种异体肾移植外周血中的动态变化,研究其在预测排斥反应和免疫耐受中的价值。方法流式细胞术监测CD4+CD25+调节性T细胞在大鼠同种异体肾移植外周血中的动态变化。结果CD4+CD25+调节性T细胞在大鼠同种异体肾移植急性排斥反应过程中明显低于同系对照组,而CsA组CD4+CD25+调节性T细胞明显高于同系对照组。结论 CD4+CD25+调节性T细胞在抑制肾脏移植排斥反应中发挥重要作用,动态监测外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的水平可预测和判断急性排斥反应的发生,了解肾脏移植后受体和移植肾之间的免疫反应程度或耐受状态。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在丙型肝炎中的意义

CD4~+CD25~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Treg)是一个具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,它不仅能抑制自身免疫性疾病的发生,并且会对移植耐受、肿瘤与感染免疫的调节产生参与诱导的作用,能够促进人的机体免疫内环境的稳定。本文对CD4~+CD25~+调节性T细胞的特征与调节的机制进行分析探讨,和在丙型肝炎病毒感染免疫发病机制中可能会发生的作用进行阐述。有相关的研究显示:其对自身抗原与非己抗原都会产生较强的免疫抑制效果。临床的相关研究结果,特别是对其在丙型肝炎病毒感染发病机制里进行的作用研究,都有利于对丙型肝炎慢性感染免疫应答机制的掌握和对慢性肝炎发生机制和免疫耐受的认识,并最终为慢性丙型肝炎病毒感染开辟新的免疫治疗途径。     

供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg对心脏移植小鼠体内B细胞功能的影响

目的 观察供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg对同种异系心脏移植小鼠受体B细胞功能的影响.方法 以Balb/c小鼠为供体、C57bl/6小鼠为受体建立小鼠心脏移植模型,于术前1 d、术后2周分别将供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg (1×106)于尾静脉注入受体体内,术后1个月抽取小鼠外周血,分离B细胞,检测其在抗IgM抗体刺激下的增殖情况,检测小鼠外周血IgG、IgA水平,以判断应用CD4+CD25+Treg后小鼠体内B细胞功能状态.实验组:术前、术后2周使用CD4+CD25+Treg(n＝8);阳性对照组:术前、术后未使用CD4+CD25+Treg(n＝8);空白对照组:未移植小鼠(n＝8).结果 实验证实,实验组B细胞增殖水平最低,空白对照组其次,阳性对照组最高,3组差异均有统计学意义(P<0.05).外周血IgG、IgA水平检测证实,实验组与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),二者明显低于阳性对照组(P<0.01).结论 经尾静脉注入CD4+CD25+Treg后心脏移植受体体内B细胞的功能可明显受到抑制,CD4+CD25+Treg可通过对B细胞的这一作用调节受体免疫状态,从而达到控制排斥反应,诱导免疫耐受的作用.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在肿瘤免疫中的研究进展

调节性T细胞(regulatory T cells,Treg细胞)是一类控制体内自身免疫反应的具有免疫抑制功能的T细胞亚群,与自身免疫性疾病的发生、移植耐受、肿瘤的免疫抑制等关系密切。近年来,Treg细胞在肿瘤中的作用研究逐渐成为热点,受到广泛关注。研究发现Treg细胞在肿瘤的发生、发展和转移的过程中发挥重要作用,可通过细胞-细胞接触、分泌抑制性细胞因子、干扰细胞代谢等方式直接或间接影响CD4~+CD8~+效应T细胞的功能,从而抑制机体的抗肿瘤免疫。因此,针对Treg的免疫疗法对于治疗肿瘤具有广阔前景。本文就调节性T细胞的作用机制特点及其与肿瘤免疫的关系做一简要综述。     

人外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞分选及扩增方法的建立

目的建立人外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(Treg)的免疫磁珠分选法(MACS)及体外扩增方法 ,并对扩增前后Treg细胞纯度及表型进行鉴定。方法流式细胞术检测人外周血Treg细胞占CD4~+T细胞的比例;免疫磁珠法分选CD4~+CD25~+Treg细胞,用CD3/CD28单抗包被的Dynalbeads联合IL2共同刺激CD4~+CD25~+Treg细胞进行体外扩增培养,在扩增培养的第0、7、14、21天分别进行细胞计数及检测细胞的活性,取扩增培养第0天及第14天细胞行流式细胞术检测扩增前后细胞纯度、主要表面标记及Foxp3的表达情况。结果正常人外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg水平占CD4~+T细胞(7.94±1.86)%,MACS能够成功分选出CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞,分选平均纯度达(95.86±0.65)%,细胞活性95%;以CD3/CD28单抗包被的Dynalbeads联合IL2共同刺激CD4~+CD25~+Treg细胞进行外扩增培养后,细胞有明显扩增。经2周扩增后,细胞扩增倍数达到原细胞数量的(21.33±1.53)倍,扩增后细胞Foxp3的表达由(95.86±0.65)%下降至(93.71±1.30)%,但差异无统计学意义(P0.05)。结论免疫磁珠分选法能够分选出高纯度的CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞,体外成功扩增CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞,扩增前后Treg细胞的纯度及表型无明显变化。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞对哮喘大鼠免疫功能影响

目的:观察CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对CD4+CD25-T细胞增殖和Th1/Th2细胞因子分泌的影响,探讨其在哮喘气道炎症中的作用机制。方法:将哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞分别与卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞和哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞联合培养,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测量细胞增殖情况,ELISA检测细胞IL-4、IL-5和IFN-γ含量。结果:OVA耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞能抑制CD4+CD25-T细胞增殖和Th2细胞因子分泌(P<0.05);哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞可明显抑制IFN-γ的分泌(P<0.05)。结论:OVA免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞可能通过抑制哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞增殖和影响Th1/Th2平衡发挥作用,哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞存在功能异常,可能与哮喘的发病有关。     

CD4+CD25+调节性T细胞在病毒感染性疾病中的作用

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）~．#-采确定的一类具有免疫抑制功能的T细胞亚群，主要通过细胞与细胞问直接接触和分泌抑制性细胞因子发挥作用，在维持机体免疫自稳、防止自身免疫以及抗感染免疫、肿瘤免疫、移植免疫、变态反应等方面起着重要作用。新近研究发现，CD4^＋CD25^＋Treg数量和功能异常与病毒感染性疾病的发生、发展关系密切。本文就CD4^＋CD25^＋Treg作用机制及其在病毒感染性疾病中的作用进行综述。     

CD4+CD25+调节性T细胞与肿瘤的研究进展

CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)是健康个体T细胞库的组成成分之一,具有独特的生物学功能,能够分泌IL-4、IL-10,转化生长因子-β(TGF-β),表达IL-2Ra(CD25)、细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)分子,对效应性T细胞具有抑制作用,是调节性T细胞的重要亚群,参与肿瘤的生长,自身免疫性疾病的发生及耐受移植排斥.现将该类细胞抑制作用机制的研究现况及其与肿瘤关系的研究进展作一综述.     

应用CD4+CD25+Treg细胞诱导大鼠肾移植免疫耐受的研究

目的 应用供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞诱导移植免疫耐受,抑制大鼠肾移植慢性排斥反应.方法 以SD、Wister大鼠分别为供、受体建立同种异体肾移植慢性排斥反应动物模型;受体脾细胞悬液同供体肾组织抗原孵育培养,诱导获得对供体抗原的特异性;采用MACS法分选具有供体抗原特异性的CD4 CD25 T细胞,FACS流式细胞法检测分选的CD4 CD25 T细胞及CD4 CD25 Treg细胞纯度;获得之供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞于同种异体肾移植术后2、4、6、8、10周,分别经尾静脉注射入受者体内(实验组,n=12),选取未注射组为对照(n=12).观察两组移植肾脏存活时间;术后第10、40、80天MTT法检测比较两组受体脾细胞对供体抗原刺激反应程度;术后第10、20、40、60、80天分别监测各组血肌酐水平.结果 FACS流式细胞法检测分选的CD4 CD25 T细胞得率为4.13%,分离纯度为73.34%;CD4 CD25 Treg细胞纯度为65.22%.所分选之CD4 CD25 Treg细胞成功获得供体抗原特异性,对供体抗原的抑制率(IR)为85.4%.移植肾存活时间:治疗组移植肾存活时间为(98.83±6.66)d,显著长于对照组的(78.25±4.71)d,组间差异有统计学意义(P＜0.05);术后第40、80天治疗组脾细胞对供体抗原刺激反应程度均明显低于对照组,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).术后第20、40、60、80天对照组血肌酐指标明显高于治疗组,同治疗组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞可特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应,有效抑制了移植肾慢性排斥反应的发生.     

膀胱尿路上皮癌微环境中CD4~+CD25~+Treg细胞的分布及其临床意义研究

目的探讨膀胱尿路上皮癌微环境中CD4~+CD25~+Treg细胞与临床病理之间的关系,探讨其在膀胱尿路上皮癌进展复发及预后中的价值。方法通过免疫组织化学Elivision法检测50例膀胱尿路上皮癌组织及20例正常膀胱组织中CD4~+CD25~+Treg细胞的数量分布情况,分析膀胱尿路上皮癌微环境中CD4~+CD25~+Treg细胞分布情况与各项临床病理之间的关系。结果 CD4~+CD25~+Treg细胞在膀胱尿路上皮癌微环境中均见分布,在正常膀胱组织中未见分布。CD4~+CD25~+Treg细胞在膀胱尿路上皮癌微环境中的分布与病理分级呈显著正相关(r=0.917),差异有统计学意义(P<0.05);与淋巴结转移呈显著正相关(r=0.723),差异有统计学意义(P<0.05);与进展复发呈显著正相关(r=0.670),差异有统计学意义(P<0.05)。CD4~+CD25~+Treg细胞在膀胱尿路上皮癌微环境中的分布与患者的年龄、性别、肿瘤大小及肿瘤个数之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论膀胱尿路上皮癌微环境中CD4~+CD25~+Treg细胞的分布情况与其病理分级、淋巴结转移及进展复发均表现为显著正相关。膀胱尿路上皮癌微环境中CD4~+CD25~+Treg细胞分布数量增加与肿瘤的进展复发及预后具有紧密联系,CD4~+CD25~+Treg细胞可能促进膀胱尿路上皮癌的发生发展。CD4~+CD25~+Treg细胞或许能够成为一个潜在的重要指标用来判断膀胱尿路上皮癌的进展复发及预后情况。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞及其在肝病的研究进展

调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是机体内具有免疫抑制功能的一类T细胞亚群。调节性T细胞在包括感染、肿瘤、自身免疫性疾病等在内的多种疾病有密切关系。CD4+CD25+Treg是一群专职Treg,是多种疾病研究的热点之一。本文主要就CD4+CD25+Treg的来源、分类、功能、免疫表型及其在肝病领域的研究进行综述。     

自身免疫调节因子对CD4+CD25+Treg细胞的影响

目的：观察自身免疫调节因子（AIRE）对CD4+CD25+Treg细胞的影响,探讨其在外周免疫耐受中的作用及机制。方法：pEGFPC3-AIRE质粒通过脂质体介导转染RAW264.7细胞;通过流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的数量;采用半定量RT-PCR法检测Foxp3和转化生长因子β（TGF-β）mRNA的表达;采用ELISA法检测TGF-β1水平。结果：AIRE转染的RAW264.7细胞可直接或间接诱导CD4+CD25+Treg细胞的产生及Foxp3 mRNA表达增强(P<0.05)。结论：表达在外周抗原提呈细胞（APCs）上的AIRE可直接和（或）间接影响CD4+CD25+Treg细胞的诱导产生及功能,从而可能在外周免疫耐受中发挥重要作用。     

消化道出血患者CD4~+CD25~+Treg细胞及其细胞因子TGF-β1、IL-10与预后的相关性

目的研究消化道出血(UGIB)患者CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg细胞)及其细胞因子转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素-10(IL-10)与预后的相关性。方法将2016年1月-2019年9月在北京市怀柔医院就诊的UGIB患者110例纳入UGIB组;另遵循年龄匹配原则自同期在本院就诊的消化道溃疡(胃镜确诊消化道溃疡,但无UGIB)患者、健康体检者各30人分别纳入溃疡组、对照组。比较三组CD4~+CD25~+Treg细胞及其细胞因子TGF-β1、IL-10水平,比较UGIB组患者治疗前、治疗后CD4~+CD25~+Treg细胞及其细胞因子TGF-β1、IL-10水平;并比较不同预后UGIB患者CD4~+CD25~+Treg细胞及其细胞因子TGF-β1、IL-10水平。结果 UGIB组CD4~+CD25~+Treg细胞及其细胞因子TGF-β1、IL-10显著高于溃疡组和对照组(P0.05);治疗后UGIB患者CD4~+CD25~+Treg细胞及其细胞因子TGF-β1、IL-10较治疗前均显著下降(P0.05)。110例UGIB患者未见再出血死亡及非再出血死亡病例,再出血率为16.36%;再出血的UGIB患者治疗前及治疗后的CD4~+CD25~+Treg细胞及其细胞因子TGF-β1、IL-10水平显著高于非再出血组(P0.05)。二元Logistic回归分析显示,治疗前CD4~+CD25~+Treg细胞及其细胞因子TGF-β1、IL-10,治疗后IL-10均是UGIB患者预后的独立影响因素(P0.05)。结论消化道出血患者存在免疫功能下降现象,且治疗前后的免疫功能指标与再出血发生情况密切相关,值得临床重视。     

人CD4+CD25+调节性T细胞的体外培养扩增

目的 建立人CD4⁺CD25⁺ Treg细胞的分离和体外扩增方法,并检测扩增细胞的表型及体外免疫抑制功能。方法 免疫磁性分离(MACS)方法分离人CD4⁺CD25⁺Treg细胞,加入刺激因子与之共培养扩增,用台盼蓝染色法和流式细胞法检测细胞的活性和纯度,流式细胞法检测细胞主要表型标记,实时定量PCR检测Treg核心标记Foxp3的表达,混合淋巴细胞反应试验分析其免疫抑制功能,ELISPOT方法检测产生细胞因子的细胞数目。结果 扩增2～3周的CD4⁺CD25⁺ Treg细胞数目达到新鲜细胞的3500倍,活性> 97 %,纯度>96 %;扩增的细胞与新鲜的细胞保持了相似的表型、Foxp3表达,其抑制功能略强于新鲜的CD4⁺CD25⁺ Treg细胞,其差异具有统计学意义（71% vs 51%, P<0.05）,可能与其产生抑制性细胞因子的细胞数目增加有关。结论 本试验室创建的分离和体外扩增人CD4⁺CD25⁺ Treg细胞的方法,可以大量扩增出高纯度、有活力且不影响其抑制功能的Treg细胞,解决了CD4⁺CD25⁺ Treg细胞数目少的问题。