过氧化物酶体增殖激活物受体与15-脂氧合酶-2在前列腺癌组织中的表达及其意义

目的 观察过氧化物酶体增殖激活物受体(PPAR-γ)及15-脂氧合酶-2(15-LOX-2)在前列腺癌中的表达,探讨其意义.方法 采用免疫组织化学方法检测28例前列腺癌组织中PPAR-γ及15-LOX-2蛋白的表达,取26例前列腺增生组织作为对照.结果 PPAR-γ在前列腺癌组表达阳性程度高于前列腺增生组(x2=4.84,P＜0.05);15-LOX-2在前列腺癌组表达阳性程度低于前列腺增生组(x2 =9.00,P＜0.05).T3期前列腺癌PPAR-γ的表达阳性程度明显高于T2期(H=4.103,P＜0.05);T2期与T3期前列腺癌细胞15-LOX-2的表达阳性程度差异无统计学意义(H =0.076,P＞0.05).Gleason评分≥7分前列腺癌PPAR-γ的表达阳性程度明显高于Gleason评分＜7分(H=5.306,P＜0.05);Gleason评分≥7分与Gleason评分＜7分前列腺癌15-LOX-2的表达阳性程度差异无统计学意义(H =0.313,P＞0.05).结论 PPAR-γ蛋白在前列腺癌组织中高表达,并且与病理分期及Gleason评分有关;15-LOX-2在前列腺癌组织中低表达.它提示PPAR-γ和15-LOX-2与前列腺癌发生与发展有关.     

EZH2在前列腺癌中的表达及其与临床病理的关系

目的:探讨EZH2蛋白及其mRNA在前列腺癌中的表达以及两者与临床病理参数间的关系。方法:通过组织芯片技术,运用免疫组化(EnVision法)和原位杂交方法分别检测48例前列腺癌中EZH2蛋白及其mRNA的表达,同时检测常规石蜡组织中15例良性前列腺增生组织和12例高级别上皮内瘤变组织中的EZH2蛋白及其mRNA的表达作为对照。结果:EZH2蛋白和mRNA在前列腺癌中的阳性率(87.5%、81.25%)明显高于良性前列腺增生组织(13.33%、6.67%)和高级别上皮内瘤(16.67%、16.67%),差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化显示,EZH2蛋白在Gleason≥7分组阳性表达率(96.67%)明显高于Gleason≤6分组(72.22%),差异有统计学意义(P<0.05)。EZH2蛋白阳性表达率与TNM分期比较,T3～T4期(100%)明显高于T1～T2期(76.92%),亦有统计学意义(P<0.05),而EZH2蛋白表达与年龄和PSA无关(P>0.05)。原位杂交显示,EZH2mRNA的阳性表达率T3～T4期(100%)高于T1～T2期(85%),与TNM分期显著相关(P<0.05),而与年龄、PSA和Gleason分级无关(P>0.05)。分段评价预后估计较好组与预后估计较差组,两组之间EZH2蛋白及其mRNA表达阳性率均有显著性差异(P<0.05)。结论:EZH2蛋白及其mRNA在前列腺癌中高表达,提示其在前列腺癌的发生、发展过程中可能起重要作用,有可能成为判定前列腺癌恶性程度进程和预后的参考指标。     

PFKFB3基因在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞糖酵解及生长的影响

目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3（PFKFB3）基因在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞糖酵解及生长的影响。 方法收集我院病理科前列腺增生和前列腺癌蜡块组织,应用免疫组化技术检测PFKFB3的表达水平。通过荧光定量PCR和Western blot实验检测正常前列腺上皮细胞（RWPE-1）和四种前列腺癌细胞系（PC3、LNCaP、DU145、C4-2）中PFKFB3的表达。应用RNA干扰技术敲低PFKFB3表达,采用细胞糖酵解试剂盒、CCK-8和克隆形成实验检测PFKFB3对前列腺癌细胞的糖酵解和增殖活性的影响。 结果与前列腺增生组织相比,前列腺癌组织中的PFKFB3表达量明显增高[（59.7±0.25） vs （3.08±0.16）,P<0.05],且病理Gleason评分越高,PFKFB3表达量也越高。同样PFKFB3在不同前列腺癌细胞系中均明显高表达。抑制PFKFB3基因表达后,前列腺癌细胞的糖酵解和增殖能力显著降低。 结论PFKFB3基因在前列腺癌恶性进展中表达上调,促进肿瘤细胞的糖酵解和增殖,靶向PFKFB3可能为前列腺癌分子诊断和治疗提供潜在的应用价值。     

前列腺癌患者癌组织中miR-647和HOXA9表达水平及其与预后的关系分析

目的 通过检测前列腺癌组织中微小RNA(microRNA,miR)-647、同源盒A9(HOXA9)表达水平，分析miR-647、HOXA9与前列腺癌患者预后的关系。方法 收集本院108例前列腺癌患者术中切除的癌组织及其对应的癌旁组织，使用qRT-PCR技术检测组织中miR-647和HOXA9 mRNA表达水平，免疫组化法检测HOXA9蛋白表达水平，并分析miR-647、HOXA9表达水平与患者临床病理特征及预后的关系；Pearson相关系数分析miR-647与HOXA9的相关性。结果 前列腺癌组织中miR-647表达水平(0.65±0.12)显著低于癌旁组织(1.01±0.09)(P<0.05),HOXA9 mRNA表达水平(1.86±0.37)明显高于癌旁组织(1.03±0.10)(P<0.05);癌组织中HOXA9蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05);前列腺癌组织中miR-647与HOXA9呈负相关(r=-0.680,P=0.000);miR-647、HOXA9表达水平与患者T分期、淋巴结有无转移、Gleason评分以及前列腺特异抗原(PSA)水平有关...     

FOXN2在前列腺癌组织的表达及对前列腺癌细胞生物学的影响

探讨双头框蛋白N2（FOXN2）在前列腺癌（PCa）组织中的表达以及对PCa细胞生物学的影响。方法 选取宜宾市第二人民医院50例接受手术治疗的PCa患者的标本及癌旁组织,通过RT-qPCR实验和Western blot实验分别检测PCa组织和癌旁组织中的FOXN2 mRNA及蛋白的表达水平,并分析PCa组织中FOXN2与患者临床病理特征的相关性。通过RT-qPCR实验检测正常前列腺细胞RWPE-1、PCa细胞PC-3、DU145、LNCaP中FOXN2 mRNA的表达水平。选取PC-3细胞为研究对象,分为FOXN2过表达组、空载体对照组以及对照组,分别通过MTT实验、流式细胞实验、Transwell实验以及Western blot实验检测各组细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭情况以及相关蛋白Bax、CyclinD1、MMP-2的表达量。结果 与癌旁组织相比,FOXN2的mRNA和蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,与TCGA数据库中结果一致。FOXN2低表达与PCa患者淋巴转移、TNM分期以及Gleason评分有关（P=0.003、0.005、0.002）。与人正常前列腺细胞RWPE-1相比,FOXN2在PCa细胞PC-3、DU145、LNCaP中均呈现低表达（P<0.05）,其中PC-3细胞中表达量最低。与对照组和空载体对照组相比,FOXN2过表达组的PC-3细胞在作用24 、48 、72 h后增殖能力显著下降（F=290.400、57.735、113.014,P<0.05）,CyclinD1蛋白表达水平显著下降（P<0.05）;PC-3细胞的凋亡率显著升高（P<0.05）,Bax蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;PC-3细胞的迁移和侵袭能力显著下降（P<0.05）,MMP-2蛋白表达水平显著下降（P<0.05）。结论 FOXN2在PCa组织及细胞中低表达,过表达FOXN2可抑制PCa细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。     

精子发生相关基因SOX30基因在人前列腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究SRY box containing gene 30(SOX30)基因在前列腺癌组织中表达情况,并且分析SOX30的表达与前列腺癌临床病理特征之间的相关性;并检测SOX30在前列腺癌细胞PC3、DU145、LNCaP以及正常人前列腺上皮细胞RWPE-1中的表达情况。方法采用免疫组织化学方法检测SOX30在前列腺癌组织中表达特点,采用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和蛋白印迹法(Western Blotting)分析SOX30在PC3、DU145、LNCaP以及正常人前列腺上皮细胞RWPE-1中的表达情况,运用统计学方法分析SOX30蛋白表达量与前列腺癌临床病理特征之间的关系。结果在123例前列腺癌中,68例(55.28%)发生SOX30表达缺失,并且SOX30表达缺失与前列腺分期(P=0.001)、Gleason评分(P0.001)有明显的相关性;与正常人前列腺上皮细胞RWPE-1相比,SOX30在PC3、DU145、LNCaP中表达明显降低。结论 SOX30可能是作为一个肿瘤抑制基因在前列腺癌的发生发展中起着重要作用。     

前列腺癌中P53的表达及其临床意义

目的:探讨P53在前列腺癌中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化Elivision法,检测45例前列腺癌和10例前列腺增生组织标本P53的表达,分析P53表达与前列腺癌分期、分级、前列腺特异性抗原(PSA)水平、内分泌治疗效果及预后的关系。结果:P53在前列腺癌和前列腺增生中阳性表达率分别为51.1%和10.0%(P<0.05);D期和A~C期前列腺癌中阳性表达率分别为70.0%和25.0%(P<0.05);Gleason评分≤7分和>7分前列腺癌中阳性表达率分别为14.3%和56.7%(P<0.05);PSA≤10μg/L和>10μg/L前列腺癌中阳性表达率分别为20.0%和60.0%(P>0.05);在内分泌治疗有效和无效前列腺癌中阳性表达率分别为25.0%和72.3%(P<0.05);LogRank检验分析P53阴性表达前列腺癌患者的生存时间明显长于P53阳性表达前列腺癌患者(P<0.05)。结论:P53表达可以作为判定前列腺癌预后的分子标记,同时可以预测内分泌治疗的效果。     

MiR-29a通过调节HuR影响前列腺癌细胞的生物学行为

目的 研究前列腺癌中miR-29a 对HuR表达的调节，进而影响细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡。方法 通过实时荧光定量（qRT-PCR）和免疫印迹法（Western blot）检测在正常前列腺上皮细胞RWPE-1和激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3内miR-29a、人抗原R(HuR) mRNA和蛋白的表达水平；miR-29a mimics(模拟剂)、inhibitor（抑制剂）和NC miRNA(对照剂)转染PC-3细胞48 h后检测miR-29a、HuR mRNA和蛋白的表达水平。细胞增殖试剂盒(CCK-8)、迁移和侵袭实验（Transwell小室）、流式细胞术分别检测PC-3细胞被转染后细胞增殖、迁移侵袭、凋亡的改变。结果 与RWPE-1细胞相比，PC-3细胞中miR-29a的表达下调，HuR mRNA和蛋白的上升（P<0.05）。与对照组相比，miR-29a mimics(模拟剂)、inhibitor（抑制剂）转染PC 3细胞后HuR mRNA无改变，但是能够改变HuR蛋白的表达（P<0.05）。MiR-29a能够抑制细胞增殖、迁移、侵袭，促进细胞凋亡（P<0.05）。结论 在前列腺癌PC-3细胞中，miR-29a通过调节HuR蛋白的表达，进而对细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡产生影响。     

不同来源前列腺基质细胞对前列腺癌细胞IGF-1和p-AKT表达的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子在前列腺癌肿瘤-基质交互作用中的地位及其作用机制.方法 将前列腺癌旁基质细胞和良性前列腺基质细胞分别与前列腺癌细胞系PC-3细胞分隔共培养(并设空白对照),之后检测前列腺癌细胞中IGF-1 mRNA(半定量RT-PCR)和p-AKT蛋白表达(Western blot).结果 与空白对照组相比较,癌旁基质细胞共培养组IGF-1 mRNA表达有所上调、p-AKT蛋白表达有所上调,但无统计学意义(P＞0.05);良性基质细胞共培养组IGF-1 mRNA和p-AKT蛋白表达显著下调(P＜0.05).相关性分析显示各组前列腺癌细胞IGF-1 mRNA与p-AKT蛋白表达呈正相关.结论 良性前列腺基质细胞通过水溶性因子抑制前列腺癌细胞中IGF-1及其下游因子表达,前列腺癌旁基质细胞则丧失了该抑制作用.     

前列腺癌组织中TGF-β1 mRNA表达及其临床意义

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在前列腺癌中的表达及意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对前列腺癌组织中TGF-β1mRNA表达进行研究。结果:TGF-β1mRNA的相对含量值:在正常前列腺组织为0.74±0.11;在前列腺癌T1~T2期为(0.69±0.10),T3~T4期为(0.44±0.08);Gleason评分≤5分者为(0.70±0.12),6~8分者为(0.54±0.11),≥9分者为(0.42±0.09)。T1~T2期与正常前列腺相比,差异无显著性(P>0.05),T3~T4期与正常前列腺组织相比,差异有极显著性(P<0.01),T3~T4期与T1~T2期前列腺癌相比,差异有显著性(P<0.05)。Gleason评分≤5分者与正常前列腺相比,差异无显著性(P>0.05),6~8分者与正常前列腺相比,差异有显著性(P<0.05),≥9分者与正常前列腺相比,差异有显著性(P<0.01),≥9分者与≤5分及6~8分者相比,差异均有显著性(P<0.01和P<0.05)。结论:TGF-β1的mRNA表达与临床分期、病理分级呈负相关。     

Sharpin蛋白在前列腺癌中的表达及其与Gleason评分、t—PSA关系的研究

目的探讨Sharpin蛋白在人不同前列腺癌细胞株中与前列腺癌组织中的表达及其与Gleason评分、血清PSA的关系。方法采用实时荧光定量PCR法,检测Sharpin在DUl45、PC-3和LNCaP3种常见的前列腺癌细胞株和RWPE．1正常前列腺上皮细胞株中的表达。同时采用免疫组织化学方法检测Sharpin在前列腺增生及前列腺癌组织中的表达,并探讨与临床病理特征的关系。结果Sharpin在3种前列腺癌细胞株中的mRNA水平（1．62±0．31,1．36±0．23,2．1±0．1）要明显高于正常前列腺上皮细胞RWPE-1（0．6±0．11）。免疫组织化学结果示Sharpin在前列腺癌组织中高表达,前列腺癌中的阳性表达率远远高于前列腺增生组织,平均染色得分也要远远高于前列腺增生组织。另外,Sharpin在前列腺癌组织中的表达与患者的Gleason评分和术前血清的t-PSA密切相关,均呈正相关（P〈0．05）。结论Sharpin可能是前列腺癌的肿瘤相关抗原,sharpin的表达可能具有评估前列腺癌患者病情、指导临床治疗方案的指导及判断预后及复发的作用。     

TLR4在前列腺癌中的表达及临床意义

目的：探讨TLR4在前列腺癌（PCa）中的表达情况及意义。方法：采用免疫组化法检测TLR4与Survivin蛋白在41例PCa及20例良性前列腺增生（BPH）组织中的表达,同时分析TLR4和Survivin蛋白表达与Gleason系统分级的关系。结果：TLR4与Survivin蛋白在BPH组织中的阳性表达例数分别为15例（75％）与0例（O）,在PCa组织中的阳性表达例数分别为18例（43．9％）与28例（68．3％）,TLR4表达与PCa的Gleason系统分级有显著相关性（P〈0．05）,随着Gleason评分增高,TLR4表达降低。Survivin蛋白的表达与Gleason系统分级无关（P〉O．05）。结论：TLR4表达与PCaGleason系统分级相关,其表达与PCa的发生发展密切相关,可成为估计肿瘤预后的一项指标。     

前列腺癌中微管相关蛋白1轻链3的表达及其临床意义研究

目的 检测前列腺癌（PCa）组织中微管相关蛋白1轻链3（MAP1LC-3）基因和蛋白表达的变化,探讨其相关的临床意义。方法 收集2016年5月至2019年2月本院泌尿外科需手术治疗的PCa患者96例,取肿瘤组织标本和癌旁正常前列腺组织标本用于研究。荧光定量PCR检测组织MAP1LC-3基因表达水平。免疫组化染色检测组织中MAP1LC-3蛋白表达水平。结果 PCa患者癌组织中MAP1LC-3基因的2^-△△Ct值为（0.375±0.065）,显著高于癌旁正常前列腺组织的（0.116±0.024）（P<0.01）。PCa组织中MAP1LC-3蛋白的AOD值为（0.351±0.046）,显著高于癌旁正常前列腺组织的（0.082±0.013）（P<0.01）。PCa组织中MAP1LC-3基因2^-△△Ct值和蛋白AOD值在Ⅲ、Ⅳ期患者显著高于Ⅰ、Ⅱ期患者（P<0.01）,N1期患者显著高于N0期患者（P<0.01）,Gleason评分>7分患者显著高于Gleason评分≤7分患者（P<0.01）,PSA>20 ng/mL患者显著高于PSA≤20 ng/mL患者（P<0.01）。结论 PCa组织中MAP1LC-3基因和蛋白高表达,高表达的MAP1LC-3可能参与了PCa的发生、侵袭和转移过程。     

前列腺癌组织中间层上皮细胞比例差异的研究

目的:探讨前列腺癌组织中间层上皮细胞构成比例差异及其临床意义。方法:对60例前列腺癌标本分别进行CK5、CK8免疫组化染色将前列腺癌分为两类:即以中间层上皮细胞为主的前列腺癌(CaP-INT)共计32例和以腔面层上皮细胞为主的前列腺癌(CaP-LUM)共计28例。比较两类前列腺癌雄激素受体(AR)阳性率、患者年龄、血清t-PSA、前列腺体积、G leason评分、临床分期、雄激素抵抗率的差异。结果:两类前列腺癌相比较,CaP-LUM的AR阳性率为(77.21±10.22)%,而CaP-INT其阳性率为(24.42±11.41)%,CaP-INT的AR阳性率明显低于CaP-LUM(P<0.05)。远处转移的病例数,CaP-INT为14例,CaP-LUM为4例,CaP-INT转移率明显高于CaP-LUM(P<0.05)。在行内分泌治疗的患者中,CaP-INT组共26例,有6例进展为雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC);CaP-LUM共23例,有1例进展为AIPC,两者亦有显著差异(P<0.05)。CaP-INT在局部临床分期上也显著高于CaP-LUM(P<0.05)。而两类前列腺癌在年龄、血清t-PSA、前列腺体积及G leason评分上无显著差异(P>0.05)。结论:中间层上皮细胞增多和前列腺癌侵袭性增加、肿瘤转移性增强及产生雄激素抵抗相关。     

Myofibroblastic stromal reaction and expression of tenascin-C and laminin in prostate adenocarcinoma

The aim of this study was to analyse relationship between changes of the stroma and expression of tenascin-C (TN-C) and laminin in prostate carcinoma. Tenascin-C immunostaining was increased, and laminin decreased in carcinomas compared with peritumoral tissue and benign prostate hyperplasia (P<0.05). Statistical analysis confirmed connection between stromal changes and TN-C expression in prostate carcinoma (P<0.05). Gleason pattern 3 carcinomas showed more pronounced stromal reaction and TN-C expression compared with Gleason pattern 4 carcinomas (P<0.05). The main cells in prostate cancer stroma are myofibroblasts that are also responsible for tenascin production. Degradation of laminin was not connected with myofibroblastic stromal changes.     

前列腺癌组织中酪氨酸硫酸化转移酶1(TPST1)的表达水平及临床意义

目的分析酪氨酸硫酸化转移酶1(TPST1)在前列腺癌(PCa)组织中的表达情况,并探讨其与前列腺癌患者临床病理特征和预后的关系。方法在肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库收集499例前列腺癌患者,分析TPST1 mRNA与PCa患者临床病理特征及预后的关系;采用免疫组织化学SP法检测前列腺组织芯片(TMA)中TPST1蛋白的表达,并分析其与PCa患者临床病理特征的关系。结果 TCGA数据库结果显示TPST1表达量与年龄具有显著相关性(P<0.05),与血清PSA、Gleason评分、临床T分期、淋巴结转移和远处转移相关性没有统计学意义(P>0.05);免疫组化结果显示,PCa癌组织中TPST1蛋白的高表达率为78.0%(39/50),明显高于非前列腺癌组织的46.67%(14/30),差异有统计学意义(P<0.05);TPST1的TMA分析结果显示,TPST1蛋白表达量与年龄、肿瘤分级、Gleason评分、临床T分期、淋巴结转移以及远处转移相关性没有统计学意义(P>0.05);TCGA数据库样本的Kaplan-Meier生存分析结果显示TPST1 mRNA高表达组的无生化复发生存情况和无病生存情况差于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05);COX单因素和多因素分析结果显示,TPST1不是影响PCa患者生存预后的独立危险因素。结论 TPST1在PCa癌组织中呈高表达,TPST1高表达提示预后差,但其与PCa患者临床分期、淋巴结转移无明显相关性,不是影响PCa患者生存预后的独立危险因素。     

ID3蛋白在前列腺癌中的表达及临床病理学意义

目的:研究ID3蛋白在前列腺癌中的表达及临床病理学意义。方法:应用间接免疫荧光技术检测ID3在PC-3M细胞中的表达情况;应用免疫组化技术检测29例前列腺癌和15例前列腺增生标本中ID3的表达情况,分析ID3与临床病理参数之间的关系。结果:ID3蛋白在PC-3M细胞中主要表达在细胞核;29例前列腺癌中ID3阳性表达率为82.7%(24/29),15例前列腺增生标本中ID3阳性表达率为6.6%(1/15),前者显著高于后者(P<0.05);ID3蛋白表达程度与前列腺癌的G leason评分显著相关(P<0.05)。结论:ID3蛋白在前列腺癌中表达,其表达量随着G leason评分的升高而升高。