姜黄素对人口腔鳞癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨姜黄素对人口腔鳞癌细胞Tca8113及Tb增殖的抑制及诱导凋亡作用。方法分别应用6．25、12．50、25．00、50．00μmol／L的姜黄素作用Tca8113及Tb细胞24h,采用MTT法检测姜黄素对口腔鳞癌细胞Tca8113及Tb增殖的抑制作用,形态学观察及流式细胞仪测定细胞凋亡。结果6．25～50．00μmol／L姜黄素能显著抑制口腔鳞癌细胞Tca8113和Tb细胞的增殖（F＝793．94、391．08,q＝6．00～62．68,P〈0．05）。流式细胞仪检测显示口腔鳞癌细胞凋亡率随姜黄素浓度升高而增加。倒置显微镜下可观察到部分凋亡细胞出现染色质凝集、核固缩、核碎裂等形态学改变。结论姜黄素对人口腔鳞癌细胞Tca8113及Tb的增殖具有显著的抑制作用,并可诱导细胞凋亡。     

姜黄素对大鼠肺成纤维细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对肺纤维化大鼠肺成纤维细胞增殖、凋亡的影响。方法:将体外培养的正常大鼠肺成纤维细胞(NLF)和肺纤维化大鼠肺成纤维细胞(MLF)分别于不同浓度的姜黄素中孵育;观察细胞生长状态变化;MTT法检测吸光值,计算细胞抑制率;流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果:姜黄索对MLF有抑制作用,存在剂量依赖(r=0.723;P<0.01)与时间依赖性(r=0.625,P<0.05)。流式细胞分析显示,姜黄素处理组MLF凋亡率较阴性对照组(4.29%)显著升高(P<0.01),并呈药物浓度依赖性。姜黄素不能抑制NLF增殖,对其凋亡影响无显著性。结论:姜黄素在体外对MLF具有抑制增殖、诱导凋亡的作用;而对NLF无明显影响。提示姜黄素可以通过诱导肌成纤维细胞的凋亡而起到抗纤维化的作用。     

姜黄素对大鼠肺成纤维细胞增殖和凋亡的影响

摘要 目的：探讨姜黄素对肺纤维化大鼠肺成纤维细胞增殖、凋亡的影响。方法：将体外培养的正常组大鼠肺成纤维细胞(NLF)和博来霉素诱导肺纤维化模型组大鼠肺成纤维细胞(MLF)分别与不同浓度的姜黄素孵育；观察细胞生长状态变化；MTT法检测吸光值，计算细胞抑制率；流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果: 姜黄素作用MLF6h、12h、24h后，各浓度组OD值较对照组显著降低（P<0.01），并呈时间－剂量效应关系。流式细胞分析显示，姜黄素处理组MLF凋亡率较对照组显著升高（P <0.01）,呈药物浓度依赖性。姜黄素不能抑制NLF增殖，对其凋亡无显著影响。结论：姜黄素在体外对MLF具抑制增殖，诱导凋亡作用；而对NLF无明显影响。提示姜黄素可以通过诱导肌成纤维细胞的凋亡而起到抗纤维化的作用。     

粉防已碱对急性缺血性肾损伤细胞凋亡的影响

目的：探讨粉防已碱在急性缺血性肾损伤中的作用及与细胞凋亡的关系。方法：在钳夹册侧肾蒂４５ｍｉｎ致大鼠急性缺生肾损伤模型的基础上,采用肾组切片ＨＥ染色、肾ＤＮＡ片分析及原位末端转移酶标记法等技术,定性、定量分析了急性缺血性肾损伤时肾小管上皮细胞的凋亡现象。结果：急性缺血性肾损伤时,肾小管皮皮细胞的凋亡现象明显啬粉防已碱对急性缺血性肾损伤具有保护作用,能够明显降低受损肾小雕恨水平。结论急性缺血性肾损伤     

姜黄素诱导Hep-2细胞凋亡及其对细胞周期各时相的影响

目的探讨姜黄素对Hep-2（人喉癌细胞株）细胞诱导分化机制，为喉癌治疗提供理论依据。方法应用MTT（塞唑兰）比色法和流式细胞仪检测Hep-2细胞增殖抑制率及细胞周期各时相的变化和凋亡率，并通过电子显微镜观察经姜黄素诱导分化后的亚细胞结构改变。结果姜黄素对Hep-2细胞增殖有明显的抑制作用，且呈剂量依赖性，流式细胞仪分析，G1期细胞增多，S期细胞减少，C2／M期细胞相对增多，亚细胞结构、细胞空化，染色质趋边凝集。结论姜黄素能够抑制Hep-2细胞增殖，阻止G1期细胞向S期的进程，促进Hep-2细胞凋亡。     

姜黄素对大鼠神经元凋亡和神经行为学的影响

目的探讨姜黄素对大鼠全脑缺血/再灌注损伤后海马CA1区神经元凋亡与神经行为学的影响。方法健康清洁雄性SD大鼠216只,其中108只用于细胞凋亡检测,108只用于神经行为学试验。随机均分为假手术组(SH组)、缺血再灌注组(IR组)和姜黄素干预组(CU组)。采用四血管阻塞法建立大鼠全脑缺血再灌注模型,干预组经腹腔注射姜黄素。原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,旷场试验和高架十字迷宫试验评价神经行为学变化。结果 TUNEL法显示SH组凋亡率较低,与SH组比较,IR组凋亡率的增高差异有统计学意义(P<0.01)。CU组在6 h后各时点凋亡指数较IR组低,差异有统计学意义(P<0.01)。旷场试验和高架十字迷宫试验显示CU组大鼠和IR组相比探索能力较强,焦虑情绪较轻,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠全脑缺血/再灌注后,姜黄素能够降低海马CA1区神经元的凋亡指数,并改善大鼠全脑缺血/再灌注后的神经行为学功能,从而起到脑保护作用。     

沙漠干热环境下中暑大鼠炎症因子与心肌损害及细胞凋亡相关性研究

目的：探讨沙漠干热环境下中暑大鼠血清炎症因子TNF－α、IL－1β的变化与心肌细胞损害和细胞凋亡的关系。方法48只雄性SD大鼠随机平均分成六组：沙漠干热环境轻度中暑组及其常温对照组,中度中暑组及其常温对照组,重度中暑组及其常温对照组,然后将三个实验组大鼠分别置于模拟沙漠干热环境中（ T：41℃,湿度：10％）,三个对照组大鼠置于常温环境（ T：25℃,湿度35％）中,在建立沙漠干热环境中暑大鼠模型后,干热环境组及其对照组分别在实验开始70 min（轻度中暑）、110 min（中度中暑）、145 min（重度中暑）三个时间点麻醉处死,并留取血液标本和心肌组织,检测血清肌酸激酶（ CK）,用ELISA 法检测大鼠血清TNF－α、IL－1β;用TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡并计算心肌细胞凋亡率。结果干热中暑各组大鼠血清TNF－α、IL－1β、CK均明显高于相对应的常温对照组（P＜0.01）;随着中暑程度加重,TNF－α、IL－1β、CK三者均明显增加,各组之间差异有统计学意义（ P＜0.01）。干热中暑各组大鼠心肌凋亡细胞指数变化趋势与炎症因子（TNF－α、IL－1β）和心肌酶（CK）变化趋势一致（P＜0.01）,相关性分析提示沙漠干热组TNF－α、IL－1β与CK相关（相关系数分别为0.799、0.734,P＜0.01）,TNF－α、IL－1β、CK三者均与心肌细胞凋亡相关（相关系数分别为0.577、0.666、0.769,P＜0.01）,常温环境组无上述相关性（ P＞0.05）。结论沙漠干热环境下TNF－α、IL－1和CK随着中暑程度的加重而增加明显,在沙漠干热环境中暑发生过程中炎症因子诱导的心肌细胞凋亡参与了心肌损害的进程。同时提示,干预炎症因子诱导的细胞凋亡可能是沙漠干热环境下中暑心肌保护的重要措施之一。     

姜黄素对人类绒毛膜癌细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨姜黄素对人类绒毛膜癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法将人类绒毛膜癌细胞JEG-3细胞株随机分为对照组和姜黄素干预组。姜黄素干预组加入100μl不同浓度的姜黄素与细胞孵育24 h;对照组只加入PRMI 1640培养液与等体积的二甲基亚砜(DMSO),MTT检测检测细胞抑制率。姜黄素干预组加入100μl姜黄素(终浓度为40μmol/L)与细胞孵育24 h后,TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blot检测增殖相关蛋白Ki-67和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达,以及凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)和Bcl2相关X蛋白(Bax)的表达。结果与对照组相比,姜黄素干预组JEG-3细胞培养24 h后吸光度显著下降(P 0. 05);姜黄素对JEG-3细胞抑制作用呈药物浓度依赖性,半抑制浓度(IC50)为(39. 33±1. 02)μmol/L;与对照组相比,JEG-3细胞的凋亡率明显升高,增殖相关蛋白Ki-67和Cyclin D1的表达显著降低(P 0. 05),凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的蛋白表达量显著升高(P 0. 05),Bcl-2的表达量显著降低(P 0. 05)。结论姜黄素可以下调人类绒毛膜癌细胞增殖相关蛋白的表达,上调凋亡相关蛋白的表达,调控其增殖和凋亡。     

姜黄素诱导Jurkat细胞凋亡机制的实验研究

目的 探讨姜黄素对Jurkat（人T淋巴细胞白血病细胞株）细胞增殖抑制率及细胞周期各时相的变化和亚细胞结构改变。方法 应用MTT（噻唑蓝）比色法流式细胞术、电子显微镜技术检测姜黄素对Jurkat细胞的增殖抑制率，细胞周期进程及凋亡率。结果 姜黄素对Jurkat细胞有明显的抑制作用，且呈剂量依赖性，流式细胞仪分析，G1期细胞增高，S期细胞减少，G2／M期细胞相对增多，凋亡率增加。亚细胞结构，细胞空化，染色质趋边凝集。结论 姜黄素能显著抑制Jurkat细胞增殖，阻止G1期细胞向S期转化进程。促进Jurkat细胞凋亡。     

持续肾脏替代治疗在热射病合并横纹肌溶解综合征中的应用

目的 探讨热射病（heat stroke,HS）合并横纹肌溶解综合征（rhabdomyolysis,RM）患者辅助应用持续肾脏替代治疗（continuous renal replacement therapy,CRRT）的临床效果.方法 回顾性分析HS合并RM的资料6例,采用综合治疗和CRRT辅助治疗,观察其临床疗效和转归.结果 6例患者中5例痊愈出院,1例死亡.治愈的5例,与CRRT治疗前比较,CRRT治疗后24h、48h、7d不同的时间点,患者生命体征均明显改善,包括：体温降低（F=52.979,P=0.000）、心率减慢（F=19.987,P=0.000）、平均动脉压升高（F=5.391,P=0.009）;APACHE Ⅱ评分降低（F=64.904,P=0.000）,Glasgow昏迷量表（GCS）评分升高（F=28.818,P=0.000）.生物化学指标显著改善,包括：血肌酐降低（F=9.296,P=0.001）、肌酸磷酸激酶降低（F=64.904,P=0.000）、肌红蛋白降低（F=55.605,P=0.000）、乳酸脱氢酶降低（F=91.839,P=0.000）、谷草转氨酶降低（F=8.166,P=0.002）、谷丙转氨酶降低（F=8.503,P=0.001）、C反应蛋白降低（F=10.852,P=0.000）和钾离子降低（F23.678,P=0.000）.结论 CRRT是抢救HS合并RM患者有效手段之一,可能对HS合并RM有改善预后的作用.     

粉防己碱对急性缺血性肾损伤细胞凋亡的影响

目的 :探讨粉防己碱在急性缺血性肾损伤中的作用及与细胞凋亡的关系。方法 :在钳夹双侧肾蒂 45min致大鼠急性缺血性肾损伤模型的基础上 ,采用肾组织切片HE染色、肾组织DNA片段分析及原位末端转移酶标记法等技术 ,定性、定量分析了急性缺血性肾损伤时肾小管上皮细胞的凋亡现象。结果 :急性缺血性肾损伤时 ,肾小管上皮细胞的凋亡现象明显增加 ;粉防己碱对急性缺血性肾损伤具有保护作用 ,能够明显降低受损肾小管的细胞凋亡水平。结论 :急性缺血性肾损伤时 ,中药粉防己碱能够调节肾小管上皮细胞的凋亡水平 ,以减轻肾组织的损伤     

重症中暑心脏损伤机制的研究进展

重症中暑是中暑最为严重的一种,常伴有多脏器功能障碍,具有高病死率和高致残率的特点。心血管功能障碍常见于重症中暑多脏器功能障碍患者,目前对其病理生理机制的认识不足,是临床预防和治疗重症中暑心功能障碍缺乏有效手段的重要原因。因此,本文围绕中暑导致心血管系统功能障碍、心脏损伤及相关分子生物学机制的研究进展进行综述,以更好地了解重症中暑所致心功能障碍,进一步为临床有效治疗提供新的思路。     

沙漠干热环境创伤失血性休克大鼠继发性肺损伤时一氧化氮合酶等变化研究

目的 研究沙漠干热环境中创伤失血性休克大鼠肺脏发生继发性损伤时,肺组织病理改变与肺组织一氧化氮(NO)浓度、诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA表达量的变化.方法 在兰州军区乌鲁木齐总医院动物实验科“西北特殊环境人工实验舱”中,140只雄性SD大鼠随机(随机数字法)分为常规环境创伤失血性休克组(常温组)和干热环境创伤失血性休克组(干热组),每组又分别设对照组、休克后0、0.5、1、1.5、2、3h组7个亚组,每组10只.对照组不做处理,干热组预热60 min,麻醉、固定,使用静脉留置针行右颈动、静脉和右股动脉插管,稳定10 min后,利用2500 g铁轮于30 cm高度击中SD大鼠左下肢股骨中上段造成粉碎性骨折,致伤后简易包扎伤口,经右股动脉放血使MAP维持在(35 ±5) mmHg(1 mmHg =0.133 kPa),继续监测60 min后进行复苏.成功建立创伤失血性休克模型后,依据分组相应时间点,打开胸腔,留取肺灌洗液、肺组织,常温组除预热外其余操作相同.HE染色观察肺组织病理学改变和一步法检测肺组织NO质量摩尔浓度,荧光定量PCR检测iNOS mRNA表达量的变化.对计量资料进行t检验与单因素方差分析,各指标间进行Pearson相关分析.结果 病理观察可见干热组各时间点肺病理损伤较常温组病理损伤、蛋白渗出严重且肺组织病理学评分较高.两组肺组织匀浆NO质量摩尔浓度总体比较差异具有统计学意义(t=2.472,P＜0.05),干热组内各时间点比较差异具有统计学意义(F =6.77,P＜0.01),同一时间点干热组数值均大于常温组数值,干热组在2h达到最大值(3.35±0.23)μmol/g较常温组峰值出现早.两组iNOS mRNA表达量总体比较t检验差异具有统计学意义(t=3.619,P＜0.01),干热组组内各时间点比较差异具有统计学意义(F=12.34,P＜0.01),同一时间点干热组数值均大于常温组,干热组1.Sh时峰值出现,常温组则在2h时开始增加.两组肺组织匀浆NO质量摩尔浓度与iNOS mRNA表达量呈正相关(r=0.680、r=0.376),iNOS mRNA表达量与肺损伤病理学评分呈正相关(r=0.846、r=0.899).结论 在沙漠干热环境中创伤失血性休克继发性肺损伤时,肺脏损伤较常温环境下严重、较早,NO、iNOS在沙漠干热环境创伤失血性休克继发性肺损伤过程中起重要作用.     

Pin1介导血管内皮细胞氧化应激反应参与重症中暑急性肺损伤的机制研究

目的 观察热打击后小鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)和肺组织中肽基-脯氨酰顺/反异构酶1(Pin1)通过调控氧化应激和凋亡形成,参与重症中暑急性肺损伤(acute lung injury,ALI)形成的分子机制.方法 体外实验,建立P...     

Effects of hyperbaric oxygen on intestinal mucosa apoptosis caused by ischemia-reperfusion injury in rats

BACKGROUND:

Hyperbaric oxygen (HBO) is an effective adjuvant therapy for ischemia- reperfusion (I/R) injury of the brain, small intestine and testis in addition to crushing injury. Studies have shown that HBO increases the activity of villi of the ileum 30 minutes after I/R injury. The present study aimed to observe the effect of HBO on apoptosis of epithelial cells in the small intestine during different periods of I/R and to elucidate the potential mechanisms.

METHODS:

Rats were subjected to 60-minute ischemia by clamping the superior mesenteric artery and 60-minute reperfusion by removal of clamping. The rats were randomly divided into four groups: I/R group, HBO precondition or HBO treatment before ischemia (HBO-P), HBO treatment during ischemia period (HBO-I), and HBO treatment during reperfusion (HBO-R). After 60-minute reperfusion, samples of the small intestine were prepared to measure the level of ATP by using the colorimetric method and immunochemical expression of caspase-3. The levels of TNF-α in intestinal tissue were measured using the enzyme-linked immunosorbent assay method (Elisa).

RESULTS:

TNF-α levels were significantly lower in the HBO-I group than in the HBO-P (P<0.05), HBO-R and I/R groups; there was no significant difference between the HBO-R and I/R groups (P>0.05). The expression of caspas-3 was significantly lower in the HBO-I group than in the HBO-P group (P<0.05); it was also significantly lower in the HBO-P group than in the I/R and HBO-R groups (P<0.05). ATP level was significantly lower in the HBO-I group than in the HBO-P group (P<0.05), and also it was significantly lower in the HBO-P group than in the I/R and HBO-R groups (P<0.05).

CONCLUSIONS:

There is an association between HBO, small intestinal I/R injury, and mucosa apoptosis. HBO maintains ATP and aerobic metabolism, inhibites TNF-α production, and thus prevents intestinal mucosa from apoptosis. Best results can be obtained when HBO is administered to patients in the period of ischemia, and no side effects are produced when HBO is given during the period of reperfusion.KEY WORDS: Hyperbaric oxygen, Ischemia-reperfusion injury, Apoptosis     

大鼠肾急性缺血再灌注损伤与氧化侵袭与细胞凋亡相关性研究

目的 探讨急性肾缺血再灌注损伤过程氧化侵袭与肾细胞凋亡在肾损伤发生机制中的作用。方法 采用摘除大鼠左肾，钳夹右侧肾蒂的方法，制成急性缺血再灌注肾损伤模型，测定GSH-Px、SOD活性和MDA含量及检测肾细胞凋亡率。结果 缺血再灌注不同时期肾组织SOD活力水平降低，与对照组相比差异显著（P〈0．05、P〈0．01），MDA含量高于对照组（P〈0．05），GSH-Px在再灌注早期活力减弱，明显低于对照组（P〈0．01），晚期活力基本恢复；肾细胞凋亡率与对照组相比差异显著（P〈0．05、P〈0．01）；抗氧化酶SOD活力与细胞凋亡率负相关，MDA含量与细胞凋亡率正相关。结论 缺血再灌注不同时期肾组织氧化侵袭在肾损伤病理过程中起重要作用；再灌注损伤与氧化侵袭和细胞凋亡有关。     

丰富环境对颅脑外伤大鼠学习记忆及海马神经元凋亡的影响

目的:研究丰富环境对颅脑外伤大鼠学习记忆能力及海马神经元凋亡的影响。方法:32只SD大鼠采用自由落体法建立颅脑外伤模型,排除差异后纳入研究,分为丰富环境组和对照组。在造模后11天开始进行连续4天水迷宫检测大鼠学习记忆能力,之后取脑观察海马区神经元形态及使用TUNEL法检测海马区神经元凋亡水平。结果:在水迷宫检测第4天丰富环境组大鼠学习记忆能力较对照组大鼠明显改善,差异有显著性意义(P0.05)。形态学检测发现丰富环境组大鼠海马区神经元凋亡水平较对照组明显减少,差异有显著性意义(P0.05)。结论:丰富环境可明显改善颅脑外伤大鼠学习记忆能力,其机制可能与减少海马区神经元凋亡,提高神经元存活水平相关。