磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/骨形态发生蛋白-15通路与哺乳动物卵巢卵泡发育

哺乳动物卵巢卵泡是由卵母细胞与其周围的颗粒细胞和卵泡膜细胞共同组成的,其生长发育过程是一个高度协调的程序化过程,确保了正常卵母细胞成熟并使其具有受精能力。卵母细胞和颗粒细胞之间的旁分泌和自分泌功能在卵巢卵泡发育过程中具有重要作用,可以为卵泡的发育提供适宜的微环境。磷脂酰肌醇-3激酶/骨形态发生蛋白-15信号通路是其中一个重要的调控通路。骨形态发生蛋白-15是卵巢卵母细胞特异性分泌的信号分子,可以通过旁分泌作用调节卵巢卵泡的发育过程。本文主要概述磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路在卵巢卵泡发育过程中的作用及骨形态发生蛋白-15作为蛋白激酶B/叉头转录因子家族-3a下游信号分子对这一过程的调控,有助于进一步理解卵巢卵泡发育的分子调控以及治疗不孕不育等卵巢疾病。     

卵泡发育及其调节因素的研究进展

卵泡发育是一个极为复杂的过程。卵泡由一个居于核心的卵细胞及周围的颗粒细胞和卵泡膜细胞所组成。在促性腺激素等的作用调控下,卵泡中颗粒细胞增殖、分化,产生分化程度不一的颗粒细胞群。颗粒细胞又通过旁分泌和间隙连接的通讯方式控制卵母细胞的生长和成熟,因而卵泡发育是处在一个庞大的调控系统严格控制之下。该文就各影响因素对卵泡发育的作用进行综述。     

小RNA调控卵泡发育的研究进展

人们已在卵泡发育的不同阶段和不同细胞中均检测到小RNA(miRNAs)的存在,并在成熟卵泡的卵泡液中也发现外泌体miRNAs。miRNAs不仅参与调控正常的卵泡发育过程,其异常调控也可导致一些卵巢疾病的发生。为进一步系统阐明miRNAs对卵泡发育的调控机制,寻找可以预测卵母细胞发育质量的外泌体miRNAs,本文从颗粒细胞发育、卵母细胞发育和激素合成等方面总结了miRNAs对卵泡发育的调控作用。     

卵泡液微环境与体外受精-胚胎移植妊娠结局相关性研究进展

<正>卵泡液由血浆渗出物和卵巢分泌物组成,供给卵母细胞和颗粒细胞适宜的生存环境,对卵泡的发育、卵母细胞的成熟起重要作用[1],其作为生物学窗口反映了排卵前卵母细胞代谢变化的整个过程。卵泡液微环境是十分复杂的生物学微环境,其内含有大量细胞因子、众多激素、氧化/抗氧化系统及各种代谢产物,对卵泡的发育、卵母细胞的成熟、胚胎的质量及体     

GDF-9/BMP-15对卵泡发育机制研究进展

生长分化因子-9(GDF-9)和骨形态发生蛋白-15(BMP-15)均由卵母细胞产生,特定表达于卵巢,属于卵源性生长因子。它们是哺乳动物卵泡发育过程中的重要的调节因子,它们主要以旁分泌或自分泌的方式作用于颗粒细胞,促进卵泡发生和发育。本文主要从GDF-9/BMP-15的概述、功能及作用机制、相关协同性等几个方面进行了综述。     

缝隙连接与卵泡发育

卵巢中的卵泡处于无血管的微环境中,卵母细胞发育所需营养以及调控信号都要通过卵母细胞与颗粒细胞之间的缝隙连接以及颗粒细胞与膜细胞之间的缝隙连接来实现。缝隙连接在胞间通讯方面起着重要的作用。缝隙连接由连接蛋白(Cx)组成,已发现Cx家族有20多个成员,其中Cx26、Cx32、Cx37、Cx43和Cx45参与卵泡的发育,Cx37、Cx43在卵泡发育过程中起着非常重要的调节作用。     

多囊卵巢综合征与颗粒细胞功能

颗粒细胞(GC)是包绕在卵母细胞周围的一层上皮细胞，以自分泌和旁分泌的方式调节卵泡的生长、发育和成熟，维持黄体的功能。多囊卵巢综合征（PCOS）患多存在颗粒细胞的功能障碍，并可能在PCOS的发病机制中起一定的作用。     

胎儿卵巢的形态学及细胞凋亡的观察与研究

目的：探讨人胎儿卵泡的发育形成过程及卵细胞凋亡情况。方法收集2013年1~12月于广东省计划生育科学技术研究所行中期妊娠及晚期妊娠(24~32周)引产的女性胎儿卵巢组织18例。其中24~27周(孕中期)胎儿卵巢组织8例,28~32周(孕晚期)胎儿卵巢组织10例。采用免疫组化苏木精-伊红(HE)染色及原位末端标记法(TUNEL),观察胎儿卵巢卵泡发育及形成过程及该过程中卵细胞凋亡情况。结果 HE染色显微镜下观察,孕中期胎龄卵巢原始卵母细胞较多,卵巢间质少,颗粒细胞较少。随着胎龄的增加,颗粒细胞逐渐增多;围绕卵母细胞,原始卵泡逐渐形成并开始增多,卵母细胞数量减少。孕晚期原始卵母细胞明显减少,原始卵泡形成,数量进一步增多,随着孕龄增加,原始卵泡愈发完整。 TUNEL染色观察见阳性凋亡细胞多见于未形成卵泡的卵母细胞,卵细胞周围的颗粒细胞在孕晚期可见少许凋亡,卵泡内卵细胞未见阳性染色。孕中期卵巢卵母细胞凋亡明显多于孕晚期,且凋亡主要发生于未形成原始卵泡的卵母细胞。结论胎儿卵巢发育过程中,原始卵母细胞数量逐步减少,原始卵泡形成,其发育过程中原始卵母细胞不断发生凋亡,导致生殖细胞丢失。     

卵巢局部调节因子在排卵机制中的研究进展

卵泡、卵细胞发育成熟及其排卵是一个非常复杂的过程，长期以来一直认为通过下丘脑-垂体-卵巢性腺轴系统相互作用，即中枢神经内分泌是卵泡发育成熟及其排卵的唯-调节机制，但近年来，随着生殖内分泌学和分子生物学的研究进展，卵巢内微环境局部自分泌和旁分泌调节因子直接调节卵泡及卵细胞发育的作用日益受到关注。如：类固醇激素、细胞因子、生长因子、抑制素、激活素及泌乳素。其中近年来对卵巢局部颗粒细胞(GC)、卵泡膜细胞及卵母细胞产生的生物活性因子的研究有较多进展。本文将从以下几个方面对其做一综述.     

卵巢早衰颗粒细胞凋亡调控机制的研究进展

卵巢早衰是妇科疾病中常见病之一,近年来其发生率呈逐年增加的趋势,且低龄化趋向愈益明显。卵巢早衰发生的主要机制是卵泡细胞闭锁进程的加速,而其进程加速主要是由于颗粒细胞的凋亡,所以颗粒细胞在评判卵母细胞是否健康,胚胎生长状态是否良好这两方面起到了举足轻重的作用。因此对于总结研究近年来颗粒细胞凋亡调控机制相关文献十分必要。本文总结归纳了相关文献,根据具体机制的不同,分为3个角度,调控颗粒细胞凋亡的相关基因,介入颗粒细胞凋亡过程的细胞因子和调节颗粒细胞的相关激素,从这几方面进行了综述。     

Localization of cystathionine β synthase in mice ovaries and its expression profile during follicular development

Background In vitro fertilization (IVF) researches have suggested that cystathionine β synthase (CBS) is involved in oocyte development. However, little is known about the regional and cellular expression patterns of CBS in the ovary. The purpose of this study was to analyze the localization of CBS in mice ovaries and to investigate the expression profile during follicular development. Methods We used in situ hybridization and immunohistochemical analysis to determine CBS expression in the ovaries of female Balb/c mice. Then the follicles were collected from F1 (C57BL×Balb/c) mice and cultured in vitro. With the method of semi-quantitative RT-PCR, we also investigated the expression profile of CBS during follicular development. Results CBS was absent in the oocytes, although it was ubiquitously expressed in the ovary with the strongest expression in follicular cells at all stages. In late antral follicles, CBS expression was markedly higher in granulosa cells located close to the antrum and in cumulus cells around the oocyte. The semi-quantitative RT-PCR showed that CBS mRNA was detected in follicles at all stages in vitro. In cumulus-oocyte complexes superovulated, CBS expression also increased rapidly. Conclusions CBS was located mainly in the follicular cells in the ovaries. The level of CBS expression is high in follicles during folliculogenesis in mice. Differences in the CBS expression profile between oocyte and follicular cells suggest a role for CBS as a mediator in interactions between oocyte and granulosa cells.     

多囊卵巢综合征患者颗粒细胞AQP9的表达

目的:研究多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)卵巢组织中窦状卵泡和在超促排卵(COH)周期黄素化颗粒细胞AQP9的表达,探讨颗粒细胞AQP9表达水平与COH周期卵泡液中甾体激素水平的关系。方法:行体外受精-胚胎移植的PCOS患者18例,对照组18例。收集卵泡(直径≥1.8 cm)液,测定甾体激素E2、P和T水平;取卵时分别收集大卵泡(直径>1.6 cm)和小卵泡(直径<1.4 cm)的黄素化颗粒细胞。用RT-PCR检测COH周期黄素化颗粒细胞AQP9mRNA的表达,免疫组化定位AQP9在PCOS卵巢内窦状卵泡和COH周期的黄素化颗粒细胞的表达。结果:RT-PCR检测证实黄素化颗粒细胞有AQP9 mRNA表达,PCOS组AQP9 mRNA表达水平与对照组比较差异无显著性(P>0.05),PCOS组大卵泡的颗粒细胞AQP9表达高于小卵泡,但无统计学差异。免疫组化显示PCOS患者卵巢的窦状卵泡内颗粒细胞和COH周期的黄素化颗粒细胞均有AQP9的表达,染色定位于胞浆和胞膜。在COH周期,颗粒细胞AQP9 mRNA表达水平与卵泡液中E2、P和T均无显著性相关。结论:PCOS患者卵巢组织中窦状卵泡的颗粒细胞及在COH周期黄素化颗粒细胞均有AQP9表达,推测AQP9可能通过水转运介导卵泡发育和窦卵泡形成。在COH周期,PCOS的大卵泡AQP9的表达有高于小卵泡的趋势,可能与卵泡发育有关。在COH周期,颗粒细胞AQP9 mRNA表达水平与甾体激素的分泌无相关性。     

ACSM蛋白家族在肿瘤中的研究进展

酰基辅酶A合成酶中链家族（Acyl-CoA Synthetase Medium Chains,ACSMs）是一类可以活化C6～C10脂肪酸,并参与中链脂肪酸的合成与分解的酶,对于细胞的存活具有重要意义。肿瘤发生时,由于肿瘤细胞增长快速,需要高出正常细胞所需的更多的能量供给,除外糖酵解途径,脂肪酸供能也是肿瘤细胞获取能量的重要途径。研究中链脂肪酸合成与代谢的关键酶ACSMs,对于深入探究肿瘤的发生发展及预后等方面均具有重要意义。主要介绍近年来ACSMs家族成员与肿瘤发生发展的研究进展。     

大鼠卵巢发育过程中Smad4的表达

目的 了解转化生长因子-β超家族(TGF-βs)在调节卵泡发育过程中的信号转导模式,以探讨在不同发育阶段大鼠卵巢中Smad4蛋白及mRNA的表达。方法 选择不同发育时期大鼠卵巢,运用免疫组化方法检测卵巢中Smad4蛋白表达,并进行图像分析;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Smad4mRNA在卵巢中的表达,以GAPDH作为内对照与特异性Smad4同时进行扩增,并计算Smad4和GAPDH的RT-PCR产物积分吸光度比值来表示Smad4mRNA的含量。结果 Smad4广泛表达于卵巢组织,但主要表达在卵泡中,其表达部位和强度随卵巢的成熟度不同而变化;在卵巢发育早期,Smad4主要在原始卵泡和窦前卵泡中表达,而在间质中的表达较弱;随着卵巢的发育成熟,Smad4在间质中的表达逐渐增强,性成熟后,在窦状及成熟卵泡颗粒细胞和卵泡膜的表达与间质细胞比较无显著差异(P>0.05)。Smad4在卵泡中的表达强度也发生了变化,即随着卵泡的发育,Smad4在窦状及成熟卵泡卵母细胞的表达明显减弱,与窦前卵泡卵母细胞比较有显著差异(P<0.05,P<0.01);与窦前卵泡比较,Smad4在卵泡膜细胞的表达逐渐增强(P<0.01),而在各级卵泡颗粒细胞中的表达无显著差异(P>0.05)。RT-PCR结果显示各阶段卵巢均有mRNA的表达,从第3周起Smad4mRNA的表达明显增强,Smad4和GAPDH积分吸光度比值与出生后1 d的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 卵巢内存在Smad4,提示TGF-β家族对卵泡发育的调节是通过Smad信号转导模式实现的。     

大鼠卵巢发育过程中Smad4的表达

OBJECTIVE: To clarify the signal transduction pathway of transforming growth factor-betasuperfamily (TGF-betas) in the regulation of follicle growth by investigating the expressions of Smad4 protein and mRNA in rat ovaries in different developmental stages. METHODS: Rat ovaries of different developmental stages were obtained to determine the expression of Smad4 protein by immunohistochemistry and image analysis system, with Smad4 mRNA measured by semi-quantitative RT-PCR. Specific primers of Smad4 and GAPDH (internal control) were used for amplification by RT-PCR, and the ratios of their integrated optical densities were calculated to estimate the relative quantity of Smad4 mRNA expression. RESULTS: Smad4 protein was widely expressed in the ovary, mainly in the follicles, and the location and intensity of Smad4 expression varied with the degree of maturation of the ovary. In the early developmental stages, Smad4 protein expressed mainly in the primordial and preantral follicles, but little in the stromal cells, and its expression intensity in the stroma increased gradually in the course of ovarian maturation. After sexual maturity, Smad4 expression intensity varied only insignificantly among the granulosa cells, theca cells and stromal cells of the antral and mature follicles (P>0.05). The staining intensity of Smad4 in the follicles also underwent changes in relation with their development, being less intense in the oocytes of the antral and matured follicles as compared to the preantral follicles (P<0.05 and P<0.01, respectively) but markedly greater in the theca cells of the antral and matured follicles than in the preantral follicles (P<0.01). No significant difference in Smad4 expression was found in the granulosa cells of different developmental stages (P>0.05). RT-PCR demonstrated that Smad4 mRNA was expressed in all the developmental stages of the rat ovary; and from the 3rd week on, the integrated optical density of Smad4 and GAPDH was significantly higher than that in 1-day-old neonatal rats. CONCLUSION: The expression patterns of Smad4 protein and mRNA in rat ovary in the course of its development indicate that Smad signal transduction may play a role in the folliculogenesis.     

肿瘤中乳酸脱氢酶B作用机制的研究进展

有氧糖酵解增加是肿瘤代谢重编程的主要特征。有氧糖酵解不仅为癌细胞提供能量而且为其生物合成提供必要的前体,这对促进肿瘤生长非常重要。癌细胞通过对糖酵解酶进行调节来满足其自身需求,糖酵解酶在促进肿瘤存活、转移、侵袭等方面发挥着积极作用。乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）作为有氧糖酵解的关键酶,由乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)和乳酸脱氢酶B(lactate dehydrogenase B,LDHB)两种亚基组成。LDHA被认为在有氧糖酵解过程中起着关键作用,并得到了广泛的研究,然而对于LDHB的研究却较少。但目前LDHB在各种肿瘤进展中的重要作用已被越来越多的报道,大量研究表明,LDHB在多种肿瘤中异常表达,与肿瘤恶性进展相关。本文从LDHB在肿瘤中的调控机制、与肿瘤发生发展的关系以及作为肿瘤诊断的生物标志物等方面综述了其近10年的研究进展,有助于深入了解该蛋白在肿瘤中的作用机制。     

应用人黄素化颗粒细胞条件培养液行人类胚胎体外培养

目的 研究卵泡壁颗粒细胞条件培养液在人类胚胎体外发育中的作用。方法 将卵泡液中回收的卵泡壁颗粒细胞,分别置于添加0．1％聚乙烯醇(PVA)和添加10％胎牛血清(FCS)的TCM-199培养系统中进行体外培养。结果 在无蛋白培养系统中,颗粒细胞能够缓慢生长,第三～五天达到生长高峰,群体倍增时间发生在培养的第二～三天,培养第一～五天可分泌雌二醇到培养液中(3．22～4．65pmol／ml)。在有蛋白培养系统中,颗粒细胞生长速度明显高于无蛋白的培养系统。使用颗粒细胞条件培养液,获得的囊胚在囊胚腔的大小和细胞数量上,均优于商品化囊胚培养液。结论颗粒细胞条件培养液有利于人类4-细胞以后胚胎的发育。     

以异常能量代谢为靶点治疗恶性肿瘤的研究进展

 充足的能量及营养供应是癌细胞生长、浸润及转移的基础,能量代谢异常是癌细胞最显著的特征之一。癌细胞存在广泛的能量代谢异常包括蛋白质和脂肪代谢异常,而有氧糖酵解是癌细胞能量代谢的主要方式。近年来,以糖酵解、氨基酸及脂肪代谢关键酶或载体作为靶标对一些肿瘤进行分子靶向治疗取得了一些重要成果,具有广阔的临床应用前景。     

补肾促排卵汤对PCOS模型大鼠颗粒细胞芳香化酶的影响

目的 通过观察补肾促排卵汤对多囊卵巢综合征（PCOS）模型大鼠卵巢颗粒细胞芳香化酶的影响,探讨其对PCOS卵巢局部的影响及作用机制。方法 应用补肾促排卵汤作用于以脱氢表雄酮诱导的PCOS大鼠模型,采用RT-PCR法及免疫组化,检测PCOS模型大鼠颗粒细胞芳香化酶mRNA及蛋白的表达。结果 补肾促排卵汤能显著提高PCOS模型大鼠颗粒细胞芳香化酶mRNA及蛋白表达（P<0.05）。结论 补肾促排卵汤能提高PCOS模型大鼠卵巢颗粒细胞芳香化酶的表达,可能是补肾促排卵汤促进卵泡发育及排出的作用机制之一。      

促性腺激素对小鼠卵巢多功能蛋白聚糖表达的影响

目的观察促性腺激素对野生型和bikurtin基因敲除小鼠多功能蛋白聚糖(PG-M)表达的影响。方法应用免疫组织化学法检测激素处理后PG—M在野生型和bikunin基因敲除小鼠中的表达。结果PG-M阳性表达分布于排卵前卵丘颗粒细胞层，给予促性腺激素后，其表达增强。bikunin基因敲除小鼠的PG-M阳性表达较野生型弱，但在激素调节诱导排卵后，PG-M仍分布在卵丘细胞表面。结论PG-M是卵泡发育中一种基质成分。促性腺激素增强排卵中PG—M表达。