Tempol预处理对七氟醚麻醉下老龄大鼠术后认知功能的影响

目的:探讨Tempol对七氟醚麻醉下老龄大鼠术后认知功能的影响。方法:老龄雄性SD大鼠32只,体重500~600g,20月龄,采用随机数字表法,分为4组(n=8):正常对照组(C组),Tempol预处理组(T组),七氟醚组(S组)和七氟醚+Tempol组(ST组)。T组和ST组连续3d腹腔注射Tempol 100mg/kg,C组和S组相应给予腹腔注射等容量0.9%生理盐水,S组和ST组大鼠分别给予连续3d,每天1次,1次4h的七氟醚麻醉,C组和T组仅置于麻醉箱内对照,不进行七氟醚麻醉,采用Morris水迷宫对各组大鼠进行认知功能测定。完成水迷宫行为学测试后,随机处死4只大鼠采用高尔基染色方进行海马树突棘密度测定,剩余4只大鼠处死后采用ELISA法测定海马内丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果:与C组相比,S组和ST组大鼠游泳路程和逃避潜伏期延长,穿越平台次数和平台所在象限停留时间缩短(P<0.05);与S组相比,ST组大鼠游泳路程和逃避潜伏期缩短,穿越平台次数和平台所在象限停留时间增加(P<0.05)。与C组相比,S组海马内MDA含量升高,SOD含量和树突棘密度下降(P<0.05)。与S组相比,ST组海马内MDA含量下降,SOD含量和树突棘密度升高(P<0.05)。C组和T组大鼠海内马MDA和SOD含量及神经元树突棘密度变化无统计学差异(P>0.05)。结论:Tempol预处理可缓解七氟醚麻醉所引起的老龄大鼠术后认知功能障碍,其机制可能与Tempol抑制氧化应激反应及增加其海马内树突棘密度有关。     

异氟烷对老年大鼠认知功能及海马NMDA受体NR1亚基磷酸化的影响

目的 探讨老年大鼠吸入异氟烷后其认知功能变化及NMDA受体NR1亚基磷酸化的分析.方法 应用18月龄SD大鼠24只,雌雄各半,随机分成3组:0%异氟烷组(10%)、1.2%异氟烷组(11.2%)和1.8%异氟烷组(11.8%),n=8.对各组大鼠行Morris水迷宫测试,结束用westtern-blot检测磷酸化NMDA受体NR1亚基.结果 11.2%组与10%组在第1天潜伏期比较有显著性差异(P<0.05),第2天以后各时间点潜伏期和空间探索实验的成绩与10%组同时间比较均无差异(P>0.05);11.8%组与I0%组潜伏期和空间探索实验的成绩比较均有显著性差异(P<0.05).11.8%组与10%组NMDA受体磷酸化NR1分析比较有显著性差异(P<0.05).结论 1.8%异氟烷引起老年大鼠的认知功能下降,推测可能与海马NMDA 受体NR1亚基磷酸化降低有关.     

七氟醚对大鼠认知功能的影响

目的:探讨七氟醚麻醉对大鼠认知功能的影响。方法:随机将雌性和雄性鼠平均分成3组,对照组(n=16,S0组)、2%七氟醚组(n=16,S1组)、3%七氟醚组(n=16,S2组),饲养于适宜的环境中。S1组及S2组分别吸入2%、3%七氟醚,2h/d,连续5d;对照组则不吸入七氟醚。停止吸入七氟醚后第1天开始采用Morris水迷宫实验测定大鼠认知功能,4次/d,连续测定5d(T1～5),记录潜伏期、平台象限活动时间与总游泳时间的百分比(Tp/T)及撤去平台后2min内的游泳轨迹。结果:与S0组相比,T1时S2组大鼠训练达标时间长、学习次数多(P<0.05),T2时S1组和S2组大鼠训练达标时间、学习次数差异无统计学意义(P>0.05)。结论:吸入2%七氟烷后大鼠认知功能无明显变化;吸入3%七氟烷后大鼠认知功能障碍。     

白藜芦醇预处理对老龄大鼠反复七氟烷麻醉致神经认知障碍的影响

目的评价白藜芦醇预处理对短期多次七氟烷吸入诱发老龄大鼠神经认知障碍的影响。方法选取健康老龄雄性SD大鼠60只,体重310～460 g,月龄18个月,将实验动物随机分为对照组（C组,n=20）、七氟烷组（S组,n=20）和白藜芦醇预处理组（R组,n=20）。R组予白藜芦醇40 mg·kg-1经口灌胃,1次·d-1,持续7 d,C组和S组予等容量1%羟甲基纤维素钠溶液经口灌胃;S组和R组于灌胃后吸入3%七氟烷,C组大鼠吸入空气,100 min·d-1,持续5 d。末次七氟烷吸入结束后立即处死大鼠,取其海马组织,测定海马内超氧化物岐化酶（SOD）活性、微量丙二醛（MDA）含量和IL-1β含量。末次七氟烷吸入结束后24 h行Morris水迷宫实验测试大鼠认知功能,记录大鼠逃避潜伏期时间和原平台位置停留时间。结果与C组比较,S组逃避潜伏期时间明显延长,原平台位置停留时间明显缩短;海马IL-1β、MDA含量明显升高,SOD活性明显下降（P<0.05）;与S组比较,R组逃避潜伏期明显缩短,原平台位置停留时间明显延长,海马IL-1β、MDA含量明显降低,SOD活性明显升高（P<0.05）。结论白藜芦醇预处理可以改善老龄大鼠短期多次七氟烷麻醉诱发的神经认知障碍,其机制可能与白藜芦醇改善大鼠颅脑组织抗氧化效能及抑制海马炎性瀑布反应有关。     

新生期大鼠重复吸入七氟烷对其成年期Aβ、Tau蛋白的影响

目的研究新生期大鼠间断、重复吸入七氟烷,对其成年期行为学及β淀粉样蛋白(Aβ)、异常磷酸化Tau蛋白(PHF-Tau)在海马CA1区的表达。方法 7日龄SD大鼠24只,随机分为3组(n=8),1.5%七氟烷组(S1组),2.6%七氟烷组(S2组),对照组(C组)。分别于出生7、14、21 d(P7、P14、P21)吸入1.5%、2.6%七氟烷及运载气体1 h,于P91~P95行定位航行和空间探索实验。水迷宫实验结束后,取海马组织,用免疫组织化学的方法测定CA1区Aβ、PHF-Tau蛋白的表达。结果 1与C组相比,P94,S1组、S2组逃避潜伏期延长(P<0.01或P<0.05),P95,S1组潜伏期延长(P<0.05);2与P91相比,C组、S2组P94和P95逃避潜伏期缩短(P<0.05);S1组,P93逃避潜伏期缩短(P<0.05);3与C组比较,S1组原平台象限滞留时间百分比减少(P<0.01);4与C组比较,S1组PHF-Tau蛋白MOD增加(P<0.05),S1组、S2组Aβ蛋白MOD增加(P<0.05或P<0.01)。结论新生期大鼠间断、重复吸入1.5%、2.6%的七氟烷可使其成年期学习记忆能力下降,其中吸入1.5%七氟烷较2.6%七氟烷影响更持久。其机制可能与成年期海马CA1区Aβ、PHF-Tau蛋白水平的改变有关。     

不同浓度七氟烷对小鼠学习记忆和海马CA1区及齿状回星形胶质细胞数量的影响

目的 探讨0.5%、1%、3%三个浓度的七氟烷对小鼠学习记忆和海马CA1区及齿状回GFAP(glial fibrillary acidic protein)阳性细胞数量的影响.方法 将40只小鼠随机分为正常组(未经任何处理) 、0.5%七氟烷组( 0.5%七氟烷吸入麻醉2 h)、1%七氟烷组(1%七氟烷吸入麻醉2 h)和 3%七氟烷组(3%七氟烷吸入麻醉2 h).给予相应的处理后,用 Morris 水迷宫行学习记忆测试.测试完毕后处死小鼠,取脑组织用免疫荧光方法观察海马CA1区及齿状回的星形胶质细胞数量变化.结果 与正常组相比,低浓度七氟烷组(0.5%、1%)小鼠逃避潜伏期无明显改变(P均＞0.05),高浓度(3%)七氟烷组小鼠逃避潜伏期缩短,海马CA1区及齿状回GFAP阳性细胞数明显增加(P＜0.05).结论 吸入低浓度七氟烷后,小鼠学习记忆无明显变化;吸入高浓度七氟烷后,其学习记忆能力有所增加,可能与其星型胶质细胞数增加有关.     

异氟烷对老年大鼠海马胆碱乙酰转移酶的作用和空间学习记忆的影响

目的 探讨异氟烷对老年大鼠海马胆碱乙酰转移酶(choline aeetyltransferase,ChAT)表达的作用和空间学习记忆的影响.方法 20月龄老年雄性SD大鼠54只,随机分为3组(n=18).A组(对照组):吸入30%氧气的空氧混合气体6 h;B组(异氟烷单次吸入组):单次吸入1.2%异氟烷和30%氧气的空氧混合气体6 h;C组(异氟烷多次吸入组):吸入1.2%异氟烷和30%氧气的空氧混合气体2 h,1次/d,连续3 d.各组处理巾随机抽取5只行血气分析,5只完成处理24 h后处死取脑分离海马,免疫组化法和RT-PCR法检测ChAT的表达,剩余行Morris水迷官实验检测大鼠的空间学习记忆功能,持续6 d.结果 与A组比较,B、C组海马ChAT mRNA及蛋白表达下调(P<0.05);2～5 d的逃避潜伏期延长(P0.05).结论 异氟烷可引起老年大鼠短期空间学习记忆功能减退,其机制可能与海马ChAT表达下调有关.     

5-HT1A受体拮抗剂对七氟烷致老年认知功能障碍模型大鼠突触可塑性的作用及其机制

目的 探讨5-HT1A受体拮抗剂对七氟烷致老年认知功能障碍模型大鼠突触可塑性的作用及其机制。方法 将30只18月龄Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、模型组以及治疗组。模型组吸入50%空气、氧气混合物（2 L/min）和2%七氟烷4 h后左侧脑室给予生理盐水（5μL）,治疗组在吸入50%空气、氧气混合物（2 L/min）和2%七氟烷4 h后左侧脑室给予5-HT1A受体拮抗剂（3μg）,对照组仅吸入50%空气、氧气混合物（2 L/min） 4 h。水迷宫法检测各组大鼠的学习记忆能力;HE染色法观察各组大鼠海马组织病理变化情况;尼氏染色和高尔基染色观察海马区神经元和突触的病理形态变化;免疫荧光法检测MeCP2、p250GAP、PSD-95、GAP-43与Syn蛋白表达;实时荧光定量PCR检测PKA、CREB1、BDNF mRNA表达水平;Western blotting检测PKA、CREB1、p-CREB1、BDNF蛋白表达水平。结果 与对照组比较,模型组大鼠逃避潜伏期显著延长,穿越平台次数显著减少（P <0.05）;与模型组比较,治疗组大鼠逃避潜伏期显著缩短,穿越平台次...     

七氟烷对老年大鼠海马毒蕈碱受体M,表达和认知功能的影响

目的 探讨不同剂量七氟烷对老年大鼠海马毒蕈碱受体M.受体亚型(mAChR M1)表达的影响及与认知功能的关系.方法 40只SD大鼠随机分为空白对照组(Con组)、1.5%七氟烷Ⅰ组(1.5%Sev Ⅰ组)、1.5%七氟烷Ⅱ组(1.5%Sev Ⅱ组)、3.0%七氟烷sev Ⅰ组(3.O%Sev Ⅰ组)和3.0%七氟烷Ⅱ组(3.0%SevⅡ组),每组8只.Con组吸入空气2h,1.5%Sev Ⅰ组、1.5%Sev Ⅱ组、3.0%Sev Ⅰ组和3.0%SevⅡ组分别吸入1.5%或者3.0%七氟烷2h.于给药后1 d或7d采用Y型迷宫实验测试学习记忆能力后即刻处死取脑,分离海马,通过RT-PCR法检测mRChR M1 mRNA表达,免疫组化法检测海马神经细胞M1受体的表达.结果 3.0%sev Ⅰ组学习次数,训练时间[分别为(41.83±4.30)次,(48.76±1.24)min]高于对照组[分别为(33.50±4.80)次,(38.24±0.68)min],差异有显著性(P<0.05),海马mAChR M1(42.12±0.66)和mAChR M1mRNA表达低于对照组mAChR M1(70.21±0.45)和mAChR M1 mRNA表达水平,差异有显著性(P<0.05).结论 七氟烷麻醉时,可以引起老年大鼠学习记忆能力一过性降低,可能与大鼠海马mAChR M1下调有关.     

硫化氢对吗啡依赖大鼠空间学习记忆及海马NMDA受体表达的影响

目的探讨新型气体信号分子硫化氢（H2S）对吗啡依赖大鼠空间学习记忆及海马NMDA受体表达的影响。方法将大鼠随机分为对照组、依赖组、NaHS组和HA组,Morris水迷宫观察H2S对依赖大鼠空间学习记忆的影响;Western-blotting测定大鼠海马NMDA受体表达。结果在Morris水迷宫实验中,依赖组和HA组逃避潜伏期和空间搜索距离较生理盐水对照组延长（〈0.05）,NaHS组较依赖组大鼠逃避潜伏期短（〈0.05）,NaHS组与对照组比较无显著性差异（〉0.05）;在Western-blotting实验中,依赖组和HA组大鼠海马NMDA受体NR1亚基蛋白表达较对照组增多（〈0.05）,NaHS组大鼠海马NMDA受体NR1亚基蛋白表达较依赖组减少（〈0.05）。结论外源性H2S可减少NMDA受体NR1亚基蛋白表达,改善吗啡依赖大鼠空间学习记忆能力。     

七氟烷对大鼠近期空间回忆能力、海马APOE、Aβ 表达的影响

目的 探讨七氟烷对成年大鼠近期空间回忆能力及海马载脂蛋白E（APOE）、β 淀粉样蛋白（Aβ）表达的影响。方法 成年SD 大鼠54 只,随机分为七氟烷麻醉组、运载气体组、空白对照组,每组54 只。七氟烷麻醉组吸入3.2% 七氟烷+ 运载气体（1 L/min 氧气O2+1 L/min 空气）2 h,运载气体组吸入运载气体2 h,空白对照组自然饲养。模型复制前、取材前行Morris 水迷宫实验。模型复制后第1 天（T1）、第3 天（T3）、第7 天（T7）取脑组织,采用免疫组织化学法检测海马CA1 区、CA3 区、DG 区APOE、Aβ 的平均光密度值（MOD）。结果 ①与运载气体组比较,各时间点七氟烷麻醉组穿越原平台次数、进入原平台象限次数、原平台象限滞留时间、原平台象限滞留时间百分比比较,差异无统计学意义（P >0.05）。②与运载气体组比较,T1、T3 时间点七氟烷麻醉组大鼠海马各区APOE 的MOD 值降低（P <0.05）,T7 时间点七氟烷麻醉组大鼠海马各区Aβ 的MOD 值增高（P <0.05）。结论 3.2% 七氟烷不损害成年大鼠近期空间回忆能力。3.2% 七氟烷吸入麻醉后1 周内,通过下调APOE 表达,抑制海马Aβ 沉积;麻醉后第7 天是海马Aβ 增加的关键时间点。     

异氟烷和七氟烷对老年小鼠认知功能的影响及其机制研究

目的 探讨异氟烷和七氟烷对老年小鼠认知功能的影响及与胆碱能系统的关系.方法 健康雌性18个月龄C57BL/6J老年小鼠30只,分为3组,每组10只.1.2%异氟烷(异氟烷组)或2.6%七氟烷(七氟烷组)麻醉6 h(同时吸入30%氧气和70%氮气混合气体),未麻醉组为对照组.麻醉后2周行Morris水迷宫实验检测认知功能...     

右美托咪定对异氟烷麻醉引起的老年小鼠认知功能障碍保护作用及机制研究

目的:研究右美托咪定对异氟烷麻醉后老年小鼠认知功能的影响，并探讨其内在的分子机制。方法:45只C57BL/6J小鼠被随机分为三组，对照组小鼠仅吸氧4 h,模型组小鼠吸入氧气+1.5%异氟烷气体4 h,治疗组小鼠腹腔注射15μg/kg的右美托咪定后吸入氧气+1.5%异氟烷气体4 h。使用Morris水迷宫和矿场实验比较三组小鼠认知功能，TUNEL染色法检测小鼠海马区神经元凋亡情况，免疫印迹法检测小鼠海马区BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达情况。结果:三组小鼠麻醉期间血气分析各项生理指标(血浆pH,PO₂和PCO₂)均在正常范围内波动，组间比较无统计学差异(均P>0.05)。与对照组小鼠相比，模型组小鼠每天平均逃逸潜伏期均显著延长(P<0.05),而治疗组小鼠每天逃逸潜伏期均较模型组显著缩短(P<0.05)。空间探索实验结果显示：与对照组小鼠比较，模型组小鼠在目的象限活动时间和穿越平台次数均显著降低(均P<0.05),而治疗组小鼠在目的象限活动时间和穿越平台次数...     

2,2’,4,4’-四溴联苯醚染毒对大鼠学习记忆及海马NMDA受体亚基基因NR1和NR2B的影响

目的:观察2,2’,4,4’-四溴联苯醚(2,2’,4,4’-tetrabromo-diphenyl ethers,BDE-47)染毒后大鼠学习记忆及海马NMDA受体亚基NR1和NR2B的变化,探讨BDE-47暴露对学习记忆的影响及其机制。方法:将80只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、BDE-47(0.1 mg/Kg、0.5 mg/Kg和1.0 mg/Kg)剂量组,每组16只,每天灌胃1次,持续30 d;用Morris水迷宫检测学习记忆,用免疫组化检测大鼠NMDA受体亚基NR1和NR2B的表达,用RT-PCR检测大鼠NMDA受体亚基NR1和NR2B的基因表达。结果:在水迷宫试验中:与溶剂对照组比较,BDE-47染毒各组的平均逃避潜伏期明显增加、穿越平台的次数和在原平台象限停留的时间明显减少(P<0.05),且呈剂量-反应关系(P<0.05)。免疫组化结果:与溶剂对照组比较,各染毒组大鼠海马NMDA受体亚基NR1和NR2B表达明显减少(P<0.05),且呈剂量-反应关系(P<0.05)。RT-PCR结果与溶剂对照组比较,BDE-47染毒各组大鼠海马NMDA受体亚基NR1的基因表达明显减少(P<0.05);各染毒剂量组之间,随着染毒剂量的增加,大鼠海马NMDA受体亚基NR1和NR2B的基因表达减少(P<0.05)。结论:BDE-47染毒后大鼠学习记忆能力降低,可能与大鼠海马NMDA受体亚基NR1和NR2B减少有关。     

阻断NR2A可增强脑缺血小鼠海马神经元树突棘丢失和认知功能障碍

目的 探讨N-甲基-D-天门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor, NMDAR or NR)亚基NR2A在脑缺血再灌注引起的海马CA1区神经元树突棘丢失和认知功能障碍中的作用.方法 制作三动脉阻断(3-VO)GFP转基因小鼠全脑缺血模型,小鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注(I/R)组和NVP-AAM077(NVP)干预组;应用跳台试验测试小鼠学习记忆能力,激光共聚焦和Neurolucida软件分析检测海马CA1区神经元形态及树突棘的变化.结果 学习记忆能力测试发现,I/R组明显差于sham组(P<0.05),NVP干预组差于sham组和I/R组(P<0.05);I/R组CA1区神经元树突棘的数量明显少于假手术组(P<0.01),NVP干预能进一步增加缺血/再灌注所致的CA1区神经元树突棘的丢失(P<0.05).结论 NMDA受体亚基NR2A在小鼠脑缺血再灌注所致树突棘丢失和脑认知功能损害中具有重要作用.     

七氟烷全身麻醉及剖腹探查术对老年大鼠认知功能障碍机制的研究

目的 研究七氟烷全身麻醉及剖腹探查术对老年大鼠认知功能障碍的机制.方法 随机将30只16月龄的SD大鼠分为3组:对照组、麻醉组和麻醉手术组(每组10例);对照组不做任何处理;麻醉组吸入4％七氟烷诱导,麻醉手术组吸入4％七氟烷诱导,同时行剖腹探查术.所有大鼠手术前和手术后行Morris水迷宫实验对其学习记忆功能进行评价,然后将大鼠取血断头取脑;采用免疫组化染色法检测海马CA1区星型胶质细胞数量、ELISA法检测血清GFAP浓度.结果 Morris水迷宫实验结果显示麻醉组和麻醉手术组均可导致老年大鼠认知功能障碍,且手术组老年大鼠认知功能障碍更严重,差异有统计学意义(P＜0.05);免疫组化染色法显示麻醉组和麻醉手术组星型胶质细胞均减少,且麻醉手术组减少更多,差异有统计学意义(P＜0.05);ELISA结果显示,麻醉组和麻醉手术组血清GFAP浓度均升高,且麻醉手术组升高更多,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 七氟烷全身麻醉和腹腔探查术可能导致老年大鼠认知功能障碍,且老年大鼠认知功能障碍可能与星型胶质细胞数量减少有关.     

大鼠妊娠前后吸入异氟烷或七氟烷对子代脑发育的影响

目的探讨大鼠妊娠前后吸入异氟烷或七氟烷麻醉对子代大鼠脑发育的影响。方法将30只雌性SD大鼠随机分为5组(每组6只):对照组(C组)、妊娠前1 d吸入1.6%异氟烷6 h组(BI组)、妊娠后6、10、14和18 d时吸入1.6%异氟烷6 h组(PI组)、妊娠前1 d吸入2.4%七氟烷6 h组(BS组)及妊娠后6、10、14和18 d吸入2.4%七氟烷6 h组(PS组)。于出生当天(T1)、出生后第7(T2)、14(T3)和28天(T4)时各组按窝别随机取12只子鼠处死取海马,HE染色法观察病理学改变,电镜下观察海马细胞超微结构,免疫组织化学染色法检测caspase-3、神经生长相关蛋白43(GAP-43)和神经型一氧化氮合酶(n NOS)的表达。结果与C组相比,BI组和BS组各时点、PI组和PS组T4时点子代大鼠海马中caspase-3、GAP-43和n NOS的表达差异无统计学意义(P>0.05),HE染色及电镜观察海马组织未见差异。PI组和PS组T1~T3时caspase-3表达增加,GAP-43和n NOS表达减少(P<0.01),PI组HE染色海马结构有较明显的病理改变,电镜观察PI组和PS组海马细胞结构存在损伤;与PI组相比,PS组T1~T3时caspase-3表达减少(P<0.01),GAP-43和n NOS表达增加(P<0.01)。结论大鼠妊娠前吸入异氟烷或七氟烷对子代脑发育无不良影响,而妊娠期吸入异氟烷或七氟烷则可引起子代脑发育的短期异常,且异氟烷毒性作用大于七氟烷。     

大鼠妊娠前后吸入七氟烷对仔鼠海马NMDA受体表达的影响

目的：观察大鼠妊娠前后吸入七氟烷对仔鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methyl-D-asparate receptor,NMDAR）的影响。方法：雌性SD大鼠18只,3月龄,体重250～300g,采用随机数字表法,将其随机分为3组（n=6）：对照组（C组）、妊娠前吸入2．4％七氟烷6h组（BS组）和妊娠后6、10、14和18d吸入2．4％七氟烷6h组（PS组）。于出生当天（T_1）、出生后第7（T_2）、14（T3）和28天（T_4）时各组按窝别随机取12只仔鼠处死取海马,采用免疫荧光和RT-PCR法检测NMDAR（NR1、NR2A和NR2B）的表达水平。结果：与C组相比,BS组仔鼠海马NMDAR表达差异无显著性（P〉0．05）;PS组仔鼠T_1-T_3时NRl和NR2A的表达明显增强（P〈0．01）,NR2B表达显著降低（P〈0．01）;NR1 mRNA知NR2A mRNA表达增强（P〈0．05）,NR2B mRNA表达降低（P〈0．05）,T-4时NMDAR表达差异无显著性。结论：妊娠前吸入2．4％七氟烷6h对仔鼠海马NMDAR表达无影响,大鼠妊娠后特定时间内吸入2．4％七氟烷6h可引起仔鼠海马NMDAR表达短期内异常,这可能会引起仔鼠海马神经细胞凋亡和神经系统发育及认知功能的短期异常。     

七氟醚基于BDNF/TrkB信号通路对孕晚期大鼠子代树突棘发育的影响

目的:探究七氟醚麻醉对孕晚期大鼠子代树突棘发育的影响及其机制。方法:取孕大鼠分为对照组,七氟醚-1h组,七氟醚-3h组,七氟醚-6h组,以2.3%七氟醚分别麻醉。取P31子代幼鼠开展水迷宫测试,以高浓度CO₂处死,取脑组织开展电生理实验检测海马CA1区长时程增强,高尔基染色评估树突棘状态,Western blot检测BDNF/Trk B蛋白表达。结果:与对照组相比,七氟醚麻醉1h的孕晚期大鼠子代P35幼鼠水迷宫实验中逃避潜伏期没有改变,而七氟醚-3h组与七氟醚-6h组幼鼠逃避潜伏期明显增加,穿越平台次数与第Ⅲ象限停留时间明显减少。此外,七氟醚麻醉3h与6h造成幼鼠f EPSP斜率明显降低,且树突棘密度与长度明显减少,然而,七氟醚-1h组幼鼠f EPSP与树突棘状态没有影响。与此同时,七氟醚麻醉3h与6h造成了幼鼠海马组织中PSD-95,BDNF与p-TrkB表达明显减少。结论:孕晚期大鼠长期麻醉后幼鼠的学习与记忆能力降低是由BDNF表达降低引起,其原因BDNF造成p-TrkB表达降低介导PSD-95蛋白减少,导致树突棘发育受损。     

七氟烷对衰老模型大鼠认知功能及海马超微结构的影响

  目的  探讨老年期大鼠七氟烷麻醉后认知功能的改变及其透射电镜下海马超微结构的变化。  方法  成年健康雄性SD大鼠,进行连续9 d的行为学训练实验后,采用颈背部皮下注射D-半乳糖40 d建立衰老大鼠模型。模型大鼠随机分为:对照组(Con)自然呼吸空气;空氧组(A/O)予以运载气体(2 L/min空气+2 L/min O₂) 6 h;七氟烷组(Sev)予以体积分数为3.2%七氟烷+运载气体6 h,大鼠分别于吸入气体或七氟烷后2 h、1周、4周各取6只行水迷宫实验和平衡木实验。行为实验完成后麻醉大鼠,迅速剥离海马组织,经固定、脱水、包埋、切片定位等制备电镜标本,采用透射电镜观察海马组织超微结构如细胞核、胞质、线粒体、内质网、有髓神经纤维、突触、凋亡小体。  结果  行为学:Sev组大鼠吸入七氟烷后2 h,空间探索能力较Con组和A/O组降低(P<0.05),1周、4周后回升,工作记忆时间在七氟烷吸入后2 h、1周逐渐延长(即记忆能力降低),与Con组和A/O组比较,差异有统计学意义(P < 0.05),平衡木实验中的始动时间在七氟烷吸入后2 h延长,然后1周、4周逐渐恢复,过杆时间在七氟烷吸入后2 h、1周、4周均较Con组和A/O组延长,差异有统计学意义(P < 0.05)。透射电镜下可见Con组大鼠海马超微结构清晰,细胞核核膜完整、胞质内无水肿液、线粒体和内质网无残缺、无水肿液聚集,有髓神经纤维形态正常、突触结构完整、细胞内未发现凋亡小体。A/O组和Sev组大鼠在吸入七氟烷2 h后可见海马细胞胞质内有少量水肿液集聚,1周时可见胞质内水肿液聚集明显增多,4周时A/O组胞质形态恢复正常,但Sev组依然可见胞质内水肿液聚集。A/O组和Sev组大鼠海马细胞透射电镜下上述其它细胞器形态结构均正常,同时也未发现凋亡小体。  结论  3.2%的七氟烷麻醉6 h可能会诱发老年大鼠早期的神经认知障碍,其机制可能与海马组织超微结构的变化有关。