LPS诱导斑马鱼炎症实热模型构建及脂质生物标志物筛选研究

[目的]基于脂质组学技术,探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的实热炎症对斑马鱼体内脂质代谢的影响,并筛选出与炎症相关的差异脂质标志物。[方法]采用荧光标记转基因中性粒细胞斑马鱼,结合活体成像系统实时监测中性粒细胞炎症迁移过程,计算斑马鱼炎症部位中性粒细胞的个数。通过超高效液相色谱串联质谱(ultra performance liquid chromatography-Q exactive-mass spectrometry,UPLC-QE-MS)技术进行脂质组学检测,根据多元统计分析比较模型组与正常组斑马鱼的代谢谱图,寻找潜在生物标志物。[结果]模型组斑马鱼炎症部位中性粒细胞个数(18个)与正常对照组(2个)比较,差异有统计学意义(P0.001),显示LPS诱发转基因中性粒细胞荧光斑马鱼炎症模型建立成功。模型组和正常对照组的代谢谱图存在明显差异,并根据精确分子量及质谱碎片初步共筛选鉴定出28个差异代谢物,包括16个磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine, PC)、7个磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamines, PE)、2个磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine, PS)、1个磷脂酸(phosphatidic acid, PA)、1个磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol, PI)、1个鞘磷脂(sphingomyelin, SM)。[结论]卵黄囊显微注射LPS能够诱导斑马鱼产生感染性炎症,差异脂质代谢物以PC和PE为主,说明LPS诱导炎症的相关机制及相关的实热症状与PC和PE的代谢有关,可为疾病的早期诊断和预防奠定基础。     

荷丹调脂方对小鼠脂质代谢的影响

目的?研究荷丹调脂方对高脂血症小鼠血浆脂质代谢异常的调节作用。方法?通过高效液相-二维线性离子阱高分辨静电场组合质谱仪(UPLC-LTQ/Orbitrap XL)的脂质组学研究方法,考察药物干预对脂质代谢的影响,寻找潜在生物标志物,探讨荷丹调脂方调节脂代谢的作用途径。结果?正常组、模型组、荷丹调脂方组血浆脂质谱明显分离。鉴定了血浆中与荷丹调脂方影响的11种生物标志物,主要包括磷脂酰胆碱（PC）、溶血磷脂酰胆碱（LysoPC）和甘油三酯（TG）。荷丹调脂方干预对部分异常脂质代谢具有明显的改善作用。结论?荷丹调脂方能有效缓解高脂饮食诱导的磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱和甘油三酯代谢紊乱,表明荷丹调脂方调血脂的作用机制可能与调节这些代谢途径有关。      

基于多肽组学的妇产科疾病研究现状

多肽是涉及人体内多种细胞功能的生物活性物质,主要来源于氨基酸脱水缩合和蛋白质降解这两种途径。所有细胞都能合成多肽物质,细胞功能活动也受多肽的调节。基于质谱的多肽组学研究已应用于疾病诊断和治疗中,多项相关研究也已开始深入探究卵巢癌、子痫前期、妊娠期糖尿病、宫颈癌、子宫内膜异位症等妇产科疾病的发病机制。因此,通过对多肽组学的研究去寻找这些妇产科疾病可能的发病机制以及潜在的生物标志物具有重要的临床意义。     

雌激素相关疾病中铁调素及其信号通路的研究

雌激素相关疾病发病机制复杂、早期诊断和治疗困难、易复发等特点一直备受关注.近年国内外关于铁代谢用于雌激素相关疾病治疗的研究取得了一定进展,铁调素通过直接或间接作用参与了乳腺癌、卵巢癌、甲状腺癌、绝经后骨质疏松、子宫内膜异位症等的发生发展,其中涉及多条信号通路(如磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B通路、蛋白激酶B/哺乳动物...     

血清和腹腔液IL-18、CA125测定与子宫内膜异位症的关系

目的 探讨血清和腹腔液IL-18、CA125水平的变化与子宫内膜异位症的关系.方法 收集45例子宫内膜异位症患者血清和腹腔液,分别测定IL-18及CA125水平.结果 子宫内膜异位症组腹腔液中IL-18水平明显高于对照组(P＜0.05),在子宫内膜异位症组中腹腔液IL-18水平显著高于血清中水平(P＜0.05),子宫内膜异位症Ⅰ～Ⅳ期之间血清和腹腔液中IL-18水平无明显差异(P＞0.05),子宫内膜异位症组患者血清CA125水平明显高于对照组,子宫内膜异位症Ⅰ～Ⅳ期中前3期术前血清CA125水平之间比较无显著性差异(P＞0.05).结论 IL-18在子宫内膜异位症的发病机制中有重要作用,综合分析血清和腹腔液CA125、IL-18水平,对子宫内膜异位症的诊断有重要参考价值.     

子宫内膜异位症患者免疫功能的变化

目的　为了探讨子宫内膜异位症发病的免疫机制。方法　采用间接免疫荧光法对子宫内膜异位症患者外周血中的 Ｔ细胞亚群、 Ｂ 细胞, Ｎ Ｋ 细胞及 Ｉ Ｌ－ ２ Ｒ＋ 细胞进行检测,并采用酶联免疫双抗体夹心法对子宫内膜异位症患者外周血及腹腔液中的 Ｔ Ｎ Ｆ－ α浓度进行了检测。结果　子宫内膜异位症患者外周血中 Ｔ 细胞亚群失衡、 Ｂ 细胞增多,外周血及腹腔液中的 Ｔ Ｎ Ｆ－ α浓度显著升高。结论　外周血中 Ｔ 细胞亚群失衡、 Ｂ 细胞增多,腹腔液中 Ｔ Ｎ Ｆα浓度升高可能与子宫内膜异位症的发生,发展密切相关。     

子宫内膜异位症蛋白组学研究技术体系的建立

目的：建立子宫内膜异位症蛋白组学研究的技术体系,寻找子宫内膜异位症新的诊断标志物。方法：用一维电泳和液质联用进行5例子宫内膜异位症同一个患者的在位内膜和异位内膜的差异蛋白表达谱分析,进行3次实验。结果：建立了分辨率高、重复性好的子宫内膜异位症在位内膜和异位内膜差异蛋白表达谱,对一维电泳中的3条差异条带进行蛋白组学分析,共鉴定出14个表达上调的差异蛋白。结论：一维电泳和液质联用具有可重复性,子宫内膜异位症在位内膜和异位内膜差异表达蛋白质可能成为子宫内膜异位症诊断的侯选标志物。     

生物标志物的筛查方法及研究进展

生物标志物在疾病的预测、诊断、病情监测、治疗效果和预后评估及疾病普查等方面有很大的价值。寻找疾病相关的生物标志物已成为热点话题,尤其在肿瘤领域。基因组学、蛋白质组学及代谢组学研究的日趋深入及相关技术的合理应用,将会对筛选理想的特异性生物标志物提供有益的方法。基因组学从分子生物学技术水平分析疾病状态下基因顺序、数目、排列等的变化,找出可能致病的差异基因,随着遗传工程技术日趋成熟,基因水平寻找生物标志物已被广泛报道。蛋白质组学技术多样化有利于筛选区别于生理状态下的差异表达蛋白质(潜在生物标志物),有利于阐明疾病的发病机制,对疾病的预防、诊断、预后具有重要作用。随着核磁共振技术和质谱等技术的发展,代谢组学已广泛应用于疾病的诊断、分子生理学、分子病理学及基因功能组学等多领域。后基因组时代蛋白质组学及代谢组学作为新兴学科不断被重视。     

阿尔茨海默病转基因模型Tg2576小鼠血清的代谢组学研究

目的 Tg2576转基因小鼠与阿尔茨海默病（Alzheimer''s disease,AD）患者的病理改变相近,本文动态研究了Tg2576小鼠在AD发病不同阶段的血清代谢物特征,为临床AD的早期诊断提供代谢依据。方法 收集Tg2576小鼠在AD发病初期（6个月）和末期（12个月）时的血清样本,采集样本的¹HNMR谱并运用多变量分析方法进行代谢特征的分析。结果 结果显示Tg2576与C57小鼠分别在6和12个月时的血清代谢特征有明显差异,且不同AD发病阶段的Tg2576小鼠具有明显的代谢差异。与C57小鼠相比,在AD出现的初期阶段,Tg2576小鼠血清中乳酸、肌醇和氨基酸（如亮氨酸、异亮氨酸、丙氨酸）的含量升高,而脂质、胆碱、磷脂酰胆碱/甘油磷脂酰胆碱、甜菜碱、甘氨酸和葡萄糖含量降低;在AD发病的末期,血清中乳酸、肌醇和丙氨酸的含量继续上升,脂质、胆碱、磷脂酰胆碱/甘油磷脂酰胆碱、甜菜碱和甘氨酸含量持续降低,同时谷氨酸和肌酸含量初步显示出下降趋势。通过比较AD的初期和末期血清代谢物,我们能够发现疾病末期血清中乳酸、肌醇和丙氨酸含量升高,脂质、胆碱、磷脂酰胆碱、甘油磷脂酰胆碱含量降低。在这些代谢物中,乳酸、脂质、胆碱、磷脂酰胆碱和甘油磷脂酰胆碱在AD发生初期已具有显著性变化,且与AD发生的严重程度密切相关。结论 结果表明Tg2576小鼠中乳酸与阿尔茨海默病程度的加重呈正相关变化,而脂质、胆碱、磷脂酰胆碱和甘油磷脂酰胆碱呈负相关改变,且这些代谢物随着疾病的发展呈动态进行性变化,可能是AD早期诊断的重要代谢标志物。     

血清和腹腔液IL-18、CA125测定与子宫内膜异位症的关系

目的探讨血清和腹腔液IL-18、CA125水平的变化与子宫内膜异位症的关系。方法收集45例子宫内膜异位症患者血清和腹腔液,分别测定IL-18及CA125水平。结果子宫内膜异位症组腹腔液中IL-18水平明显高于对照组（P〈0.05）,在子宫内膜异位症组中腹腔液IL-18水平显著高于血清中水平（P〈0.05）,子宫内膜异位症I～IV期之间血清和腹腔液中IL-18水平无明显差异（P〉0.05）,子宫内膜异位症组患者血清CA125水平明显高于对照组,子宫内膜异位症I￣IV期中前3期术前血清CA125水平之间比较无显著性差异（P〉0.05）。结论IL-18在子宫内膜异位症的发病机制中有重要作用,综合分析血清和腹腔液CA125、IL-18水平,对子宫内膜异位症的诊断有重要参考价值。     

Erythrocyte sphingolipid species as biomarkers of Alzheimer's disease

Diagnosing Alzheimer's disease (AD) in the early stage is challenging. Informative biomarkers can be of great value for population-based screening. Metabolomics studies have been used to find potential biomarkers, but commonly used tissue sources can be difficult to obtain. The objective of this study was to determine the potential utility of erythrocyte metabolite profiles in screening for AD. Unlike some commonly-used sources such as cerebrospinal fluid and brain tissue, erythrocytes are plentiful and easily accessed. Moreover, erythrocytes are metabolically active, a feature that distinguishes this sample source from other bodily fluids like plasma and urine. In this preliminary pilot study, the erythrocyte metabolomes of 10 histopathologically confirmed AD patients and 10 patients without AD (control (CTRL)) were compared. Whole blood was collected post-mortem and erythrocytes were analyzed using ultra-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry. Over 750 metabolites were identified in AD and CTRL erythrocytes. Seven were increased in AD while 24 were decreased (P<0.05). The majority of the metabolites increased in AD were associated with amino acid metabolism and all of the decreased metabolites were associated with lipid metabolism. Prominent among the potential biomarkers were 10 sphingolipid or sphingolipid-related species that were consistently decreased in AD patients. Sphingolipids have been previously implicated in AD and other neurological conditions. Furthermore, previous studies have shown that erythrocyte sphingolipid concentrations vary widely in normal, healthy adults. Together, these observations suggest that certain erythrocyte lipid phenotypes could be markers of risk for development of AD.     

子宫内膜异位症非侵入性诊断标记物研究进展

1/5的育龄妇女患有子宫内膜异位症,该病对患者的健康和生活质量造成严重影响,但其发病机制复杂,确诊难度大。只有通过腹腔镜检查并对疑似病例进行组织病理学检查才能确诊,该技术医疗费高,并发症多。大量研究表明各种生物标记因子在子宫内膜异位的发生中有很重要作用,使用标记物诊断具有简便、快速、医疗费用低且能减少患者疼痛等优势,成为该病诊断的一个重要方向。本文综述了子宫内膜异位症诊断相关的重要生物标记物研究进展。     

代谢组学在儿童哮喘中的应用进展

支气管哮喘是儿童最常见的慢性疾病,其漏诊率高,发病机制复杂。代谢组学通过定性定量分析生物样品的低分子量分子或代谢产物的变化,为寻找生物标志物和发病机制提供了一种新途径。本文综述了代谢组学技术运用于儿童哮喘的研究,运用靶向或非靶向研究策略,以哮喘儿童及健康儿童的血液、呼出气、粪便及尿液为研究对象,试图寻找儿童哮喘的潜在生物标志物及发病机制,为儿童哮喘的诊断及治疗提供帮助。近年来代谢组学在儿童哮喘方面取得了不小的进展,但受限于个体差异、样品采集、数据分析及组学异质性等因素,代谢组学在儿童哮喘的解释方面仍面临挑战。     

Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌患者外周血中的表达及临床意义

目的 探讨Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌患者外周中的表达及其在胃癌诊断及预后方面的价值。方法 利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测89 例胃癌患者及健康对照外周血中SurvivinmRNA 和CK19 mRNA 的表达情况，并利用统计学方法分析血清Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌中的诊断和预后价值。结果 RT-PCR 结果发现胃癌患者外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 的表达均高于健康对照组；ROC 曲线显示外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 为胃癌有效诊断分子靶点；χ2检验显示外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 与胃癌患者的TNM 分期呈正相关；Kaplan-Meier 生存曲线显示Survivin 和CK19 双阳性组的胃癌患者术后5 年生存率低于其他各组。结论 胃癌患者外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 表达水平增高，是胃癌早期诊断和判断预后的潜在分子指标。     

Levels of Lipid Perioxides and Superoxide Dismutase in Peritoneal Fluid of Patients with Endometriosis

Endometriosis is a common gynecological condi-tion,the cause of which remains unclear.Recentstudies have showed thatoxygen free radicals may beinvolved in the pathogenesis of endometriosis.Thepresent study was undertaken to investigate thechanges of LPO and SOD levels in peritoneal fluidsfrom infertile women patients with endometriosis.1　 MATERIALSAND METHODS1 .1　 SubjectsPeritoneal fluid samples were collected from3 0regularly menstruating infertile women undergoingdiagnostic lapa…     

外周血表皮生长因子受体和LUNX mRNA表达对肺癌微转移诊断的价值

目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者和肺良性病变患者外周血表皮生长因子受体(EGFR)mRNA和LUNX mRNA表达情况,探讨其在肺癌微转移诊断中的价值.方法:采用荧光定量PCR方法检测42例肺癌患者和18例肺良性疾病患者外周血EGFR mRNA和LUNX mRNA表达.结果:42例NSCLC患者EGFR mRNA表达的阳性率为45.2%(19/42),LUNX mRNA表达的阳性率为40.5%(17/42),两者联合检测阳性率可提高到64.3%.良性肺部疾病患者均为阴性.结论:EGFR mRNA和LUNX mRNA可作为检测NSCLC患者外周血微转移的分子标志物,联合检测可提高外周血癌细胞的检出率.     

早产无创性检测生物标志物研究进展及其应用前景

早产是最常见的产科并发症之一。近几十年来,全世界范围内早产的发生率居高不下,且呈不断上升的趋势。阐明人类分娩发动的机制并对早产进行有效防治是保障母婴健康、提升人口素质的迫切需求。受到伦理学和检测手段的限制,早产的预测和早期诊断一直是困扰医务工作者的首要难题。近年来,关于无创性检测生物标志物的研究方兴未艾,羊水、宫颈阴道液、尿液、唾液和血液都提供了丰富的生物标志物,从中寻找能够预测早产的生物标志物成为研究热点。本文旨在讨论早产预测中无创性检测标志物的研究进展,展望该领域未来的发展和应用前景。     

阿尔茨海默病外周血早期生物标志物的研究进展

阿尔茨海默病发病隐匿,在痴呆症状出现前数十年,体内已产生一系列病理变化,一旦进入痴呆期,目前尚无理想的药物和疗法可缓解病情。其与衰老呈正相关,年龄越大,患病风险越高。筛选合适的生物标志物进行早期诊断、早预防、早发现、早治疗,对预防和延缓阿尔茨海默病的发展有着重要意义。外周血生物标志物易采集、易检测、可重复,是最理想的生物标志物来源。本文根据阿尔茨海默病经典的β淀粉样蛋白（Aβ）和Tau蛋白机制,梳理了部分外周血中潜在的生物标志物。     

VEGF表达与内异症临床诊断及R-AFS分期的相关性研究

目的：对子宫内膜移位症进行VEGF含量与内异症分期的相关性研究,并为临床辅助诊断提供参考资料。方法：选取我院妇科经腹腔镜手术及术后病理证实为子宫内膜异位症患者36例,使用Elisa法检测患者血清和腹腔液中VEGF的含量,按不同R-AFS分期进行统计学分析。结果：不同R-AFS分期血清中VEGF含量不同,差异有统计学意义（P〈0.05）;不同R-AFS分期腹腔液中VEGF含量不同,差异有统计学意义（P〈0.05）;R-AFS分期与患者血清及腹腔液中VEGF含量成正相关,相关有统计学意义（P〈0.05）。结论：此结果进一步证实了,VEGF在子宫内膜异位症中的重要作用,并且由于其与疾病程度的明显相关,可以将VEGF做为子宫内膜异位症分期的诊断依据以及疗效判断的监测指标。     

子宫内膜异位症诊治困局与思考

子宫内膜异位症（Endometriosis,EM）是一种雌激素依赖性神经炎症性疾病,其导致的慢性盆腔痛、卵巢子宫内膜异位囊肿、不孕严重影响女性的生活质量。本文从中西医角度综述了EM发病机制,并对EM中西医诊治存在的问题进行了深入的探讨;并对EM中西医诊治提出策略性建议。笔者强调,EM是一种慢性疾病,需要长期的管理。在EM诊治过程中要重视临床诊断,避免诊断延迟;同时要重视中医药的规范化治疗,尽早介入、尽早使用;要积极提高中医药在EM治疗中的地位和临床使用率。