高效液相色谱-串联质谱方法测定血清中氨磺必利、舒必利、米那普仑、西酞普兰、文拉法辛及O-去甲文拉法辛浓度

目的：建立人血清中氨磺必利、舒必利、米那普仑、西酞普兰、文拉法辛及O-去甲文拉法辛浓度同时测定的LC-MS/MS方法，实现临床样本的血药浓度监测。方法：以去甲基氨磺必利和D，L-N，N-二去甲文拉法辛为内标，甲醇-乙腈溶剂沉淀蛋白；使用ES Sonoma C₁₈（2）色谱柱（50 mm×2.1 mm，3 μm）以甲醇和6 mmol·L^-1乙酸铵水溶液为流动相，梯度洗脱；使用三重四级杆进行检测，采用电喷雾的离子源，在正离子模式下以MRM的扫描模式进行定量分析。结果：方法经验证，空白基质的干扰小，注射完高浓度样品后在空白样品中的残留符合要求，高浓度样品可以稀释2倍后进行分析，基质因子变异系数RSD小于15%，处理后的样品12 h内分析稳定、未处理样本4℃冰箱存放1周稳定，氨磺必利在15.53~497.00 ng·mL^-1、舒必利在18.03~577.00 ng·mL^-1、米那普仑在7.91~253.05 ng·mL^-1、西酞普兰在9.71~310.62 ng·mL^-1、文拉法辛在8.62~275.83 ng·mL^-1、O-去甲文拉法辛在9.19~293.92 ng·mL^-1范围内均具有良好的线性关系（R²>0.99），方法的准确度高、精密度好。结论：该方法的样本处理简单，样本分析时间短，可以实现大量临床样本的快速分析，已成功应用于临床服用氨磺必利、舒必利、米那普仑、西酞普兰或文拉法辛的患者的血药浓度监测。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血清中文拉法辛和O-去甲基文拉法辛浓度的不确定度评价

目的：评价高效液相串联质谱（Liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）法测定人血清中文拉法辛和O-去甲基文拉法辛浓度的不确定度。方法：对可能会引入不确定度的步骤进行分析,包括测量重复性、样品称量、溶液配制、样品处理、仪器允差、基质效应、提取回收、标准曲线拟合等,评估扩展不确定度。结果：文拉法辛低（12 ng·mL^-1）、中（120 ng·mL^-1）、高（300 ng·mL^-1）浓度质控样品的拓展不确定度分别为：U_L=0.847 ng·mL^-1,U_M=7.518 ng·mL^-1,U_H=20.776 ng·mL^-1;O-去甲基文拉法辛低（60 ng·mL^-1）、中（600 ng·mL^-1）、高（1 500 ng·mL^-1）浓度质控样品的拓展不确定度分别为：U_L=11.666 ng·mL^-1,U_M=91.479 ng·mL^-1,U_H=254.523 ng·mL^-1（P=95%,k=2）。结论：LC-MS/MS法测定人血清中文拉法辛和O-去甲基文拉法辛浓度的不确定度主要来源于标准曲线拟合、基质效应和提取回收过程。选择合适的同位素氘代内标浓度能够有效降低标准曲线拟合过程引入的不确定度。     

UPLC-MS/MS法同时测定单侧足踝手术患者血浆中利多卡因及其活性代谢物的浓度

目的：建立简便快速、灵敏准确的超高效液相色谱串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定人体血浆利多卡因及其两种活性代谢物的浓度。方法：血浆样品经溶剂诱导相变萃取前处理后,以罗哌卡因为内标,经Thermo hypersil GOLD C₁₈（100 mm×2.1 mm,1.9 μm）色谱柱,以A （0.01%甲酸水溶液）-B （乙腈）为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾电离源（ESI）,在正离子（positive）模式下进行选择离子反应监测（SRM）。结果：利多卡因在5~4 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好,单乙基甘氨酰二甲苯胺、甘氨二甲基苯酰胺在1~800 ng·mL^-1范围内线性关系良好。该方法日内、日间RSD均小于10%,且提取回收率稳定,并测得股神经联合坐骨神经阻滞后,10名足踝手术患者体内利多卡因及两种活性代谢物的C_max分别为（1 672.86±227.45）、（265.66±32.71）、（42.19±22.35）ng·mL^-1。结论：该方法简便高效、灵敏准确,可用于利多卡因及其两种活性代谢物血药浓度的监测。     

中国胃肠间质瘤患者服用伊马替尼稳态谷浓度的初步分析

目的：研究中国胃肠间质瘤（gastrointestinal stromal tumor,GIST）患者服用伊马替尼稳态浓度的分布情况,为开展伊马替尼治疗药物浓度监测和个体化治疗提供依据。方法：收集服用甲磺酸伊马替尼达稳态（29 d）的GIST患者血浆,HPLC-MS/MS法检测血浆伊马替尼浓度。分析不同剂量伊马替尼血药浓度的差异以及个体间和个体内变异。结果：共收集88例GIST患者的154份血浆样本。服用伊马替尼600 mg·d^-1（n=4）、400 mg·d^-1（n=81）、300 mg·d^-1（n=1）、200 mg·d^-1（n=2）的患者血药浓度分别为（3 032.50±679.94）ng·mL^-1,（1 525.14±599.87）ng·mL^-1,1 155 ng·mL^-1,（655.57±21.92）ng·mL^-1。伊马替尼个体间变异39.57%,个体内变异为22.32%。单变量分析显示,伊马替尼血药浓度与性别、年龄、肿瘤切除部位以及是否转移无关。结论：中国GIST患者服用伊马替尼血药浓度个体差异较大,十分有必要进行血药浓度监测。     

HPLC-MS/MS法同时测定癫痫伴抑郁患者血浆中卡马西平和文拉法辛的浓度

目的：建立人血浆中同时测定卡马西平和文拉法辛浓度的HPLC-MS/MS方法,并用于临床癫痫伴抑郁患者血药浓度的测定。方法：色谱柱：Phenomenex Kinetex XB-C18,（2.6 μm,50 mm×3 mm）;流动相：甲醇（A）-2%甲酸水溶液（B）（65∶35）,等度洗脱;流速为0.4 mL·min^-1;柱温：40℃;进样量：5 μL。电喷雾离子源（ESI）,多离子反应监测（MRM）,正离子扫描。结果：卡马西平在0.1~20 μg·mL^-1内线性关系良好,最低定量下限为0.01 μg·mL^-1;文拉法辛在10~800 ng·mL^-1内线性关系良好,最低定量下限为10 ng·mL^-1。准确度在±15%之间,日内、日间精密度的RSD均小于15%,提取回收率为89.24%~105.74%,稳定性良好,不受基质效应影响。结论：本方法简单、快速、经济,具有良好的专属性和灵敏性,适用于临床检测卡马西平和文拉法辛的血药浓度。     

基于超高效液相色谱-串联质谱快速检测索非布韦及其代谢物在大鼠体内的生物等效性分析

目的：建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）快速并同时测定大鼠血浆中抗丙肝药索非布韦及其代谢物GS-331007的含量,探讨索非布韦代谢产物作为标记物测定药时曲线的可能性,研究不同厂家抗丙肝药索非布韦在大鼠体内的生物等效性。方法：通过液质联用检测原研药A和仿制药B以36 mg·kg^-1灌胃大鼠各时间点索非布韦和GS-331007的血药浓度。用DAS 2.1.1和SPSS 17.0软件计算药动学参数并比较原研药A和仿制药B的一致性。结果：原研药A和仿制药B中索非布韦药动学参数C_max分别为（1 376.08±174.95）ng·mL^-1和（1 297.58±164.93）ng·mL^-1,t_max分别为（0.75±0.08）h和（0.72±0.16）h,t_1/2分别为（1.57±0.20）h和（1.73±0.45）h,AUC_（0→t）分别为（2 691.67±280.85）ng·mL^-1·h和（2 851.20±199.54）ng·mL^-1·h,AUC_{（0→∞）}分别为（2 748.51±258.91）ng·mL^-1·h和（3 007.75±364.02）ng·mL^-1·h,原研药A和仿制药B代谢物GS-331007 C_max分别为（1 302.52±163.73）ng·mL^-1和（1 430.88±107.52）ng·mL^-1,t_max分别为（3.97±0.74）h和（3.95±1.38）h,t_1/2分别为（5.56±2.55）h和（5.44±1.38）h,AUC_（0→t）分别为（9 723.24±1170.38）ng·mL^-1·h和（9 032.31±1 037.76）ng·mL^-1·h,AUC_{（0→∞）}分别为（9 893.26±1 251.89）和（9 316.90±1 293.44）ng·mL^-1·h。结论：本实验建立的UPLC-MS/MS方法可在3.5 min内准确测定大鼠血浆中索非布韦及其代谢物GS-331007含量。根据索非布韦和其代谢物GS-331007药时曲线得出原研药A和仿制药B的药动学参数一致性较好（P>0.05）。本工作发现用代谢物GS-331007作为索非布韦生物等效性研究的可能性。     

晚期非小细胞肺癌患者吉西他滨血药浓度与临床疗效及不良反应相关性研究

目的：通过液质联用（LC-MS）技术测定非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者吉西他滨血药浓度,探讨吉西他滨血药浓度与临床疗效及不良反应的相关性。方法：入组某院化疗病区确诊为非小细胞肺癌,并接受吉西他滨联合顺铂方案化疗的患者,于输注吉西他滨完后5 min取血,采用LC-MS测定吉西他滨血药浓度,每两周期评估近期疗效,收集不良反应信息,比较高血药浓度组和低血药浓度组的临床疗效、不良反应差异,探讨两者之间相关性。结果：53例患者吉西他滨峰浓度范围为：1.58~28.70 μg·mL^-1,均值（14.37±8.63）μg·mL^-1,其中>15 μg·mL^-1组28例,≤15 μg·mL^-1组25例。>15 μg·mL^-1组客观缓解率（ORR）、临床获益率（CBR）显著高于≤15 μg·mL^-1组（P<0.05）;>15 μg·mL^-1组白细胞降低、中性粒细胞降低、血小板降低、Ⅲ~Ⅳ级胃肠道反应发生率显著高于≤15 μg·mL^-1组（P<0.05）,两组血红蛋白降低、肝肾功能损害、过敏反应及皮疹等发生率差异无显著性（P>0.05）。结论：NSCLC患者吉西他滨峰浓度与临床疗效及不良反应具有相关性,高峰浓度能提高患者治疗的临床疗效,但增加了白细胞减少、粒细胞减少和血小板减少及Ⅲ~Ⅳ级胃肠道反应发生率。     

超高效液相色谱-质谱联用法检测人全血中氯喹、羟氯喹、阿比多尔及其临床应用

目的: 建立并验证一种人全血中氯喹、羟氯喹、阿比多尔的检测方法,并将其用于临床检测。方法: 全血样本经氯化铵裂解和乙腈蛋白沉淀后,采用液相-串联质谱联用仪测定。色谱柱为BEH C₁₈,以含0.5%甲酸乙腈溶液-0.5%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1,电喷雾正离子模式,多反应监测。结果: 氯喹、羟氯喹、阿比多尔在8~1 600 ng·mL^-1线性关系良好;批内和批间精密度(RSD)均在12.71%以内,批内和批间准确度(RE)均在-7.12%~13.51%;提取回收率均在76.50%~92.49%;内标归一化的基质因子变异系数(RSD)均小于15%;在多种储存条件下,处理前后的样品稳定性良好。结论: 该方法专属性强,准确度高,重复性好,可用于3种药物治疗药物监测及中毒检测。     

抑郁症患者CYP2D6基因多态性与文拉法辛代谢的相关性研究

目的：探讨汉族抑郁症患者CYP2D6基因多态性对文拉法辛体内代谢的影响。方法：以79名抑郁症住院患者为研究对象,采用液相色谱-质谱/质谱联用技术测定患者体内文拉法辛及去甲文拉法辛血药浓度,采用sanger测序对患者CYP2D6*4基因（rs3892097）、CYP2D6*5基因（基因缺失）、CYP2D6*10基因（rs1065852）和CYP2D6*14基因（rs5030865）进行SNPs分型。结果：（1）CYP2D6*4、CYP2D6*5、CYP2D6*14 3个基因的突变检出率为0%。根据CYP2D6*10（rs1065852）基因分型结果将患者分为3组：CC组（15例,19.0%）、CT组（25例,31.6%）和TT组（39例,49.4%）,其中T等位基因突变频率为65.2%;（2）3组间C_VEN、C_ODV、剂量校正前后C_VEN+C_ODV浓度差异无统计学意义;CC、CT和TT组C_ODV/C_VEN分别为6.0、4.0和3.0,其中CC与TT组间差异有高度统计意义（P<0.01）,CC与CT组间差异有统计意义（P<0.05）。（3）不同性别组间C_ODV和剂量校正前后的C_VEN+C_ODV差异有统计意义：女性组C_ODV（368.6 ng·mL^-1）高出男性组（267.0 ng·mL^-1）38.1%;女性组C_VEN+C_ODV（499.3 ng·mL^-1）高出男性组（406.7 ng·mL^-1）22.8%;女性组剂量校正后C_VEN+C_ODV（2.5 ng·mL^-1·mg^-1）高出男性组（2.1 ng·mL^-1·mg^-1）19.0%。结论：研究未发现不同CYP2D6基因型组间药物浓度差异有统计意义,但不同基因型组间文拉法辛代谢率（C_ODV/C_VEN）差异有显著性。文拉法辛体内代谢存在性别差异,但临床疗效是否有差异有待进一步研究;相对于男性患者,女性患者暴露于更高的药物浓度之下,发生药物不良反应的风险更高,因此临床治疗女性患者时剂量调整需更加缓慢和谨慎。     

高效液相色谱串联质谱法同时检测人血浆伊马替尼及代谢物

目的：建立一种同时测定人血浆中伊马替尼及其活性代谢产物N-去甲基伊马替尼的高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）法,并应用于检测胃肠间质瘤患者伊马替尼及代谢物的浓度。方法：血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以含0.1%甲酸的水溶液和甲醇溶液为流动相;采用梯度洗脱,Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）色谱柱进行分离,流速为0.3 mL·min^-1;柱温为35℃。ESI离子源,正离子模式,多反应监测,用于定量分析的离子对为m/z494.2→m/z394.3（伊马替尼）、m/z480.3→m/z394.3（N-去甲基伊马替尼）、m/z502.5→m/z394.4（内标,伊马替尼-D₈）。结果：伊马替尼和N-去甲伊马替尼的线性范围均为50~10 000 ng·mL^-1,定量下限为50 ng·mL^-1,伊马替尼及代谢物的准确度分别为97.9%~109.0%,95.5%~103.5%,日内和日间变异系数<10%。结论：本方法简便、准确、灵敏、专属性强,适用于人血浆中伊马替尼及其代谢物浓度的检测。     

LC-MS/MS法测定人血清中奥氮平的不确定度评价

目的：评价高效液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）测定人血清中奥氮平的不确定度。方法：通过分析LC-MS/MS法测定人血清奥氮平浓度过程中的影响因素,包括测量重复性、天平称量、溶液配制、基质效应、血清样本预处理和标准曲线拟合等,评价测定过程中各因素引起的不确定度,计算合成不确定度和扩展不确定度。结果：人血清中低（6 ng·mL^-1）,中（60 ng·mL^-1）和高（150 ng·mL^-1）浓度奥氮平的扩展不确定度分别为0.418,3.851,10.108 ng·mL^-1（P=95%,k=2）。结论：LC-MS/MS法测定人血清中奥氮平的不确定度主要由基质效应和标准曲线拟合引入。     

氯吡格雷活性代谢物在人体内的血药浓度测定

目的：采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）建立人血浆中氯吡格雷活性代谢产物浓度测定的方法。方法：血浆经冷冻干燥处理,以Accucore C₁₈为色谱柱;乙腈（含0.01%甲酸）-水（含0.01%甲酸）为流动相,流速0.4 mL·min^-1,柱温30 ℃,进样量2 μL;通过正离子模式多反应监测扫描分析,离子通道分别为氯吡格雷活性代谢产物衍生物（CAMD）m/z 504.2→155.1,内标氯雷他定m/z 382.8→336.9。结果：血浆中氯吡格雷活性代谢产物衍生物在0.5~500 ng·mL^-1范围内线性关系良好;最低检测限为0.5 ng·mL^-1;提取回收率为83.81%~97.65%;日内和日间精密度的RSD均小于9.86%。结论：本方法准确可靠,简便快速且灵敏度高,适用于人血浆中氯吡格雷活性代谢物的测定,可进一步用于研究氯吡格雷活性代谢产物的药代动力学特征。     

柱前衍生-气质联用法同时测定人血浆中水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷的浓度

目的：建立一种同时测定人血浆中水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷浓度的GC-MS方法。方法：使用SH-Rxi-5Sil（30 m×0.25 mm ID，0.25 μm）气相色谱柱，以甲醇作为样品溶剂同时也是甲酯衍生化试剂，在气相进样口高温衬管内衍生化并气相分离，质谱定量检测样本中的水杨酸和阿司匹林衍生物，以及氯吡格雷的含量。结果：水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷分别在0.26～127.5μg·mL^-1、1.93～965μg·mL^-1和5.45~2180ng·mL^-1范围内线性良好，三种待测物的定量下限分别可达0.26，1.93，5.45 ng·mL^-1。结论：该方法所用的血浆样本量少，操作相对简便污染小，测定周期短，对水杨酸、阿司匹林和氯吡格雷的测定结果稳定性和重复性良好，可以作为临床血药浓度检测的方法推广。     

液-质联用法测定人血浆中卡马西平浓度的不确定度评定

目的:评定液-质联用法(LC-MS/MS)测定人血浆中卡马西平(CBZ)浓度的不确定度。方法:分析LC-MS/MS法测定人血浆中CBZ浓度的整个过程,确定不确定度的来源和大小,最后进行合成并扩展。结果:人血浆中低浓度(14.8 ng·mL^-1)和高浓度(717 ng·mL^-1)CBZ的扩展不确定度分别为0.92 ng·mL^-1和38.8 ng· mL^-1(P=95%,k=2)。结论:LC-MS/MS法测定人血浆中CBZ浓度的不确定度在低浓度时主要由重复性、生物样品配制、基质效应和回收率引入,在高浓度时主要由生物样品配制、基质效应和回收率引入。     

二甲双胍肠溶片人体药动学和生物利用度研究

目的：研究二甲双胍肠溶片生物利用度。方法：HPLC法测定血浆中二甲双胍浓度。30名健康受试者随机交叉单剂量口服二甲双胍肠溶片参比药物和试验药物1 000 mg,测定不同时间血浆中二甲双胍浓度,DAS软件处理药时数据。结果：与参比药物相比,试验药物相对生物利用度F₀^t：（97.3±14.9）%,F₀^∞：（94.9±13.9）%;试验药物与参比药物的主要药动学参数t_max分别为：（2.20±0.49）h;（2.42±0.58）h,C_max分别为：（1 733±379）ng·mL^-1;（1 620±396）ng·mL^-1,t_1/2ke分别为：（2.48±0.40）h;（2.50±0.20）h,AUC₀^t分别为：（11 402±2 402）ng·h·mL^-1;（10 701±2 011）ng·h·mL^-1,AUC₀^∞分别为：（12 258±2 401）ng·h·mL^-1;（11 299±2 321）ng·h·mL^-1;对两制剂间AUC₀^t、AUC₀^∞、C_max、t_max药动学参数进行双向单侧t检验,P值分别为：0.050 86、0.059 02、0.063 85、0.058 34,均大于0.05,无统计学意义。结论：二药物生物等效。     

肾移植术后应用雷帕霉素转换方案的临床观察

目的:探讨肾移植术后患者应用雷帕霉素进行转换治疗的安全性和有效性。方法:分析2012-2016年北京朝阳医院泌尿外科肾移植术后由传统钙调磷酸酶抑制剂(CNI)为主的方案转换为雷帕霉素免疫抑制方案的患者。所有患者转换前均使用环孢素/他克莫司联合霉酚酸/硫唑嘌呤及糖皮质激素作为初始免疫抑制方案。各免疫抑制剂的剂量根据血药浓度进行调整,使用三联方案的患者在转换当天停用他克莫司/环孢素,雷帕霉素浓度控制在4~10ng·mL^-1;使用四联方案的患者雷帕霉素浓度控制在3~7ng·mL^-1,他克莫司剂量为原来的1/3,浓度控制在2~5ng·mL^-1。分析患者转换前后1年血肌酐、蛋白尿、血常规和血生化指标;总结转换前后1年感染发生率和肿瘤患者转归。结果:33例患者转换1年后血肌酐水平下降,但结果差异无显著性[(112.36±63.82)μmol·L^-1比(108.17±55.41)μmol·L^-1,P=0.58]。甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇在转换后1年有明显增长(P=0.04、0.02),转氨酶水平变化差异无显著性(P=0.19、0.12)。转换前后1年血小板、血红蛋白、血糖变化无明显差异。转换前后巨细胞病毒感染(CMV)、卡氏肺孢子菌肺炎(PCP)感染降低,肿瘤患者复发率降低,蛋白尿呈双向改变。结论:肾移植术后患者应用雷帕霉素转换方案是安全、有效的。