黄连配方颗粒化学成分的体内代谢研究

目的 探讨黄连配方颗粒主要成分体内代谢过程。方法 采用UHPLC-TOF/MS技术,根据精确相对分子质量和碎片离子分析,并结合相关文献检索及质谱裂解规律,比较黄连配方颗粒给药前后大鼠血清及尿液的图谱。结果 在黄连给药组血清中共发现原型成分15个,代谢物9个;尿液中原型成分18个,代谢物20个。结论 本研究较为全面地阐释了黄连配方颗粒主要化学成分的体内过程,研究结果可为黄连配方颗粒药动学、代谢产物推测、药效物质基础及作用机制等研究提供参考依据。     

基于UHPLC-QTOF-MS/MS技术分析玳玳花的化痰活性成分

目的：利用超高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱（UHPLC-QTOF-MS/MS）技术快速分析玳玳花的化痰的活性成分。方法：以酚红排出量筛选玳玳花不同提取部位祛痰的作用,岛津ARC-C18色谱柱（3.0 mm×100 mm,1.7μm）,联合质谱分析有效部分的化学成分。结果：玳玳花乙醇提取物具有显著的化痰作用,提取物中初步鉴定了32个化合物,主要为黄酮类和有机酸类。结论：建立了一种基于化痰活性结合UHPLC-QTOF-MS/MS分析鉴定玳玳花的化学成分的快速方法。     

大鼠血清中黄芩素代谢产物的鉴定(英文)

黄芩素是黄芩苷的苷元,是黄芩的主要活性黄酮类成分之一。大鼠灌胃给予黄芩素(200mg/kg)之后,利用HPLC-DAD和LC-MS/MS法从大鼠血清中检测并鉴定出5个代谢产物(M1-M5)以及原型药(M0)。在此结果上,推测了黄芩素在大鼠血清中可能的代谢途径。     

基于网络药理学及液质联用技术的三黄益肾颗粒医院制剂质量标志物预测研究

目的:采用网络药理学结合液质联用技术预测分析三黄益肾颗粒医院制剂的质量标志物。方法:采用网络药理学方法分析三黄益肾颗粒治疗糖尿病肾病的作用机制,并筛选出活性成分;通过超高效液相-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对三黄益肾颗粒中的化学成分进行全面鉴定;通过质谱鉴定的成分与网络药理学筛选的成分对比,结合中医药组方理论,辨识出与功效相关的成分作为三黄益肾颗粒的质量标志物。结果:网络药理学模块化筛选得到君药组20个潜在质量标志物;臣药组筛选得到27个潜在Q-Marker;佐使药组筛选得到48个潜在质量标志物。与通过液质联用技术辨识的30种成分比对出16个交集成分,结合三黄益肾方中医药组方理论,初步预测黄芪甲苷、芒柄花黄素、阿魏酸、芦荟大黄素4种成分为三黄益肾颗粒的质量标志物。结论:通过网络药理学及液质联用技术并结合中医药组方理论,筛选出三黄益肾颗粒的质量标志物,可为提升三黄益肾颗粒的质量标准提供依据,为建立以中医药理论为指导,以临床疗效为基础的医院制剂整体质量评价体系提供思路。     

基于方剂配伍含药血清“谱-效关系”的茵陈蒿汤保肝作用药效物质研究

目的：初步阐明茵陈蒿汤保肝作用的药效物质。方法：SD大鼠灌胃制备茵陈蒿汤及其各单味药、各缺味方含药血清,一方面采用已建立的方法测定不同方剂配伍含药血清HPLC指纹图谱;另一方面建立H₂O₂诱导的HL-7702肝细胞损伤模型,并对不同方剂配伍含药血清进行保肝作用药效评价,最后分别采用双变量相关性分析和多元回归分析,指认含药血清指纹图谱中与药效相关的色谱峰。结果：茵陈蒿汤含药血清指纹图谱中6号峰与肝细胞保护作用明显相关,1~6,8,9,11,20号峰与肝细胞保护作用有一定关系。结论：茵陈蒿汤保肝作用的药效物质主要包括来源于大黄的蒽醌类成分及体内代谢产物、来源于栀子的环烯醚萜类成分及体内代谢产物和西红花酸类成分体内代谢产物,其中1个蒽醌类成分体内代谢产物活性较强。     

基于高效液相色谱法定性定量跟踪的大黄结合型与游离型蒽醌分离及纯化初步研究

目的：考察大黄中结合型与游离型蒽醌分离及纯化方法。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法对大黄药材中8个结合型蒽醌及5个游离型蒽醌含量进行测定,采用Triple-Q-TOF/MS技术对大黄药材色谱图中主要色谱峰成分进行鉴定,95%乙醇提取大黄药材中的蒽醌类成分,提取液回收乙醇后加水沉淀,分离为结合型蒽醌和游离型蒽醌2个部位,分别采用碱性醇沉法和氯仿-酸水双相萃取法对结合型蒽醌和游离型蒽醌进行初步纯化,并结合HPLC-DAD法在280 nm和430 nm 2个波长下进行定性定量跟踪。结果：大黄药材中检测到的43个主要成分全部转移到了提取液中,经纯化处理后,结合型蒽醌部位杂质明显减少,游离型部位纯度从19.98%提高到92.97%。结论：考察的方法可用于大黄结合型与游离型蒽醌初步分离及纯化。     

运用超高效液相色谱-生物化学检测在线联用分析方法筛选中药中的丁酰胆碱酯酶抑制剂

目的：建立超高效液相色谱（UPLC）-生物化学检测（BCD）在线联用技术快速筛选中药中的丁酰胆碱酯酯酶（BChE）抑制剂的方法。方法：运用UPLC-DAD-BCD方法快速筛选吴茱萸、钩藤、苦参、山豆根提取物中的BChE抑制剂。以莲心碱为阳性对照,考察UPLC-DAD-BCD方法用于BChE抑制剂筛选的可行性。运用超高效液相-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱（UHPLC-LTQ/Orbitrap MS）方法鉴定4种中药的70%甲醇提取物中的主要活性成分。结果：UPLC-DAD-BCD方法快速筛选出12个BChE抑制剂,其中吴茱萸4个、钩藤3个、苦参5个、山豆根2个,山豆根中的2个活性成分与苦参共有,通过UHPLC-LTQ/Orbitrap MS鉴定出其中的8个BChE抑制剂,分别为去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、1-甲基-2-[（6Z,9Z）-6,9-十五二烯基]-4（1H）-喹诺酮、去氢毛钩藤碱、毛钩藤碱、苦参碱和氧化苦参碱。结论：建立的UPLC-DAD-BCD在线分析方法灵敏度高、重现性好,能快速筛选中药中的BChE抑制剂,为中药中新的生物活性成分的快速筛选提供了一种高效、便捷的分析策略。     

基于UPLC-QTOF/MS的茵陈蒿汤体外成分鉴定和急性肝损伤防护作用入血成分研究

鉴定茵陈蒿汤体外活性成分和体内入血成分,为探究其对急性肝损伤防护作用和防治机制提供了科学依据。利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)技术,鉴定茵陈蒿汤水煎液及口服预防给药14天后,刀豆蛋白A (con-A)所致急性肝损伤小鼠的血清样本(本研究中所有实验动物的使用获得海军军医大学伦理委员会批准,批号19YF1459400)中的化学成分。初步鉴定茵陈蒿汤水煎液含90个化合物,主要为黄酮类、萜类、鞣质类、醌类等,血清样本中含5个原形成分,包括大黄酚、脱氧土大黄苷-8-O-没食子酸盐、玉叶金花苷酸、7-甲氧基-香豆素、大黄素。本文所建立的UPLC-QTOF/MS方法能高效灵敏地鉴别茵陈蒿汤的体外成分及其入血成分,初步阐明茵陈蒿汤保肝作用的药效物质基础,可为茵陈蒿汤的质量标志物筛选和药理作用研究提供科学依据。     

基于HPLC-DAD指纹图谱和化学计量法分析的红药子抗氧化活性谱效关联研究

目的：建立红药子药材醇提物的HPLC-DAD指纹图谱,分析指纹图谱与抗氧化作用的关联性, 挖掘红药子抗氧化的物质基础,为控制红药子的质量提供依据。方法：通过HPLC-DAD法建立10批红药子醇提物的指纹图谱,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)清除活性、超氧阴离子自由基清除活性、羟自由基清除活性为指标评价红药子药材的抗氧化活性,并采用偏最小二乘法(PLS)分析 HPLC-DAD指纹图谱与抗氧化活性关系,筛选红药子药材指标性成分。结果：10批红药子的指纹图谱共匹配出21个共有峰,其相似度均大于0.90。通过化学计量学方法分析,综合相关系数和VIP值两个指标, 确定9个共有峰与DPPH自由基清除活性呈正相关且VIP值均大于1,3个共有峰与超氧阴离子清除活性呈正相关且VIP值均大于1,8个共有峰与羟自由基清除活性呈正相关且VIP值均大于1。最后经HPLC-QTOF-MS鉴别了红药子药材指纹图谱中10个峰,共鉴定出7个共有特征峰,3个非共有峰。其中,与抗氧化活性最相关的三个峰10、12、14分别为绿原酸、岩白菜素、隐绿原酸。结论：建立的红药子药材的指纹图谱方法简单可行,通过谱效关系分析筛选出抗氧化活性的重要成分,为明确红药子抗氧化作用提供物质基础,为整体控制红药子质量提供依据。     

裸花紫珠药材及相关制剂质量控制方法研究

目的：建立裸花紫珠药材及相关制剂质量标准,为临床用药安全提供保障。方法：采用多种柱色谱方法、波谱 分析技术、显微法、高效液相色谱法、HPLC-MS/MS 法以及现代药理方法对裸花紫珠及相关制剂药效物质基础及作用 机理、质量控制方法及药代动力学进行系统研究。结果：从裸花紫珠药材中分离鉴定了 76 个化合物,发现 11 个具有止血、 活血、抗炎等药效活性成分,并明确了可用于裸花紫珠药材及相关制剂质控定量活性指标成分木犀草苷和毛蕊花糖苷; 起草了裸花紫珠药材、干浸膏、裸花紫珠片 / 胶囊 / 颗粒 5 项质量标准;建立了 HPLC-MS/MS 同时测定大鼠血浆中木犀 草苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷等 7 种活性成分的血药浓度的方法。结论：通过系统研究,阐明了裸花紫珠药材药 效物质基础及作用机理以及主要活性成分药物动力学参数,为临床合理用药提供了科学依据,同时建立了裸花紫珠药材、 干浸膏、裸花紫珠片 / 胶囊 / 颗粒 5 项国家药品标准,形成了从裸花紫珠 - 中间体 - 系列制剂的完整质量控制体系。     

黄连及其复方治疗抑郁症的临床应用和现代研究进展

黄连复方目前已经用于抑郁症的治疗。本文从传统理论,基础研究和临床研究3个方面,对黄连,黄连复方及黄连主要成分小檗碱的抗抑郁作用进行了综述,并对其机制进行了初步探讨,为深入开展药理研究和进一步临床推广应用提供了科学依据。     

五味子对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抑菌活性部位的筛选和UPLC-QTOF-MS/MS分析活性组分化学成分

目的：研究五味子对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）体外抑菌活性部位的筛选以及分析五味子活性组分化学成分。方法：采用系统溶剂法分段萃取和AB-8大孔吸附树脂分离技术,结合管碟法对各分离组分进行体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性追踪检测,筛选出五味子抑菌活性最强组分。超高效液相（UPLC）、电喷雾四级杆飞行时间质谱（ESI-QTOF-MS）和二级质谱（MS/MS）对五味子抑菌活性组分进行分析。结果：筛选出70%乙醇提取的五味子依次经乙酸乙酯萃取和AB-8大孔吸附树脂水洗脱的组分（EEW component）为抗MRSA体外抑菌活性部位,同时对抗生素敏感金黄色葡萄球菌和临床分离的耐药MRSA均具有较强的抑菌活性。UPLC-QTOF-MS/MS分析体外抑菌活性组分,根据一级质谱提供的相对分子质量和二级质谱高能量碰撞碎片信息,初步鉴定了11个化合物,这11个化合物分别为奎尼酸（1）、苹果酸（2）、柠檬酸（3）、苹果酸异构体（4）、咖啡酰奎尼酸（5）、莽草酸（6）、柠檬酸单甲酯（7）、原儿茶酸（8）、富马酸单乙酯（9）、2-羟基-丙基三羧酸-2-乙酯（10）和柠檬酸二甲酯（11）。结论：本实验初步筛选了五味子抑菌活性部位,为开发天然抑菌制剂提供了方法和思路。     

多指标正交试验优选丹参黄连的提取工艺

目的: 优选丹参黄连提取工艺。方法: 采用正交设计,以丹酚酸B、丹参酮Ⅱ_A和表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱4种生物碱总量的质量分数和干膏得率为评价指标,用高效液相色谱法测定其含量,对提取工艺中乙醇体积分数、乙醇用量、提取次数、提取时间4个因素进行考察,采用综合加权评分法处理数据。结果: 优选工艺:加70%乙醇10倍量,回流提取3次,每次0.5 h。结论: 优选所得的工艺合理可行,可作为丹参黄连的提取工艺。     

剂量配伍对泻心汤蒽醌类成分溶出率变化规律研究

目的:研究黄连、黄芩的剂量配伍变化对泻心汤蒽醌类成分在泻心汤中溶出率影响。方法:固定大黄的量不变,应用2因素5水平星点设计法设计泻心汤的剂量比例,用HPLC法测定不同剂量比例泻心汤的蒽醌类成分的含量,计算溶出率,建立数学模型,分析剂量配伍变化对泻心汤蒽醌类成分溶出率变化影响。结果:大黄的量不变,黄连的量与黄芩的量分别不同程度改变时,泻心汤蒽醌类成分的溶出率不同。黄芩的量改变对泻心汤蒽醌类成分的影响较大。得到蒽醌类成分有较好溶出率的剂量比例为大黄-黄连-黄芩=6∶0.17∶5.83。结论:将星点设计-响应面法应用于中药剂量配伍方面的研究,具有方法简便、精度高的优点。非线性回归分析比线性回归分析更适用于复方剂量配伍变化对其有效成分溶出率变化规律的研究。     

基于HPLC-DAD的产康乐颗粒入血成分鉴定及含量测定

目的: 通过对产康乐颗粒进行血清药物化学研究,初步阐明产康乐颗粒的药效物质基础。方法: SD大鼠灌胃给药后,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定含药血清样品的HPLC色谱图,通过与空白样品的HPLC色谱图进行对比分析,获得血中移行成分信息,并对主成分进行定量分析。结果: 产康乐颗粒HPLC色谱图中可检出20个血中移行成分,其中5个成分可能为代谢成分,15个成分为机体直接吸收入血,包括绿原酸、黄芩苷和6-姜辣素(含量分别为:16.26,0.49,0.41μg·mL^-1)。结论: 通过该方法的研究,为阐明产康乐颗粒的药效物质基础提供科学依据。     

广西产桑叶调节血脂作用及成分鉴定研究

目的研究广西产桑叶调节血脂作用并对调脂活性成分进行鉴定。方法采用Triton WR-1339诱导建立急性高脂血症小鼠模型,给药后分别测定小鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量,观察桑叶水提物、桑叶醇提物、桑叶水提物+桑叶醇提物的调节血脂效果,用高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱(HPLC-QTOF/MS)法对调脂效果最好的一组入血成分进行鉴定。结果各组桑叶提取物均有一定的调节血脂作用,且具有剂量依赖性,高剂量组调脂效果优于低剂量组;桑叶水提物+桑叶醇提物以高剂量协同作用调脂效果最好。小鼠血清样品中检测出9个入血成分,鉴定了7个成分,其中3个原形成分,4个代谢产物,9个入血成分主要为黄酮类化合物。结论黄酮类成分是桑叶提取物发挥调脂作用的主要成分。     

Metabolism of ferulic acid in rats

Ferulic acid is the major active constituent in many natural Chinese medicinal herbs. The metabolism of ferulic acid has been investigated using solid-phase extraction and HPLC-DAD methods that were established to separate and analyze the metabolites in urine, feces and bile. Three metabolites, identified by enzymatic hydrolysis, HPLC-DAD, HPLC-MS and MS/MS, are all glucuronic acid conjugates of ferulic acid. Ferulic acid conjugated with one glucuronic acid at different positions produces M1 and M3. Ferulic acid conjugated with two glucuronic acids produces M2, which is the main metabolite. A metabolic pathway is proposed.     

基于靶向代谢组学的腹膜透析患者血清氨基酸水平探究

目的:分析腹膜透析(PD)终末期肾病(ESKD)患者血清氨基酸谱,探究其氨基酸代谢失衡状况,为氨基酸腹膜透析液的科学合理调整提供参考。方法:回顾性分析2015年1月-2015年6月某院肾内科147例终末期肾病行腹膜透析管植入术患者,与147例同期进行体格检查且未见异常的健康志愿者的完整临床资料。运用超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)法定量检测血清样本中24种氨基酸含量,结合多变量统计学分析筛选腹膜透析患者与健康志愿者的差异代谢物(t检验、变量投影重要性准则)。运用R软件对差异代谢物和实验室检测指标进行相关性分析,探究差异代谢物的生物学功能,并实现PD患者血清氨基酸谱系统聚类。结果:腹膜透析患者与健康志愿者的实验室检测指标与血清氨基酸含量多数存在统计学差异。血清氨基酸定量检测结果的多变量统计分析显示:腹膜透析患者与健康志愿者的氨基酸谱得分图呈现良好的分离趋势。进一步差异代谢物筛选表明,丙氨酸(P<0.001)、马尿酸(P<0.001)等在腹膜透析患者血清中显著升高,而牛磺酸(P<0.001)显著降低,是主要的差异氨基酸。相关性研究表明,不同类型氨基酸(芳香族氨基酸、支链氨基酸等)与实验室检测指标的相关性不同,马尿酸与血肌酐呈现中等强度的相关性(ρ=0.58,P=0.03)。结论:运用UHPLC-MS/MS能够快速、有效识别腹膜透析患者血清氨基酸代谢状况。马尿酸、牛磺酸、丙氨酸3种氨基酸的变化可为氨基酸腹膜透析液的临床合理优化提供参考。     

对叶百部抗肺炎支原体活性部位的血清药物化学研究

目的：应用血清药物化学理论分析检测对叶百部抗肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae,MP）活性部位的体内成分。方法：利用D101大孔树脂进行梯度洗脱,不同洗脱部位进行抗MP实验,测定其最小抑菌浓度值。采用超高效液相色谱与飞行时间质谱联用（UPLC-Q-TOF-MS/MS）及MetaboLynx数据处理技术分析鉴定抗MP活性部位的血中移行成分。分析采用Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸乙腈（B）,梯度洗脱,流速为0.40 mL·min^-1,柱温为45℃。结果：比较大孔树脂富集各洗脱部位最小抑菌浓度,水洗脱部位为29.41 mg·mL^-1,20%乙醇洗脱部位为15.62 mg·mL^-1,50%乙醇洗脱部位为10.42 mg·mL^-1,90%乙醇洗脱部位为7.81 mg·mL^-1。检测并鉴定了90%乙醇洗脱部位灌胃大鼠血中移行成分54个,包括14个原型成分和40个代谢产物。结论：对叶百部经大孔树脂富集90%乙醇洗脱部位抗MP活性最强,为抗MP活性部位。金刚大碱、百部新碱、对叶百部碱、新对叶百部碱、异对叶百部碱、N-氧-对叶百部碱、对叶百部碱J以及对叶百部碱H等成分可能为对叶百部抗MP的部分物质基础。