基因芯片与罗氏绝对浓度法对结核分枝杆菌耐药检测的效果比较

目的探讨基因芯片与罗氏绝对浓度法检测结核分枝杆菌耐药性的效果。方法对2012~2013年收集的180例标本进行痰液结核分枝杆菌培养,采用基因芯片检测抗结核药利福平和异烟肼的耐药性,同时采用罗氏绝对浓度法药敏检测进行对照,评价其灵敏度、特异度和符合率。结果以罗氏绝对浓度法作为金标准,基因检测结果显示,利福平耐药性的灵敏度为92.3%、特异度为97.1%、准确度为95.0%;而异烟肼的灵敏度为85.4%、特异度为93.9%、准确度为90.0%。基因检测结果显示,利福平存在rpoB基因突变,异烟肼可能存在inhA、katG和ahpC基因突变。结论基因芯片法和罗氏绝对浓度法对利福平和异烟肼耐药性检测具有较好的一致性,但基因芯片更具快速、准确的特点,值得临床推广应用。     

基因芯片技术在分枝杆菌菌种鉴定和结核耐药性检测中的应用及评价

目的探讨基因芯片技术在结核病快速诊疗中的应用价值。方法对抗酸染色涂片阳性的肺结核患者痰标本同时进行基因芯片菌种鉴定和BACTEC MGIT 960培养,对结核阳性的样本分别用以上两种方法检测利福平和异烟肼的耐药性。以培养法为参考方法,评价基因芯片法菌种鉴定和耐药检测的敏感度、特异度和符合率。采用Kappa检验分析两种方法的一致性。结果 656例涂片阳性的患者中,两种方法各检出非结核分枝杆菌21例,符合率为100%。耐药性检测发现,基因芯片对利福平的敏感度为87.8%(86/98),特异度为96.0%(410/427),符合率为94.5%(496/525),Kappa值为0.84,P0.05;对异烟肼的敏感度为81.9%(96/116),特异度为91.7%(375/409),符合率为89.5%(470/525),Kappa值为0.71,P0.05;两种药物药敏结果总符合率为92.0%(966/1 050)。结论基因芯片技术能够准确地筛选出非结核分枝杆菌;对利福平和异烟肼耐药性检测与培养法有很好的符合率和高度一致性,而且能够快速、准确地检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性,在结核病的快速诊疗领域具有广阔的应用前景。     

基因芯片技术在检测痰涂阳肺结核患者结核分枝杆菌耐药性的应用效果

目的探讨基因芯片技术在结核病耐多药快速检测中的应用效果。方法收集重庆市五个区县1 030例涂阳肺结核患者的痰标本,同时进行罗氏培养和基因芯片检测异烟肼、利福平耐药性,培养后的菌株用比例法药敏试验检测异烟肼、利福平的耐药性。以比例法药敏试验为判断标准,对基因芯片的检测效果进行分析。结果对同时有两种耐药性检测结果的958例患者进行了统计学分析,基因芯片对异烟肼检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P0.05),符合率94.1%,灵敏度80.2%,特异度95.9%,阳性预测值71.8%,阴性预测值97.4%,Kappa值为0.724。基因芯片对利福平检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P0.05),符合率96.3%,灵敏度86.4%,特异度97.5%,阳性预测值80.9%,阴性预测值98.3%,Kappa值为0.815。此外,基因芯片对异烟肼和利福平耐药结核病检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P0.05),符合率96.9%,灵敏度78.3%,特异度98.3%,阳性预测值78.3%,阴性预测值98.3%,Kappa值为0.766。结论基因芯片技术可用于耐多药结核病早期快速筛查和诊断,以弥补传统药敏试验的不足,但该方法对检测环境要求较高,需对操作人员严格培训。     

基因芯片法检测结核分枝杆菌耐药性的可行性分析

目的分析基因芯片法检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的灵敏度、特异度及符合率,为临床提供方便、准确、快速的MTB耐药性的检测方法。方法以DNA测序法为金标准,采用基因芯片法与比例法药敏试验同时对2014年8~12月收治的250例结核病患者的痰液标本分离MTB菌株进行耐药性检测,比较两种方法检测MTB对利福平和异烟肼耐药性的效能。结果基因芯片法与比例法药敏试验检测MTB对利福平的耐药率分别为3.0%、3.5%,对异烟肼的耐药率分别为6.7%、8.2%。以DNA测序法为金标准,基因芯片法检测MTB对利福平与异烟肼耐药性的灵敏度、特异度及符合率均高于比例法药敏试验,且检测时间短于比例法药敏试验,差异均有统计学意义(P0.05)。结论运用基因芯片法检测MTB对利福平和异烟肼的耐药性,具有较高的灵敏度、特异度与符合率,可以代替比例法药敏试验成为检测MTB耐药性的有效方法。     

基因芯片技术检测结核杆菌耐药的临床研究

目的 评价基因芯片技术在结核病防治工作中对结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药性的检测效果.方法 利用基因芯片技术对38例涂阳肺结核患者的痰标本进行异烟肼和利福平耐药检测,以传统罗氏药敏试验为金标准,对基因芯片技术的检测效果进行评价.结果 在38例菌株中,用基因芯片法进行异烟肼耐药基因检测,与罗氏药敏的符合率为84.2％,对38例进行利福平耐药基因检测,符合率为89.5％.结论 基因芯片检测异烟肼和利福平的耐药性与罗氏药敏方法具有很好的一致性,具有简便快速,灵敏度高,特异性好的优点,对临床及时准确进行抗结核治疗具有重要意义.     

基因芯片技术在分枝杆菌菌种鉴定和耐药性分析中的应用

目的探讨基因芯片技术在分枝杆菌菌种鉴定和耐药性分析中的应用价值。方法收集2014年1月—2016年12月宜昌市第三人民医院抗酸染色镜检阳性的肺结核患者痰样本680例,同时采用基因芯片法和培养法进行菌种鉴定,对被鉴定为结核分枝杆菌(MTB)复合群的样本分别再采用以上2种方法检测MTB对利福平和异烟肼的耐药性。以培养法作为参考方法,评价基因芯片法菌种鉴定的符合率。以药物敏感性试验结果为金标准,计算基因芯片法MTB耐药检测的敏感性、特异性和符合率,并比较其与金标准的一致性。结果基因芯片法检出31例非结核分枝杆菌(NTM),培养法检出32例NTM,符合率为96.88%。与药物敏感性试验相比,基因芯片法检测MTB对利福平耐药性的敏感性为89.81%,特异性为93.55%,符合率为92.80%,Kappa值为0.82,P0.05;检测MTB对异烟肼耐药性的敏感性为83.06%,特异性为91.39%,符合率为89.48%,Kappa值为0.73,P0.05。结论基因芯片法能够准确地筛选出NTM,在结核病诊断和耐药监测中敏感性和特异性较高,与传统培养法及药物敏感性试验有很好的一致性,且更高效、快捷、安全,具有较大的应用价值。     

基因芯片诊断耐多药结核病的临床多中心研究

目的 评估基因芯片法检测耐多药结核临床分离株的临床意义。方法采取分层抽样的方法分别从北京胸科医院、同济大学附属上海市肺科医院和广州市胸科医院保存的临床菌株库的耐药组和敏感组中,随机抽取利福平耐药株800株,异烟肼耐药株797株,耐多药株791株,利福平/异烟肼双敏感380株。用基因芯片法检测包括rpoB基因的511(T→C)、513(A→C,C→A)、516( G→T,A→T,A→G)、526( C→T,C→G,A→T,A→G)、531( C→T,C→G)、533( T→C)位点、katG的315(G→C,G→A)位点和inhA的-15(C→T)位点的耐药突变。以绝对浓度法药敏结果为金标准,计算基因芯片法的符合率、敏感度和特异度。同时对基因芯片法的核酸扩增产物进行测序,以验证基因芯片对核酸序列检测的准确性。结果以绝对浓度法药敏结果作为标准,基因芯片法检测利福平、异烟肼耐药和耐多药的符合率分别是93.7％(1 108/1 183)、83.8％ (994/1 186)、82.4％ (975/1 183)。检测利福平耐药的敏感度为92.0％ (733/797),特异度为97.2％( 375/386);检测异烟肼的敏感度为77.4％ (617/797),特异度为96.9％ (377/389);检测耐多药的敏感度为74.6％( 588/788),特异度为98.0％(387/395)。在利福平基因芯片检测为突变的菌株中,突变频率最高的位点是531( TCG),突变率为64.5％(480/744);在katG/ inhA突变菌株中,基因芯片检测为katG 315( AGC)单突变的为77.4％(487/629);且与测序结果基本一致,仅有5例菌株中不完全相符。其中1株异烟肼耐药菌基因芯片法检测为katG 315(G→C)突变,而测序结果为野生型,其余4株为基因芯片法未包含的突变类型。结论基因芯片法可快速可靠地检测结核临床分离株利福平和异烟肼的耐药性,有望在临床诊断中广泛应用。     

XpertMTB/RIF在结核病诊断及利福平耐药中的应用

目的评价XpertMTB/RIF技术在诊断结核病及利福平耐药中的临床应用价值。方法选取196例初诊患者痰标本,分别进行抗酸染色涂片镜检、罗氏固体培养、比例法药敏试验和XpertMTB/RIF检测,对XpertMTB/RIF检测痰标本中结核分枝杆菌(MTB)和利福平耐药性的敏感度和特异度,以及与金标准的一致性进行分析。结果以罗氏培养结果为金标准,XpertMTB/RIF方法检测MTB的敏感度为94.62%(123/130)、特异度为87.88%(58/66),kappa=0.828;以比例法药敏试验结果相比,XpertMTB/RIF方法检测利福平耐药的敏感度73.33%(11/15),特异度为96.30%(104/108),kappa=0.696。结论 XpertMTB/RIF在结核病诊断和利福平耐药检测中敏感度和特异度较高,与传统方法有很好的一致性,且更高效,快捷,安全,更符合成本-效益,值得推广。     

探针熔解曲线在耐药结核病快速筛查中的临床应用研究

目的 研究探针熔解曲线在耐药结核病快速筛查中的临床应用价值。方法 选取2020年1月—2021年3月镇江市第三人民医院收治的378例肺结核患者为研究对象,依次完成传统罗氏固体药物敏感性检测（比例法）、探针熔解曲线技术检测常用的6种药物耐药结果,包含利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、氧氟沙星、阿米卡星,和比例法进行对比,计算探针熔解曲线技术检测6种药物的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率与约登指数。结果 与比例法作比较,熔解曲线技术检测利福平耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、约登指数分别为91.70%、98.10%、61.10%、99.70%、97.90%、0.898;异烟肼是87.90%、94.20%、59.20%、98.80%、93.65%、0.821;乙胺丁醇是87.50%、97.03%、38.89%、99.72%、96.83%、0.845;链霉素是91.30%、98.19%、87.50%、98.79%、97.35%、0.895;氧氟沙星是94.74%、98.89%、81.82%、99.72%、98.68%、0.936;阿米卡星是80.00%、99...     

线性探针技术在耐多药结核病诊断中的应用评价

目的评价线性探针技术诊断临床耐多药结核病(MDR-TB)的价值。方法收集临床分离的结核分枝杆菌菌株268例,采用比例法药敏试验和线性探针技术检测利福平和异烟肼的耐药性,以比例法药敏试验为金标准,分析线性探针方法检测的敏感度、特异度。结果与比例法药敏试验相比,线性探针技术检测耐利福平敏感度为88.89%,特异度为98.05%,耐药检出率差异无统计学意义(χ~2=0.82,P0.05);耐异烟肼敏感度为84.61%,特异度为97.69%,耐药检出率差异无统计学意义(χ~2=0.69,P0.05);诊断MDR-TB的敏感度为78.26%,特异度为96.85%,耐多药检出率差异无统计学意义(χ~2=0.53,P0.05)。结论线性探针技术敏感度和特异度高,可用于MDR-TB的早期诊断。     

DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用

目的 探讨DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用.方法 采用抗酸杆菌涂片法、罗氏培养法、比例法药敏试验及DNA微阵列芯片法对海南地区的2069例疑似结核病患者痰标本进行检测,并对结核分枝杆菌检出率、耐药性及耐药基因突变特征进行分析.结果 DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌检出率为明显高于罗氏培养法和...     

Xpert MTB/RIF检测痰标本结核分枝杆菌与利福平耐受性的临床应用研究

目的分析Xpert MTB/RIF方法用于临床快速检测结核分枝杆菌(MTB)与利福平耐受性的临床意义。方法收集2015年1-12月在惠州市结核病防治研究所及5个县区医院结核科就诊的肺结核患者痰标本552例,进行涂片镜检、Xpert MTB/RIF核酸检测和改良罗氏培养,并对培养阳性者进行药敏实验。评价各种方法 MTB检测灵敏度与特异度,对比传统药敏方法和Xpert MTB/RIF检测利福平耐药性的结果并分析。结果 Xpert MTB/RIF与改良罗氏培养法对MTB检测结果相比,敏感度95.3%、特异度93.1%;耐药性对比结果中,所有阳性标本中利福平耐药的敏感度82.1%,特异度97.8%;Xpert MTB/RIF检测MTB分级与改良罗氏培养分级一致性分析中,kappa=0.688,提示两者结果具有良好的一致性。结论 Xpert MTB/RIF可用于临床早期快速检测结核分枝杆菌与利福平耐药检测的筛查,有利于临床快速决策。     

西藏地区169例复治失败肺结核病例耐药状况检测

目的 了解西藏地区复治肺结核患者中的结核分枝杆菌对抗结核化学药物的耐药状况,为有效防治肺结核病提供科学依据.方法 收集西藏自治区结核病防治所2000-2005年复治失败病例169例痰标本,用改良罗氏培养基分离培养结核分枝杆菌,绝对浓度法检测分离菌株对4种抗结核药物[链霉素(SM)、异烟肼(INH)、乙氨丁醇(EMB)、利福平(RFP)]的耐药性测定.结果 共检测169株结核分枝杆菌,其中耐药株165株,总耐药率高达97.63%,其中耐多药(所耐药物中含R和H)133例,耐多药率为78.70%.复治失败的耐药率和耐多药率明显高于全国46.50%的水平.对RFP、INH、SM和EMB的耐药率分别为91.12%(154/169)、84.02%(142/169)、75.15%(127/169)和21.30%(36/169).结论 西藏地区属高耐药区,应加强结核分枝杆菌的耐药监测和控制.     

5种结核分枝杆菌检测方法的临床应用价值研究

目的评价5种结核分枝杆菌检测方法对肺结核的辅助诊断价值。方法统计2018年1-10月在广州医科大学附属第一医院住院的患者,分为临床诊断肺结核患者和临床诊断非结核普通住院患者共209例,用结核培养法、PCR-荧光探针法、结核感染T淋巴细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)法、抗酸染色法、利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)法分别进行检测,比较这5种方法在临床诊断中的价值。结果结核培养法、抗酸染色法、PCR-荧光探针法、T-SPOT.TB法、Xpert MTB/RIF法阳性率分别为16.8%、23.4%、39.2%、53.0%、52.2%。结核培养法灵敏度为52.17%,特异度为100.00%;抗酸染色法灵敏度为42.45%,特异度为96.67%;PCR-荧光探针法灵敏度为76.00%,特异度为97.98%;T-SPOT.TB法灵敏度为91.67%,特异度为79.80%;Xpert MTB/RIF法灵敏度为99.09%,特异度为100.00%。结论Xpert MTB/RIF法是最值得推荐的方法,也是唯一可以作为诊断结核感染的分子生物学方法,如果能够联合这几种方法,可以快速、准确地对结核感染进行诊治。     

云浮地区肺结核病患者结核分枝杆菌复合群耐药性分析

目的 分析云浮地区肺结核病患者结核分枝杆菌复合群(MTBC)耐药特点,为制定个体化治疗方案提供指导.方法 收集云浮市区及4个县区结核病门诊初诊结核病患者痰培养阳性菌株1571株,采用对硝基苯甲酸(PNB)鉴定培养管进行MTBC鉴别试验;采用比例法进行菌株对9种抗结核病药物(4种一线,5种二线)的体外药物敏感性试验.结果...     

噬菌体裂解法检测结核杆菌药物敏感性的研究

目的利用结核分支杆菌噬菌体裂解法检测结核杆菌对利福平、异烟肼、链霉素敏感性。方法选用传统方法判定为利福平、异烟肼、链霉素的耐药或敏感菌株,采用噬菌体裂解法检测其对以上三种药物的敏感性,对比其特异性和敏感度。结果运用噬菌体裂解法检测结果显示,异烟肼药物浓度为1μg/ml时,其灵敏度为87.0%,特异度为93.3%,与传统方法的符合率为92.0%;链霉素药物浓度为4μg/ml时,其灵敏度为96.2%,特异度为92.0%,与传统方法的符合率为92.9%;利福平药物浓度为5μg/ml时,其灵敏度为91.4%,特异度为96.2%,与传统方法的符合率为94.7%。结论采用噬菌体裂解法检测结核杆菌药物敏感性简便易行,灵敏度、特异度高,与传统方法比较符合率较高,便于临床推广。     

GeneXpert MTB/RIF、MGIT960液体培养法在胸腔积液结核分枝杆菌检测中的应用

目的探讨GeneXpert MTB/RIF、MGIT960液体培养法在胸腔积液结核分枝杆菌检测中的应用。方法回顾性分析386例疑似和确诊结核病患者胸腔积液标本中腺苷脱氨酶(ADA)、GeneXpert MTB/RIF及MGIT960液体培养法的检测结果。以胸腔积液ADA>40 U/L作为鉴别结核性积液的标准,将标本分为3组:第1组为非结核性积液(ADA≤40 U/L,219例),第2组为结核性积液(ADA>40 U/L,145例),第3组为脓性胸腔积液(不能进行ADA检测,22例)。结果在386例患者中,GeneXpert MTB/RIF检测结核分枝杆菌复合群的阳性率为15.54%(60/386),MGIT960液体培养法检测结核分枝杆菌复合群的阳性率为5.44%(21/386),前者检测阳性率明显高于后者(χ²=14.52,P<0.05)。3组中,GeneXpert MTB/RIF检测阳性率分别为3.20%、24.83%和77.27%;MGIT960液体培养法检测阳性率分别为2.74%、8.28%和13.64%。GeneXpert MTB/RIF在结核性积液、脓性胸腔积液中检测结核分枝杆菌复合群的阳性率明显高于MGIT960液体培养法(χ²=14.38、17.97,P<0.05)。将采用MGIT960液体培养法检测为阳性的标本21例进行GeneXpert MTB/RIF检测发现,两种方法检测阳性结果的符合率为52.38%(11/21)。结论GeneXpert MTB/RIF检出结核分枝杆菌复合群的阳性率明显高于MGIT960液体培养法,特别是在结核性积液和脓性胸腔积液中。两种方法联合检测,有助于临床对结核性胸膜炎的早期诊断和治疗。     

绍兴地区非结核分枝杆菌肺部感染情况分析

目的了解绍兴地区由非结核分枝杆菌(NTM)所引起的肺部感染情况及细菌耐药状况,为临床合理用药提供参考。方法收集2017年7月-2018年7月分离自绍兴文理学院附属医院及各县区医院临床样本的NTM,并分析患者临床资料。采用对硝基苯甲酸培养基和噻吩-2-羧酸肼培养基对菌株进行初步鉴定,并用基因芯片技术进一步进行分型。采用比例法进行药物敏感性试验。结果 2 768例样本中共分离出NTM 243株,检出率为8.77%。NTM感染患者中男性占77.37%,<60岁者占65.43%,约70.00%的患者同时患有其他肺部疾病。243株NTM主要为胞内分枝杆菌(62.14%),其次为鸟分枝杆菌(19.75%)。分离出的NTM对一线抗菌药物的耐药率均较高,对异烟肼和链霉素的耐药率近100.00%;对二线抗菌药物的耐药率低于一线抗菌药物。结论 NTM感染引起的肺部疾病好发于患有其他肺部疾病的患者,胞内分枝杆菌是临床主要的NTM,快速、准确地进行菌种鉴定有助于临床对患者进行早期诊断和治疗。     

海南省肺部感染患者非结核分枝杆菌的菌种鉴定分析

目的 通过对海南省肺部感染患者非结核分枝杆菌（NTM）进行菌种鉴定,探讨海南省NTM肺部感染菌种的类型及人群分布情况。方法 收集2016年7月至2021年6月期间就诊于海南医学院第二附属医院疑似肺结核患者的呼吸道标本进行分枝杆菌培养,对培养阳性标本进行对硝基苯甲酸（PNB）/噻吩-2-羧酸肼（TCH）培养菌型初步鉴定,采用DNA微阵列芯片技术进行分枝杆菌菌种鉴定,无法确定菌种的菌株进一步采用基因测序法鉴定。结果 共收集8 507例疑似肺结核患者的呼吸道标本,剔除重复病例后,有318例经PNB/TCH培养初步鉴定为NTM,315例经DNA微阵列芯片技术和热休克蛋白65(hsp65)基因测序鉴定为NTM。其中308例患者为单一感染模式,6例MTB+NTM和1例2种不同NTM的混合感染模式。快速生长分枝杆菌128株占40.5%,以龟/脓肿分枝杆菌为主（占32.9%）;缓慢生长分枝杆菌188株占59.5%,以胞内分枝杆菌为主（占39.6%）。女性患者多于男性且好发于中老年人,男女性别比为0.79∶1。男女性患者年龄分布差异有统计学意义（Z=2.200,P<0.05）,>40岁的患者...