血浆同型半胱氨酸及胱硫醚β合成酶多态性与脑血栓形成

目的探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)及胱硫醚β合成酶(CBS)基因多态性与脑血栓形成的关系.方法应用高效液相色谱-荧光法及扩增阻滞突变体系法测定87例急性脑血栓形成患者和80例对照者血浆Hcv浓度和CBS基因型.结果病例组平均空腹血浆Hcy浓度15.28 μmol/L(95%CI为14.37～16.19)较对照组11.32μmol/L(95%CI?0.47～12.16)高(P＜0.001).CBS两突变位点对血浆Hcy浓度的影响不一致.病例组和对照组基因型分布、纯合子频率和等位基因频率差异均无统计学意义.结论高Hcy血症与脑血栓形成发病有关.     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与强直性脊柱炎基因组DNA甲基化水平的相关性

目的 探讨我国湖南地区汉族人群亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与强直性脊柱炎(AS)基因组DNA甲基化水平的相关性。 方法 收集来自湖南地区200例人类白细胞抗原-B₂₇(+)AS患者(AS组)以及120名健康人(正常对照组)的外周血,其中200例AS患者的诊断符合美国1984年纽约标准。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术检测MTHFR基因C677T位点多态性,胞嘧啶延伸法检测DNA甲基化水平,ELISA检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度,特异免疫测定法检测红细胞叶酸浓度。 结果 AS组患者MTHFR基因位点C677TT基因型的比例明显高于正常对照组(17.0%比5.0%;χ²=9.874, P=0.002)。AS组的血浆Hcy浓度为(18.71±2.42)μmol/L,明显高于正常对照组的(10.97±2.93)μmol/L(t=24.402, P<0.001);其中,MTHFR基因位点C677CC和C677CT基因型组的血浆Hcy浓度分别为(18.31±1.94)(q=12.088, P=0.01)和(17.80±2.18)μmol/L(q=6.496, P=0.01),均明显低于C677TT基因型组的(21.70±1.80)μmol/L。AS组C677TT基因型基因组DNA甲基化水平明显低于正常对照组(t=5.655, P<0.001)和AS组的C677CC(t=11.514, P<0.001)及C677CT基因型(t=10.287, P<0.001)。结论 在湖南地区汉族人群中,MTHFR基因C677T位点的多态性与AS发病相关。MTHFR基因677位点T/T突变是AS组高Hcy血症的重要影响因素。MTHFR基因677位点T/T突变与AS基因组DNA低甲基化相关,DNA的低甲基化可能是AS发病的机制之一。     

同型半胱氨酸和胱硫醚-β合成酶基因多态性与Alzheimer病的关系

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)和胱硫醚-β合成酶基因CBS844ins68基因多态性与阿尔茨海默病(alzheimerdisease,AD)的关系。方法运用多聚酶链反应技术和荧光偏振法(FPIA)检测66例阿尔茨海默病及143例正常人CBS844ins68基因多态性和血浆总Hcy水平。结果AD组CBS844ins68D/D、D/I、I/I基因型频率(%)分别为78.79、19.69、1.52,对照组分别为78.32、18.88、2.8,CBS844ins68各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无显著性(P>0.05)。AD病例组与对照组血浆Hcy分别为(14.72±6.2)μmol/L和(10.9±2.4)μmol/L,两者差异有显著性(P<0.05)。AD患者血浆总Hcy水平显著高于正常组。结论胱硫醚-β合成酶多态性与AD无明显相关,高同型半胱氨酸血症与Alzheimer病发生有一定关系。     

孕晚期妇女与新生儿血浆维生素A水平的相关性分析

目的 探讨孕晚期妇女静脉血与新生儿脐带血血浆维生素A(vitamin A,VitA)水平的相关性。方法 2009年5月至6月在河北省元氏县和乐亭县募集孕妇688例,采集产前静脉血和新生儿脐带血,采用高效液相色谱法检测血浆视黄醇浓度,用以反映VitA水平。根据产前静脉血血浆视黄醇浓度,孕妇VitA营养状态分为缺乏(<0.70 μmol/L)、边缘性缺乏(0.70~<1.05 μmol/L)、充足(≥1.05 μmol/L)。根据脐带血血浆视黄醇浓度,新生儿VitA营养状态分为缺乏(<0.35 μmol/L)、边缘性缺乏(0.35~<0.70 μmol/L)、充足(≥0.70 μmol/L);将脐带血血浆视黄醇浓度低于第10百分位数定义为新生儿VitA相对缺乏。新生儿与孕妇血浆视黄醇浓度比值定义为VitA胎盘转运系数。采用多元分式多项式(multivariable fractional polynomials,MFP)模型和Pearson相关探讨孕妇与新生儿血浆VitA水平的关系,采用Logistic回归模型探讨孕妇VitA营养状态对新生儿VitA缺乏的影响,采用MFP模型和Spearman相关探讨孕妇VitA水平与胎盘转运系数的关系。结果 孕晚期妇女视黄醇平均浓度为(1.15±0.30)μmol/L,VitA缺乏率和边缘性缺乏率分别为4.5%和37.8%;新生儿视黄醇平均浓度为(0.78±0.13)μmol/L,无VitA缺乏,边缘性缺乏率为28.2%。调整孕妇年龄、体重指数等因素后,孕妇与新生儿VitA水平间呈线性正向剂量-反应关系(幂参数=1,P<0.05), Pearson相关系数为0.13(P<0.01)。与VitA充足组孕妇相比,缺乏组(crude OR=2.20,95%CI:1.04~4.66)和边缘性缺乏组(crude OR=1.43,95%CI:1.01~2.02)分娩VitA边缘性缺乏新生儿的风险显著升高,但多因素调整后,上述效应不再有统计学意义;VitA缺乏组孕妇分娩VitA相对缺乏新生儿的风险在调整多因素前后均显著增加(crude OR=3.02,95%CI:1.21~7.50;adjusted OR=2.76,95%CI:1.05~7.22)。孕妇VitA水平与VitA胎盘转运系数间呈非线性负向剂量-反应关系(幂参数=-0.5,P<0.05),调整后Spearman相关系数为-0.82(P<0.001)。结论 孕晚期妇女与新生儿血浆VitA水平呈正向线性剂量-反应关系,提示孕妇VitA营养状态影响新生儿VitA储存水平。     

孕晚期妇女与新生儿血浆维生素A水平的相关性分析

目的 探讨孕晚期妇女静脉血与新生儿脐带血血浆维生素A(vitamin A,VitA)水平的相关性。方法 2009年5月至6月在河北省元氏县和乐亭县募集孕妇688例,采集产前静脉血和新生儿脐带血,采用高效液相色谱法检测血浆视黄醇浓度,用以反映VitA水平。根据产前静脉血血浆视黄醇浓度,孕妇VitA营养状态分为缺乏(<0.70 μmol/L)、边缘性缺乏(0.70~<1.05 μmol/L)、充足(≥1.05 μmol/L)。根据脐带血血浆视黄醇浓度,新生儿VitA营养状态分为缺乏(<0.35 μmol/L)、边缘性缺乏(0.35~<0.70 μmol/L)、充足(≥0.70 μmol/L);将脐带血血浆视黄醇浓度低于第10百分位数定义为新生儿VitA相对缺乏。新生儿与孕妇血浆视黄醇浓度比值定义为VitA胎盘转运系数。采用多元分式多项式(multivariable fractional polynomials,MFP)模型和Pearson相关探讨孕妇与新生儿血浆VitA水平的关系,采用Logistic回归模型探讨孕妇VitA营养状态对新生儿VitA缺乏的影响,采用MFP模型和Spearman相关探讨孕妇VitA水平与胎盘转运系数的关系。结果 孕晚期妇女视黄醇平均浓度为(1.15±0.30)μmol/L,VitA缺乏率和边缘性缺乏率分别为4.5%和37.8%;新生儿视黄醇平均浓度为(0.78±0.13)μmol/L,无VitA缺乏,边缘性缺乏率为28.2%。调整孕妇年龄、体重指数等因素后,孕妇与新生儿VitA水平间呈线性正向剂量-反应关系(幂参数=1,P<0.05), Pearson相关系数为0.13(P<0.01)。与VitA充足组孕妇相比,缺乏组(crude OR=2.20,95%CI:1.04~4.66)和边缘性缺乏组(crude OR=1.43,95%CI:1.01~2.02)分娩VitA边缘性缺乏新生儿的风险显著升高,但多因素调整后,上述效应不再有统计学意义;VitA缺乏组孕妇分娩VitA相对缺乏新生儿的风险在调整多因素前后均显著增加(crude OR=3.02,95%CI:1.21~7.50;adjusted OR=2.76,95%CI:1.05~7.22)。孕妇VitA水平与VitA胎盘转运系数间呈非线性负向剂量-反应关系(幂参数=-0.5,P<0.05),调整后Spearman相关系数为-0.82(P<0.001)。结论 孕晚期妇女与新生儿血浆VitA水平呈正向线性剂量-反应关系,提示孕妇VitA营养状态影响新生儿VitA储存水平。     

MTHFR C677T和CBS G919A基因突变与青年缺血性脑卒中的相关性研究

目的:探讨同型半胱氨酸血症、同型半胱氨酸(Hcy)代谢关键酶N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)及胱硫醚β合成酶(CBS)基因突变与青年缺血性脑卒中的关系。方法:采用病例对照分析方法,以高效液相色谱法测定受试者空腹及负荷后血浆Hcy水平,采用聚合酶链-限制性内切酶片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和扩增阻滞突变体系法,对100例青年缺血性脑卒中患者和100例对照者的MTHFR基因C677T位点和CBS基因G919A位点进行检测。结果:MTHFR C677T基因检测病例组和对照组基因型分布、纯合子频率和等位基因频率差异均有统计学意义(P<0.05)。CBS G919A基因检测病例组和对照组基因型分布、纯合子频率和等位基因频率差异均无统计学意义(P(0.05)。结论:MTHFR C677T和CBS G919A突变均导致血浆Hcy浓度明显增高。MTHFR C677T多态性位点是青年缺血性脑卒中的独立危险因子。CBS G919A基因突变与青年缺血性脑卒中发病无相关性。     

腔隙性脑梗死患者认知障碍与高同型半胱氨酸血症、梗死灶数目及体积的相关性

目的 探讨腔隙性脑梗死患者血管性认知障碍(VCI)程度与血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平、梗死灶数目及总体积的相关性。 方法 选择2011年10月至2013年10月,在滕州市中医医院神经内科首次住院的腔隙性脑梗死患者196例,采用简易精神状态检查表(MMSE)评分,将患者分为认知功能正常组(155例)、轻度认知障碍组(35例)和痴呆组(6例),以201名健康体检者为对照组。所有入选患者均进行血Hcy检测及头颅MRI检查,计算腔隙梗死灶数目及每个腔隙梗死灶体积(mm³)及总体积;对腔隙性脑梗死患者认知功能与血Hcy水平、腔隙梗死病灶数目及总体积之间的相关性进行多元线性回归分析。 结果 腔隙性脑梗死患者中Hcy≥10 μmol/L者比率高于对照组(91.84% vs 65.67%, P<0.01);痴呆组血Hcy水平［(51.37±8.12)μmol/L］与轻度认知障碍组［(28.06±7.56)μmol/L］、认知正常组［(21.70±6.92)μmol/L］、对照组［(11.58±3.73)μmol/L ］比较,差异均有统计学意义(P<0.01);痴呆组、轻度认知障碍组和认知功能正常组梗死灶数目 ［(8.00±1.67)、(4.77±0.77)、(3.52±0.81)个］ 及总体积［(27.42±9.34)、(14.96±6.89)、(8.81±3.71)mm³］分别进行组间比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。 结论 腔隙性脑梗死患者认知功能MMSE评分与血Hcy水平呈负相关,与梗死灶数目及梗死灶总体积亦呈负相关。     

血清Lp-PLA2、Hcy及hs-CRP联合检测对急性冠状动脉综合征辅助诊断的临床价值

目的 探讨血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、同型半胱氨酸(Hcy)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)联合检测对急性冠状动脉综合征(ACS)的诊断价值。方法 收集2019年1月至12月延安大学附属医院心血管内科就诊的ACS患者140例, 其中不稳定心绞痛(UA)患者60例(UA组), 急性心肌梗死(AMI)80例(AMI组), 选取同期本院体检中心的健康人群100例为对照组(HC组), 测定各组Lp-PLA2、Hcy、hs-CRP水平。评价3项指标单独及联合检测对AMI的诊断性能。采用单因素方差比较各组间检测指标的差异, 采用受试者工作曲线评价各检测指标的诊断性能。结果 受试者Lp-PLA2、Hcy、hs-CRP水平(中位数), HC组分别为:194.5 μg/L、7.65 μmol/L、2.96 mg/L;UA组的分别为:301 μg/L、9.15 μmol/L、6.25 mg/L;AMI组的分别为:376 μg/L、14.5 μmol/L、5.95 mg/L。AMI组Lp-PLA2、Hcy水平高于UA组(t₂=23.317、1.799, 均P＜0.05), AMI组Lp-PLA2、Hcy、hs-CRP水平高于HC组(t₁=20.811、1.600、2.695, P＜0.05)。单独检测时, Lp-PLA2对AMI的诊断性能最大(AUC=0.781);两两联合检测时, Lp-PLA2+Hcy联合检测对AMI的诊断性能较好(AUC=0.838, Se=77.5%, Sp=81.7%, YI=0.592);Lp-PLA2+Hcy+hs-CRP(AUC=0.838, Se=78.8%, Sp=81.7%, YI=0.605)联合检测的灵敏度高于Lp-PLA2+Hcy联合检测, 但未能显著提高对AMI的诊断性能。结论 单独检测时, Lp-PLA2对AMI的诊断性能较好, 而Lp-PLA2+Hcy联合检测时对AMI有较高的诊断性能。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性及高同型半胱氨酸血症与中国汉族人群肺血栓栓塞症的关联

为探讨亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)C677T基因多态性与中国汉族人群肺血栓栓塞症 (PTE)的关联 ,观察高同型半胱氨酸血症 (HHc)是否为中国汉族人群肺血栓栓塞症的一个独立危险因素。采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性法检测 92例PTE患者 ,以及年龄、性别与PEG患者匹配的、来自同一区域的 92名对照者的MTH FRC677T基因多态性 ;采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定上述 92对入选对象的空腹血清同型半胱氨酸 (Hcy)浓度。结果 :①PTE组与对照组MTHFR基因C677T突变TT基因型的频率分别为 3 0 .4%和 2 9.4% ,2组T等位基因频率分别为 5 0 %和 47% ,差异均无显著意义 (P >0 .0 5 ) ;TT型与CC型比较发生PTE的相对危险度OR =1 .2 2 ,95 %CI为 0 .5 9～ 2 .5 1 ,表明TT基因型不增加PTE患病的危险性。②PTE组血清Hcy浓度为 ( 1 7.1± 9.3 9) μmol/L ,明显高于对照组 [( 1 3 .8± 7.4) μmol/L],P =0 .0 3 4;高同型半胱氨酸血症 (HHc)增加了PTE患病的危险性 (OR =3 .67,95 %CI为 1 .84～ 7.3 1 )③PTE组CC、CT、TT 3种基因型的Hcy浓度分别为 ( 1 4.8± 6.5 ) μmol/L、( 1 5 .8± 7.3 ) μmol/L、( 2 1 .5± 1 1 ) μmol/L ,对照组对应基因型的血清Hcy浓度分别为 ( 1 2 .1± 5 .2 ) μmol/L、( 1 1 .9± 7.0 ) μmol     

脑血栓患者胱硫醚-β合成酶的基因多态性研究

目的 :探讨同型半胱氨酸 (Hcy)代谢过程的关键酶之一胱硫醚 -β合成酶 (CBS)基因多态性与脑血栓的关系及其家族遗传性。方法 :采用限制性内切酶片段长度多态性方法检测患者 CBS基因T2 7796 C位碱基突变。结果 :病例组与对照组 CBS基因分布频率和等位基因频数分布差异无显著性(P>0 .0 5 ) ;一级亲属和对照组 CBS基因分布频率差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,C纯合型与对照组差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,杂合型差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,杂合型比纯合型患脑血管病的危险度高 3.2倍。结论 :不能排除 CBS基因 T2 7796 C点突变是脑血管疾病发病的遗传因素     

动脉粥样硬化性脑梗死患者血同型半胱氨酸的变化

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)与动脉粥样硬化性脑梗死的关系. 方法:采用高效液相色谱法检测98例动脉粥样硬化性脑梗死患者血浆Hcy水平,并与50例对照组进行比较分析. 结果:病例组空腹血浆Hcy含量(21.4±2.3) μmol/L显著高于对照组(10.2±1.5) μmol/L(P﹤0.01). 血浆Hcy升高率,病例组(48.0%)高于对照组(6.0%),两者存在极显著差异. 结论:高Hcy血症作为一种新的独立危险因素参与了动脉粥样硬化性脑梗死的发生、发展过程.     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性同型半胱氨酸浓度和脑梗死的相关性研究

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性、血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度和脑梗死的相关性,为脑梗死的防治提供依据。方法应用聚合酶链反应(PCR)-RFLP方法检测215例脑梗死患者和200名健康对照者的MTHFR基因C677T多态性,并用循环酶法测定2组的血浆Hcy浓度,比较2组间MTHFR基因型和Hcy浓度的差异,以及基因型与Hcy浓度的相关性。结果 215例脑梗死患者中MTHFR基因TT型、CT型和T等位基因频率(7.4%,30.7%,22.8%)高于对照组(1.5%,15.5%,9.2%)(χ~2=8.374,P=0.004,OR=5.28,χ~2=13.362,P=0.000,OR=2.41;χ~2=27.898,P<0.01,OR=2.90)。脑梗死组和对照组平均Hcy浓度分别为(13.18±6.24)μmol/L和(10.26±3.42)μmol/L,脑梗死组的Hcy浓度显著高于对照组(P=0.000),TT基因的血浆Hcy浓度均显著高于CT型(P=0.019)和CC型(P=0.004),而CT型与CC型的Hcy浓度之间差异均无统计学意义(P=0.107)。结论 MTHFR基因C677T突变可影响Hcy水平,可能与脑梗死的发生密切相关。     

同型半胱氨酸血症与2型糖尿病慢性并发症的关系

目的 探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)与2型糖尿病慢性并发症的关系。方法 将60例2型糖尿病患者分为糖尿病组(30例)和糖尿病合并并发症组(30例),以健康者作为对照组,测定各组的空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、同型半胱氨酸,并对各组间Hcy进行统计学比较。结果 糖尿病合并慢性并发症组Hcy较对照组显著升高(P<0.01)。而并发症组与糖尿病组相比亦显著升高(P<0.01)。结论 高Hcy与糖尿病慢性并发症明显相关,其机制可能与血管内皮损伤有关。     

皮质下缺血性血管病患者认知功能与血浆同型半胱氨酸水平的相关性

目的 探讨皮质下缺血性血管病(SIVD)患者认知功能与患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平关系。方法 收集130例SIVD患者(SIVD组),依据认知损害程度分为皮质下血管性轻度认知损害组(SVMCI组)及皮质下血管性痴呆组(SVaD组),另选取60例认知功能正常老年人作为对照组(正常对照组)。采用MMSE、蒙特利尔认知测评量表(MoCA)及临床痴呆量表(CDR)评价分别对两组患者进行痴呆程度测定。分别测定两组患者的Hcy浓度。然后,对指标进行比较和相关分析。结果 SIVD组受检者血Hcy水平显著高于对照组(P<0.05),其血清叶酸及维生素B12水平均显著低于对照组(P<0.05),SIVD组受检者血Hcy水平随着痴呆程度增加而显著升高(P<0.05)。SIVD组患者的血浆Hcy水平与自身痴呆程度呈正相关(P<0.05),与MMSE及MoCA评分呈正相关(P<0.05)。结论 高水平Hcy与SIVD的发生、发展相关,高Hcy血症是SIVD发病的一个重要因素。     

同型半胱氨酸、叶酸及亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变在急性肠系膜静脉血栓形成发病中的作用

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)、叶酸(FA)及5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T突变在急性肠系膜静脉血栓形成(AMVT)发病中的作用。方法采用高效液相色谱法测定63例AMVT患者和75例健康对照者血浆Hcy水平,放射免疫法测定血浆FA浓度,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法进行MTHFR C677T基因多态性的分析。结果AMVT组与对照组血浆Hcy水平分别为(23.5±8.8)μmol/L和(12.2±6.6)μmol/L,差异有非常显著意义(P<0.01)。Hcy水平与FA呈负相关(AMVT组:r=-0.42,P<0.01;对照组:r=-0.39,P<0.01)。MTHFR C677TTT基因型在AMVT组的分布频率(33.3%)高于对照组(17.3%),经χ2检验差异有统计学意义(χ2=6.31,P<0.05)。结论血浆高Hcy水平和低FA是AMVT形成的危险因素。MTHFR C677T多态性中TT基因型可能是AMVT形成的一个重要遗传风险因子。     

2型糖尿病的同型半胱氨酸及胱硫醚β合成酶CBS844ins68基因多态性特点

目的探讨2型糖尿病患者的同型半胱氨酸水平(homocysteine,Hcy)及Hcy代谢相关酶胱硫醚β-合成酶(cysta-thionineβ-synthase,CBS)基因的844 ins68的多态性的特点。方法选择72例新发2型糖尿病患者(DM)及83例健康对照者,检测了所有研究对象的Hcy、叶酸、维生素B12浓度。应用PCR分析CBS 844ins68基因多态性。结果 DM组Hcy水平明显低于对照组,差异具有统计学意义(10.9μmol/L vs 12.7μmol/L,P<0.05)。DM组叶酸水平明显高于对照组(8.3ng/ml vs 5.5ng/ml,P<0.05)。DM组维生素B12水平与对照组差异无统计学意义(396pg/ml vs 431pg/ml,P>0.05)。糖尿病组与对照组CBS844ins68的基因型及等位基因频率的差异均无统计学意义,P>0.05。结论初发2型糖尿病Hcy水平可能减低,CBS844ins68基因多态性可能与糖尿病无关。     

同型半胱氨酸代谢酶基因多态性与脑血栓形成的关系

目的　探讨同型半胱氨酸 (Hcy)代谢酶、N5,1 0 -亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)及胱硫醚 β合成酶 (CBS)基因多态性与脑血栓形成的关系。方法　应用聚合酶链 -限制性内切酶片段长度多态性分析 (PCR -RFLP)和扩增阻滞突变体系法检测 87例脑血栓形成患者和 80例对照者MTHFR和CBS基因型。结果　两组基因型分布、纯合子突变率及等位基因频率差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　单纯的MTHFR和CBS突变并非脑血栓形成的独立危险因素     

非甾体类抗炎药对人牙髓细胞的抗炎修复作用

目的:研究不同非甾体类抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)的抗炎和修复作用,探索可适宜于牙髓炎活髓保存治疗的药物。方法:取新鲜拔除的人类第三磨牙的牙髓进行hDPCs原代培养,消化传代至4~6代,向培养基中加入1 mg/L脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)培养24 h,获得LPS刺激后的hDPCs(LPS-hDPCs),实验组使用含有不同浓度(1、10、100 μmol/L)NSAIDs(阿司匹林或美洛昔康)的培养基培养LPS-hDPCs,普通培养基作为阴性对照组。采用MTT法在第1、3、5、7天对细胞增殖活力进行检测,采用real-time PCR法于6 h检测炎症基因白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达;培养7 d后检测成牙分化基因牙本质基质蛋白(dentin matrix protein-1,DMP-1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)基因表达;采用茜素红染色法于第14天检测矿化结节形成,氯化十六烷基吡啶进行矿化结节钙半定量检测。结果:MTT结果显示,1~100 μmol/L阿司匹林或美洛昔康对hDPCs增殖具有显著促进作用(P<0.05),该促进作用呈浓度依赖性。1~100 μmol/L美洛昔康或100 μmol/L阿司匹林均可显著下调LPS-hDPCs炎症基因TNF-α和 IL-6表达(P<0.05),且100 μmol/L美洛昔康的该作用效果显著强于100 μmol/L阿司匹林(P<0.05)。100 μmol/L美洛昔康可以显著促进LPS-hDPCs成牙向分化基因DSPP、DMP-1的表达和矿化(P均<0.05)。结论:美洛昔康可促进hDPCs增殖,在有效抑制炎症因子升高的同时,可促进炎症状态下hDPCs的成牙本质向分化和矿化,美洛昔康可能在牙髓炎症中发挥抗炎和促进修复的作用。     

白头翁皂苷D联合索拉非尼对人肝癌细胞侵袭与转移的影响

目的 探讨白头翁皂苷D联合索拉非尼对人肝癌细胞株侵袭和转移的影响。 方法 以人肝癌细胞株SMMC-7721细胞为研究对象,分为白头翁皂苷D组(浓度为11.9 μg /L)、索拉非尼组(浓度为2.15 μmol/L)、联合组(白头翁皂苷D 11.9 μg/L+索拉非尼2.15 μmol/L)以及对照组(普通培养液)。通过MTT法、Transwell小室实验观察白头翁皂苷D、索拉非尼单药和联合对SMMC-7721细胞的侵袭和转移的抑制作用,并用免疫组织化学方法检测CD_44V6、血管内皮生长因子C(VEGF-C)、基质金属蛋白酶MMP-9基因蛋白表达的影响。 结果 MTT结果显示,白头翁皂苷D、索拉非尼单药和联合对SMMC-7721细胞的增殖均有抑制作用,且24 h的抑制率都<15%;Transwell小室实验结果显示,联合组的黏附抑制率与单药组相比,具有协同抑制作用,但未呈现时间依赖关系;联合组的侵袭抑制率和迁移抑制率均显著高于单药组(P<0.01);免疫组织化学结果表明,联合组在下调CD_44V6、VEGF-C、MMP-9方面均高于单药组(P<0.05)。 结论 白头翁皂苷D和索拉非尼联合可协同抑制SMMC-7721细胞侵袭和转移,联合效果整体优于单药。     

血浆Hcy水平及MTHFR基因C667T 突变与肝硬化的相关性研究

目的探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平与肝硬化的关系及血浆Hcy水平升高的遗传因素。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定64例肝硬化患者、42例非肝硬化肝病患者和60名健康对照者血浆Hcy水平,聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术(PCR RFLP)分析N5,N10亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C667T突变。结果肝硬化组血浆Hcy水平[(14.6±6.9)μmol/L]显著高于非肝硬化肝病组[(9.3±5.2)μmol/L]和正常对照组[(7.1±3.9)μmol/L](均P<0.01);MTHFR基因677位点碱基变异致3种基因型C/C、C/T和T/T,肝硬化组3种基因型分布频率(18.8%,50.0%,31.2%)明显高于非肝硬化肝病组(45.2%,40.5%,14.3%)和正常对照组(53.3%,33.4%,13.3%)(均P<0.01),非肝硬化肝病组3种基因型分布频率与正常对照组比较,差异无显著性意义(均P>0.05);血浆Hcy水平增高与T/T基因型别相关。结论血浆Hcy水平升高是肝硬化的一个危险因素,可能与MTHFR基因677位点碱基C→T突变有关。