基质金属蛋白酶在慢性心衰时的变化及其意义

目的 探讨慢性心力衰竭(CCF)患者血清基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2、MMP-9)的变化及其临床意义.方法 测定58例CCF患者及45名正常对照者MMP-2、MM-9水平,用超声心动仪测定两组患者心脏结构和功能指标.结果 CCF患者血清MMP-2、MM-9水平明显高于对照者(P＜0.05);左室收缩末内径、左室舒张末内径、左室收缩末期容积和舒张末期容积随着CCF病情加重而增大(P＜0.05),左心室射血分数随着CCF病情加重而降低(P＜0.05).结论 MMP-2、MMP-9共同参与了CCF的发生、发展,可作为反映心室重塑和心功能恶化的有效指标.     

前列地尔对急性冠状动脉综合征患者肿瘤坏死因子-α和基质金属蛋白酶-9的影响

目的:探讨前列地尔对急性冠状动脉综合征(ACS)患者肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法:选取2014年6月至2015年12月,我院诊断为ACS患者,共278例,其中不稳定型心绞痛(UAP)128例,ST段抬高型心肌梗死(STEMI)54例,非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)96例,随机分为常规治疗组(A组)和前列地尔+常规治疗组(B组),分别检测TNF-α、MMP-9,比较治疗1周后,两组炎症因子TNF-α、MMP-9的变化。结果:(1)治疗1周,两组TNF-α、MMP-9水平较治疗前均有所下降,其中,A组MMP-9下降水平差异有统计学意义(P0.05),B组两者平均下降水差异有统计学意义(P0.05);(2)与常规治疗组比较,前列地尔+常规治疗组TNF-α、MMP-9下降幅度更大,两组差异均有统计学意义(P0.05)。结论:前列地尔可以有效降低ACS患者体内炎症因子TNF-α、MMP-9的水平。     

氟伐他汀对心衰患者基质金属蛋白酶的影响

在充血性心力衰竭(CHF)的进展过程中,左心室重塑、扩张,泵功能失调是影响患者病情及预后的主要因素.研究表明,心肌中的基质金属蛋白酶(MMPs)可特异地降解细胞外基质,影响心室重塑[1].MMP-1、MMP-9是MMPs家族的重要成员,在心室重构中起着重要的作用.近年来基础及动物实验证实,他汀类药物可抑制动脉粥样硬化斑块MMPs表达,起到稳定斑块的作用[2],然而尚无将他汀类药物特定用于CHF患者的前瞻性研究[3].本研究观察氟伐他汀对CHF患者血清MMP-1、MMP-9的影响,探讨他汀类调脂药物对左室重构及心功能的影响及其可能机制.     

白藜芦醇对动脉粥样硬化兔心肌纤维化和基质金属蛋白酶2、组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达的影响

目的 观察白藜芦醇对动脉粥样硬化兔心肌间质胶原纤维变化和基质金属蛋白酶2及组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达水平的影响.方法 33只新西兰白兔随机分为对照组、模型组和白藜芦醇干预组.观察心肌间质胶原纤维的变化,测量心肌间质胶原容积分数.逆转录聚合酶链反应检测心肌组织基质金属蛋白酶2及组织型基质金属蛋白酶抑制剂2 mRNA水平.结果 与对照组相比,模型组胶原纤维明显增多、增粗、排列紊乱,呈不规则网状或粗块状沉积于心肌间质,胶原容积分数和基质金属蛋白酶2表达增多,组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达减少(P<0.01).白藜芦醇干预能显著减少上述指标的改变.结论 动脉粥样硬化进程中,存在着心肌纤维化、基质金属蛋白酶2表达增多和组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达减少等现象,白藜芦醇能减轻基质金属蛋白酶2/组织型基质金属蛋白酶抑制剂2表达的失衡,改善心肌纤维化.     

丁苯酞对大鼠基质金属蛋白酶及淀粉样前体蛋白表达的影响

目的探讨分子水平丁苯酞对慢性低灌注大鼠基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP-9及淀粉样前体蛋白(β-APP)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠72只随机分为假手术组、缺血组、丁苯酞组,每组24只。缺血组和丁苯酞组按不同时间分为7、14、30和60d时间点,每时间点6只。用Western blot法分析各组β-APP、MMP-2和MMP-9表达的变化。结果与7d组比较,14、30、60dβ-APP表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与14d比较,30、60dβ-APP表达明显升高(P<0.01);与30d比较,60dMMP-2表达明显升高(P<0.01),丁苯酞组仅30d与60d比较,差异有统计学意义(P<0.01)。与假手术组比较,缺血组和丁苯酞组β-APP和MMP-2表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与缺血组比较,丁苯酞组β-APP和MMP-2表达明显降低(P<0.01)。结论 MMP-2与β-APP变化趋势一致,可能参与了血脑屏障的破坏以及淀粉样物质的沉积。丁苯酞可能通过减少MMP-2及β-APP表达干预淀粉样物质的沉积。     

基质金属蛋白酶-2、9在舒张性心力衰竭大鼠中的表达

目的研究舒张性心力衰竭大鼠左心室基质金属蛋白酶-2、9的变化。方法34只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组（-17）,实验组建立两肾一夹模型,对照组行假手术。术后12周时左心导管插管法测定血流动力学指标、左心室质量指数;采用ELISA及免疫组化法测定左心室组织MMP-2、9的蛋白表达。结果与对照组比较,实验组收缩压,平均颈动脉压分别升高24．69％、3268％（均P〈0．01）,而左心室质量指数和LVEDP升高3838％和418．56％（P〈0．05或001）：＋dp／dtmax及-dp／dtmax升高8．56％（P〈0．05）和11．34％（P〈0．01）。ELISA法测定左心室组织MMP-2、9分别较对照组增高298％、795％（均P〈0．01）;免疫组化累积光密度显示实验组左心室组织MMP-2、9分别较对照组增高132．61％、2971％（均P〈0．01）。结论舒张性心力衰竭大鼠左心室MMP-2、9合成增加。     

大鼠实验性脑出血后基质金属蛋白酶2和9的表达

目的探讨大鼠脑出血后基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9的表达及其意义。方法采用未抗凝新鲜自体股动脉血注入大鼠尾状核建立脑出血动物模型。用酶谱分析法测定脑出血后6h、12h、24h、3天、6天、10天和15天时基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9的表达。结果基质金属蛋白酶2在脑出血后24h开始表达(P<0.05),第6天时达高峰(P<0.01),到第10天仍维持高水平表达(P<0.05);而基质金属蛋白酶9在脑出血后6h开始表达(P<0.05),24h~3天最明显(P<0.01),此后活性逐渐降低,第10天时的活性仍高于对照组(P>0.05),15天时不再表达。结论脑出血后6h~3天出血灶周围脑组织中基质金属蛋白酶9的活性增高,可能与急性期脑水肿的形成有关,而基质金属蛋白酶2的迟发表达可能参与了脑组织的修复过程。     

基质金属蛋白酶与心肌间质重构

在心力衰竭的进展过程中，心室重构起主要作用。心室重构包括心肌实质重构和心肌间质重构，心肌间质重构是指成纤维细胞增生、纤维化以及细胞外基质胶原网的量和组成的变化。基质金属蛋白酶（MMPs）是一种能特异地降解细胞外基质成分的Zn^2 依赖的酶家族，心肌中的MMPs能够降解心脏中所有的基质成分，是心肌间质重构中基质降解的推动力量。MMPs的表达与活性受到肿瘤坏死因子-α、白介素－1β、血管紧张素Ⅱ、内皮素以及金属蛋白酶组织型抑制物等因子的调控。通过直接或间接的方法调节MMPs的活性，可以改变心肌间质重构过程，从而最终改变心力衰竭的进程。     

胃肠安方对胃癌基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶抑制因子1/2蛋白表达的影响

[目的]观察胃肠安方对人胃癌裸鼠原位移植瘤转移的抑制作用及其对基质金属蛋白酶9 (matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子(matrix metalloproteinases tissue inhibitor,TIMP)-1、TIMP-2蛋白表达的影响.[方法]建立裸小鼠胃原位癌模型,分为胃肠安方组及模型组,观察裸小鼠胃癌种植后肿瘤转移灶情况以及与肿瘤生长与转移密切相关的MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的影响.[结果]胃肠安方能够抑制胃癌生长与转移,与模型组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).胃肠安方组MMP-9蛋白阳性表达明显弱于模型组,TIMP-1及TIMP-2蛋白阳性表达明显强于模型组.[结论]胃肠安方具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤转移作用,其抑制胃癌转移的部分作用机制与抑制MMP-9蛋白表达及上调TIMP-1、TIMP-2蛋白表达有关.     

基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9与急性肺损伤关系的研究进展

急性肺损伤是由多种肺内外因素如严重创伤、感染、休克、脓毒症和大量输血等原因引起的弥漫性肺实质损伤.各种原因引起一系列炎症细胞在肺内聚集和活化,释放细胞因子、生长因子及其他炎症介质,引起基质金属蛋白酶(MMP)的合成和活化.MMP-2、MMP-9通过破坏基底膜、促进炎症过程中有关细胞的迁移以及细胞外基质重建,在急性肺损伤...     

辛伐他汀减轻舒张功能不全心力衰竭大鼠心肌纤维化

目的 探讨辛伐他汀对舒张功能不全心力衰竭(diastolic heart failure,DHF)大鼠心脏功能保护和心肌纤维化的影响.方法 雄性SD大鼠30只,随机分为阴性对照组、DHF组、辛伐他汀组.采用腹主动脉缩窄建立DHF模型,阴性对照组只开腹和分离腹主动脉.辛伐他汀组大鼠术后经灌胃给予辛伐他汀2 mg/(kg·d),阴性对照组和DHF组大鼠给予同等量的生理盐水.4周末心脏超声检测心功能,颈动脉插管记录血流动力学,HE染色和Masson染色观察心肌组织病理结构的变化.结果 心脏超声显示DHF组大鼠室间隔和左心室后壁厚度、E/A比值明显增高,血流动力学检测显示收缩压、舒张压、左心室收缩压、左心室舒张末压升高,左心室松弛时间常数延长,左心室内压最大下降速率下降,心脏指数和左心室质量指数增加.辛伐他汀使增加的室间隔和左心室后壁厚度、E/A、收缩压、舒张压、左心室收缩压、左心室舒张末压、心脏指数和左心室质量指数降低,左心室松弛时间常数缩短,左心室内压最大下降速率升高.HE染色和Masson染色显示,DHF组大鼠心肌组织间纤维组织和炎性细胞增多,心肌胶原面积与总面积的比值和壁内小动脉管腔周围胶原面积与管腔面积的比值在心肌组织中显著增加;辛伐他汀减轻DHF大鼠心肌组织间纤维化和炎性细胞浸润,降低心肌胶原面积与总面积的比值以及壁内小动脉管腔周围胶原面积与管腔面积的比值.结论 辛伐他汀改善DHF大鼠心脏功能,此作用可能与减轻心室纤维化有关.     

慢性心力衰竭患者心肌热休克蛋白47的表达及其与纤维化的相关性研究

目的热休克蛋白47(HSP47)是一种高度保守的分子蛋白,被认为是胶原的特异性分子伴侣,在胶原合成及纤维化中发挥着重要的作用。本文探讨心室重构在慢性心力衰竭患者中的分子机制。方法手术病人取血清及组织标本各60例,分为3组:心功能1级组、心功能2级组、心功能3级组,每组20例。采用实时荧光定量(RT-PCR)方法检测HSP47的m RNA表达量,并且运用酶联免疫吸附法测定上述60例患者血清HSP47、Ⅰ型前胶原羧基末端前肽(PⅠCP)浓度。结果 (1)与心功能1级组比较,HSP47 m RNA水平在心功能2级组、心功能3级组的心肌组织中表达明显增加(P0.05),且在心功能3级组较心功能2级组明显增加(P0.05)。(2)心肌组织中HSP47表达量与血清中HSP47、PⅠCP水平呈显著独立正相关(r=0.704,P0.05;r=0.811,P0.05)。结论HSP47 m RNA在慢性心力衰竭患者中表达增加,提示HSP47可能参与了心室重构。     

芪苈强心胶囊对心力衰竭大鼠心肌线粒体蛋白质组影响的研究

目的采用蛋白质学方法研究芪苈强心（QLQX）胶囊对心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体蛋白表达情况的影响,并探讨其治疗心力衰竭的机制。方法将心肌梗死心力衰竭大鼠模型分为心衰模型组、QLQX（1.0g/kg.d-1）胶囊组、假手术组。灌胃给药,每天一次,连续4周后,差速离心法提取心肌线粒体,双向电泳法分离差异表达的蛋白,凝胶银染后酶切差异蛋白点进行激光解析电离飞行时间（MALDI-TOF）质谱分析,通过Mascot软件在数据库检索。结果共鉴定出11种差异表达的蛋白质,表达上调的有NADH氧化还原酶、ATP合成酶、苹果酸脱氢酶、长链乙酰辅酶A脱氢酶、缩醛酶、肌酸激酶、58 kDa钙调蛋白;表达下调的蛋白有乳酸脱氢酶B、烯醇酶、αB2Crystallin和热休克蛋白27。结论 QLQX胶囊能够部分纠正衰竭心肌线粒体有关能量代谢、氧化应激相关酶的异常表达,可能是其治疗心力衰竭的机制之一。     

Short Term Effects of Doxycycline on Matrix Metalloproteinases 2 and 9

Purpose  To investigate the short term effects of Doxycycline on MMP-2 and MMP-9. Methods  Short term effects of Doxycycline (100 mg B.I.D.) on plasma levels of MMP-2 and MMP-9 were investigated in 20 healthy subjects; the effects of Doxy, Acetylsalicylic acid, Nitrates, and Enalapril on MMP-9 release from were assessed in isolated polymorphonuclear cells. Results  In plasma, MMP-9 activity was reduced (−22%, 95% CI −32/−11; P = 0.002) starting at 12 h after doxy; in vitro, MMP-9 released from stimulated neutrophils was reduced by Doxy (−28%, 95% CI −43/−14; P = 0.001), inhibiting degranulation, and by nitrates (−52%, 95% CI −76/−28 P = 0.005), increasing three times both pro- and active-MMP-9 bound to neutrophils (P = 0.007 and 0.040, respectively). Conclusions  Doxy decreases MMP-9 plasma levels by around 20%, within the first 12 h. The mechanism leading to such reduction seems due to the inhibition of PMN degranulation.     

Cardiac Cell Therapy Trials: Chronic Myocardial Infarction and Congestive Heart Failure

Although most cardiac cell therapy trials have focused on patients with acute myocardial infarction, attempts at “regenerating” chronically failing hearts have also been performed. These studies have entailed use of skeletal myoblasts and bone marrow-derived cells. In the case of skeletal myoblasts, the randomized placebo-controlled MAGIC trial has not achieved its primary end point as 6-month ejection fractions did not significantly differ between patients receiving cells or placebo, but the finding that the highest dose of myoblasts resulted in a significant anti-remodeling effect (a prespecified secondary end point) compared with the placebo group provides an encouraging signal. In the case of bone marrow cells, surgical injections of the mononuclear fraction combined with coronary artery bypass surgery have failed to show any substantial benefit. A catheter-based trial using a cross-over type of design has reported more successful outcomes, but its results will then have to be confirmed. Indeed, the most positive results have been reported with intraoperative epicardial injections of CD133 progenitors, which is probably explained by the angiogenic potential of these cells. There are three possible reasons for these mixed results. The first is the marked heterogeneity of cell functionality (particularly in the case of bone marrow), which would expectedly translate into variable clinical outcomes. The second reason is the low rate of sustained engraftment caused by early mechanical leakage followed by biologically induced cell death. The third possible explanation is a mismatch between the choice of end points and the presumed mechanism of action of the cells. The initial assumption that adult stem cells could affect myocardial tissue regeneration has led to the usual focus on ejection fraction as the major surrogate end point for treatment efficacy. It is now increasingly recognized that adult stem cells, in contrast to their embryonic counterparts, have little if any regenerative capacity and that their presumed beneficial effects more likely involve paracrine signaling and/or limitation of remodeling, in which case infarct size, perfusion, or left ventricular volumes might be more appropriate markers. Altogether, these observations provide a framework for future research the results of which will then have to be integrated into the protocol design of second-generation clinical trials so as to maximize their likelihood of yielding more successful results.     

心功能衰竭大鼠模型心肌线粒体蛋白的差异表达分析

利用差异蛋白质组的方法识别心功能衰竭大鼠心肌代谢的异常 ,以期发现新的治疗靶点。对大鼠行冠状动脉左前降支结扎 ,术后 4周 ,左心室射血分数达 4 6 .4 %± 10 .9% ,成功建立心功能衰竭大鼠模型。实验动物分心功能衰竭组 (n =8)和对照组 (n =8) ,分别取左心室进行线粒体抽提。利用双向凝胶电泳技术显示差异蛋白的表达谱。再经胶内酶解 ,行质谱鉴定和蛋白数据库分析。结果发现 ,双向电泳显示 3个蛋白位点表达有显著差异 ,其中一条蛋白被证实为乙醛脱氢酶 2 ,它在心功能衰竭心肌中的表达显著下降。在心肌梗死后 3、7、14及 2 8天心肌乙醛脱氢酶 2mRNA的表达呈逐渐下降趋势。结果提示 ,在心功能衰竭大鼠的心肌线粒体中乙醛脱氢酶 2表达显著下调 ,而乙醛脱氢酶与硝酸甘油的转化有关。这为临床心功能衰竭患者使用硝酸甘油提供了很有价值的依据。     

高尿酸血症与慢性心力衰竭的相关性分析

目的分析高尿酸血症(HUA)与慢性心力衰竭的相关性及预后的关系。方法连续收集中国医科大学附属盛京医院心内科2009年2月~2012年1月因慢性心力衰竭住院的患者422例[其中射血分数保留心衰(HFp EF)患者260例],同期收集非心衰入院患者134例,分析高尿酸血症与心衰的相关性,并通过随访研究进一步分析高尿酸血症与心衰患者HFp EF的关系。结果 HFp EF组和射血分数减低心衰(HFr EF)组尿酸浓度(374.54±144.30μmol/L、416.45±168.93μmol/L)均高于非心衰组(299.71±114.36μmol/L),各组间差异均具有统计学意义(P0.05)。在多因素Logistic回归分析中,高尿酸血症对HFp EF的OR值为2.620(P0.05),对HFr EF的OR值为4.311(P0.05)。在HFp EF患者中,高尿酸血症组心衰严重程度及脑钠肽水平均明显高于正常尿酸组(P0.05)。高尿酸血症在非心衰、HFp EF、HFr EF三组间患病率分别是9%、23.5%及34%。在HFp EF患者中,高尿酸血症组和正常尿酸组死亡率分别为27.6%、50.8%,差异具有统计学意义(P0.05)。结论心衰患者高尿酸血症的患病率明显增高,高尿酸血症可能是HFp EF及HFr EF发生的危险因素,HFp EF合并高尿酸血症者远期死亡率更高。     

Association between Functional Variables and Heart Failure after Myocardial Infarction in Rats

Background

Heart failure prediction after acute myocardial infarction may have important clinical implications.

Objective

To analyze the functional echocardiographic variables associated with heart failure in an infarction model in rats.

Methods

The animals were divided into two groups: control and infarction. Subsequently, the infarcted animals were divided into groups: with and without heart failure. The predictive values were assessed by logistic regression. The cutoff values predictive of heart failure were determined using ROC curves.

Results

Six months after surgery, 88 infarcted animals and 43 control animals were included in the study. Myocardial infarction increased left cavity diameters and the mass and wall thickness of the left ventricle. Additionally, myocardial infarction resulted in systolic and diastolic dysfunction, characterized by lower area variation fraction values, posterior wall shortening velocity, E-wave deceleration time, associated with higher values of E / A ratio and isovolumic relaxation time adjusted by heart rate. Among the infarcted animals, 54 (61%) developed heart failure. Rats with heart failure have higher left cavity mass index and diameter, associated with worsening of functional variables. The area variation fraction, the E/A ratio, E-wave deceleration time and isovolumic relaxation time adjusted by heart rate were functional variables predictors of heart failure. The cutoff values of functional variables associated with heart failure were: area variation fraction < 31.18%; E / A > 3.077; E-wave deceleration time < 42.11 and isovolumic relaxation time adjusted by heart rate < 69.08.

Conclusion

In rats followed for 6 months after myocardial infarction, the area variation fraction, E/A ratio, E-wave deceleration time and isovolumic relaxation time adjusted by heart rate are predictors of heart failure onset.     

氟伐他汀对急性心肌梗死大鼠基质金属蛋白酶9表达的影响

目的 观察氟伐他汀对急性心肌梗死大鼠基质金属蛋白酶9表达的影响,以探讨他汀类药物改善急性心肌梗死后左心室重构的机制.方法 选用雄性Wistar大鼠47只,随机分为心肌梗死组、心肌梗死用药组、假手术组和假手术用药组,结扎大鼠冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,术后心肌梗死用药组及假手术用药组饲氟伐他汀10 mg/(kg·d),心肌梗死组和假手术组不给予任何处理和干预.4周后测左心室血流动力学参数、左心室重量指数及基质金属蛋白酶9含量.结果 术后基质金属蛋白酶9含量和左心室舒张末压在假手术组和假手术用药组均较低,且组间无明显差别(P0.05),在心肌梗死组和心肌梗死用药组均高于假手术组(P<0.05),而在心肌梗死组又高于心肌梗死用药组(P<0.05).与假手术组比较,心肌梗死组和心肌梗死用药组大鼠左心室收缩压、左心室压最大上升速率及左心室压最大下降速率均明显下降(P<0.05),且心肌梗死组较心肌梗死用药组下降更明显(P<0.05).各组左心室重量指数无明显差别(P0.05).结论 氟伐他汀能抑制基质金属蛋白酶9的表达,从而阻止大鼠心肌梗死后心室重构,改善心脏功能.     

骨髓单个核细胞移植对慢性心力衰竭大鼠心肌修复的远期效果

目的 研究骨髓单个核细胞移植对慢性心力衰竭大鼠心肌的修复作用及其远期效果观察。方法 建立慢性心力衰竭大鼠模型。造模后通过心肌直接注射的方法，于移植组移植DAPI标记过的骨髓单个核细胞；对照组注射同等剂量PBS溶液；假手术组仅开胸和关胸。并于造模后即刻、移植后4、8和12周，分批分组进行免疫组织化学和透射电镜的检测。结果 心脏标本切片，荧光显微镜检查证实在细胞移植区有细胞核因被标记而呈荧光的新生心肌和血管。免疫组织化学检查发现细胞移植区有类似心肌细胞的细胞团、心肌特异性结蛋白和肌动蛋白．增殖细胞核抗原检测阳性。透射电镜检查可见不成熟的心肌细胞，有细胞超微结构的变化，胞质中有散在肌丝样物质，还可见内膜不完整的新生血管，且阳性物质随时间推移而逐渐增多。对照组和假手术组则没有这些改变，并且在不同时间段出现死亡病例。结论骨髓单个核细胞移植可有效防止慢性心力衰竭大鼠心功能恶化．促进心肌和血管再生，在移植后长时间内没有出现新的心肌缺血损害、炎症反应和恶性心律失常，持续修复受损心肌．远期效果明显。