用对流扩散免疫电泳法鉴定不同ENA抗体

许多结蒂组织病(CTD)患者血清中存在抗可提取性细胞核抗原(Extractable Nuclear Antigens,ENA)的自身抗体。这些抗体的检测及其临床意义的研究是近年来CTD临床免疫的一个重要进展。目前测定抗体的方法以双向免疫扩散法和对流免疫电泳(CIE)法用得最多。我们在用CIE法检测ENA抗体过程中,设计了对流扩散免疫电泳(CDIE)法鉴定不同ENA抗体。现介绍如下。     

血清抗bFGF自身抗体、IL-6、TNF-α水平检测在ITP中的临床意义

目的：探讨血清抗碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)自身抗体、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平检测在特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的临床意义。方法：选取2019年1月—2020年1月我院收治的ITP患者62例设为病例组，另选健康查体者60例设为对照组。按发病的急慢性，将病例组分为急性ITP组和慢性ITP组，按照预后情况将病例组分为ITP预后良好组与预后不良组。比较病例组与对照组、急性ITP组与慢性ITP组、ITP预后良好组和预后不良组患者的血清抗bFGF自身抗体IgM、IgG水平和IL-6、TNF-α水平。用ROC曲线下面积分析血清抗bFGF自身抗体IgM、IgG水平联合检测对ITP预后的评估价值。结果：病例组血清抗bFGF IgG抗体、抗bFGF IgM抗体、IL-6、TNF-α水平高于对照组(P<0.05);急性ITP组的血清抗bFGF IgG抗体、抗bFGF IgM抗体、IL-6、TNF-α水平高于慢性ITP组(P<0.05);ITP预后良好组的血清抗bFGF自身抗体、IL-6、TNF-α水平低于预后不良组(P<0.05);血清抗bF...     

流行性出血热患者血小板表面免疫复合物的实验研究

本文介绍有关流行性出血热(EHF)患者血小板表面免疫复合物的研究方法,简述不同染色方法、不同浓度的荧光血清及蛋白载体对实验的影响。实验结果证实EHF患者血小板表面含有特异性抗原、抗体和C_3等免疫复合物组分。     

类风湿关节炎早期诊断指标的筛选及鉴定

目的寻找类风湿关节炎的早期诊断指标。方法采用双向电泳、MALDI-TOF/TOF质谱分析等方法从类风湿关节炎滑膜组织中筛选并鉴定特异性自身抗原,进一步建立该抗体的ELISA检测方法,测定30例早期类风湿关节炎患者及30例健康对照者血清中的抗体水平,并分析抗体水平与疾病活动度的相关性。结果早期类风湿关节炎血清中筛选并鉴定出特异性的锰超氧化物歧化酶抗体。ELISA法检测早期RA血清中锰超氧化物歧化酶抗体D(450)值均值(1.72±0.35)明显高于正常人血清(0.95±0.34)(P<0.000 1)。在早期RA患者血清中锰超氧化物歧化酶抗体阳性率为63.3%,且该抗体水平与RF、CCP、CRP呈明显正相关。结论锰超氧化物歧化酶抗体可能作为类风湿关节炎早期诊断与疾病活动性预测的指标之一。     

兔抗人补体Clg抗体试制成功

常规制备抗体的方法是先提纯抗原,经免疫动物而制得特异性抗体。鉴于提纯Clg方法较复杂,一般实验室难以实行。我们参考国外文献报道,利用国内一般实验室的仪器设备,从临床检验后混合人血清中提取富含Clg组分的优球蛋白直接免疫动物产生粗制抗血清,再用除去Clg蛋白的血清组分(简称Clg—D),以戊二醛交联而成固相免疫吸附剂,吸除非抗Clg的杂抗体,如化二步法制得的抗Clg抗体,经初步鉴定,为单特异性抗Clg抗体。已在本院与有关单位临床实验室试用。对临床病人Cgl含量     

小鼠IgG抗体的制备——IgG—SPA菌体免疫法

本文介绍制备小鼠IgG抗体的一种简便方法,即IgG-SPA菌体免疫法。首先制备10％(w/v)Cowan I 株菌体稳定液,按一定比例与正常小鼠血清制备IgG-SPA菌体免疫原。然后以9—12亿/ml菌体免疫原静脉注射于年青健康家兔,数次免疫后,即得兔抗小鼠IgG抗体(RAM-IgG),其血清效价达1:32～1:64(双扩法);其抗体纯度高,与正常小鼠血清只出现一条沉淀线。经鉴定,其血清不含有鼠IgM抗体。本文又把该法与IgG常规乳化佐剂免疫法作了比较。     

意外抗体的鉴定在疑难配血中的重要作用

目的 鉴定输血患者血清中的意外抗体,提高交叉配血相合率和临床输血安全性.方法 用盐水介质直接离心法、LISS/Coombs卡、经典抗人球方法对870份抗体筛选阳性的血液样本进行抗体鉴定.结果 488份血清中仅有特异性同种抗体,主要为Rh系统抗体300份(61.5%),MNS系统抗体104份(21.3%),其中抗-E抗体...     

1例冷自身抗体伴同种抗体AIHA患者的血型血清学分析

目的 分析1例冷自身抗体伴同种抗体的自身免疫性溶血病贫血(AIHA)患者的血型血清学特点.方法 将患者血清与筛选细胞和自身细胞在室温和37℃条件下分别在盐水、凝聚胺和抗人球介质中进行不规则抗体筛选,利用吸收放散实验处理患者红细胞和血清,排除冷自身抗体干扰后进行不规则抗体鉴定、血型鉴定和交叉配血.结果 在此例AIHA患者...     

抗流感病毒血清的制备

目的 :制备抗流感病毒血清为所分离的流感病毒亚型分型和鉴定之用。方法 :用灭活流感病毒免疫家兔 ,使其产生抗体 ,收集兔血清 ,测定抗血清的血凝抑制效价以判定血清的抗体滴度。结果 :抗H5N1 血清和抗H6 N1 血清效价高且与其它病毒抗原不产生交叉反应 ,抗H9N2 (Y2 80 )和抗H9N2 (G1 )两种血清彼此间有较明显的交叉反应 ,可能与两者血凝素结构未发生变化有关 ,故这两种血清均可应用于H9N2 病毒的鉴定。结论 :本方法制备的抗流感病毒血清效价高 ,交叉反应小 ,可作流感病毒的亚型分型及鉴定之用     

SP-B中间产物特异性抗体的制备与鉴定

目的制备和鉴定表面活性物质蛋白B(surfactant protein B,SP-B)加工处理过程中部分中间产物的特异性抗体。方法利用Lasergene 7.0和Macvector 11.0.4软件进行抗原表位分析,确定作为抗原的3条多肽序列,将人工合成的多肽与钥孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,免疫兔制备抗血清,间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测免疫前血清背景和免疫后血清效价,抗原亲和纯化抗血清,超滤浓缩抗体,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测抗体纯度,间接ELISA法检测抗体效价,蛋白质印迹(Western blot)鉴定抗体特异性。结果免疫前兔血清背景均低,免疫后抗血清效价均达到要求,抗原亲和纯化后所得抗体纯度及效价高,特异性好。结论成功制备了3种SP-B中间产物特异性多克隆抗体,为深入研究SP-B的加工处理奠定了基础。     

自身抗体检测对自身免疫性肝炎的诊断研究

目的 检测抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗肝肾微粒体抗体(LKM)、抗可溶性肝抗原抗体(SLA)、抗肝细胞膜抗体(LMA)、抗线粒体抗体(AMA)，来探讨自身抗体检测对诊断自身免疫性肝炎的临床意义。方法 应用ELISA方法筛选出肝炎病毒血清标志物阴性而谷丙转氨酶异常升高的病人血清。应用间接免疫荧光法检测自身抗体。结果38份血清中有9例存在一项或一项以上的自身抗体，其中ANA阳性5例，SMA阳性4例，LKM阳性4例，SLA阳性1例，LMA阳性2例，抗线粒体抗体阳性2例。结果 全为阴性的血清标本29例；而对照组健康人只有1例ANA呈阳性。结论 自身免疫性肝炎是一组以存在自身抗体为特点的肝损害疾病，通过检测自身抗体可对一部分AIH病人进行确诊。     

上海近郊加里福尼亚脑炎感染研究的初步报道

加里福尼亚脑炎是由蚊子传播,虫媒病毒感染引起的。1982年7月我组派人在加拿大虫媒病毒研究参考中心学习期间,曾用甲组、乙组和布尼安组虫媒病毒中某些毒株对上海近郊126份健康居民(指在采血时无任何病状)的血清进行血凝抑制(HI)抗体测定。在126份血清中,14份血清有乙组虫媒病毒的HI抗体(11％)。5份血清有雪鞋兔病毒(Snowshoe Hare Virus,SSH)的HI抗体(4％)。对此5份血清进一步用中和试验鉴定,证实有3份血清对加里福尼亚脑炎病毒血清群中SSH病毒的中和抗体     

凝聚胺配血在临床输血中的应用

凝聚胺技术 (Polybrene)是一种快速检测不完全抗体的方法 ,具有灵敏度高、操作简便等优点。国内外已广泛应用于血型鉴定 ,交叉配血 ,抗体筛选 ,也有用于自身免疫性溶血性贫血(AIHA)抗体的检测。1　材料与方法1.1　材料1.1.1　Polybrene试剂　 (台湾BESO公司提供 )1.1.2　谱细胞及广谱抗人球蛋白血清 ,抗 A及抗 B血清 (南京华欣药业提供 )菠萝酸 (上海血液中心提供 )抗 D ,抗 C ,抗 E ,抗 e(中国输血研究所提供 ) ,抗 M ,抗 N ,抗 P1(北京血液中心提供 )。1.1.3　AB型血清及O型Rh(D)阳性红细胞 (本科自制 ) ,本科鉴定的 2 0例病人…     

肾综合征出血热患者血清中和抗体的实验研究

目的：了解肾综合征出血热患(HFRS)血清中是否存在HFRS病毒中和抗体和中和抗体滴度的高低。方法：用近几年患病愈后血清中的HFRS病毒，以固定病毒量、稀释血清抗体方法，用小白鼠乳鼠中和实验，测定血清中和抗体对病毒的中和效价。结果：HFRS病后和隐性感染人群血清中和抗体滴度(GMT)均较高，其中，家鼠型GMT为422．7、野鼠型GMT为302．6、隐性感染GMT也达157．1。结论：中和抗体在血清中存留稳固而持久，是HFRS病后抗体免疫力的标志。     

Autocue Innova全自动血型仪正反定型不符原因分析和对策

目的:调查Autovue Innova全自动血型仪在ABO血型鉴定中正反定型不符的原因,探讨相应的处理措施。方法:选取2016年1-12月采集送检的全血标本4 371份,采用Autovue Innova全自动血型仪进行ABO血型鉴定,并采用手工方法复查。结合病史资料、抗体筛查、抗体鉴定、蛋白定量等方法,分析两种方法出现正反定型不一致的原因及其对策。结果:(1)Autovue Innova系统成功鉴定4 312份(98.65%),系统提示错误信息的11份(0.25%)经系统重新检测均可成功分级,另48份(1.10%)正反定型不符;手工方法成功鉴定4 345份(99.41%),正反定型不符26份(0.59%)。两种方法的成功鉴定率比较差异无统计学意义(x~2=0.003,P=0.959)。(2)经Autovue Innova系统判定为正反定型不符者含正定型不符7份及反定型不符41份。7份正定型不符包括红细胞弱反应(4份)及混合红细胞反应(3份);41份反定型不符包括血清额外反应(9份)及血清弱反应(32份,其中22份可被手工法纠正)。(3)婴幼儿样本(37.50%)、恶性血液病(12.50%)、同种异体抗体(8.33%)、冷抗体(8.33%)是造成Autovue Innova系统48份正反定型不一致的主要原因,但绝大部分(16/18)婴幼儿样本及全部冷抗体、M蛋白所致的正反定型不符者可被手工法纠正。结论:Autovue Innova全自动血型仪的ABO血型鉴定准确率高,对于其判断为正反定型不符者,首先应采用凝胶卡式法、试管法等手工方法复查,若经手工复查仍不能纠正结果者,可考虑行抗体筛查、抗体鉴定、蛋白定量等进一步检查。     

胃肠道腺癌患者血清抗癌胚抗原抗体的检测

目的：探讨胃肠道腺癌患者血清中IgG和IgM抗癌胚抗原(CEA)抗体的情况，评价CEA及IgG和IgM抗CEA抗体的联合检测在胃肠道腺癌诊断中的意义。方法：用放免法检测血清中CEA含量，酶联免疫吸附法(EuSA)检测血清中IgG和IgM抗CEA抗体，用竞争抑制法检测抗体的特异性。结果：胃肠道腺癌患者血清CEA含量升高者(≥15ng／ml)占30．9％(21／68)，IgG抗CEA抗体阳性者占35．3％(2，4／68)，IgM抗CEA抗体阳性者占26．5％(18／68)，CEA及抗CEA抗体的联合检测可使胃肠道腺癌的阳性率提高到60．3％(41／68)；健康对照组血清CEA升高者为0，IgG和IgM抗CEA抗体阳性者占3.3%，(1／30)。结论：胃肠道腺癌患者血清中IgG和IgM抗CEA抗体的检出率较高，这些抗体与血清CEA水平的联合检测可提高胃肠道腺癌的诊断率。     

高效价冷凝集素引起的血型定型困难一例分析

目的:通过1例高效价冷凝集素引起血型定型困难,探讨临床输血科(血库)规范操作ABO血型鉴定的重要性.方法:应用吸收放散等血型血清学方法去除致敏在红细胞表面和血清中的冷自身抗体来进行血型鉴定.结果:经检测此份血样为B 型,由于血清中含有高效价冷自身抗体而引起血型正反定型不相符合.结论:为了保证临床输血安全,应规范ABO正反定型的鉴定,减少临床输血反应的发生.     

应用辛酸硫酸胺法提取小鼠腹水和血清中的IgG抗体

目的：从小鼠腹水和血清中纯化 IgG抗体。方法：首先用辛酸沉淀小鼠腹水和血清中的非免疫球蛋白,然后用固体硫酸胺提取抗人 T和 B细胞白血病单克隆抗体 (IgG1和 IgG2b)和多克隆 IgG抗体。结果：经 SDS-PAGE和活细胞免疫荧光法鉴定,获得了纯度高、活性好的抗体,腹水中单抗的回收率达 80％以上。结论：本方法是一种简单、价廉且有效的纯化小鼠腹水和血清 IgG抗体的方法。     

免疫血清制备中的几个问题

免疫血清也就是指含有特异性抗体的血清．在免疫学实验中常用于对抗原的分析鉴定、定量测试，其质量的优劣直接影响到实验结果。免疫血清制备的基本方法是使用相应抗原免疫动物。然后抽血(放血)分离血清。要得到较高质量的免疫血清。应注意以下几个问题。     

914例不规则抗体筛查结果分析及临床意义

目的 了解预期输血患者血清中有无意外同种抗体,避免输血反应的发生.方法 对914例患者血清(血浆)进行不规则抗体筛查及鉴定,并对筛查结果进行分析.结果 同种免疫性抗体占1.75%,多为Rh血型免疫性抗体( 包括2例Rh抗D引起的新生儿溶血病);自身免疫性抗体(包括冷自身抗体、温自身抗体及IgM+IgG自身免疫性抗体)占5.5%,患者均有多次输血史或妊娠史.结论 对有妊娠史、输血史患者输血前应常规筛查不规则抗体,以确保输血安全.