信号增强型电化学免疫传感器用于NT-proBNP高灵敏检测的研究

目的 构建用于人N末端前钠尿肽(NT-proBNP)高灵敏检测的电化学传感器.方法 采用自组装方法将牛血清清蛋白-碳纳米管复合物(BSA-MWNTs)固载在洁净的玻碳电极表面,结合共价交联固定化技术和亲和素-生物素信号放大技术,制得NT-proBNP高灵敏免疫传感器,优化实验条件,采用电化学方法对电极的响应特性进行研究.结果 在最优实验条件下,该传感器对NT-proBNP响应的线性范围为1～30 ng/mL和30～150 ng/mL,检出限为0.03 ng/mL.结论 该方法可实现对NT-proBNP的超灵敏检测.     

基于CdTe量子点和磁性纳米材料构建的夹心型电化学免疫传感器

目的 制备新型夹心型电化学免疫传感器,并研究该传感器的性能. 方法 以甲胎蛋白（AFP）作为检测模型,以磁性微球为一抗固定载体,CdTe量子点作为二抗标记物,通过碳二亚胺交联法制备AFP一抗固化的免疫磁珠和AFP二抗固化的CdTe量子点,通过夹心免疫分析模式和电化学溶出伏安法建立新型高灵敏电化学免疫传感器,并采用红外光谱、紫外光谱及电化学方法对该传感器进行表征. 结果 该电化学免疫传感器对AFP抗原检测的线性范围为1～200 ng/mL,检测限为0.025 ng/mL. 结论 该电化学免疫传感器仪器简单、操作便捷、检测结果稳定,并具有较高的灵敏度.     

快速灵敏检测HCV核心抗原的免疫新方法及其性能分析

目的建立一种用于快速、灵敏检测血清丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCcAg)含量的免疫新方法,并对其性能进行评价。方法采用新型纳米材料修饰电极,将HCV核心抗体固定到电极表面,制备检测HCV核心抗原的电化学免疫传感器,并分析该传感器的检测性能。结果该免疫传感器对HCV核心抗原反应灵敏,其线性范围为2.50～300.00ng/mL,相关系数为0.997,检出限为1.20ng/mL。此外,该传感器具有较好的准确性、选择性和精密度。结论该电化学免疫传感器性能良好,可实现对HCcAg的快速、灵敏检测。     

电化学发光免疫分析法检测血浆C肽的临床评价

目的：探讨电化学发光免疫分析法（ECLIA）测定血浆C肽的效果及临床应用价值。方法：采用电化学发光免疫分析法和酶联免疫分析法（ELISA）分别测定糖尿病病人的血浆C肽含量，并用电化学发光免疫分析法同时测定胰岛素含量，并对测定结果通过SPSS统计软件进行相关统计分析。结果：ECLIA测定C肽的平均批内与批间变异系数分别为2．13％，4．27％，平均回收率是98．9％，灵敏度为0．01ng／mL；ELISA法的平均批内与批间变异系数分别为10．8％，16．5％，平均回收率是91．9％，灵敏度为0．06ng／mL；ECLIA及ELISA法所测C肽含量与ECLIA法所测胰岛素含量均呈正相关（r=0．96，r=0．89，P均〈0．05）。结论：ECLIA法测C肽的各技术参数优于EUSA法，且操作简便，检测速度快，具有重要临床应用价值。     

采用石墨烯修饰的电化学免疫传感器检测猪肉中的己二烯雌酚含量

利用石墨烯及己二烯雌酚修饰电极,研制了一种用于检测己二烯雌酚的高灵敏新型电化学免疫传感器;通过竞争结合,以铁氰化钾为探针,实现了对己二烯雌酚的高灵敏快速检测。结果表明:研制的石墨烯/己二烯雌酚电化学免疫传感器具有很高的灵敏度,并且在己二烯雌酚质量浓度为500~5 000 ng/mL的范围内具有良好的线性关系,检测限可达到0.2 ng/mL。该传感器具有良好的稳定性和重复性,对猪肉实际样品进行了己二烯雌酚的含量分析,回收率在83.8%~97.7%之间,结果令人满意。     

乙肝五项定量在乙型肝炎检测中的应用

目的探讨乙肝五项定量检测在临床中的应用效果。方法收集郑州大学第一附属医院乙肝患者血清标本200侈4（HBV-DNA阳性）,采用电化学发光法及ELISA法进行乙肝五项检测。结果200例血清标本五项定量值为HBsAg（1．28±0．20）ng／ml,HBsAb（8．0±0．68）mIU／ml,HBeAg（0．60±0．11）ncu／ml,HBeAb（2．65±0．51）ncu／ml,HBcAb（3．5±0．60）ncu／ml;HBsAg检测灵敏度为0．5ng／ml,ELISA法HBsAg检测灵敏度为2n∥ml。针对HbsAg检测,两者χ^2值为30．1,P〈0．01。结论电化学发光技术优于ELISA法,其检测结果可与HBV—DNA互补,为临床提供诊疗提供更加可靠依据。     

基于碳纳米管-硫堇/苝四甲酸二酐衍生物膜/纳米金的新型癌胚抗原电流型免疫传感器的研究

目的探讨采用碳纳米管-硫堇(CNTs-THi)/苝四甲酸二酐衍生物膜(PTC-NH2)/纳米金(nano-Au)构建的新型的高灵敏癌胚抗原(CEA)免疫传感器的性能。方法以氧化铟锡(ITO)电极为基底,在其表面首先电沉积一层纳米金,然后依次修饰CNTs-Thi、PTC-NH2、nano-Au,固载癌胚抗原特异性抗体(anti-CEA)制得新型高灵敏癌胚抗原(CEA)免疫传感器。通过循环伏安法考察电极修饰过程的电化学特性。结果该免疫电极的峰电流响应与癌胚抗原的浓度在1.0～75.0 ng/mL的范围内保持良好的线性关系,相关系数为0.991 5,检测下限为0.5 ng/mL。结论利用该方法制备的免疫传感器具有灵敏度高、线性范围宽、检测下限低等优点。     

基于AgI模拟酶纳米材料构建阻抗型免疫传感器用于检测癌胚抗原

目的 设计一种基于AgI模拟酶纳米材料的阻抗型免疫传感器,对血清样品中的癌胚抗原(CEA)进行高灵敏检测.方法 合成一种壳聚糖修饰的碘化银(CS-AgI)纳米材料,利用透射电镜(TEM)和傅里叶红外光谱(FTIR)法对合成的CS-AgI进行表征,以CS-AgI为信号标记物修饰CEA抗体,采用夹心式免疫分析法在金电极表面制备一种高效、灵敏的电化学免疫传感器,采用电化学工作站定量分析检测所构建免疫传感器的电化学性能.结果 成功合成CS-AgI纳米颗粒,颗粒呈球形,粒径约为100 nm.以CS-AgI纳米颗粒为信号标记物构建的免疫传感器在pH7.0的磷酸盐缓冲液中检测CEA时表现出良好的电化学性能,其交流阻抗响应值与样品中的CEA浓度的对数呈线性增加趋势,并在CEA浓度为0.1～80 ng/mL范围内展现出良好的线性关系(r=0.996),检测限达到0.05 ng/mL.结论 基于AgI模拟酶纳米材料构建的阻抗型免疫传感器可以高灵敏检测CEA,同时具有较好的精确性、重现性和选择性,为癌症的早期诊断和早期治疗提供了实验依据.     

酶联免疫法与电化学发光法检测肿瘤标志物癌胚抗原结果的对比分析

目的分析和对比酶联免疫法（EusA）与电化学发光免疫法（ECuA）检测患者血清中肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）结果。方法分别用ELISA与ECLIA对60例样本中的血清CEA含量进行检测。结果2种方法均能较准确地反映血清中游离CEA的含量,ELISA与ECLIA相关系数为0．97,显示高度相关;二者做配对样本均值分析的t检验,在95％的可信程度下,P=0．066〉0．05,说明ELISA与ECLIA结果差异无统计学意义。结论ELISA与ECLIA在检测CEA结果上有较高的一致性。作为肿瘤标志物的检测具有较高的实用价值。     

抗赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备及其ELISA检测方法的建立

目的制备抗赭曲霉毒素A（OA）的单克隆抗体（McAb）并对其进行初步鉴定,在此基础上建立竞争抑制酶联免疫吸附试验（ELISA）用于OA的检测。方法采用小剂量长周期的免疫方案,以OA 牛血清白蛋白（BSA）偶联物免疫雌性BALB/c小鼠,采用细胞融合法获得分泌抗OA的McAb的杂交瘤细胞株,用竞争抑制ELISA法进一步检测McAb的特异性,腹水诱生法大量制备McAb,以OA为竞争抗原,建立检测OA的竞争抑制ELISA。结果OA BSA免疫的BALB/c小鼠血清效价为1:512?000,与BSA有强烈的交叉反应。细胞融合后,ELISA筛选抗体分泌阳性的杂交瘤细胞株,抗OA BSA的McAb与BSA的交叉反应率仅为3.5%,对分泌抗OA BSA特异的McAb的细胞株经3轮克隆化,抗体分泌阳性率达到100%,建立了1株能稳定分泌抗OA BSA McAb的杂交瘤细胞株,竞争抑制法进一步证明了该抗体是特异针对OA的,腹水诱生法制备了大量的McAb。竞争抑制ELISA线性范围为0.24～125?ng/mL,线性方程y=-0.113?2logx+0.901?6,相关系数r=0.98,最低检出浓度为0.24?ng/mL。样品的加标回收率为97.07%～107.83%。结论获得了分泌抗OA的McAb的杂交瘤细胞株,建立了OA检测的简单、灵敏、高效的ELISA检测方法。     

基于Au_(nano)-PB、AEAPS-Dextran-Fe_3O_4和Au_(nano)修饰的前列腺特异性抗原电流型免疫传感器的研究

目的采用普鲁士兰-纳米金(Au_(nano)-PB)、氨基硅烷化-葡聚糖-四氧化三铁纳米复合物(AEAPS-Dextran-Fe_3O_4)及纳米金(Aunano)共修饰于氧化铟锡(ITO)电极表面固载抗体制得高灵敏前列腺特异性抗原电流型免疫传感器。方法先将ITO电极表面滴加适量Au_(nano)-PB,随后将AEAPS-Dextran-Fe_3O_4滴涂在ITO玻璃电极的Au_(nano)-PB膜上,然后通过静电吸附Au-nano并固定前列腺特异性抗体(anti-PSA),制得电流型免疫传感器。结果在最佳实验条件下,该传感器响应的峰电流值与前列腺特异性抗原(PSA)浓度在该传感器(0.8～20)ng/mL及(20～170)ng/mL的范围内保持良好的线性关系,检测下限为0.6ng/mL。结论成功建立了前列腺特异性抗原免疫传感器,该方法制备简单,操作便捷,检测下限低。     

壳聚糖/碳纳米管修饰电极电化学免疫传感器用于甲胎蛋白检测

目的构建壳聚糖/碳纳米管(CNT)修饰电极电化学免疫传感器用于甲胎蛋白(AFP)检测的新技术。方法采用壳聚糖/CNT复合物修饰玻碳电极,通过共价键合方式将AFP抗体固定在修饰电极表面,固定抗体的电极与AFP、辣根过氧化物酶(HRP)标记的AFP抗体反应,构筑夹心型免疫复合结构。HRP催化TMB底物产生电流信号,电流信号大小与AFP浓度成正相关,实现对AFP的高灵敏检测。结果该电化学免疫传感器可以准确检测AFP标准样品,也可用于检测血清中AFP的浓度。结论壳聚糖/CNT修饰电极构建的用于AFP检测的电化学免疫传感器具有较高的灵敏度和准确性。     

压电C肽免疫传感器的实验研究

目的：构建一种新型压电C肽免疫传感器，方法：AT切向，基频10MHz的石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定形成检测池，抗人C肽单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体敏感膜，构成压电C肽免疫传感器。结果：构建的压电C肽免疫传感器C肽的响应特性良好，其线性检测范围为0．375－12．0ng/ml，胰岛素，胰岛素原对C肽的检测基本无干扰，传感器可再生后重复使用5次，58例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合（P＞0．05），两种方法的相关系数为0．94。结论：研制的压电C肽免疫传感器具有灵敏度高，特异性好，不需标记，操作简单，省时，能实时在线检测和重复使用等优点，对比实验表明其检测结果准确，能用于临床实验诊断，具有临床推广价值。     

压电石英晶体甲胎蛋白免疫传感器的实验研究

目的　构建一种新型压电甲胎蛋白 (AFP)免疫传感器。方法　AT切向、基频 10MHz的石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定组成检测池 ,抗人AFP单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体敏感膜 ,构成压电AFP免疫传感器。结果　构建的压电AFP免疫传感器对AFP的响应特性良好 ,其线性检测范围为 2 0～ 10 0 0ng ml ,癌胚抗原(CEA)、前列腺特异抗原 (PSA)、人绒毛膜促性腺激素 (hCG)等对AFP的检测基本无干扰 ;传感器可再生后重复使用 5次 ;68例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合 ,两种方法的相关系数为 0 92 ,P <0 0 1。结论　研制的压电AFP免疫传感器是一种灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能重复使用和实时在线检测AFP的新方法 ,对比实验表明其检测结果准确 ,能用于临床实验诊断 ,具有临床推广价值。     

基于多壁碳纳米管-壳聚糖-硫堇纳米复合物修饰甲胎蛋白免疫传感器的研究

目的采用多壁碳纳米管-壳聚糖-硫堇(MWCNT-CS-THi)纳米复合物及半胱氨酸盐酸盐共修饰于玻碳电极表面固载抗体制得高灵敏甲胎蛋白免疫传感器。方法先在玻碳电极表面滴涂一层MWCNT-CS-THi纳米复合物,随后利用壳聚糖和硫堇分子中大量的正电荷氨基固定纳米金(GNPs)并吸附半胱氨酸盐酸盐(CH),最后用戊二醛(GA)交联甲胎蛋白特异性抗体制得电流型免疫传感器。结果在最佳实验条件下,该传感器响应的峰电流值与甲胎蛋白抗原(AFP)浓度在0.1～200.0ng/ml的范围内保持良好的线性关系,检测下限为0.07ng/ml。结论成功建立了甲胎蛋白免疫传感器,该方法制备简单,线性范围宽,检测下线低。     

基于石墨烯-依来铬青蓝R的新型免标记电化学免疫传感器用于CA19-9检测

目的构建石墨烯-依来铬青蓝R(GO-ECR)免标记电化学免疫传感器高灵敏检测CA19-9的新技术。方法化学法合成氧化石墨烯并滴涂于电极表面,通过循环伏安法电沉积制作GO-ECR修饰玻碳电极,在偶联剂EDC和NHS作用下以共价键合方式将CA19-9抗体固定于修饰电极表面,固定的抗体与CA19-9发生免疫反应形成抗原-抗体复合物。铁氰化钾溶液作为检测探针,对比免疫反应前后铁氰化钾响应信号的差异,利用信号降低程度与CA19-9浓度正相关,实现对CA19-9的特异性高灵敏检测。结果该电化学免疫传感器检测CA19-9的线性范围为0.05～500 U/mL,检测限为0.01 U/mL,且能准确测定临床血清样本CA19-9的浓度。结论构建的GO-ECR免标记电化学免疫传感器可以简单、准确、特异地检测CA19-9。     

Glassy carbon electrode modified with multi-walled carbon nanotubes sensor for the quantification of antihistamine drug pheniramine in solubilized systems

A sensitive electroanalytical method for quantification of pheniramine in pharmaceutical formulation has been investigated on the basis of the enhanced electrochemical response at glassy carbon electrode modified with multi-walled carbon nanotubes in the presence of sodium lauryl sulfate. The experimental results suggest that the pheniramine in anionic surfactant solution exhibits electrocatalytic effect resulting in a marked enhancement of the peak current response. Peak current response is linearly dependent on the concentration of pheniramine in the range 200–1500 μg/mL with correlation coefficient 0.9987. The limit of detection is 58.31 μg/mL. The modified electrode shows good sensitivity and repeatability.