10854例珠蛋白生成障碍性贫血基因筛查结果及基因类型分析

目的 了解重庆地区进行孕前检查人群的珠蛋白生成障碍性贫血基因携带率、基因类型和构成比情况.方法 对2014年4月至2016年3月在该院进行孕前体检的10854人进行珠蛋白生成障碍性贫血筛查,筛查包括:平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白(MCH)水平,血红蛋白电泳,对筛查结果任意一项异常者行珠蛋白生成障碍性贫血基因检测.结果 在10854人中,珠蛋白生成障碍性贫血初筛阳性者1117人,筛查阳性率10.29％.珠蛋白生成障碍性贫血基因阳性者共458例,珠蛋白生成障碍性贫血基因携带率4.21％.其中检测出单纯a珠蛋白生成障碍性贫血253例,α珠蛋白生成障碍性贫血基因携带率2.33％,其中α珠蛋白生成障碍性贫血以--SEA最常见,构成比为52.17％.检测出单纯β珠蛋白生成障碍性贫血197例,β珠蛋白生成障碍性贫血基因携带率1.81％,其中β珠蛋白生成障碍性贫血以CD17(A→T)最常见,构成比为31.47％.检测出携带αβ复合型珠蛋白生成障碍性贫血基因11例.结论 重庆是珠蛋白生成障碍性贫血高发地区,做好孕前珠蛋白生成障碍性贫血筛查工作,对提高人口素质,实现优生优育具有重要作用.     

惠州地区5500例珠蛋白生成障碍性贫血的基因检测分析

目的：运用基因诊断技术检测患者珠蛋白生成障碍性贫血（简称地贫）基因,了解主要的基因突变类型及其频率。方法以2010年1月至2014年10月就诊于惠州市中心人民医院血液科（门诊和体检）的5500例患者为研究对象,采用跨越断裂点的PCR（GAP‐PCR）技术及膜反向杂交技术分别对α‐和β‐地贫进行基因分析。结果检出α‐地贫基因改变1604例,占29．16％;检出β‐地贫基因改变1096例,占19．93％,检出αβ‐复合型地贫患者119例。结论α‐和β‐地贫的基因筛查为婚育指导提供了有价值的基础资料。     

广西西林县珠蛋白生成障碍性贫血研究:群体调查及产前诊断

本文对西林县中小学生3227例、新生儿脐血223份、门诊贫血病人126例及1例β-珠蛋白生成障碍性贫血(β-地贫)高危儿及其家系进行地贫的普查及产前诊断。试验方法按常规进行。结果表明,β-地贫、HbH及异常Hb病的检出率分别为3％、0.124％和0.56％;脐血HbBarts阳性率为12.1%;壮族β-地贫、HbH病、HbJ组、HbS组、HbE及HbC·S的检出率分别为3.2%、0.12%、0.41%、0.04％、0.16%和0.04%;汉族和苗族β-地贫的检出率分别为3.38％和0.42%。此外,本文应用Triton-尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳方法诊断成年人α-地贫1。本文进行一例β-地贫高危儿的产前诊断表明,其父母分别为17T/A和-28T/A杂合子,胎儿羊水细胞为17T/-28T的双重杂合子。     

2例妊娠合并珠蛋白生成障碍性贫血患者的基因特征

β 珠蛋白生成障碍性贫血是 β 珠蛋白基因发生突变或缺失 ,导致β 珠蛋白合成障碍 ,造成肽链合成不平衡 ,引起溶血性贫血的一种常染色体隐性遗传性疾病。我院于1998年6月～2002年6月收治2例孕妇 ,均经反向点杂交技术证实为β 珠蛋白生成障碍性贫血 ,现报道如下。1病历摘要例1患者 ,女性 ,32岁 ,孕2产0,因停经35周 +3,中度贫血 ,于2001年11月10日入院。患者祖籍温州 ,平素月经规则:3～7/28～30d ,量中 ,末次月经2001年3月5日。发现轻度贫血10余年 ,血红蛋白在90～95g/L之间 ,多次于外院就诊 ,诊断为缺铁性贫血 ,口服铁剂治疗无效 ,本次妊娠…     

珠蛋白生成障碍性贫血的实验室诊断进展

珠蛋白生成障碍性贫血是人类常见的特异性隐性单基因遗传病,是由于某类珠蛋白合成受抑制所引起的溶血性贫血,在我国常见于南方人群,具有发病率高、重症患者胎儿病死率高等特点,目前尚无彻底根治的方案。筛选恰当的珠蛋白生成障碍性贫血实验诊断方法对该病的预防具有重要意义。该文回顾总结珠蛋白生成障碍性贫血的实验室诊断方法,阐述将筛查法和基因诊断法有机结合在珠蛋白生成障碍性贫血的实验室诊断、筛查方面的特点。     

轻型珠蛋白生成障碍性贫血1例报告

珠蛋白生成障碍性贫血是珠蛋白肽链量生成不正常引起的一组遗传性疾病，又称地中海贫血。最多见于地中海东北地区的各民族中，因而得名。在我国南方长江流域一带特别是广东、广西地区有发现，北方地区尚未见报道。我科在2005年6月收治1例，现报道如下。     

联合检验对珠蛋白生成障碍性贫血的诊断意义分析

目的 探讨联合检验对珠蛋白生成障碍性贫血的诊断意义.方法 选取2018年6月至2019年6月本院收治的20例珠蛋白生成障碍性贫血患者作为观察组,另选取同期健康体检者20名作为对照组.两组均统一进行联合检验,比较两组血液学指标检查结果,分析联合检验对珠蛋白生成障碍性贫血的诊断意义.结果 观察组RDW、HbA2水平均高于对照组,MCV水平、RBC脆性均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).MCV与Hb电泳联合、MCV与RBC脆性联合及Hb电泳与RBC脆性联合的串联试验灵敏度较高,其并联试验的特异度较高.结论 联合检验有助于提升珠蛋白生成障碍性贫血的诊断准确性,值得临床推广应用.     

羊水细胞原位培养法在β-珠蛋白生成障碍性贫血产前诊断中的应用

目的 探讨羊水细胞原位培养法在β-珠蛋白生成障碍性贫血产前诊断中的应用价值.方法 对羊水细胞进行原位培养,应用培养后细胞,采用聚合酶链反应,结合反向点杂交技术检测β-珠蛋白生成障碍性贫血突变类型.结果 426例羊水细胞均培养成功,共检出β-珠蛋白生成障碍性贫血302例,26种基因型.其中纯合子30例,双重杂合子71例,杂合子201例.胎儿合并α-珠蛋白生成障碍性贫血杂合子27例,其中Hb Bart′s水肿胎9例,HbH病1例.结论 在孕中期行羊膜腔穿刺术获取羊水细胞,对羊水细胞进行原位培养,利用培养细胞进行β-珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断,避免因母体血污染、多次取材导致重型珠蛋白生成障碍性贫血胎儿的误诊或漏诊,可准确地检出各类β-珠蛋白生成障碍性贫血基因型.     

珠蛋白生成障碍性贫血患者红细胞游离原卟啉水平的研究

测定116例珠蛋白生成障碍性贫血、37例缺铁性贫血患者及45例正常人的FEP水平。结果:6例(9.2％)杂合子β珠蛋白生成障碍性贫血病人的FEP增高,其中4例合并缺铁;14例(27.5％)纯合子β珠蛋白生成障碍性贫血、HbH病及β珠蛋白生成障碍性贫血复合HbE病患者的FEP增高,与缺铁无关。缺铁性贫血病人的FEP水平显著高于杂合子β珠蛋白生成障碍性贫血病人。37例缺铁性贫血病人中,34例(91.9％)FEP增高;而37例非缺铁的杂合子β珠蛋白生成障碍性贫血患者中,36例(97.3％)FEP在正常范围,FEP测定对两者的鉴别诊断有一定的临床价值。     

α和β地中海贫血的羊水产前基因诊断

目的研究单管多重PCR体系检测缺失型α-地中海贫血及反向点杂交法检测β-地中海贫血在产前诊断中的应用价值。方法应用单管多重PCR体系产前检测37例父母均为α-地中海贫血杂合子的风险胎儿的羊水地贫基因及应用反向点杂交法产前检测18例父母均为β-地中海贫血杂合子的风险胎儿的羊水地贫基因。结果37例α-地中海贫血风险胎儿中检出Hb Bart纯合子7例,左缺失型H病3例,右缺失型H病2例。18例β-地中海贫血的风险胎儿检出2例IVS-nt 654/CD41-42双重杂合子,1例IVS-nt 654纯合子。结论应用单管多重PCR体系及反向点杂交法进行α和β地中海贫血产前羊水基因检测,能快速、准确作出诊断,从而预防重症患儿的出生,达到优生目的。     

地中海贫血的产前筛查和基因诊断

目的 分析孕妇血液学指标与地中海贫血(简称地贫)各基因型的关系,探讨地贫产前筛查的可靠依据.方法 在本院所有产前检查人群中广泛开展地贫的血液学筛查,进行阳性病例基因检测,确诊后筛查配偶,夫妇患同型地贫者进行产前诊断;疑似β地贫夫妇行β基因突变热点测序、比对,探查未知突变.结果 疑似地贫孕妇115例,确诊73例,夫妇同患α地贫1对、β地贫3对,产前诊断重型地贫患儿3例.Hb、MCV、RBC、RDW、HbA2在α、β、α/β与β/β间差异有统计学意义(P<0.01).疑似β地贫的样本大多呈2～5个SNP杂合状态.结论 重庆为β地贫的高发区，红细胞参数和定量血红蛋白电泳是筛查地贫的重要指标,gap-PCR、PCR-RDB、基因测序可明确诊断,切实干预地贫的出生缺陷.     

孕产妇358名产前地中海贫血基因筛查和诊断分析

目的分析孕产妇产前地中海贫血的基因筛查和诊断情况。方法应用全血细胞计数和血红蛋白电泳技术对358名孕妇进行产前筛查,分析红细胞平均体积（MCV）、红细胞平均血红蛋白含量（MCH）值以及血红蛋白电泳异常区带;应用裂口．聚合酶链式反应（Gap．PCR）和聚合酶链式反应（PCR）结合反向点杂交技术进行地中海贫血的基因诊断。结果358名孕产妇中仅发现3例血红蛋白病[2例血红蛋白K（HbK）和1例血红蛋白D（HbD）]。结论Gap—PCR和PCR结合反向点杂交技术在诊断地中海贫血中存在一定的漏检风险,该技术需与DNA测序配合使用才能提高诊断的准确度。     

49例同型地中海贫血携带者产前基因诊断分析

目的 探讨防止严重类型地中海贫血(简称地贫)患儿出生的有效手段和重要意义.方法 2013年1月至2015年12月于该院产前检查的孕妇及配偶通过地贫筛查和基因诊断,对确诊的49例同型地贫携带者夫妇进行羊水地贫产前基因诊断,并在产前诊断后进行髓访.结果 在49例同型地贫携带者夫妇中,基因诊断检测出α-地贫主要突变类型为--SEA/αα (50.0％)、-α3.7/αα (36.5％)、-α4.2/aa(11.5％),p地贫主要突变类型为CD17/N(42.0％)、CD41-42/N (26:0％)、IVS-Ⅱ-654/N(22.0％).产前诊断检测出HbH病4例,Bart's水肿胎儿2例,重型β-地贫10例,α-地贫携带者19例,β-地贫携带者10例,α-地贫合并β-地贫1例,健康胎儿3例.随访结果与产前诊断结果相符.结论 通过开展地贫产前筛查和产前诊断能有效地防止重症地贫患儿出生.     

贵阳地区1143例孕妇地中海贫血筛查及基因检测结果分析

目的了解贵阳地区孕妇人群的地中海贫血(简称地贫)发生情况,并探讨地贫产前筛查的临床意义。方法采用红细胞指数分析和血红蛋白电泳对孕妇进行地贫表型分析,表型阳性者进一步做地贫基因诊断。分析贵阳地区孕妇人群地贫基因型的分布情况。结果 1 143例孕妇筛查出地贫表型阳性68例(5.95%),基因诊断确诊为地贫63例(5.51%),其中α-地贫23例(2.01%),β-地贫40例(3.50%)。α-地贫基因型以--SEA/αα最多,占60.9%;β-地贫基因型以CD17/N最多,占45.0%。结论贵阳地区是地贫高发区;对孕妇开展产前筛查可有效防止重型地贫患儿的出生。     

高通量基因测序对血清学筛查临界风险孕妇的应用价值

目的：探讨对于血清学筛查临界风险的孕妇应用高通量基因测序价值。方法选择2012年5月至2015年5月在常州市妇幼保健院产前诊断中心就诊的1066例血清学筛查临界风险的孕妇,在知情同意的原则下抽取孕妇外周血,提取血浆中胎儿游离DNA ,制备文库,采用Illumina NextSeq500测序平台对其进行测序分析,对测序提示的染色体异常患者行羊膜腔穿刺,羊水细胞培养后染色体G显带核型分析。结果1066例样本中,高通量基因测序提示15例染色体非整倍体异常,经知情同意,13例孕妇自愿接受羊水产前诊断,其中7例羊水G带核型结果与测序结果一致,包括4例21三体,1例18三体,1例47,XXX ,1例47,XXY ,其余6例G带核型正常。结论高通量基因测序可作为血清学筛查临界风险孕妇的有效补充检测手段。     

血常规MCV、MCH在产前地中海贫血筛查中的应用价值

目的：探讨地中海贫血基因携带者的血常规指标MCV、MCH在筛查孕妇地中海贫血中的应用价值。方法：选2012年1月至2013年12月在桂林市人民医院建卡后确诊患有地中海贫血基因携带者的孕妇100例作为地贫组,同期无贫血症状的孕妇100例作为正常组。对两组孕妇的血常规相关指标Hb、MCV、MCH进行比较。结果：地贫组孕妇血常规中MCV、MCH检测结果明显低于正常组,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论：血常规相关指标MCV、MCH在产前筛查孕妇地中海贫血中具有重要意义,必要时进行地中海贫血基因检测和产前诊断可确诊重型地中海贫血胎儿。     

微量胎儿细胞中Y染色体锌指结构基因自动测序及影响因素的探讨

目的：在已建立的较简便、敏感的对性连锁遗传病胎儿进行产前性别鉴定方法的基础上探讨高温循环全自动测序中几个因素对测序鉴定ZFY基因结果的影响。方法：自行设计ZFY引物并建立了富集胎儿细胞结合巢式聚合酶链反应扩增男性特异性ZFY基因并进一步循环测序方法，计算机辅助设计的两对寡核苷酸引物位于Y染色体短臂的Ucdo43保守区内；同时对DNA纯度、浓度和测序过程中水的质量对DNA自动测序结果的影响进行回顾性分析。结果：实验表明利用孕妇外周血中微量胎儿细胞扩增男性特异性ZFY基因并进行高温循环全自动测序方法可行，结果可靠，在DNA纯度、浓度较低以及配制测序胶时所用纯水水质较差时，对测序曲线造成不同程度的影响，从而影响测序结果。结论：提示该方法检测胎儿DNA是可行的，同时在DNA自动测序鉴定产物特异性时需使用高纯度高浓度的DNA和高质量的纯水，要想获得较长的测序片段，所用模板浓度不能太低。     

产前基因检测杜氏肌营养不良

目的 产前基因检测杜氏肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy,DMD)家系胎儿.方法 利用性别决定基因SRY引物PCR和羊水细胞培养染色体核型分析确定3例DMD家系胎儿性别,采用mPCR技术对3个DMD家系成员外周血及胎儿羊水和脐静脉血进行DMD基因内18个外显子位点扩增,STR-PCR结合聚丙稀酰胺凝胶技术对DMD基因3'端及基因内的44、45、49、50内含子的(CA)n短串联重复序列引物进行扩增,进行家系连锁分析和产前基因诊断.结果 共检出4例胎儿,其中2例单胎和1例双胎之甲胎为男性,之乙胎为女性.3个DMD家系2个检出为非缺失型,1个为缺失型.4例胎儿均继承了与同代先证者相同的母源致病单体型,除1例双胎之女胎为风险基因携带者外,其余3例男胎均为DMD风险胎儿,3例患儿母亲均为杂合型.结论 STR多态连锁分析不仅适用于常见缺失突变检测未发现缺失的DMD患者,同样适用于缺失型DMD患者的产前基因检测.     

全自动血红蛋白分析仪在地中海贫血筛查诊断中的应用

目的探讨采用高效液相色谱法（HPLC）的全自动血红蛋白分析仪在地中海贫血（简称地贫）筛查诊断中的应用。方法用全自动血红蛋白分析仪及其配套试剂对5738例受检样本进行血红蛋白分析,对筛查出的830例异常结果的样本采用多重聚合酶链反应（PCR）和反向斑点杂交法（RDB）进行地贫基因检测,比较其符合率。结果5738例受检者中,共筛查出830例异常,检出率为14．46％;其中,拟诊仪地贫480例,占57．83％;拟诊13地贫316例,占38．07％;拟诊B复合d地贫11例,占1．33％;检出异常区带HbH13例,HbE8例,HbQ2例,分别占1．57％、0．96％和0．24％。经地贫基因分析,确诊743例,确诊率为89．52％;其中,仅地贫413例,占55．59％,符合率为86．04％;13地贫313例,占42．13％,符合率为99．05％;B复合仪地贫17例,占2．29％,符合率为90．91％。结论采用HPLC技术的全自动血红蛋白分析仪对B地贫的诊断有良好的符合性,对仅地贫有一定的提示作用。可用于地贫的筛查诊断。