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1.
目的:观察转化生长因子-β(TGF-β)和表皮生长因子(EGF)对人分泌中期子宫内膜间质细胞(ESC)基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法:体外培养ESC,分离、纯化后的ESC以1×105个/孔接种于96孔板,加入含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液。24h后换无血清的DMEM/F12培养液,每孔200μL,分别加入TGF-β和EGF,终浓度均为2.5、5.0和10.0ng/mL,培养48h后通过ELISA法测培养液中MMP-9的含量。结果:与对照组比较,实验组随着TGF-β浓度的增加,ESC分泌的MMP-9明显下降(P〈0.05,P〈0.01);而随着EGF浓度的增加,ESC分泌的MMP-9则显著上升(P〈0.05,P〈0.01),且二者的变化具有剂量依赖性。结论:TGF-β和EGF可能通过调节人子宫内膜间质细胞MMP-9,而参与胚胎植入过程。  相似文献   

2.
目的 研究人正常早孕滋养层细胞与蜕膜细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)的表达特点,探讨子宫内膜蜕膜化进程中MMPs的变化及对胚胎着床的影响。方法 收集正常妇女分泌期子宫内膜及人正常早孕绒毛和相应蜕膜标本各5例,分别进行离体培养,鉴定其纯度在98%以上后,收集培养上清液,利用Luminex(LmnAvidin Beads)测定培养上清液中MMPs(MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9、MMP-12、MMP-13)蛋白表达的变化,分析MMPs在不同培养条件下的表达差异及表达之间的相关性。结果 ①在不同培养条件下,MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9均有表达.MMP-12及MMP-13分别在ESC及DSC中无表达,且MMP-8、MMP-12、MMP-13表达均低。②与子宫内膜细胞相比,MMP-1、MMP-3、MMP-7在DSC,EVCT中表达均降低,降低有显著性差异(P〈0.05),而MMP-2、MMP-8、MMP-9在DSC,EVCT中则显著升高,升高有显著性差异(P〈0.05)。且在蜕膜细胞中,MMP-1、MMP-3、MMP-2、MMP-7高表达尤为显著。③与蜕膜细胞相比,MMP-1、MMP-3、MMP-7在EVCT中表达显著降低(P〈0.05)。MMP-2、MMP-9、MMP-13在EVCT中升高有显著性(P〈0.05)。且在滋养层细胞中,MMP-2、-9高表达尤为显著。④MMPs之间的相关性:MMP-2与MMP-9相关关系显著(P〈0.05),且关系较密切(r=0.6645)。MMP-1,MMP-3,MMP-7两两间相关关系显著(P〈0.05),且关系密切(r〉0.7340)。其他MMP之间相关关系不显著。结论 首次利用Luminexx MAP方法多通量的检测到子宫内膜间质细胞、早孕蜕膜细胞与滋养层细胞的多种MMPs的表达,它们均可分泌多种MMP,但是不同种类组织细胞的表达量不同;MMPs可能通过调控子宫内膜蜕膜化及母胎界面间MMPs的变化而影响胚胎着床,为成功妊娠创造条件。  相似文献   

3.
目的:探讨子宫腺肌病患者在位子宫内膜、子宫内膜-肌层界面(endometrial—myometrial interface,EMI)基质金属蛋自酶-9(MMP-9)及其抑制物-1(TIMP—1)的表达及其生物学意义。方法:采用免疫组化SP方法对40例子宫腺肌病的子宫内膜(含部分肌层)和40例子宫肌瘤的子宫内膜(含部分肌层)的组织进行分析。结果:腺肌病组MMP-9的表达强度EMI处显著高于远肌层(P〈0.05)。EMI处MMP-9表达,腺肌病组显著高于对照组(P〈0.05)。EMI处TIMP-1在增生期和分泌期的表达,腺肌病组明显低于对照组(P〈0.05)。TIMP-1在EMI和远肌层的表达比较无显著差异(P〉0.05)。结论:子宫腺肌病组EMI处的内膜腺体中MMP-9的高表达,可使子宫内膜的侵蚀能力增强,可能参与子宫腺肌病的发生和发展。  相似文献   

4.
目的:探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF—α)和可溶性肿瘤坏死因子受体(soluble TNFRI,sTNFRI)对体外培养的子宫内膜异位症(Endometriosis)患者在位内膜基质细胞的影响,为子宫内膜异位症的生物学治疗提供新思路。方法:对EMS患者的在位子宫内膜基质细胞进行体外培养,分别用不同浓度的TNF—α(0、0.1、1.0、10.0和100.0ng/m1)或者同-浓度TNF—α(1ng/ml)培养不同时间(4、8、12、24、48和72h)或者TNF—α(1ng/m1)和sTNFRI(2μg/m1)对基质细胞进行刺激并收集细胞上清液,利用双抗体夹心ELISA检测细胞培养上清液中IL-6、基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases,MMP-3)的水平。结果:TNF-α可促进体外培养的EMS子宫内膜基质细胞IL-6、MMP-3的分泌,而且IL-6、MMP-3浓度与TNF—α之间存在剂量、时间依赖关系(P〈0.05),而sTNFRI具有抑制TNF—α的作用。结论:TNF—α在EMS的发病机制中发挥重要的作用,其对EMS患者子宫内膜基质细胞的促黏附、侵袭、增殖等作用可能是通过促进IL-6、MMP-3的分泌来完成的;sTNFRⅠ有望用于EMS生物学治疗。  相似文献   

5.
目的 研究CD82/KAI1对着床窗口期小鼠子宫基质细胞内整合素α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响.方法 采用基因工程技术,构建CD82/KAI1腺病毒;用免疫细胞化学技术观察妊娠小鼠子宫基质细胞感染CD82/KAI1腺病毒后,细胞内α、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin的表达变化情况.结果 ①构建的小鼠重组腺病毒的滴度达到6.5×1012pfu/ml,感染原代培养的小鼠子宫基质细胞48 h后,CD82/KAI1蛋白有明显表达.②妊娠4 d的小鼠子宫基质细胞中E-cadberin、β-catenin、α5、MMP-9均有表达,没有检测到β3的表达;对照组未妊娠小鼠细胞中均没有检测到E-cadherin、β-catenin、α5、MMP-9和β3的表达.③与导空腺病毒组相比,妊娠4 d的小鼠子宫基质细胞感染CD82/KAI1腺病毒后,β-catenin和MMP-9表达显著上升(P<0.05),α5表达显著下降(P<0.05),E-cadherin的表达量没有显著变化(P>0.05),未检测到β3的表达.结论 成功构建含小鼠CD82/KAI1全基因的重组腺病毒.胚胎植入前小鼠子宫基质细胞内整合素α5、MMP-9、E-cadherin和β-catenin的表达可能受CD82/KAI1的影响.  相似文献   

6.
目的 探讨肺组织内高水平的转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白对基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制物(TIMPs)表达的调节,以及MMPs/TIMPs表达紊乱与肺组织纤维化的关系.方法 8只TGF-β1转基因小鼠和8只正常对照小鼠在出生后8周经断头术处死,收集血浆及肺组织标本,测定血浆和肺组织中TGF-β1蛋白浓度,以及MMP-2、MMP-9、MMP-3、MMP-13、TIMp-1、TIMp-2和TIMP-3蛋白的表达,并通过Masson-Goldner染色法检测肺组织中胶原的沉积.结果 在转基因小鼠肺组织中,MMP-2的表达显著降低,TIMP-1、TIMp-2和TIMP-3的表达显著增加,并且转基因小鼠肺组织呈现明显纤维化.结论 转基因小鼠肺组织中高浓度的TGF-β1可能通过抑制MMP-2表达,以及增加TIMp-1、TIMp-2、TIMP-3表达,减少细胞外基质的降解,增加细胞外基质的沉积,促进肺纤维化的产生.  相似文献   

7.
目的 观察比较基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶抑制物(TIMPs)在异位、在位和正常子宫内膜中的表达,探讨其与子宫内膜异位症(内异症)的关系。方法应用免疫组化LSAB法和KS400图像分析系统,检测MMP-9和TIMP-3在26例卵巢子宫内膜异位囊肿患者的异位子宫内膜和其中15例在位子宫内膜中的表达,分析阳性细胞的分布规律,以20例正常子宫内膜作为对照。结果MMP-9和TIMP-3在正常和异位子宫内膜的腺上皮细胞、基质细胞中均有不同程度的表达。异位子宫内膜组织中MMP-9呈高表达状态,TIMP-3表达减少,与正常子宫内膜和在位内膜相比有显著差异(P〈0.05);在位子宫内膜与正常子宫内膜MMP-9和TIMP-3的表达无显著差异(P〉0.05)。结论提示异位内膜组织具有更强的侵袭力,其在子宫内膜异位症发病中起重要作用。  相似文献   

8.
观察不同浓度溪黄草黄酮(FRSH)对非酒精性脂肪肝纤维化小鼠的影响,并探讨初步机制。方法将小鼠随机分为5 组:对照组、模型组及FRSH 低、中、高剂量组(FRSH-L、FRSH-M、FRSH-H)。检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和谷氨酸氨基转移酶(AST)平;苏木精- 伊红染色法观察肝脏组织的病理状态;Western blot检测肝组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肝组织中转化生长因子-β(TGF-β)、过氧化物酶体增殖物活化受体-γ(PPARγ)mRNA 的表达。结果与模型组比较,FRSH 能够降低血清中ALT、AST 的含量,并改善肝组织的脂肪变性,减轻症、坏死程度;肝组织中TIMP-1 蛋白和TGF-β mRNA 表达降低,MMP-9蛋白和PPARγ mRNA表达增加。结论FRSH能抑制非酒精性脂肪性肝纤维化的发生、发展,可能与MMP-9、TIMP-1、TGF-β 及PPARγ 的表达相关。  相似文献   

9.
目的初步研究白介素-1β(IL-1β)对离体培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其特异性组织抑制物-3(TIMP-3)的影响。方法原代培养人分泌中期子宫内膜细胞,利用粘附式细胞仪570型,采用间接免疫荧光法检测IL-1β对内膜细胞分泌MMP-9和TIMP-3的影响。结果(1)MMP-9:空白对照组为1491.38±68.95,50U/ml组为1592.40±47.57,100U/ml组为1702.63±75.31,500U/ml组为1994.49±52.98,1000U/ml组为2347.58±45.87。随着IL-1β的浓度增加,原代培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌MMP-9表达量呈浓度依赖性显著升高(P<0.05);(2)TIMP-3:空白对照组为1643.31±61.29,50U/ml组为1597.27±49.07,100U/ml组为1443.93±81.23,500U/ml组为1343.28±54.80,1000U/ml组为1157.85±47.95。随着IL-1β的浓度增加,原代培养的分泌中期子宫内膜细胞分泌TIMP-3表达量呈浓度依赖性显著下降(P<0.05)。结论IL-1β通过促进MMP-9分泌,抑制TIMP-3分泌,使细胞外基质降解,有利于绒毛滋养层细胞侵入。  相似文献   

10.
目的 观察固本通络汤对糖尿病肾病大鼠(diabetic nephropathy,DN)转化生长因子-β1 (transforming growth factor β1,TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitors of metalloproteinases-1,TIMP-1)表达的影响.方法 采用单侧肾切除加链脲佐菌素制备DN模型,分为正常对照组、模型对照组、氯沙坦组和固本通络汤大、中、小治疗组,免疫组织化学法检测大鼠肾脏TGF-β1、MMP-9、TIMP-1的表达.结果 大、中剂量的固本通络汤能明显降低TGF-β1、TIMP-1的表达(P〈0.05),升高MMP-9的表达(P〈0.01).结论 固本通络汤可能通过抑制DN大鼠肾组织TGF-β1的表达,调节MMP-9、TIMP-1的平衡,发挥对DN大鼠的肾脏保护作用.  相似文献   

11.
目的通过不同浓度的IL-1β对小鼠胚胎体外发育的干预,探讨IL-1β在胚胎着床中的作用。方法将IL-1β稀释为1、10、100μg/L等浓度,研究其对2-细胞期小鼠胚胎囊胚形成率及囊胚孵出率的影响,并应用免疫组化方法检测不同浓度IL-1β对着床窗口期小鼠子宫内膜基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、细胞黏附分子-1(ICAM-1)蛋白表达的影响。结果经不同浓度的IL-1β干预后,各实验组培养72h的囊胚形成率明显高于对照组,差异均有显著性(χ2=21.050~25.441,P0.01),各实验组间比较差异无显著性(P0.05);IL-1β浓度为1、10μg/L组培养96h的囊胚孵出率明显高于对照组,差异均有显著性(χ2=6.705、7.192,P0.01)。与对照组比较,各实验组MMP-9、ICAM-1蛋白表达量明显增加,差异有显著性(F=149.854、318.097,P0.01)。结论合适的IL-1β浓度有助于体外培养小鼠胚胎着床。  相似文献   

12.
目的有研究提示基质金属蛋白酶(martix metalloproteinase,MMP)及其抑制物金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1在细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解过程中起着重要的作用,但MMP、TIMP和TGF-β1在胎膜早破(premature rupture of membrane,PROM)中的作用机制尚不明了。文中的研究目的为探讨PROM患者胎盘胎膜组织中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1表达变化及意义。方法采用免疫组织化学SP法和Western blot印迹杂交法分别检测足月未临产择期剖宫、足月自然临产阴道分娩和足月PROM各28例孕妇分娩后的胎盘胎膜组织中MMP-9,TIMP-1和TGF-β1表达变化。结果免疫组化结果显示:①未临产组胎膜组织中MMP-9表达强度最低(P〈0.05),临产组次之(P〈0.05),PROM组最高(P〈0.05),胎盘中MMP-9表达趋势亦同;②TIMP-1和TGF-β1表达趋势与MMP-9相反,未临产组胎膜组织中TIMP-1和TGF-β1表达强度最高(P〈0.05),临产组次之(P〈0.05),PROM组最低(P〈0.05),胎盘中TIMP-1和TGF-β1亦然。Western blot结果显示:①未临产组胎膜组织中MMP-9表达量最低(P〈0.05),临产组次之(P〈0.05),PROM组最高(P〈0.05),胎盘中MMP-9表达趋势亦同;②未临产组胎膜组织中TIMP-1和TGF-β1表达量最高(P〈0.05),临产组次之(P〈0.05),PROM组最低(P〈0.05),胎盘中TIMP-1和TGF-β1亦然。胎盘和胎膜上TGF-β1表达水平与TIMP-1表达呈正相关,与MMP-9表达呈负相关。结论胎盘胎膜上TGF-β1表达降低,可通过调节MMP-9和TIMP-1的表达引起MMP-9/TIMP-1之间的比例失衡,使胶原降解加速,胎膜强度与韧性下降,从而导致PROM的发生。  相似文献   

13.
目的 研究转化生长因子β1(TGF-β1)对培养的人视网膜色素上皮(HRPE)细胞分泌基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的调节作用。方法3~4代培养的人视网膜色素上皮细胞,经不同浓度的TGF-β1(0.01、0.1、1、10ng/ml)处理,36h后收集条件培养基,或经TGF-β1作用不同时间(24、36、48h)后收集条件培养基,采用明胶酶谱分析方法定量检测HRPE细胞上清液中MMP-2的活性水平。结果培养的HRPE细胞上清液中可检测到MMP-2,经TGF-β1处理后,能显著上调培养基中MMP-2的分泌。TGF-β1的浓度从0.01~10ng/ml,MMP-2的分泌活性有明显的剂量依赖性,同时MMP-2的分泌活性随TGF-β1作用时间延长而增强。结论培养的HRPE细胞能分泌MMP-2,TGF-β1能上调HRPE细胞中MMP2的分泌。MMP-2分泌增加,可能在玻璃体视网膜的疾病中有利于HRPE细胞的迁移。  相似文献   

14.
目的研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制物-1(TIMP-1)与子宫内膜异位症(EMs)的相关性。方法将EMs 15例轻度和36例重度患者分别作为观察组,38例卵巢畸胎瘤患者作为对照组。通过ELISA法测定腹水中MMP-9及TIMP-1值,比较各组两者及其比值的差异。结果与对照组比较,EMs轻度组MMP-9、TIMP-1差异无统计学意义(P〉0.05);EMs重度组MMP-9、TIMP-1差异有统计学意义(P〈0.05);3组的MMP-9/TIMP-1差异均有统计学意义(P〈0.05);EMs轻度组与重度组相比较,MMP-9差异有统计学意义(P〈0.05),TIMP-1差异无统计学意义(P〉0.05)。结论随着疾病的加重,有MMP-9升高、TIMP-1降低、MMP-9/TIMP-1比值升高的趋势,MMP-9、TIMP-1与子宫内膜异位症发生、发展有相关性,特别是两者的比值,具有重要诊断价值。  相似文献   

15.
采用实时荧光PCR和激光共聚焦技术研究降压益肾颗粒(JYYS)对自发性高血压大鼠(SHR)肾组织细胞外基质降解系统转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅳ型胶原蛋白(COLⅣ)、基质金蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。以JYYS和苯那普利为研究对象,考察不同剂量JYYS和苯那普利对SHR肾脏TGF-β1、COLⅣ、MMP-9及其抑制物TIMP-1 mRNA表达和蛋白表达的差异。结果表明:JYYS长期给药可降低TIMP-1、TGF-β1及COLⅣ转录和蛋白水平,上调肾组织局部MMP-9mRNA和蛋白水平,从而纠正MMP-9/TIMP-1失衡,促进细胞外基质的降解,减少细胞外基质的积聚,产生肾脏保护作用。  相似文献   

16.
目的探讨基质金属蛋白酶及其抑制剂在子宫内膜异位症发生及发展中的作用及临床意义。方法采用免疫组化SP法分别测定MMP-3、MMP-9在卵巢子宫内膜异位症患者的异位内膜30例(A组)及其在位内膜16例(B组),子宫腺肌症患者的异位内膜40例(c组),子宫肌瘤患者的子宫内膜20例(正常对照D组)的表达强度。结果卵巢子宫内膜异位症患者和子宫腺肌症患者的异位内膜中MMP-3、MMP-9的表达强度明显高于正常子宫内膜(P〈0.05);卵巢子宫内膜异位症患者和子宫腺肌症患者的异位内膜中MMP-3、MMP-9的表达强度无明显差异(P〉0.05);MMP-3、MMP-9,在卵巢子宫内膜异位症患者的在位内膜中的表达与在正常对照组子宫内膜中的表达无明显差异。结论MMP-3、MMP-9可能参与子宫内膜异位症和子宫腺肌症的发生和发展。  相似文献   

17.
目的:探讨膀胱移行细胞癌组织基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2、MMP-9)和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)的表达和相互关系。方法:采用免疫组织化学sP法检测48例膀胱移行细胞癌组织及16例正常膀胱黏膜组织MMP-2、MMP-9和CD147的表达情况,比较不同临床、病理特征膀胱移行细胞癌患者CD147和MMP-2、MMP-9的表达及其相关性。结果:膀胱移行细胞癌组织中MMP-2、MMP-9和CD147的阳性表达率分别100%、95.8%、95.8%,均明显高于正常膀胱黏膜组织(P均〈0.05);其阳性表达与肿瘤的病理分级、临床分期呈正相关(P〈0.05),与临床预后无显著相关(P〉0.05);膀胱移行细胞癌组织CD147与MMP-2、MMP-9多同时表达,呈现出显著正相关,相关系数分别为0.784、0.853(P〈0.001)。结论:MMP-2、MMP-9、CD147在膀胱移行细胞癌发展中可能起着重要的作用。MMP-2和MMP-9的分泌增加可能与CD147的诱导促进作用有关系。  相似文献   

18.
MMP-9和TIMP-1在不明原因不孕者子宫内膜的表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)在不明原因不孕、正常早孕蜕膜组织和正常子宫内膜中的表达,探讨其与不明原因不孕关系。方法应用免疫组化S—P法,检测MMP-9和TIMP-1在30例不明原因不孕症患者的种植窗期子宫内膜、20例早孕蜕膜组织和20例正常子宫内膜中的表达情况。结果MMP-9和TIMP-1在宫内早孕蜕膜组织表达程度最高,在正常予宫内膜中表达较高,而在不明原因不孕子宫内膜表达水平显著降低,MMP-9和TIMP-1在三组之间比较,差异均有统计学意义(P均〈0.05)。结论MMP-9和TIMP—I在不明原因不孕子宫内膜中呈低水平表达,且无分泌期表达水平的增强,这可能会导致子宫内膜接受性的降低,使着床失败引起不孕。  相似文献   

19.
目的采用转化生长因子-β1(TGF-β1)转基因小鼠,研究高水平的TGF-β1对巩膜厚度以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)水平的影响,以探讨TGF-β在巩膜重塑中的作用及可能的机制。方法应用Alb/TGF-β1(Cys^223,225Ser)转基因小鼠模型作为实验对象,同窝出生的C57BL/6J野生型小鼠作为对照组。ELISA法测定血浆TGF-β1浓度。Western blot法测定巩膜组织TGF-β1、MMP-2及TIMP-2浓度,应用Whatman Biometria凝胶分析软件分析Western blot结果。对全眼球经视神经乳头正中石蜡切片进行数码图像分析测定后极部巩膜厚度。结果TGF-β1转基因小鼠血浆TGF-β1浓度约为野生型对照小鼠的1.68倍(P〈0.01),转基因小鼠巩膜组织中TGF-β1的表达水平是野生型小鼠的2.68倍(P〈0.01),MMP-2的表达水平和野生型小鼠差异无显著性意义,TIMP-2的水平是野生型小鼠的3.15倍(P〈0.01),转基因小鼠后极部巩膜厚度较野生型小鼠显著增厚(P〈0.01)。结论TGF-β1浓度增高会导致巩膜增厚。TGF-β1通过升高TIMP-2的水平抑制MMP-2的活性,从而抑制胶原的降解导致巩膜增厚。  相似文献   

20.
目的:观察转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对绒毛膜癌JEG-3细胞系基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinases,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白表达的影响。方法:体外培养人绒毛膜癌JEG-3细胞,分别给予不同浓度及不同作用时间的TGF-β1进行诱导,Western Blotting法检测MMP-9、TIMP-1蛋白的表达变化。结果:与对照组相比,100、200μg/L TGF-β1作用后,检测各组细胞MMP-9及TIMP-1蛋白的相对表达量均增加(P〈0.01);与0h比较,12、24、48、72h各组细胞MMP-9及TIMP-1蛋白的相对表达量均增加(P〈0.05),且各组MMP-9/TIMP-1大于1。结论:绒癌的浸润转移与MMP-9及TIMP-1的表达变化密切相关。  相似文献   

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