热休克蛋白27通过降低内质网应激抑制硼替佐米诱导的骨髓瘤细胞凋亡

目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)细胞热休克蛋白27(HSP27)表达对硼替佐米诱导凋亡的影响及机制。 方法 人MM细胞株U266细胞暴露于硼替佐米,实时荧光定量PCR检测HSP27 mRNA,蛋白质印迹法检测HSP27、磷酸化-HSP27(p-HSP27)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3/9(cl-Caspase 3/9)表达。收集12例初治和10例复发MM患者骨髓瘤细胞,荧光原位杂交法检测染色体异常,比较HSP27 mRNA和蛋白表达差异。将U266细胞分为观察组和对照组,分别转染HSP27-siRNA和NC-siRNA,流式细胞术检测硼替佐米诱导的细胞凋亡率。慢病毒介导HSP27基因在U266细胞过表达,蛋白质印迹法检测硼替佐米诱导的GRP78和cl-Caspase 3表达。 结果 硼替佐米暴露显著上调U266细胞HSP27 mRNA和蛋白的表达(P<0.01),上调GRP78和p-PERK表达(P<0.05),活化Caspase-3和Caspase-9(P<0.05); 4-苯基丁酸预处理显著抑制硼替佐米诱导的Caspase-3和Caspase-9活化(P<0.01)。复发MM患者HSP27 mRNA和蛋白的表达显著高于初治MM患者(P<0.01)。沉默HSP27表达显著增加硼替佐米诱导的U266细胞凋亡(P<0.01)。慢病毒介导HSP27过表达显著抑制硼替佐米诱导的GRP78表达和Caspase-3活化(P<0.01)。 结论 HSP27负反馈抑制内质网应激,减少硼替佐米诱导的MM细胞凋亡。     

热休克蛋白27在原发性肺癌中的表达

目的 :探讨HSP2 7在原发性肺癌中的表达与临床和病理的关系。方法 :采用免疫组织化学技术 ,检测HSP2 7在 4 0例肺癌和 2 3例肺的良性病变中的表达情况。结果 :HSP2 7在癌组织中的表达阳性率为 95 % (38/4 0 )。HSP2 7在肺癌中表达率较高 (P <0 .0 5 ) ,在癌旁组织、良性病变的肺泡上皮和间质中未见表达 ,其表达与淋巴结转移无关。结论 :HSP2 7阳性反应的强弱与肺癌的组织学类型密切相关 ,HSP2 7在肺癌组织中的表达 ,可以判定其增殖分化的程度 ,为临床判断预后及疗效 ,制定治疗方案提供了重要参考指征     

Rb蛋白在多发性骨髓瘤细胞中的表达及临床意义

目的：探讨多发性骨髓瘤（MM）细胞Rb蛋白的表达与临床化疗的关系,方法：采用免疫细胞化学S－P法,借助抗Rb蛋白单抗,对47例多发性骨髓瘤患者进行了检测,结果：47例中有11例（11／47）呈阴性表达,阴性表达率30．6％,免疫人型各亚型之间差异显著无显著性（P＞0．05）,所有患者采用常规化疗方案化疗个疗程,Rb蛋白阴性组化疗有效率为36．4％,而Rb蛋白阳性组总有效率为77．9％,两组比较差异显著（P＜0．05）,多变量分析显示,除去血清β2－微球蛋白,乳酸脱氨酶,肌酐三因素对化疗结果的影响,Rb蛋白阴性可作为影响化疗疗效的独立负性因素,结论：Rb蛋白阴性表达在多发性骨髓瘤细胞中较易见,且Rb蛋白不表达者对化疗疗效差。     

骨髓活检在多发性骨髓瘤诊断中的价值

50年代末 ,骨髓活检开始应用于临床 [1 ] ,80年代后国外多数血液病机构均常规进行骨髓活检与涂片标本的二重检查以诊断血液病 [2 ] 。而骨髓瘤细胞 (MMC)的检出是诊断多发性骨髓瘤 (MM)的主要诊断依据之一。我院 1996年 1月至 1998年 10月对 18例 MM在瘤细胞的检出率及细胞定性方面 ,进行骨髓切片与涂片对比观察 ,现报告如下。1　资料和方法1.1　一般资料 :按美国西南肿瘤组诊断标准 [3 ] ,诊为 MM的初治病例 18例 ,其中男 11例 ,女 7例 ,年龄 46～ 5 8岁 ,平均年龄 5 1岁 ,病程最短 2个月 ,最长 36个月 ,平均 16个月。1.2　检测方法 :…     

热休克蛋白90在系统性红斑狼疮外周血单个核细胞中的表达

目的探讨热休克蛋白90(HSP90)在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用。方法使用免疫组化SP法和细胞原位杂交技术检测45例SLE患者外周血单个核细胞(PBMC)中HSP90蛋白、HSP90mRNA的表达情况,另取15例健康血样进行正常对照。结果45例SLE患者PBMC中HSP90蛋白阳性表达17例(37.78%),15例正常对照组中未见明显阳性细胞。半定量分析SLE活动组PBMC中HSP90蛋白表达的平均吸光度(A)值为(0.412±0.230),显著高于正常对照组(0.117±0.033)和SLE非活动组(0.187±0.019)(均P<0.01);SLE非活动组也显著高于正常对照组(P<0.05)。45例SLE患者中HSP90mRNA阳性表达20例(44.44%),15例正常对照组中未见阳性细胞。半定量分析SLE活动组PBMC中HSP90mRNA表达的平均A值为(0.350±0.225),显著高于正常对照组(0.114±0.009,P<0.01)和SLE非活动组(0.221±0.040,P<0.05);SLE非活动组与正常对照组比较也显著升高(P<0.05)。SLE中抗心磷脂抗体阳性患者HSP90水平明显高于阴性患者。结论SLE患者中存在HSP90的过度表达,且在抗心磷脂抗体阳性的患者中尤其明显,并与疾病的活动性相关。提示HSP90可能在SLE的发病机制中起着重要作用。     

热休克蛋白27与P53在宫颈癌中的表达及临床意义

目的 探讨热休克蛋白27（HSP27）在宫颈鳞癌发生、发展中的表达及其与抑癌基因P53蛋白表达的关系。方法 应用免疫组化SP法观察80例宫颈鳞癌和30例宫颈上皮肉瘤样病变（CIN）组织中HSP27蛋白、P53的表达,并分析其相互关系。结果 HSP27蛋白在宫颈鳞癌、CIN组织、正常宫颈组织的阳性表达率分别为69．5％、84．7％和10．0％,HSP27蛋白的表达与宫颈鳞癌病理分级和临床分期负相关（P〈0．05）,并与P53的表达呈正相关。结论 HSP27参与宫颈鳞癌早期的发生发展,并与P53蛋白的表达密切相关。     

47例多发性骨髓瘤临床分析

４７例多发性骨髓瘤临床分析李振玲蒋玉玲（血液科）１临床资料１９８４年１１月～１９９５年１２月收治多发性骨髓瘤（ｍｕｌｔｉｐｌｅｍｙｅｌｏｍａ，ＭＭ）４７例，其中男３５例、女１２例；年龄３１岁～８１岁，平均５５岁。＞４０岁者４３例（９１５％），高峰年...     

热休克蛋白27/转录激活因子5复合物在高糖诱导足细胞凋亡中的意义

目的研究足细胞内热休克蛋白27(HSP27)是否与转录激活因子5(ATF5)形成复合物及其在足细胞凋亡中的意义。方法高糖刺激体外培养的小鼠肾小球足细胞系建立细胞凋亡模型,应用Hochest染色、流式细胞技术测定细胞凋亡。应用Western印迹分析技术检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径的活化,应用免疫共沉淀技术检测HSP27和ATF5形成复合物的变化,阻断实验观察MAPK信号途径对高糖调节足细胞HSP27与ATF5形成复合物以及足细胞凋亡的影响。结果成功建立了高糖刺激足细胞凋亡的模型,30mmol/L高糖刺激48h凋亡率(27.2%±8.9%)显著高于5.5mmol/L正常糖(对照)48h组(10.6%±2.7%,P<0.05)。正常糖(对照)组细胞HSP27与ATF5即可形成复合物,而在高糖刺激12hHSP27与ATF5形成的复合物明显增加为正常糖组的195%±36%(P<0.05)。高糖刺激30min即可使细胞外信号调节激酶(ERK1/2)和p38活化。进一步阻断实验显示ERK1/2活化抑制剂可以减弱高糖刺激引起HSP27和ATF5形成复合物的效应(PD98059+高糖组为109%±19%,高糖组211%±46%,P<0.05),同时加重高糖诱导细胞凋亡(PD98059+高糖组凋亡率为51%±4%,高糖组凋亡率为27%±9%)(P<0.05)。p38活化抑制剂不影响高糖刺激引起的HSP27和ATF5形成复合物(SB20358+高糖组为290%±43%,高糖组为231%±20%,P>0.05),但可减轻高糖诱导细胞凋亡(SB20358+高糖组凋亡率为16%±6%,高糖组凋亡率为27%±9%)(P<0.05)。结论高糖依赖ERK1/2信号通路而不是p38信号通路刺激足细胞HSP27与ATF5形成复合物的增加,蛋白复合物可能在高糖诱导的足细胞凋亡中起保护作用。     

M蛋白检测在诊断多发性骨髓瘤中的临床应用价值

目的探讨M蛋白定量分析在多发性骨髓瘤（MM）的诊断和治疗中的应用。方法回顾性分析49例MM患者的临床资料与M蛋白之间的关系,并进行统计学分析。结果初治时IgG、IgA型及轻链型M蛋白的量与血红蛋白、血小板计数均呈负相关,M蛋白的量与初治时患者的骨质破坏程度无明显相关;肾功能不全的发生率IgG型低于IgA型及轻链型,三者之间相比差异有统计学意义（p〈0.05）;化疗2个疗程后M蛋白的下降与初治时M蛋白的量无明显相关。结论M蛋白是MM诊断和临床分期的重要指标,也是评价治疗是否有效的标准之一。     

多发性骨髓瘤患者骨髓骨硬化蛋白表达及其临床意义分析

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓上清液骨硬化蛋白(sclerostin)的表达水平及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验法定量检测sclerostin的水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨髓单核细胞(BMMNC)sclerostin基因的表达。结果 MM组sclerostin水平为(0.54±0.21)pg/mL,明显高于对照组(0.31±0.06)pg/mL,差异有统计学意义(t=5.67,P<0.01);复发难治组sclerostin水平为(0.65±0.17)pg/mL,明显高于对照组及初诊组(0.47±0.21)pg/mL,差异有统计学意义(t=8.44、3.27,P<0.01),RT-PCR也证实了部分MM患者的BMMNC能表达sclerostin基因;MM组sclerostin水平与碱性磷酸酶(ALP)呈负相关(r=-0.379,P=0.005),与校正血钙、骨质损害评分、血清β2-微球蛋白、M蛋白的比例、临床ISS分期呈正相关;中位随访时间29(6~65)个月,低sclerostin组中位生存期为48(6~65)个月,高sclerostin组中位生存期为24(6~52)个月,二者比较差异有统计学意义(χ2=12.74,P<0.01)。结论骨髓sclerostin水平可反映MM患者骨质破坏、成骨受抑程度及机体瘤负荷水平,并能在一定程度反映患者的中位生存期。     

多发性骨髓瘤32例骨髓细胞学诊断及分型

目的:探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)骨髓细胞学诊断和分型以及其他实验室相关指标特征,提高对MM的认识。方法:对32例MM患者的实验室检查相关资料进行回顾性分析。结果:MM患者可引起贫血、血涂片中红细胞的分布异常、红细胞沉降率(ESR)加快、血清球蛋白含量显著增高、白蛋白/球蛋白比值显著降低、蛋白尿等,根据骨髓片中瘤细胞形态可分为浆细胞型、幼浆细胞型、原浆细胞型和网状细胞型。结论:骨髓检查对MM具有特异性诊断价值,血常规检查、血涂片红细胞分布、ESR、血清蛋白测定等对MM的协助诊断具有重要意义,二者结合能够提高MM诊断的准确性,为临床提供可靠依据。     

骨髓活检及涂片对多发性骨髓瘤的诊断价值的比较

目的探讨骨髓涂片及活检对多发性骨髓瘤（MM）的诊断价值。方法同步观察302例MM患者骨髓涂片和活检塑料包埋切片。观察骨髓增生程度、浆细胞形态、增殖模式及浸润程度、网硬蛋白积分。结果MM患者骨髓造血组织在骨髓活检中观察到的增生程度明显高于骨髓涂片,两者差异有统计学意义（P〈0.05）。99例患者（32.7%）骨髓瘤负荷处于Ⅰ期,140例（46.4%）处于Ⅱ期,63例（20.9%）处于Ⅲ期。骨髓切片中浆细胞以簇片-间质型、结节-间质型、结节型及塞实型为主,以结节状浆细胞瘤出现为阳性诊断标准,其敏感性273例（90.4%）明显高于涂片中浆细胞〉15%的指标（70.5%）。136例（45.0%）显示骨髓涂片与活检切片内浆细胞的浸润度相符,109例（36.1%）患者的骨髓涂片浆细胞浸润度较活检低,57例（18.9%）患者的骨髓涂片浆细胞浸润度较活检高。骨髓涂片中双核、多核及火焰型浆细胞,以及浆细胞胞浆中出现Auer氏小体、鲁氏小体对诊断MM有重要的参考价值。结论 骨髓活检能准确反映骨髓组织的增生程度、浆细胞浸润情况及增殖模式、纤维增生程度,对MM的诊断及鉴别诊断有较高价值;骨髓涂片典型的浆细胞形态对确诊MM有重要作用,骨髓涂片结合骨髓活检能提高MM诊断的准确率,减少误诊。     

99mTc-MDP骨显像对多发性骨髓瘤骨病的诊断价值

目的:探讨99mTc-MDP骨显像对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)骨病的诊断价值?方法:回顾分析了83例初诊的MM患者,均行全身99mTc-MDP骨显像,以X线检查部位为限定范围,与相应部位的骨显像结果进行比较分析?结果:99mTc-MDP骨显像阳性率为88.0%(73/83例),X线检查阳性率为73.3%(55/75例),低于骨显像的阳性率,但同时行头颅?胸片?腰椎及骨盆X线检查患者的X线检查阳性率与骨显像检查无显著差异(P=0.726)?99mTc-MDP骨显像对肋骨病变的阳性率高于X 线(P < 0.01),X线对头颅?骨盆病灶阳性率高于骨显像(P < 0.01)?结论:99mTc-MDP骨显像与多部位的X线检查总的敏感性相似,但骨显像对肋骨病灶的敏感性优于X线,而X线则对检测头颅?骨盆病变更敏感,故两种检查方法相互结合,对不相符部位进一步行CT/MRI 验证是提高MM骨病检出率的重要途径?     

Peripheral blood and bone marrow lymphocyte subsets in patients with multiple myeloma

Summary A panel of monoclonal antibodies (McAb) from the Wu series was used to characterize lymphocyte subsets of peripheral blood (PB) from 9 patients with multiple myeloma (MM) by means of indirect immunofluorescence assay. In 7 of these patients bone marrow (BM) cells were also studied. Abnormal distribution of T lymphocyte subsets was observed in these patients, and the alterations were quite similar in both PB and BM. A significant increase in the proportion of WUT ₈ ⁺ cells (P<0.00l) and a reduced WuT₄/WuT₈ ratio (P<0.001) were found in patient group. In both PB and BM of patients, WuT ₁₀ ⁺ cell counts were significantly higher than normal (P<0.00l). There was a good correlation between BM WuT ₁₀ ⁺ cells and BM myeloma cells (r= 0.76, P<0.05), whereas no correlation was found between PB WuT ₁₀ ⁺ cells and BM myeloma cells. The significance of abnormal T-cell subset distribution and elevated WuT ₁₀ ⁺ cells in MM is discussed.     

HSP90抑制剂对人多发性骨髓瘤细胞增殖及HSP90蛋白表达的影响

目的 探讨HSP90抑制剂17-AAG对人多发性骨髓瘤细胞增殖及HSP90蛋白表达的影响. 方法 采用MTT法检测HSP90抑制剂对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖能力的影响;采用Western blot检测不同浓度的HSP90抑制剂17-AAG(0.001,0.01,0.1,1.0,10.0 μmol/L)对人多发性骨髓瘤细胞中HSP90蛋白表达水平的影响. 结果 HSP90抑制剂17-AAG对人多发性骨髓瘤细胞株U266细胞有剂量依赖性的增殖抑制作用(P＜0.05),无时间依赖性的增殖抑制作用(P＞0.05).随着药物浓度的增加,HSP90蛋白水平的表达也逐渐下降. 结论 HSP90抑制剂能剂量依赖性抑制人多发性骨髓瘤细胞增殖能力,同时下调人多发性骨髓瘤细胞株U266细胞中HSP90蛋白水平的表达.     

HSP90抑制剂对人多发性骨髓瘤细胞增殖及HSP90蛋白表达的影响

目的：探讨HSP90抑制剂17-AAG对人多发性骨髓瘤细胞增殖及HSP90蛋白表达的影响。方法采用MTT法检测HSP90抑制剂对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖能力的影响;采用 Western blot检测不同浓度的 HSP90抑制剂17-AAG (0.001,0.01,0.1,1.0,10.0μmol/L)对人多发性骨髓瘤细胞中HSP90蛋白表达水平的影响。结果 HSP90抑制剂17-AAG对人多发性骨髓瘤细胞株U266细胞有剂量依赖性的增殖抑制作用(P<0.05),无时间依赖性的增殖抑制作用(P>0.05)。随着药物浓度的增加,HSP90蛋白水平的表达也逐渐下降。结论 HSP90抑制剂能剂量依赖性抑制人多发性骨髓瘤细胞增殖能力,同时下调人多发性骨髓瘤细胞株U266细胞中HSP90蛋白水平的表达。     

单光子发射计算机断层扫描全身骨显像对多发性骨髓瘤的诊断价值

目的 探讨单光子发射计算机断层扫描(SPECT)全身骨显像对多发性骨髓瘤(MM)的诊断价值.方法 对50例临床确诊的MM患者行SPECT及X线平片检查,将二者检测结果进行对比分析.结果 50例患者共207个病灶中,SPECT阳性检出率为80.19%,X线平片阳性检出率为60.87%,两种检查方法的检测结果比较,差异有统计学意义(χ2=85.27,P＜0.01).核素显像对肋骨病灶的显示较X线更敏感(χ2=29.93,P<0.05),而颅骨病变则更适合行X线检查(χ2=27.84,P<0.01).结论 SPECT全身骨显像对MM的诊断及疗效的监测具有较高的临床应用价值.     

骨髓活检塑包法在多发性骨髓瘤诊断中的价值

目的了解骨髓活检在多发性骨髓瘤诊断与鉴别诊断中的价值。方法运用塑料包埋切片技术观察32例多发性骨髓瘤患者的骨髓象表现,同时与骨髓涂片进行比较。结果多发性骨髓瘤骨髓切片中浆细胞以结节状和片状浸润为主,这类浸润方式对多发性骨髓瘤诊断的敏感性(90.6%)明显高于涂片中浆细胞>15%的指标(65.6%)。切片中骨髓增生程度也明显高于涂片。结论骨髓活检塑包切片法更能正确反映骨髓组织的真实情况,对多发性骨髓瘤的诊断、疗效判断方面的价值优于涂片。