一种新的脂蛋白脂肪酶基因突变（C^56→T）

目的：筛查国人（天津地区）脂蛋白脂肪酶基因突变情况，并探讨其对血脂水平的影响。方法：利用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术，对386例患者（血脂正常组278例，血脂异常组108例）的脂蛋白脂肪酶基因进行突变筛查，对可疑突变的扩增样品进行DNA序列测定。结果：在386例样本中，检出1例外显子3 C^56→T（Leu^103→Leu）同义突变杂合子。结论：新LPL突变（C^56→T）的发现，对进一步阐述IJPL结构与功能的关系有重要的参考价值。     

脂蛋白脂肪酶基因突变的研究

目的：筛查国人脂蛋白脂肪酶(LPL)基因的突变，并探讨其与高甘油三酯血症的关系。方法：对高甘油三酯血症组(48例)和正常甘油三酯对照组(121例)的各扩增片段进行分析，电泳图谱异常者进行PCR产物测序。对于频率较高的多态性位点，引入限制性核酸内切酶位点利用PCR-RFLP进行鉴定。结果：在高甘油三酯血症人群中，检出2例内含子3受位剪接点上游6bp的C→T转换的突变杂合子，1例外显子5Pm^207→Leu突变杂合子，在全部样品中检出1例Ser^447→stop突变纯合子，50例Ser^447→stop杂合子。结论：天津地区人群中存在着LPL基因突变，除Ser^447→stop外，内含子3和外显子5的突变多与高甘油三酯血症相关，可能是高甘油三酯血症的遗传易感因子。     

脂蛋白脂肪酶外显子9基因突变研究

目的 :筛查国人脂蛋白脂肪酶 (LPL)外显子9基因突变和Ser447→stop突变频率 ,并探讨该突变对血脂水平的影响。方法 :依血脂测定结果 ,将169例分为高甘油三酯血症组(HTG组 ) ,48例和正常甘油三酯组(对照组 )121例 ,利用聚合酶链反应 -单链构象多态性和聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析技术对待测人群的LPL基因外显子9及其相邻内含子区域进行突变筛查 ,并对典型单链构象电泳图谱携带者进行PCR产物测序。结果 :在169例中检出1例Ser447→stop突变纯合子 ,50例Ser447→stop杂合子 ,未检出其它位点的突变 ;HTG组的Ser447→stop突变检出率 (25.0 % ,12/48)明显低于对照组 (31.4 % ,38/121) ,HTG组的Stop447 等位基因频率(12.5% )明显低于对照组 (16.5% ),两组比较差别均有统计学意义(P<0.01)。结论 :我国人群中LPL外显子9突变种类单一 ,Ser447→stop是一高频率的多态性位点 ,Stop447等位基因可能有轻微的降低血浆甘油三酯的作用。     

线粒体tRNALeu(UUR)nt3256C→T突变与2型糖尿病

目的 了解线粒体tRNALeu(UUR)基因mt3256C→T突变在河南地区汉族2型糖尿患者群中的发生率及其与糖尿病的关系.方法 应用PCR-限制性片断长度多态性技术结合直接测序方法对随机抽取的无亲缘关系的138例2型糖尿病患者及104例正常对照者进行线粒体基因tRNA<'Leu(UUR)>mt3256C→T突变的筛查.结果 2型糖尿病组和正常对照组均未发现tRNALeu(UUR)mt3256C→T突变.结论 线粒体tRNALeu(UUR)基因mt3256C→T突变可能不是线粒体糖尿病发病的原因.     

脂蛋白脂肪酶基因Ser447Stop多态性与缺血性脑血管病的关系

目的探求中国人群中脂蛋白脂肪酶(LPL)基因SerStop多态性与缺血性脑血管病(ICVD)的相关性。方法收集112例ICVD患者(短暂性脑缺血发作36例,脑梗死76例)和105名非ICVD患者或健康人为对照,用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)的方法来确定其基因型。结果ICVD组和对照组的平均年龄及性别构成没有明显差别。高血压、糖尿病、高血脂和吸烟史等危险因素在ICVD组均明显高于对照组(P值均小于0.05)。ICVD组和对照组的突变+突变纯合子基因型频率分别为0.161和0.391。ICVD组的突变+突变纯合子基因型频率显著低于对照组(P=0.002,OR3.3,95%,CI1.1～7.8)。ICVD亚组间的分析显示,短暂性脑缺血发作与对照组之间突变+突变纯合子基因型频率无明显差别,而脑梗死组与对照组则有显著性差异。结论脂蛋白脂肪酶基因Ser447Stop多态性与ICVD特别是脑梗死有一定的相关性,是缺血性脑血管疾病的一个保护性因素。     

脂蛋白脂肪酶在神经系统研究进展

脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase, LPL)是脂质和脂蛋白代谢的关键酶。LPL主要水解富含甘油三酯脂蛋白,为代谢组织提供游离脂肪酸(free fatty acid, FFAs)。LPL是脂蛋白和细胞表面脂蛋白受体的分子桥梁,促进脂蛋白的摄取。最近研究表明,LPL在多种组织中广泛表达。大脑中LPL有多种生理功能,可以调节大脑脂质代谢、能量平衡,与阿尔兹海默症密切相关。本文主要综述LPL在神经系统最新研究进展,为神经系统相关疾病提供治疗和预防新靶点。     

天津地区汉族人线粒体ND1基因突变与2型糖尿病的关系

目的了解线粒体NADH脱氢酶复合物亚单位1(ND1)基因中3 316位点G→A突变和3 394位点T→C突变,在天津地区汉族2型糖尿病(DM)患者中的情况.方法对随机收集的无血缘关系的300例2型DM患者进行研究,同时选择280例无DM家族史的糖耐量正常者作为对照组,用聚合酶链反应扩增、限制性内切酶Hae Ⅲ消化进行点突变筛选.结果2型DM组中3 316 G→A突变占2.7%(8/300),3 394 T→C突变占4.0%(12/300);而对照组中未发现3 316位点突变,3 394位点突变占0.71%(2/280),组间比较均有显著性差异(P＜0.05).结论线粒体DNA ND1基因中3 316 G→A突变和3 394 T→C突变是天津地区汉族人2型糖尿病的潜在致病基因.     

不同血液净化方式对尿毒症患者血清脂蛋白和炎性因子的影响

目的通过监测尿毒症患者血液透析(HD)、血液透析灌流(HDP)、血液透析滤过(HDF)治疗前后血清脂蛋白及相关炎症因子指标的变化,探讨三种不同血液净化方式对血清脂蛋白和炎性因子的影响。方法将48例尿毒症患者随机分为HD、HDP、HDF3组,分别于血液净化前、血液净化后4个月,检测血浆脂蛋白(a)[LP(a)]、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、载脂蛋白B100(ApoB100)、载脂蛋白A1(ApoA1)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、脂蛋白酯酶(LPL)指标。结果 HD组血清HDL、LDL、ApoB100、ApoA1、LPL浓度HD前后无变化,LP(a)、CRP、TNF-α浓度升高;HDP组血清LP(a)、HDL、LDL、ApoB100、ApoA1、CRP、TNF-α浓度均较净化前和HD组低,LPL浓度无变化;HDF组血清LP(a)、LDL、ApoB100、CRP、TNF-α浓度均较净化前、HD组降低,LPL浓度升高,HDL、LDL、ApoB100、ApoA1、LPL浓度较HDP组高。结论 HD可激活尿毒症患者免疫炎症反应,升高血清LP(a)浓度;HDP可减少相关炎性因子、降低血脂的各项指标;HDF通过改善LPL活性降低血清LP(a)、LDL浓度,对HDL影响不大。     

脂蛋白脂肪酶和动脉粥样硬化

<正>脂蛋白脂肪酶(LPL)是富含甘油三酯脂蛋白代谢的关键酶,与动脉粥样硬化有密切关系。在体内分布脏器不同,表现出不同的作用特点。脂蛋白脂肪酶在血浆中具有水解甘油三酯作用,对防治动脉粥样硬化病变有利。在动脉壁内,细胞基     

慢性髓系白血病STI571耐药与Bcr-Abl基因点突变的关系

目的通过Bcr-Abl激酶ATP结合区测序分析,探讨慢性髓系白血病(CML)STI571耐药与Bcr-Abl基因点突变的关系。方法将CML患者分为对STI571耐药和非耐药两组,细胞系分为STI571耐药细胞系K562/G01、野生型K562/W细胞,进行骨髓单个核细胞或细胞系细胞Abl基因ATP结合区双向测序分析,了解Abl酪氨酸激酶ATP结合区点突变情况。PCR产物的序列长度为344bp,其中的180bp(98～277bp)为ABL激酶的第906～1085bpDNA序列片段,涵盖了Abl激酶的ATP结合区序列。结果K562/G01耐药细胞ABL激酶ATP结合区DNA测序与K562/W相同,与ABL激酶原序列相比,有两个同义点突变。在STI571耐药急变的CML患者骨髓单个核细胞Abl激酶ATP结合区测序结果发现:在8例耐药急变的患者中2例患者第944位核苷酸C→T单个碱基出现点突变,使苏氨酸(Thr)突变为异亮氨酸(Ile)。1例CML-CP的患者第1070碱基A→G替换,导致357位赖氨酸(Lys)→精氨酸(Arg)。结论Bcr/Abl融合基因ATP结合区的点突变是CML中STI571耐药的重要原因之一,对指导临床用药具有重要价值。     

45例少见β地中海贫血患者β球蛋白基因序列分析

目的研究佛山地区稀有β地中海贫血基因突变。方法对来佛山妇幼保健院产前检查的8400例患者进行血细胞和血红蛋白电泳常规筛查．对其中3600例血象异常怀疑β地中海贫血的患者行反向点杂交检测常见的17种突变,确诊1260例,然后对未发现常见突变的45例可疑患者扩增β球蛋白基因送公司直接基因测序。结果发现了15例稀有β地中海贫血,其中nt-90（C→T）、CD6（GAG→AAG）突变各2例,IVS—Ⅰ-116（T→G）、IVS—Ⅰ-128（T→G）、IVS—Ⅰ-130（G→C）突变各1例,CD113（GTG→GAG）突变8例。结论针对未发现常见17种β地中海贫血基因突变的可疑患者采用β球蛋白基因直接基因测序鉴定可以发现稀有突变,并为患者更好地提供产前基因诊断服务。     

OATP1B1基因位点521T→C的突变对瑞舒伐他汀在中国健康人体内药代动力学特征的影响

研究中国健康人体内OATP1B1基因位点521T→C的突变对瑞舒伐他汀药代动力学的影响,为临床参考遗传多态性特征来确立瑞舒伐他汀正确合理的给药方案提供依据。血浆样品应用LC-MS方法测定:采用电喷雾电离源(ESI),选择性监测瑞舒伐他汀(m/z 480.0),内标匹伐他汀(m/z 420.0)。利用ARMS-PCR方法对40名健康受试者OATP1B1的521T→C位点的基因分型,结果显示有7名为OATP1B1基因位点521T→C突变者,占全部健康受试者的17.5%,其余OATP1B1基因野生型纯合子占全部健康受试者的82.5%。首次发现中国人体内的瑞舒伐他汀药代动力学特征在OATP1B1基因位点521T→C突变组与基因野生型组间存在显著差异。中国人体内OATP1B1基因位点521T→C突变对瑞舒伐他汀的药代动力学过程有显著影响。瑞舒伐他汀OATP1B1基因突变组与野生型组相比较,其在人体内的吸收程度增加,消除过程减慢,故在临床应用中应参考OATP1B1基因位点521T→C的突变情况来指导瑞舒伐他汀的合理用药。     

线粒体基因突变型糖尿病患者氧化应激状态的临床研究

目的:观察线粒体基因突变型糖尿病(mitochodrial diabetes mellitus,mtDM)患者体内氧化应激状态,探讨线粒体基因突变与氧化应激的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)筛查2型糖尿病患者(T2DM组)和健康对照组(C组)mtDNA tRNALE(UUUR)3243A→G(A3243G)和mtDNAND412026A→G(A12026G)突变位点发生情况,用酶反应化学比色法测定线粒体基因突变型糖尿病组(mtDM组)、T2DM组及健康对照组外周血中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、抗活性氧活力(Anti-ROS)和丙二醛(MDA)等氧化应激指标。结果:(1)与C组相比,mtDM组和T2DM组Anti-ROS、SOD、GSH-Px、CAT活性及SOD/MDA均下降(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05或P<0.01)。(2)mtDM组与T2DM组相比,CAT活性下降(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05或P<0.01)。(3)A3243G突变组和A12026G突变组之间SOD、GSH-Px、CAT、Anti-ROS活性和MDA差异无统计学意义(P>0.05)。结论:线粒体基因突变型糖尿病较无突变2型糖尿病患者及健康对照组氧化应激损伤更严重,可能与线粒体基因突变有关。     

脂蛋白脂酶基因敲除鼠的脂代谢研究

目的通过野生型(c57)小鼠及脂蛋白脂酶(LPL)基因敲除杂合子(LPL+/-)小鼠体内实验,探讨LPL对小鼠体质量、脂肪及血脂等方面的影响。方法对LPL+/-小鼠和c57小鼠行表型鉴定后,分为两组,每组6只,比较两组小鼠在体质量,脂肪含量及血脂等方面的变化。结果LPL+/-小鼠甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、体质量及内脏脂肪含量均较c57小鼠高(P<0.05),而其肝脏、骨骼肌、脂肪及胰腺组织的TG、FFA较c57小鼠也呈现不同程度的增高趋势,其中肝脏TG的增高差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠体内实验证实了LPL基因敲除可导致体质量,脂肪含量的增加,同时引起FFA的增高及高TG血症,以及组织血脂水平不同程度的增高趋势。     

海带对高脂血症大鼠血脂水平的调节作用机制

目的探讨海带对高脂血症大鼠血脂的调节作用机制。方法雌性Wistar大鼠40只,高脂饲料喂养建立高脂血症动物模型,海带粉饲料喂养干预治疗。血生化法检测大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平及脂蛋白酯酶(LPL)和肝脂酶(HL)的活性。结果海带治疗组动物血清TG和TC水平较治疗前和模型组显著下降(P<0.05)。LDL水平显著低于模型组(P<0.05),而HDL、LPL和HL水平均显著高于模型组(P<0.05)。结论海带可能通过增强LPL和HL的活性,影响TG、TC、LDL和HDL等血脂组分的代谢,而发挥调节血脂水平的作用。     

脂蛋白脂酶在2型糖尿病人群中的浓度变化和临床意义

目的 探究脂蛋白脂酶(LPL)在2型糖尿病患者中的浓度变化情况及其临床意义。方法 选择90例进行检查的2型糖尿病患者作为观察组,选择同一时间进行健康体检的90例志愿者作为对照组。检测其LPL浓度变化以及甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(Hb A1c)等血脂水平情况,比较两组之间的差异。结果 观察组患者的LPL、HDL-C水平明显低于对照组,TG、Hb A1c水平则明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组的TC、LDL-C水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 2型糖尿病患者的脂蛋白脂酶浓度降低,其活性明显下降,导致TG分解代谢降低从而出现高TG血症,TG向HDL-C转化速度改变,造成HDL-C水平显著降低。这可能是导致动脉粥样硬化的主要原因之一。     

Wilson病基因突变的检测和分析

目的:研究Wilson病(WD)基因突变的类型和发生情况,探讨WD基因诊断的意义和方法。方法:采用变性高效液相色谱(DHPLC)及单链构象多态性(SSCP)方法结合DNA序列分析对12个无亲缘家系13例患者及22位亲属进行ATP7B基因外显子5、8、12突变的检测。结果:35例DNA标本确认6种基因突变,其中包括3种错义突变(R778L,D756N,R952K),1种缺失突变(2790del3),2种同义突变(2310C→G,2850G→C)。在13例患者中,发现6例R778L突变,2例D756N突变,R952K和2790del3各1例,均为杂合型突变,涉及10个等位基因,本组检出率为38.5%(10/26)。结论:PCR-SSCP,DHPLC是WD基因突变筛查较为敏感而特异的方法,且二者各具特点。经检索2790del3是ATP7B基因新突变类型。R778L是中国人最常见的突变类型。     

碱提类肝素组分Ⅱ对两种脂酶及血脂的影响

碱提类肝素组分Ⅱ(简称 C2)是采用碱提工艺从猪十二指肠粘膜中提取的酸性粘多糖。对其抗血栓、调整血脂等作用已有大量研究。本实验观察应用不同剂量 C2后离体大鼠肝脏灌流液中肝脂酶(HL)的活性变化,以及静脉注射 C2对动物血浆脂蛋白脂酶(LPL)、HL 和血浆脂质成分的影响。     

江苏地区汉族儿童多药耐药基因3个单核苷酸多态性位点的单倍型研究

目的 分析江苏汉族人群多药耐药基因-1(MDR1)的单核甘酸多态(12外显子1236 C→T突变、21外显子2677G→T/A突变、26外显子3435C→T突变)及其构成的单倍型分布.方法 通过多重单碱基延伸反应(SNaPshot SNP分型技术)对江苏地区170名健康儿童的MDR1 C1236T、G2677T/A、C3435T的SNP位点进行基因分型,统计各基因型频率.UNPHASED软件对MDR1的SNPs(C1236T-G2677T/A-C3435T)进行单倍型分析.结果 在170例儿童中,等位基因1236T、2677T、2677A、3435T频率分别为63.5%、37.4%、17.0%和35.0%.基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡(HWE),差异无统计学意义(P>0.05).MDR1的1236、2677、3435三个位点间(C1236T-G2677T/A-C3435T)存在连锁不平衡性,以TTT(31.8%)、TGC(25.3%)、CGC(17.7%)和CAC(16.2%)四种单倍型为主.结论 江苏地区汉族人群MDR1的单核甘酸多态及单倍型分布具有自己的特点.在临床应用相关药物时,进行基因型及单倍型检测,将有助于指导临床个体化用药.     

甲状旁腺激素相关蛋白对人间充质干细胞成脂肪分化的影响

目的:观察甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)在人间充质干细胞体外成脂肪分化中的影响,探讨其作用机制。方法:体外分离培养人间充质干细胞,分为对照组、成脂诱导组和成脂+PTHrP组。采用MTT法测定细胞增殖情况;苏丹红染色法观察成脂肪分化;RT-PCR法检测脂蛋白脂肪酶(LPL)的表达水平。结果:成脂+PTHrP组与成脂诱导组细胞增殖均显著高于对照组(P<0.05);成脂+PTHrP组与成脂诱导组比较,前期无显著性差异,从第4日起有显著性差异(P<0.05)。苏丹红IV染色结果显示,成脂诱导组出现阳性细胞的时间最早,阳性率和强度最强;其LPL mRNA表达水平也显著高于对照组和成脂+PTHrP组(P<0.05)。结论:PTHrP可抑制人间充质干细胞向成脂肪方向的分化。