慢性肾脏病血清及尿液Ⅳ型胶原和层黏连蛋白与肾组织纤维化的关系

目的 探讨慢性肾脏病（Chronic Kidney Disease,CKD）血清及尿液Ⅳ型胶原和层黏连蛋白与肾组织纤维化的关系.方法 以63例住院接受肾穿刺活检、未接受糖皮质激素、免疫抑制剂、血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂和中草药等治疗的1～2期的CKD患者为研究对象,其中男性38例,女性25例.年龄为（40.5±17.5）岁,最小23岁,最大58岁.血清及尿液Ⅳ型胶原、层黏连蛋白采用酶联免疫吸附法测定.肾组织ColⅣ、LN表达强度利用病理图像分析软件对免疫组化阳性目标进行光密度测定.分析肾组织Ⅳ型胶原、层黏连蛋白光密度与血清、尿液Ⅳ型胶原、层黏连蛋白水平的关系.应用SPSS 11.0软件包进行统计分析,单因数相关分析采用Pearson相关分析.结果 CKD患者血清中Ⅳ型胶原及层黏连蛋白水平与肾组织纤维化程度无关,而尿液Ⅳ型胶原及层黏连蛋白水平与肾组织纤维化程度呈正相关.结论 尿液Ⅳ型胶原、层黏连蛋白水平能够反映早期CKD患者肾脏纤维化发生的程度.     

黄芪对肝纤维化大鼠NF-κB的调节作用

目的通过观察NF-κB表达情况,探讨黄芪抗肝纤维化机制。方法45只SD大鼠随机分为正常对照组、CCl_4诱导肝纤维化模型组和黄芪干预组。HE染色评价各组肝纤维化程度,免疫组化方法检测NF -κB在肝组织中表达,利用单因素方差分析法研究其表达水平与肝纤维化关系。结果HE染色结果显示,肝纤维化模型组的肝纤维化分级明显高于正常对照组(P<0.01),黄芪组肝纤维化分级与肝纤维化模型组比较明显降低(P<0.01);肝纤维化模型组大鼠肝组织NF-κB表达显著高于正常对照组(P<0.01),而黄芪组NF-κB表达较模型组显著降低(P<0.01)。结论黄芪可以显著抑制CCl_4诱导的肝纤维化,对NF-κB信号转导通路相关分子的调控可能是其机制之一。     

梗阻性黄疸大鼠肝组织中α-平滑肌肌动蛋白和肿瘤坏死因子-α的表达

[目的]探讨梗阻性黄疸大鼠肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达及其意义.[方法]采用胆总管结扎法建立梗阻性黄疸大鼠模型,4周后检测大鼠肝组织羟脯氨酸、透明质酸和层黏连蛋白的含量,观察肝组织的病理变化,并采用免疫组织化学染色方法观察大鼠肝组织中TNF-α和HSC标志物-αSMA的表达情况.[结果]胆总管结扎组与假手术对照组比较,大鼠肝组织中羟脯氨酸、透明质酸和层黏连蛋白的含量均明显增高,肝组织内可见大量胆管及纤维组织增生,纤维间隔形成,多数大鼠形成胆汁性肝硬化.胆总管结扎组大鼠肝组织内-αSMA阳性细胞主要分布在增生的胆管周围、纤维组织及间隔内,TNF-α阳性表达的肝细胞呈散在分布.[结论]梗阻性黄疸大鼠肝组织中羟脯氨酸、透明质酸和层黏连蛋白含量明显升高,可见TNF-α在肝细胞中表达,而TNF-α及α-SMA阳性细胞的分布特征不相同.     

层黏连蛋白受体与胃癌侵袭转移的关系及定量研究

目的:研究层黏连蛋白受体在胃癌中的表达,探讨其与胃癌侵袭及淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组化S-P法,检测96例胃腺癌组织中层黏连蛋白受体的表达情况;应用图像分析技术来分析这个指标在胃癌中的阳性表达率。结果:经四格表x2检验层黏连蛋白受体在胃癌组织中的高表达与浸润深度、分化程度密切相关(P<0.05~0.01),与淋巴结转移无关(P>0.05);而层黏连蛋白受体的IRS经t检验与浸润深度、分化程度、淋巴结转移密切相关(P<0.05~0.01)。结论:胃癌组织中层黏连蛋白受体高表达参与并影响了胃癌的侵袭和转移。     

维甲酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用

目的 探讨维甲酸（at-RA）对单侧输尿管梗阻大鼠（UUO）肾间质纤维化的影响.方法将26只大鼠随机分为假手术组、模型组、给药组,结扎单侧输尿管造成梗阻性肾病模型.术后9天处死大鼠,取梗阻侧肾做组织学检查,HE染色,用免疫组化方法检测肾组织中结缔组织生长因子（CTGF）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）.结果维甲酸显著减轻肾小管间质损害,治疗组肾间质炎细胞浸润和肾间质CTGF、α-SMA表达显著低于对照组.结论维甲酸减轻UUO模型大鼠肾小管间质损害和炎细胞浸润,降低CTGF表达,抑制α-SMA表达,从而减轻肾间质纤维化.     

不同浓度PEBP凝胶对大鼠子宫内膜纤维化的抑制作用

目的:探讨不同浓度聚乙二醇-b-聚L-苯丙氨酸嵌段聚合物凝胶(PEBP凝胶)对大鼠子宫内膜损伤导致的纤维化的抑制作用.方法:24只雌性SD大鼠随机分为4组(B、C、D、E组,n=6),采用刮宫兼感染双重损伤法制作大鼠宫腔纤维化模型.B、C、D、E组双侧子宫造模后,随机一侧子宫注入PEBP浓度分别为0、8.125、16.25、32.5 mg/mL的凝胶0.3 mL;另一侧子宫注入0.3 mL生理盐水作为模型组(A组).损伤14 d后取子宫组织固定、包埋、切片,行苏木素伊红(HE)染色以观察各组大鼠的子宫愈合情况,行Masson染色以观察子宫内膜纤维化程度,并通过免疫组化法检测子宫内膜组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达情况.结果:实验组与模型组相比,损伤后宫内植入PEBP凝胶可显著缓解损伤造成的子宫内膜纤维化(P<0.05),缓解程度随PEBP在凝胶中浓度的升高而升高;PEBP凝胶组子宫内膜组织TGF-β1的表达随凝胶中PEBP含量的增加而降低.与模型组相比,PEBP含量最高的E组TGF-β1的表达显著降低(P<0.05).结论:PEBP凝胶对大鼠子宫内膜损伤导致的纤维化具有抑制作用,且抑制作用随着凝胶中PEBP浓度的升高而增强,高浓度PEBP凝胶也可抑制损伤后子宫内膜TGF-β1的表达.     

化学和热传导双重损伤构建大鼠宫腔黏连模型的方法及其评价

目的 采用化学和热传导双重损伤法构建大鼠宫腔黏连（IUA）模型，阐明该方法作为化学损伤的改良方法构建接近 IUA 病理学变化动物模型的特点和优势。 方法 6 只 6~8 周龄雌性 SD 大鼠随机分为化学损伤组和化学及热传导双重损伤组（双重损伤组），每组3只。以大鼠左侧宫角为实验组，右侧宫角为自身对照组。化学损伤组大鼠左侧宫角作为化学损伤实验组采用95% 乙醇作用3 min，右侧宫角作为化学损伤自身对照组不进行任何处理；双重损伤组大鼠左侧宫角作为双重损伤实验组采用95% 乙醇作用 3 min 后100 ℃ 热水再处理1 min，右侧宫角作为双重损伤自身对照组不进行任何处理。造模术后第14天，采用 HE染色、Masson 染色和 Ki67 免疫组织化学染色法检测各组大鼠子宫内膜厚度、腺体数量、纤维化面积比及腺体上皮细胞和基质细胞的增殖指数（PI）。 结果 HE 染色，与相对应的自身对照组比较，化学损伤实验组和双重损伤实验组大鼠子宫内膜厚度和腺体数量明显减少（P<0.05）；与化学损伤实验组比较，双重损伤实验组大鼠子宫宫腔封闭，子宫内膜厚度和腺体数量均明显减少（P<0.05）。Masson 染色，与相对应的自身对照组比较，化学损伤实验组和双重损伤实验组大鼠子宫内膜层呈纤维化增生，子宫内膜组织中纤维化面积比明显升高（P<0.05）；与化学损伤实验组比较，双重损伤实验组大鼠子宫内膜层可见纤维化黏连带和完整肌层，子宫内膜组织中纤维化面积比明显升高（P<0.05）。Ki67 免疫组织化学染色，与相对应的自身对照组比较，化学损伤实验组和双重损伤实验组大鼠子宫内膜组织中腺体上皮细胞核形状和排列发生改变，基质细胞 PI 明显升高（P<0.05）。 结论 化学和热传导双重损伤法操作简便且可重复性好，可为 IUA 治疗的安全性评价、机制研究和临床转化提供具有纤维化黏连带和完整肌层的IUA模型，具有良好的应用前景。     

细胞外基质和整合素β1在非小细胞肺癌中的表达和意义

目的研究细胞外基质中纤维黏连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、层黏连蛋白和整合素β1在人非小细胞肺癌组织中的表达特征及意义.方法采用免疫组化EnVision法,检测57例非小细胞肺癌组织中细胞外基质和整合素β1的表达.结果在非小细胞肺癌中纤维黏连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、层黏连蛋白广泛（≥50%切片区域）表达率分别为80.7%、71.9%和42.1%,整合素β1阳性表达率为43.9%.纤维黏连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、层黏连蛋白和整合素β1在57例肿瘤标本中阳性表达率显著高于在23例正常肺组织的阳性表达率（P＜0.05）.在非小细胞肺癌中,层黏连蛋白在中高分化组的阳性表达率显著高于低分化组（P＜0.05）.Ⅳ型胶原蛋白在肺腺癌表达率显著高于在肺鳞癌的表达率（P＜0.05）;层黏连蛋白在肺鳞癌的表达率显著高于在肺腺癌表达率（P＜0.05）.无淋巴结转移组的层黏连蛋白的表达率显著高于淋巴结转移组（P＜0.05）,整合素β1在淋巴结转移组表达率显著高于无转移组（P＜0.05）.结论细胞外基质和整合素β1在非小细胞肺癌组织中有高表达;层黏连蛋白高表达可能提示肿瘤恶性程度较低及淋巴结转移发生低,并与鳞癌发生有关;Ⅳ型胶原蛋白高表达可能与腺癌发生有关;整合素β1高表达则可能促进癌细胞侵袭转移.     

戊酸雌二醇联合阿司匹林对大鼠宫腔黏连的改善作用

目的：探讨戊酸雌二醇联合阿司匹林对大鼠宫腔黏连（IUA）的改善作用,阐明两者联用治疗的作用机制。方法：50只健康雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、戊酸雌二醇组、阿司匹林组和戊酸雌二醇联合阿司匹林组（联合组）,每组10只,除对照组外其余各组大鼠采用刮宫加感染双重损伤法建立IUA模型,连续给药24 h后取各组大鼠血清和子宫组织,采用ELISA法检测大鼠血清雌二醇水平,HE染色观察大鼠宫腔组织病理形态表现及腺体数量,采用Masson染色观察大鼠子宫内膜纤维化面积比,采用免疫组织化学法检测子宫内膜组织中转化生长因子β1（TGF-β1）、纤溶酶原激活物抑制剂1（PAI-1）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白表达水平。结果：ELISA法检测,与对照组比较,模型组大鼠血清雌二醇水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,戊酸雌二醇组、阿司匹林组和联合组大鼠血清雌二醇水平明显升高（P<0.05）。HE和Masson染色检测,与对照组比较,模型组大鼠宫腔发生黏连、扩大,腔内有积液,宫腔壁细胞排列紊乱,炎性细胞浸润明显,子宫内膜间质纤维化,胶原纤维排列紊乱,子宫内膜腺体数量明显减少（P<0.05）,纤维化面积比明显增加（P<0.05）;与模型组比较,戊酸雌二醇组、阿司匹林组和联合组大鼠宫腔黏连、积液、炎性细胞浸润和子宫内膜间质纤维化明显减轻,宫腔壁细胞排列整齐,有少量胶原纤维,子宫内膜腺体数明显增加（P<0.05）,纤维化面积比明显降低（P<0.01）;与阿司匹林组比较,联合组大鼠子宫内膜腺体数明显增加（P<0.05）,子宫内膜纤维化面积比明显降低（P<0.05）。与模型组比较,戊酸雌二醇组、阿司匹林组和联合组大鼠子宫内膜组织中TGF-β1和PAI-1蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,MMP-9蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）;与阿司匹林组比较,联合组大鼠子宫内膜组织中TGF-β1和PAI-1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,MMP-9蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：戊酸雌二醇与阿司匹林联合应用可降低大鼠子宫内膜组织中TGF-β1和PAI-1表达,上调MMP-9表达,对大鼠IUA具有改善作用。     

水飞蓟素对大鼠肝纤维化转化生长因子β1及结缔组织生长因子表达的影响

目的 观察水飞蓟素在胆总管结扎诱导的大鼠肝纤维化模型的治疗效果及其作用机制.方法 60只雄性SD大鼠,随机分为假手术对照组、纤维化模型组及水飞蓟素治疗组.采用胆总管结扎法造模.4周后处死全部大鼠,采用放射免疫法(RIA)检测大鼠血清中透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)及Ⅲ型前胶原(PCⅢ)的水平;HE染色和Masson染色观察大鼠肝组织病理改变;免疫组织化学检测结缔组织生长因子(CTGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)在肝组织内的表达.结果 与模型组大鼠比较,水飞蓟素治疗后大鼠血清中HA、LN和PCⅢ的水平显著降低;肝组织内纤维化程度降低,肝小叶结构趋于正常;治疗后大鼠肝组织CTGF及TGF-β1表达明显降低(P<0.01),免疫反应阳性信号主要位于纤维间隔细胞的胞浆中.结论 水飞蓟素能有效地减轻胆总管结扎诱导的肝纤维化大鼠的肝损伤及纤维化程度,其机制可能与抑制肝内CTGF和TGF-β1表达有关.