莪术挥发油抑制人肝癌细胞株SMMC-7721生长的实验研究

[目的]探讨莪术挥发油对肝癌细胞生长抑制的作用机制。[方法]用荧光显微镜观察药物作用前后细胞形态学的变化，采用噻唑氮蓝(MTT)法检测莪术油对细胞生长的抑制作用，并用流式细胞仪检测细胞周期的阻滞及凋亡率。[结果]MTT结果表明莪术油浓度与细胞生长抑制率成正比。荧光显微镜观察结果显示，1．0mg／mL的莪术挥发油作用24h后可有效诱导肝癌细胞凋亡，细胞形态产生明显的凋亡特征，细胞核凹陷或固缩成均一的致密物。流式细胞仪检测结果表明，莪术油作用后细胞凋亡率可达28.15％，细胞周期被阻滞在S期。[结论]莪术挥发油可抑制肝癌细胞SMMG772l的生长，诱导凋亡及阻滞细胞周期是其抑制生长的重要机制。     

大黄素抑制人结肠癌RKO、Caco-2细胞体外增殖作用的研究

目的:探讨大黄素对人结肠癌细胞株RKO、Caco-2的体外增殖的抑制作用。方法:MTT比色法检测细胞活力;倒置显微镜显像观察细胞数量变化;FCM检测细胞凋亡率及周期分布;Caspase-3分光光度法检测Caspase-3酶蛋白活性。结果:随着作用时间的延长以及大黄素浓度的升高,大黄素对人结肠癌RKO、Caco-2细胞的体外增殖抑制作用增高;大黄素阻滞两种细胞于S期,使G2/M期细胞比率明显下降,激活Caspase-3酶蛋白;提高细胞凋亡率。结论:大黄素抑制人结肠癌细胞株RKO、Caco-2体外增殖,其作用呈浓度、时间依赖性;大黄素能够阻滞RKO、Caco-2细胞株细胞周期并激活Caspase-3诱导细胞凋亡。     

大黄素对人结肠癌HT-29细胞体外增殖的抑制作用

目的观察大黄素对人结肠癌细胞株HT-29体外增殖的抑制作用。方法取对数生长期的HT-29细胞,按每孔5×103个细胞接种于96孔板,贴壁24 h后换液,分为对照组和实验组(分别含有12.5μM、25μM、50μM、100μM大黄素),共5组。每组均设6个复孔,于37°C、5%CO2孵箱中分别培养24 h、48 h和72 h。采用MTT比色法检测细胞活力;倒置显微镜显像观察细胞数量变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布;分光光度法检测Caspase-3酶蛋白活性。结果①MTT比色法显示,处理24 h时,与对照组比较,大黄素50μM、100μM组细胞抑制率差异有统计学意义(P<0.05),而大黄素12.5μM、25μM组抑制率差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,处理48 h及72 h后大黄素12.5μM、25μM、50μM、100μM组的细胞抑制率差异有统计学意义(P<0.05);大黄素各浓度组处理48 h及72 h后的抑制率与同浓度组处理24 h比较,抑制率升高,差异有统计学意义(P<0.05);大黄素各浓度组处理72 h后的抑制率与同浓度组处理48 h比较抑制率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。②倒置显微镜观测显示,对照组多为类圆形成团生长,经各浓度大黄素处理后,细胞体积缩小、间隙变大,细胞数减少。③流式细胞仪检测显示,对照组G2/M期细胞比率明显高于大黄素各浓度组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组G0/G1期细胞比率明显高于大黄素25μM、50μM、100μM浓度组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组与12.5μM大黄素组G0/G1期细胞比率差异无统计学意义(P>0.05);对照组S期细胞比率明显低于大黄素各浓度组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,大黄素12.5μM、25μM、50μM、100μM组HT-29细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05)。④与对照组比较,大黄素各浓度组Caspase-3酶蛋白活性显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大黄素抑制人结肠癌细胞株HT-29体外增殖,其作用呈浓度、时间依赖性;大黄素能够阻滞HT-29细胞周期,并激活Caspase-3诱导细胞凋亡。     

芦荟大黄素对人膀胱癌细胞T24增殖及凋亡的影响

目的：探讨芦荟大黄素（AE）对人膀胱癌细胞株T24细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法：采用甲基噻唑（MTT）比色法测定AE对体外培养的T24细胞的抑制率,并用作图法计算半数有效抑制浓度（IC5）0;光学显微镜下观察AE作用前后细胞形态学变化;流式细胞技术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测mRNA表达。结果：MTT法测定显示,在5～160μg/mL浓度范围内,AE对膀胱癌T24细胞生长有抑制作用,并呈量-效关系,IC50为31.55μg/mL;光学显微镜下药物IC50剂量（32μg/mL）作用T24细胞后呈现明显的死亡形态变化;流式细胞仪检测显示AE可阻滞T24细胞进入G2/M期;Annexin V-FITC/PI双染法显示早期凋亡细胞数明显增加;R T-PCR法显示myc基因表达下降。结论：AE能抑制人膀胱癌T24细胞生长,并阻断细胞周期和诱导细胞凋亡。其机制可能与myc基因表达下调有关。     

不同粒径雄黄对SMMC7721细胞凋亡的影响

早在二十世纪七十年代就已有人用雄黄来治疗癌症,但由于制剂粗糙,服用量大,疗效不理想,后来少有应用.我们受纳米化药物的启发,对雄黄的粗大颗粒进行改造,使之细微化,达到纳米、微米级,并对其药学性质作了研究,以期能使之运用于临床,成为口服的化疗药物.本以SMMC7721肝癌细胞为实验对象,用DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪等方法研究了三种不同粒径的雄黄体外对肿瘤细胞增殖的影响.     

永磁磁场对大鼠胰岛细胞的增殖、活性影响的实验研究

【目的】研究在正常和缺氧培养条件下,不同强度永磁磁场对大鼠胰岛细胞增殖及活性的影响。【方法】根据大鼠胰岛细胞生长曲线的情况,选择培养第3天的细胞进行实验。在正常和缺氧培养条件下,采用3．4、5．6、13．8、27．8、52．6、107．0、178．9mT强度磁场对加磁A—G组进行干预,对照组的细胞不加任何磁场干预,于磁场干预72小时后,利用噻唑蓝（M1rr）方法检测各组细胞活性;采用44．8、90．6、182．1mT对加磁a—c组进行干预,对照组的细胞不加任何磁场干预,在磁场干预72小时之后,利用流式细胞仪检测各组细胞增殖情况。【结果】胰岛细胞生长周期吸光度（A）值从第2天（A值0．067±0．021）到第5天（A值0．44±0．113）呈直线生长趋势,故选择培养第3天的细胞进行磁场干预实验。在正常培养条件下,加磁组（A—G组）的MTT值与对照组相比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;在缺氧培养条件下,加磁A组MTT值高于对照组（火0．01）。在正常培养条件下,加磁组（a、b、e组）的细胞增殖情况随着磁场强度的增加先降低后增加;在缺氧培养条件下加磁组细胞增殖情况随着磁场强度增加而提高。【结论]在正常培养条件下,不同强度的永磁磁场对大鼠胰岛细胞的活性无影响,在高强度的磁场作用下可以提高大鼠胰岛细胞的增殖能力;在缺氧培养条件下,低强度的磁场可提高大鼠胰岛细胞的活性,高强度的磁场则可提高大鼠胰岛细胞的增殖能力。     

白屈菜红碱对人胃癌BGC823细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的观察白屈菜红碱(che lerythrine)对人胃癌BGC 823细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法通过M TT实验检测白屈菜红碱对细胞生长的抑制率,AO/EB的荧光核染色观察细胞形态,DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果M TT实验显示白屈菜红碱抑制BGC 823细胞的生长呈时间、浓度依赖的方式,显微镜下观察到AO/EB的荧光核染后凋亡的细胞,琼脂糖凝胶电泳出现DNA的片段化,在白屈菜红碱质量浓度为1.5、2.0、2.5μg/mL且培养24 h时,流式细胞仪可以检测到凋亡峰,且细胞被阻滞在S和G2/M期。结论白屈菜红碱能有效地诱导BGC 823细胞凋亡,而且其诱导的凋亡具有周期依赖性。     

消痰散结方对MKN—45人胃癌细胞ICAM—1表达的影响

目的：观察水痰散结方对体外培养的胃癌细胞粘附分子ICAM－1表达的影响，初步探讨消痰散结方抑制胃癌细胞转移的作用环节。方法：制备消痰散结药物血清，体外培养MKN－45人胃癌细胞，拟消痰散结方药物血清干预培养细胞，采用免疫组化ABC法检测胃癌组织中ICAM－1的。结果：中药组胃癌组织中ICAM－1表达水平明显低于空白对照组。结论：消痰散结方抑制胃癌细胞转移的环节可能和影响粘附分子的表达，从而影响细胞的粘附性机能有关。     

姜黄素抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖及诱导凋亡作用研究

目的研究姜黄素(Cur)对人胃腺癌细胞(SGC-7901)增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用CCK-8检测不同浓度Cur对SGC-7901细胞的24、48、72 h的抑制作用;TUNEL检测各浓度Cur作用24h后SGC-7901细胞凋亡的发生率;Western blot法检测各浓度Cur作用SGC-7901细胞后剪切半胱氨酰天冬氨酸酶-3(cleaved-caspase-3)、剪切半胱氨酰天冬氨酸酶-9(cleaved-caspase-9)、Bax和Bcl-2蛋白量的表达。结果与对照组比较,50、100、200μmol/L Cur作用胃癌SGC-7901细胞后吸光度下降(P0.05),同时药物剂量越高,作用时间越长,吸光度越低(P0.01);12、24、48h IC50分别为156.51、86.88、35.32μmol/L;Cur能上调SGC-7901细胞中cleaved-caspase-3,cleaved-caspase-9和Bax蛋白的表达(P0.05),而同时能下调Bcl-2蛋白的表达(P0.05)。结论姜黄素具有抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,诱导其凋亡的作用;其抗肿瘤作用机制与激活caspase-3凋亡通路及Bcl-2蛋白家族相关。     

叶下珠复方对人肝癌HePG2细胞体外增殖抑制及诱导凋亡作用

目的观察叶下珠复方对人肝癌HePG2细胞体外增殖的抑制作用并探讨其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)和生长曲线测定法,比较不同浓度的叶下珠复方在不同作用时间对体外培养的HePG2细胞增殖的影响;同时应用流式细胞术、荧光显微镜和电镜对HePG2细胞的凋亡率及形态学进行观察。结果叶下珠复方对HePG2细胞增殖有抑制作用,在一定范围内,叶下珠复方的浓度越大、作用时间越长,对HePG2的抑制作用越强,叶下珠复方浓度为500μg/mL作用72h时,其抑制率达93.58%,IC50为240μg/mL。不同浓度的叶下珠复方均具有一定程度诱导HePG2细胞凋亡的作用。结论叶下珠复方在体外能一定程度抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与诱导肝癌HePG2细胞凋亡有关。     

黄芩素对肿瘤细胞MKN45凋亡与增值的影响

目的探讨黄芩素诱导胃癌细胞株MKN45凋亡的作用机制,为黄芩素在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法采用MTT法检测黄芩素抑制细胞增殖的半数抑制浓度(IC50);采用不同浓度的黄芩素处理细胞,用流式细胞仪检测胃癌细胞株MKN45的凋亡情况;采用免疫组化方法检测半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)的表达情况。结果黄芩素对细胞生长的IC50为126.39umol/L。50、100、200μmol/L黄芩素能够诱导胃癌细胞MKN45凋亡,凋亡率与剂量呈正相关。50、100、200μmol/L黄芩素诱导caspase-3的表达。结论黄芩素能诱导胃癌细胞凋亡,可能与其诱导caspase-3的表达有关;并明显抑制癌细胞增殖,具有抗MKN45细胞作用。     

蛇葡萄素诱导人胃癌细胞凋亡的研究

目的:研究蛇葡萄素对人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的影响。方法:MTT比色法测定细胞的增殖抑制率,流式细胞仪Annexin-V FITC/PI双染检测蛇葡萄素33.3,50,75 mg.L-1作用下SGC-7901细胞的凋亡及各细胞周期。结果:蛇葡萄素作用于SGC-7901 48 h后,可明显促进细胞早期凋亡,50,75 mg.L-1细胞凋亡率为(29.03±6.21)%,(43.43±1.00)%,明显高于空白组(11.83±4.67)%(P<0.05,P<0.01)且呈剂量依赖关系。蛇葡萄素33.3,50,75 mg.L-1作用于SGC-7901细胞48 h后,G1期细胞分别为(52.07±4.41)%,(57.07±2.70)%,(58.43±2.66)%明显高于空白对照组(42.00±3.04)%(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论:蛇葡萄素能诱导SGC-7901细胞凋亡并使细胞周期阻滞在G1期。     

胃宁方对人胃癌SGC-7910细胞增殖凋亡的影响

目的观察胃宁方对人胃癌SGC-7910细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法不同浓度不同时间的胃宁方处理人胃癌SGC-7910细胞,MTT法测定细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期、凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA)、c-Myc、Bcl-2表达。结果胃宁方能抑制SGC-7910细胞增殖,抑制率与浓度呈依赖关系;细胞周期G0/G1期、S期比例增加,胃宁方能诱导细胞凋亡,凋亡率与时间、剂量呈依赖关系;胃宁方作用后PCNA、c-Myc、Bcl-2表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。结论胃宁方能抑制SGC-7910细胞增殖,诱导其凋亡;其作用机制可能与下调PCNA、c-Myc、Bcl-2的表达有关。     

中药诱导胃癌细胞凋亡的研究进展

胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。随着科学技术的发展和人类对健康的需求,国内外对胃癌的研究越来越深入。目前,在胃癌综合治疗中,中医药所发挥的作用越来越大,可明显提高患者的生活质量,并延长生存期。中医药的抗癌机制研究日益受到重视,尤其是诱导癌细胞凋亡的相关作用机制。通过对单味中药及中药复方诱导胃癌细胞凋亡的总结,从而为中医药治疗胃癌的基础机制及临床应用提供指导,促进中医药在临床中治疗胃癌的发展。     

胃肠安颗粒通过RUFY3抑制人胃癌MKN45细胞侵袭转移

目的:研究健脾复方胃肠安颗粒抑制人胃癌MKN45细胞侵袭转移的分子机制.方法:体外培养人胃癌MKN45细胞,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)检测不同质量浓度的胃肠安颗粒(600,900,1 200,1 500 mg·L-1)与人胃癌MKN45细胞共孵育24,48,72 h,对细胞增殖活力的影响;采用蛋白免疫印迹法(...     

肠胃清药物血清协同奥沙利铂对人结肠癌耐药细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨肠胃清药物血清协同奥沙利铂(L-OHP)对HCT116/L-OHP细胞增殖及凋亡的影响.方法:采用MTT法检测L-OHP联合肠胃清药物血清对HCT116/L-OHP细胞的生长抑制情况,流式细胞仪碘化丙啶(PI)染色分析细胞周期分布及Annexin V-FITC试剂盒监测对HCT116/L-OHP凋亡的影响.结果:HCT116/L-OHP细胞对L-OHP的耐药指数为9.17倍,48 h L-OHP作用于HCT116和HCT116/L-OHP的IC50分别为(9.88 ±0.42),(85.81 ±2.76) mg·L-1,联用肠胃清药物血清后HCT116/L-OHP的IC50降至(35.2±2.8) mg·L-1,逆转指数为2.44倍(P＜0.05).联用前后细胞周期分别停滞在G1,G2期及G1期,其中G1,G2期各组间两两比较P＜0.001,S期组间除奥沙利铂组与奥沙利铂联用肠胃清组比较P＜0.05外,余P＜0.001.联用前后细胞凋亡率分别为(8.6±0.31)％,(23.73±2.36)％,各组间除空白组与奥沙利铂组比较P＜0.05外,余P ＜0.001.结论:肠胃清药物血清能有效地逆转人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT116/L-OHP对奥沙利铂的耐药,诱导HCT116/L-OHP凋亡,改变细胞周期分布.     

半夏泻心汤含药血清对人胃癌腹膜转移细胞增殖的影响

目的：研究半夏泻心汤含药血清对体外人胃癌腹膜高转移潜能细胞株GC9811-P增殖的影响。方法：采用血清药理学方法、MTT法及台盼兰染色法观察半夏泻心汤对GC9811-P细胞的敏感性及生长抑制作用。结果：半夏泻心汤含药血清对GC9811-P较为敏感,对其增殖有明显的抑制作用,且有显著的剂量-效应关系（P＜0.05）。结论：半夏泻心汤对GC9811-P细胞的增殖有一定的抑制作用,提示辛开苦降法可能是中医药防治胃癌腹膜转移的主要治法之一。     

养正散结汤对人胃癌MKN-45细胞增殖、凋亡及ERK通路的影响

目的:探讨养正散结汤对人胃癌MKN-45细胞增殖、凋亡及细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路的影响。方法:将养正散结汤组(0. 5,1,1. 5,2,2. 5,3,3. 5 g·L~(-1))作用于胃癌MKN-45细胞,设置空白组,分别孵育24,48,72 h后采用细胞增殖活性检测方法(CCK-8)检测细胞增殖情况;用养正散结汤组(0. 4,0. 8 g·L~(-1))处理细胞,运用平板克隆形成实验观察细胞的克隆形成能力;用4,8 g·L~(-1)养正散结汤干预细胞,利用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况;用2,4,8 g·L~(-1)养正散结汤处理细胞,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测ERK表达及其磷酸化水平。结果:与空白组比较,养正散结汤组能明显抑制MKN-45细胞的增殖,处理24,48 h后,养正散结汤从2 g·L~(-1)开始,处理72 h后,从1. 5 g·L~(-1)开始,细胞存活率逐渐降低,呈明显浓度依赖性(P 0. 05,P 0. 01)。经不同质量浓度的养正散结汤干预48 h后,养正散结汤组细胞克隆形成率显著低于空白组(P 0. 01),呈一定的量效关系,0. 8 g·L~(-1)养正散结汤干预后,MKN-45细胞集落基本无法形成;养正散结汤组细胞凋亡率明显高于空白组(P 0. 05,P 0. 01);干预12 h后,与空白组比较,养正散结汤从4 g·L~(-1)开始下调MKN-45细胞中ERK蛋白的磷酸化水平(P 0. 01)。结论:养正散结汤能抑制人胃癌细胞MKN-45的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与抑制ERK的磷酸化有关。     

芦荟大黄素联用顺铂对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨芦荟大黄素(AE)单用或联用顺铂(CP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响。方法:以MDA-MB-231细胞为研究对象,用5,10,20,30,40,50μmol·L-1AE,2,4,8,12,24,36μmol·L-1CP,或不同浓度AE联用CP处理乳腺癌MDA-MB-231细胞48 h,另设空白组,MTT法检测细胞增殖;Annexin V FITC/PI双染和流式细胞术检测细胞凋亡与细胞周期;Western blot分析Bcl-2相关X蛋白(Bax),B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-x L蛋白表达的变化。结果:与空白组比较,AE单用显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖,半数抑制浓度(IC50)为22.21μmol·L-1,与CP联用时IC50为9.51μmol·L-1。联用指数CI501,表明两药物有协同作用;AE单用使细胞周期阻滞在G1期,并诱导细胞凋亡,联用CP则增强阻滞,凋亡率明显增加;两药联用显著抑制Bcl-2和Bcl-x L的表达,并上调Bax的表达,与空白组比较均具有明显的统计学差异(P0.05,P0.01)。结论:芦荟大黄素抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,使细胞周期阻滞在G1期,并通过上调促凋亡蛋白和下调抗凋亡蛋白,诱导凋亡。与顺铂联用能增强其促凋亡作用,两药存在协同作用。     

大黄素对体外人肺腺癌细胞增殖抑制作用的影响

目的探讨大黄素对人肺腺癌Anip973细胞(简称肺癌细胞)作用的机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和生长曲线测定比较不同浓度的大黄素在不同作用时间内对体外培养的肺癌细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞凋亡率,并对此进行电镜分析。结果在一定范围内,大黄素的浓度越大、作用时间越长对肿瘤细胞生长的抑制作用越强,凋亡率也越高,60μmol／L大黄素处理肺癌细胞72h后增殖抑制率达90％。结论大黄素可明显抑制肺癌细胞的增殖,其抑制作用具有时效和量效关系。