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1.
以小鼠菌血症模型对抗核心糖脂域McAb(EL1、EL3和3H4)的免疫保护的效果进行了研究。结果表明,(1)3株McAb能显著提高受E.coli攻击小鼠的存活率(P<0.05);(2)EL3和3H4还分别有降低3LD50绿脓杆菌和5LD50鼠伤寒沙门氏菌感染小鼠病死率的作用(P<0.05);(3)EL3与3H4对受5LD50E.coli和10LD50绿脓杆菌攻击小鼠有一定的协同保护作用;(4)在EL1预防性保护试验中发现,提前4周注入EL1,并于攻菌前1周加强一次,EL1可明显提高5LD50E.coliJ5株攻击小鼠的存活率(P<0.05)。提示EL3和3H4对细菌感染小鼠具有一定的交叉保护作用。 相似文献
2.
应用ELISA、免疫印迹及加成指数等方法对我们制备的3株(EL1、EL2和EL3)抗E.coliJ5株和1株(3H4)抗S.minnesotaR595株核心糖脂域McAb进行了研究。结果表明,4株McAb与不同类型的LPS均有不同程度的交叉反应,其中以EL2、EL3和3H43株McAb的交叉反应更为广泛,且可与类脂A结合。常见的革兰氏阴性菌(GNB)及其LPS均有较强的抑制EL3和3H4结合抗原的作用,EL1和EL2的结合抗原反应也可明显被E.coliJ5株和S.minnesotaR595株或LPS(Re-及Re-LPS)所抑制;且4株McAb间与两突变菌株结合反应的加成指数(A.I)均较低。提示4株抗核心糖脂域McAb识别LPS抗原的表位相似或相距较近。McAb表现出的与LPS较广泛的交叉反应性,可能与其作用位点位于LPS内核及类脂A结构中具有共同抗原表位区域有关。 相似文献
3.
抗细菌脂多糖核心糖脂域McAb免疫反应特性的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
应用ELISA、免疫印迹及加成指数等方法对我们制备的3株(EL1、EL2和EL3)抗E.coliJ5株和1株(3H4)抗S.minnesotaR595株核心糖脂域McAb进行了研究。结果表明,4株McAb与不同类型的LPS均有不同程度的交叉反应,其中以EL2、EL3和3H43株McAb的交叉反应更为广泛,且可与类脂A结合,常见的革兰氏阴性菌(GNB)及其LPS均有较强的抑制EL3和3H4结合抗 原 相似文献
4.
本文研究了实验性高胆固醇血症大鼠肝及小肠中低密度脂蛋白(LDL)受体mRNA和载脂蛋白(apo)A-1mRNA的水平变化以及苯甲酸雌二醇(EB)对二者的影响。发现高脂(HC)组肝及小肠LDL受体mRNA水平分别低于正常组50%和60%(P<0.05),小肠apoA-1mRNA水平低于正常组58%(P<0.05),此时血清总胆固醇(TC)及LDL胆固醇(LDL-c)均明显高于正常组(P<0.01),血清apoA-1低于正常组(P<0.05)。HC+EB组血清TC及LDL-c明显低于HC组,而肝LDL受体mRNA水平则显著高于HC组,为HC组的3.5倍(P<0.002)。结果提示:(1)高胆固醇负荷时细胞可通过转录水平下行调节LDL受体;(2)小肠可能在apoA-1的代谢中起重要作用;(3)EB可能通过诱导肝LDL受体基因表达而降血脂。 相似文献
5.
用绿脓杆菌外毒素A(EPA)免疫后的BALB/C小鼠脾细胞,经融合后制备出4株抗PEA的单克隆抗体。从50%最大结合的单克隆抗体浓度分析可知,4株单克隆抗体的相对亲和力为4D1-4D3〉1D1-5F11〉1D7-4C10〉4H5-3E9。通过ELISA相加实验证实:4株单克隆抗体均识别相同的PEA抗原位点。 相似文献
6.
用淋球菌全菌体免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,以纯化PIA做ELISA间接法筛选,获得5株稳定分泌抗PIA的McAb的杂交瘤细胞株。5株McAb中3株为IgM类(2H11,4H8,4E10),另2株分别为IgG1(1C2)和IgG2b(5A5)亚类。2H11和1C2为高亲和力抗体,1C2与5A5识别的抗原表位相同。Westernblotting试验表明,5株McAb均能从复杂的淋球菌菌体崩解物中特异地识别分子量为35KDa的PIA抗原,与淋球菌PIB无交叉反应。 相似文献
7.
在自制的8株烯醇化酶(NSE)McAb中,经方阵排列滴定筛选出无交叉反应且效价较高的2株McAb,用辣根过氧化物酶(HRP)为标记物,建立了NSE-McAb双位点夹心ELISA。经直线回归方程、取代试验、阻断试验检验,该标准曲线近似直线关系,可测定标本中NSE的范围为5~50μg/L。对23例小细胞肺癌(SCLC)(Ⅰ和Ⅱ期4例、Ⅲ期7例、Ⅳ期12例).32例非小细胞肺癌(NSCLC),22例肺良性疾病(BPD)和36例健康体检者血清NSE进行了测定,SCLC的阳性率为82.6%(19/23),其中Ⅰ和Ⅱ期为50%(2/4);Ⅲ期为85.7%(6/7),Ⅳ期为91.7%(11/12);NSCLC的阳性率为3.1%(1/32),BPD阳性率为4.5%(1/22)。SCLC的显著高于NSCLC和BPD(P<0.01);SCLC的Ⅳ和Ⅲ期显著高于Ⅰ和Ⅱ期(P<0.01)。23例SCLC经综合治疗后,完全缓解组和部份缓解组血清NSE水平非常显著低于进展组和无改变组(P<0.01)。本文研究结果证明,NSEMcAb双位点夹心ELISA具有灵敏、特异和简便快速的特点,对SCLC的血清学诊断有较高的灵敏度和特异性,对SC 相似文献
8.
抗LPS—HDL McAb的交叉反应性 总被引:3,自引:3,他引:0
目的:制备具有广泛交叉反应性的抗LPSMcAb。方法:以内毒素-高密度脂蛋白(LPS-HDL)复合物作为包被抗原,筛选抗LPS的McAb;采用间接ELISA法鉴定其交叉反应性;以竞争抑制试验和被动溶血试验分析交叉反应的特异性。结果:用LPS-HDL筛选获得3株具有广泛交叉反应性的McAb,阳性率为75%(3/4);以LPS筛选出1株具有广泛交叉反应性的McAb,阳性率为11.1%(1/9)。结论:用LPS-HDL包被做ELISA,有利于筛选出具有广泛交叉反应性的抗LPSMcAb。 相似文献
9.
高胆固醇血症大鼠LDL受体与apoA—1mRNA的水平变化及苯甲… 总被引:4,自引:0,他引:4
本文研究了实验性高胆固醇血症大鼠肝及小肠中低密度脂蛋白(LDL)受体mRNA和载脂蛋白(apo)A-1mRNA的水平变化以及苯甲酸雌二醇(EB)对二者的影响。发现高脂(HC)组肝及小肠LDL受体mRNA水平分别低于正常组50%和60%(P〈0.05),小肠apoA-1mRNA水平低于正常组58%(P〈0.05),此时血清总胆固醇(TC)及LDL胆固醇(LDL-c)均明显于正常组(P〈0.01),血 相似文献
10.
用淋球菌全菌体免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,以纯化PIA做ELISA间接法筛选,获得5株稳定分泌抗PIA的McAb的杂交瘤细胞株。5株McAb中3株为IgM类(2H11,4H8,4E10),另2株分别为IgG1(1C2)和IgG2b(5A5)亚类。2H11和1C2为高亲和力抗体,1C2与5A5识别的抗原表位相同。Western blotting试验表明,5株McAb均能 相似文献
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抗D型葡萄球菌肠毒素单克隆抗体的研制及其初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
应用小鼠杂交瘤技术获得了5株分泌抗D型葡萄球菌肠毒素(SED)McAb的杂交瘤细胞(DC3、DC4、DB11、4D3和4D5)。其中4D3为IgM(λ),其余为IgG1(k)。这组McAb除DC3外,其它4株McAb识别的抗原构象表位相同,其相亲和力依次为4D5〉DC3〉DC4〉4D3〉DB11。利用抗SED多克隆抗体HRP标记的DC3和4D3(针对不同表位)混合McAb建立了夹心ELISA法,并 相似文献
12.
本文以大肠杆菌感染小鼠的动物模型,对我们制备的两株抗大肠杆菌J5株脂多糖单克隆抗体(EL1和EL3)免疫保护效果进行了研究.结果表明:(1)EL1和EL3均有明显提高受5LD50大肠杆菌感染小鼠存活率的作用(P<0.01);(2)EL1和EL3注射时间对其免疫保护效果有较大的影响;(3)EL1和EL3可明显延长受大剂量大肠杆菌(10LD50)感染小鼠的平均存活时间.提示EL1和EL3具有中和大肠杆菌LPS,从而降低其毒性的作用。 相似文献
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抗大肠杆菌J5株脂多糖单克隆抗体免疫保护作用的实验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
本文以大肠杆菌感染小鼠的动物模型,对我们制备的两株抗大肠杆菌J5株脂多糖单克隆抗体(EL1和EL3)免疫保护效果进行了研究。结果表明:(1)EL1和EL3均有明显提高受5ID50大肠杆菌感染小鼠存活率的作用(P<0.01);(2)EL1和EL3注射时间对其免疫保护效果有较大的影响;(3)EL1和EL3可明显延长受大剂量大肠杆菌(10LD50)感染小鼠的平均存活时间。提示EL1和EL3具有中和大肠杆 相似文献
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人心肌肌钙蛋白T单克隆抗体的研制及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
以人心肌肌钙蛋白T(cTnT)为抗原,采用脾内免疫法,免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠Sp2/0细胞融合,经间接ELISA法筛选,三次克隆化后获得5株能稳定分泌抗cTnT单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞G3、G8、G10、A5和A7。免疫球蛋白亚类鉴定其中1株为IgG2a,4株为IgM。染色体数目92~110条。将G3、G8、G10、A5的单克隆抗体腹水做1:100稀释与LDH、CK、CKMB和GOT等心肌酶均无交叉反应。5株McAb的腹水效价为3.2×10-6~1.6×10-7。McAb相加试验表明,A5和G3可识别不同的抗原表位。 相似文献
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NIDDM患者不同血管并发症ApoE基因型频率分布的… 总被引:2,自引:0,他引:2
采用多聚酶链反应(PCR),研究NIDDM患者不同血管并发症ApoE基因型及其等位基因频率分布。结果:(1)并发冠心病(CHD)组∈3/3基因型频率为52%,显著低于对照组76%(P〈0.01);∈4/3基因型频率为34%,显著高于对照组12%(P〈0.01);∈4等位基因频率为21%,显著高于对照组9%(P〈0.05),∈3频率为74%,显著低于对照组86%(P〈0.05)。(2)大血管病变组∈ 相似文献
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黄芪四君子汤对类脾虚小鼠ANP,cAMP,cGMP,T4水平的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
为探讨黄芪四君子汤在其治疗中的作用机理,本文采用放射免疫分析法,观察该方法对利血平所致类脾虚小鼠模型的T4、ANP、cAMP、cGMP水平的影响。结果显示:(1)类脾虚组小鼠T4含量比较对照低(P〈0.25),而给药组T4含量已接近对照组水平(P〉0.05);(2)组脾虚组ANP含量比对照组显著降低(P〈0.001),而给药组则明显高于类脾虚组(P〈0.01);(3)类脾虚组cAMP水平及cAMP 相似文献
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应用小鼠杂交瘤技术获得5株分泌抗D型葡萄球菌肠毒素(SED)McAb的杂交瘤细胞(DC3、DC4、DB11、4D3和4D5)。其中4D3为IgM(λ),其余为IgG1(k)。这组McAb除DC3外,其它4株McAb识别的抗原构象表位相同,其相对亲和力依次为4D5>DC3>DC4>4D3>DBll。利用抗SED多克隆抗体与HRP标记的DC3和4D3(针对不同表位)混合McAb建立了夹心ELISA法,并以该法检测了自临床标本中分离的80林金葡萄菌所产生的SED,其产毒率为41.3%。 相似文献
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本文用改良枸椽酸-枸椽酸钠法,从新鲜牛鼻表皮制备的DesmoplakinⅡ(DPⅡ)免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞在PEG介导下与Sp2/0细胞融合,经筛选、克隆化获得4株能稳定分泌DPⅡMcAb的杂交瘤细胞系(分别命名为DPy-1,2,3,4)。4株McAb均为IgGl,染色体数目为93 ̄105。免疫组化分析表明,4株DPⅡMcAb具有很高的上皮组织特异性和敏感性,并提示DPⅡ可能不存在于 相似文献
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CD4单克隆抗体在体内诱导小鼠胸腺细胞凋亡 总被引:3,自引:0,他引:3
为研究抗CD4 McAb引起胸腺细胞减少的机理,本课题探讨了CD4 McAb诱导胸腺细胞发生凋亡的可能性。小鼠注射抗CD4 McAb后,皮质胸腺细胞体积缩小,染色质凝聚;PI染色后经流式细胞计测定,显示大量的亚二倍体细胞(凋亡细胞,Apoptotic cells),与正常小鼠相比P〈0.001;片断化DNA的百分比也明显高于正常小鼠,P〈0.01。片断化DNA在凝胶电泳上呈现典型的阶梯现象。细胞内 相似文献
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抗内毒素单链抗体基因的构建、序列分析及表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:构建抗内毒素(LPS) 单链抗体基因, 并尝试其在E.coli 中的表达。方法: 采用linker Prim er Mix ,按VHlinkerVL 的结构将鼠抗LPS m Ab C3A2 的VH ,VL 基因拼接成单链抗体(ScFv) 基因;用PE373A 型全自动DNA序列分析仪测定其核苷酸序列。PCR 扩增抗LPS ScFv 基因并更换两端接头序列后,插入谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合表达载体pGEX4T1 ;转染E.coli JM109 ,以IPTG 诱导表达,SDSPAGE 分析表达产物。结果:扩增出的ScFv基因长735bp , 序列分析表明,该序列完整、正确;SDSPAGE 显示,转染入重组质粒p4TC3A2Fv 的JM109 菌经诱导后,有相对分子质量( Mr) 约为52 000 的外源蛋白表达。结论:成功地构建了鼠抗LPS ScFv 基因,并在E.coli JM109中表达了GSTScFv 融合蛋白。 相似文献