常染色体显性的薄基底膜肾病的基因连锁分析

应用２号染色体长壁与Ⅳ型胶原α３,α４基因位点连锁的ＣＡ１１和ＨａｅⅢＲＦＬＰ的多态性为遗传标记,对临床诊断为薄基底膜肾病的家系进行基因连锁定位分析。方法从外周血白细胞分离染色体ＤＮＡ,用ＰＣＲ方法扩增两个遗传标记并酶切后,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测产物。     

三个封闭群小鼠线粒体DNAPCR-RFLP分析

目的：分析ＫＭ等３个封闭群小鼠线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）的多态性,探讨实验小鼠的遗传监测方法。方法：ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术,即ＰＣＲ技术结合限制性内切酶片段长度多态分析（Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ ｆｒａｇｍｅｎｔ ｌｅｎｇｔｈ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＲＦＬＰ）。结果：ｍｔＤＮＡ Ｄ－Ｌｏｏｐ、ｔＤＮＡ１基因、ＤＮ３基因片段经ＨａｅⅢ、ＨｉｎｆⅠ、ＥｃｏＲⅤ、ＨｉｎｄⅢ、ＨｐａⅠ、ＢａｍＨⅠ、Ａｐａ     

嗜肺巴氏杆菌蛋白及抗原图谱初步分析

为了应用ＲＦＬＰ分析猪线粒体ＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ的多态性。应用ＰＣＲ对西双版纳近交系小耳猪、广西巴马小型猪、贵州小型香猪、大约克夏猪、荣昌猪和长白猪血液总ＤＮＡ样品中线粒体ＤＮＡ控制（ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ）进行扩增,２３种限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳检测。结果发展ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ酶切多态性贫乏。因此根据现用酶,应用ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析,尚不能做猪品种品系鉴     

武汉地区正常汉族人载脂蛋白B基因区域DNA多态频率的研究

应用载脂蛋白Ｂ（ＡｐｏＢ）ｃＤＮＡ探针（ＬＢ１．５），检测了２１名武汉地区正常汉族人血脂个体的ＡｐｏＢ基因限制性内切酶ＭｓｐⅠ限制性片断长度多态性（ＲＦＬＰ）等位基因频率。结果显示：２１份标本共出现２．３５ｋｂ（Ｍ_１）和２．６０ｋｂ（Ｍ_２）２条杂交片段；突变型等位基因Ｍ_２位于ＡｐｏＢ基因３’端侧翼的高变区（ＨＶＲ）内，其基因频率为０．０２４，并具有种族差异。Ｍ_２基因的检出和基因频率的获得，为进一步揭示ＡｐｏＢ基因区域在脂类代谢中的作用提供了一个很好的遗传标记。     

人白细胞L－myc遗传多态性分析

从人白细胞中分离ＤＮＡ，经ＥｃｏＲＩ酶切后，进行Ｌ－ｍｙｃＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交，得出人Ｌ－ｍｙｃ限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ）图谱。结果发现，经ＥｃｏＲＩ酶切产生Ｌ－带（１０ｋｂ）及Ｓ－带（６ｋｂ）。对Ｌ－ｍｙｃＲＦＬＰ与肺癌恶变与预后的关系进行了讨论。     

人肺癌、胃癌及肝癌c－Ki－ras第12密码子点突变的研究

以３０例肺癌、４０例胃癌及２２例肝癌石蜡包埋组织提取的ＤＮＡ为模板，经两轮ＰＣＲ扩增一限制性内切酶酶切，用限制性酶切片段长度多态性方法（ＲＦＬＰ）检测ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子点突变。结果发现，肺癌组织中２０％（６／３０）有突变，其中４０％（４／１０）鳞癌和２０％（２／１０）腺癌有突变，小细胞肺癌（０／１０）无突变；４０例胃癌中仅１例（２．５％）有突变，２２例肝癌无１例突变。ＰＣＲ－ＲＦＬＰ是一种很敏感及快速检测基因突变的方法。     

肺癌中Ki—ras癌基因突变的检测及其临床意义

肺癌中Ｋｉ－ｒａｓ癌基因突变的检测及其临床意义张雷刘鸿瑞王志永张淑华我们用多聚酶链反应－限制性内切酶片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）技术，检测肺癌及邻近正常肺组织中Ｋｉ－ｒａｓ基因第１２密码子突变，以探讨Ｋｉ－ｒａｓ基因突变在肺癌发生中的作用及其临...     

DNA结合多态性在法医血液遗传学的应用

法医血液遗传学是应用分子遗传学的理论及技术研究并解决司法实践中的血液及其它组织标本的司法鉴定的一门法医学分支学科。其研究范围包括遗传物质的本质、遗传物质的传递及遗传信息的实现 ,所采用的技术为ＤＮＡ多态性分析技术 ,即利用遗传标记的多态性对生物检材进行种类、种属、表型的鉴别及亲子鉴定。遗传标记的发展大致可以分为限制性片段长度多态性 (ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ,ＲＦＬＰ )、可变数目串联重复(ｖａｒｉａｂｌｅｎｕｍｂｅｒｔａｎｄｅｍｒｅｐｅａｔ ,ＶＮＴＲ) …     

人肺癌,胃癌及肝癌c—Ki—ras第12密码子点突变的研究

以３０例肺癌、４０例胃癌及２２例肝癌石蜡包埋组织提取的ＤＮＡ为模板，经两轮ＰＣＲ扩增－限制性内切酶酶切，用限制性酶切片段长度多态性方法检测ｃ－Ｋｉ－ｒａｓ第１２密码子点突变。     

16s～23s rDNA间隔区序列RFLP分析在分枝杆菌分类鉴定中的应用

目的：通过对分枝杆菌１６ｓ～２３ｓｒＤＮＡ间隔区序列ＤＮＡ ＰＣＲ扩增和限制性酶切分析，评价其在分枝杆菌分类鉴定中的价值。方法：对２１种分枝杆菌和９种亲缘关系较远的非分枝杆菌和４种亲缘关系较近的非分枝杆菌的１６ｓ～２３ｓ ｒＤＮＡ间隔区序列ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增并对扩增产物进行限制性内切酶ＨａｅШ．Ｍｓｐ ｉ消化反应，分析不同菌种扩增 段及其限制性片段长度多态性的差异。结果：ＰＣＲ扩增结果显示：分枝     

PCR-RFLP技术DLA-DRB1基因分型在狗卵巢移植配型中的应用

目的 探讨狗组织相容性系统（ＤＬＡ）－ＤＲＢ１基因分型方法及用于狗卵巢移植配型的可行性。方法 选择特定的引物和６种限制性内切酶,采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ｐｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ ｆｒａｇｍｅｎｔ ｌｅｎｇｔｈ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ,ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）技术建立了ＤＬＡ－ＤＲＢ１基因分型的方法。     

两株粉,尘螨基因组DNA的研究

了解粉螨与尘螨基因组ＤＮＡ特征，以在基因水平上探讨二者的相互关系，方法：通过限制性酶切片段多态性分析和随意扩增的多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析，对二种粉螨及尘螨基因组ＤＮＡ进行比较。结果限制性内切酶ＥｃｏｒＩ、ＰｓｔＩ消化腐酪食螨，屋尘螨基因组ＤＮＡ存在不同的限制性酶切图谱；选用４种机引物对腐酪食螨及屋尘进行扩增，仅引物ＰＢＲ３２２／ＥｃｏｒＩ扩增片段显示出各自特有带型，计算二者ＲＡＰＤ相似率为６４．     

甲型血友病携带者的PCR—RFLP检测

目的 探讨甲型血友病携带者的基因诊断方法。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合限制性酶切片段长度多态（ＲＦＬＰ）分析技术,对５个甲型血友病家系的２９名成员进行了ＦⅧ基因外显子１８和内含子２２两个多态位点的扩增片段限制酶切长度多态性连锁分析。并对其中的１个家系进行了产前基因诊断。结果 ５个家系中有５名女性被确定为携带者,１个家系的男性胎儿被确定为病人。结论 ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法可对多数甲型血友病进行     

p53基因点突变与胃癌细胞恶性程度及临床预后的关系

为进一步明确胃粘膜癌变过程中基因变异的规律，本研究以胃癌手术标本、胃镜活检标本、体外培养细胞为研究体系，利用聚合酶链反应／限制性内切酶长度多态性（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ）、ＰＣＲ／单链构象多态性（ＳＳＣＰ）、ＤＮＡ序列分析、免疫组化及原位杂交多项研究手段，系统研究了６０例胃癌、３０例异型增生和３３例肠上皮化生病变中基因的改变。这一结果提示ｐ５３基因异常与胃癌的发生、发展密切相关。     

遗传性因子Ⅶ缺乏症一家系基因分析

目的 鉴定遗传性凝血因子Ⅶ（ＦⅦ）缺乏症一家系的ＦⅦ基因突变。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）分段从基因组ＤＮＡ扩增出先证者及正常人的ＦⅦ基因各显子ＤＮＡ片段,经ＰＣＲ产物直接测序法,分析各片段序列;采用ＰＣＲ结合限制性内切酶ＨｇｉＣ Ⅰ酶切分析先证者及其家系成员的ＦⅦ基因组ＤＮＡ片段。结果 先证者的ＦⅦ基因第３２９密码子存在ＴＧＴ→ＧＧＴ错义突变;限制性内切酶酶切的结果确证先证者为Ｃ３２９Ｇ纯合型突变,家系中有３个成员为Ｃ３２９Ｇ杂合型突变。结论 在国内外首次发现存在于遗传性ＦⅦ缺乏性患者的ＦⅦ基因第３２９密码子ＴＧＴ→ＧＧＴ突变,导致所编码的半胱氨酸被甘氨酸替代;ＰＣＲ结合限制性内切酶ＨｇｉＣ Ⅰ酶切分析可用于该突变的快速诊断。     

聚合酶链反应——限制性片段长度多态性检测载脂蛋白E基？…

目的：建立聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＥＬＰ）分析结合ＤＮＡ直接银染技术检测载脂蛋白Ｅ基因多态性。方法：选择江苏地区汉族健康人１６８例及冠心病６３例，ＰＣＲ扩增ＡｐｏＥ基因第４外显子包含编码第１１２位和第１５８位氨基酸残基的基因序列，ｃｆｏＩ限制性内切酶酶切后电泳，银染色后分析ＡｐｏＥ基因型。结果：汉族健康人群及冠心病人群ＡｐｏＥ基因型频率分别为ε２／２０．６％，０；ε２／３１１     

6个近交系小鼠线粒体DNA D-Loop区PCR-RFLP分析

分析Ｔ７３９等６个近交系小鼠线粒体ＤＮＡＤ－Ｌｏｏｐ区的多态性,探讨近交系小鼠的遗传监测方法。方法：ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术,即ＰＣＲ技术结合限制性片段长度多态分析。结果Ｄ－Ｌｏｏｐ片段经ＨａｅⅢ、ＨｉｎｆⅠ、ＥｃｏＲⅤ、ＩＮＤⅢ、ＨｐａⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＡｐａⅠ、ＮｄｅⅡ、ＸｈｏⅠ、ＸｂａⅠ内切酶消化后,Ｔ７３９、ＴＡ２、６１５、ＢＡＬＢ／Ｃ、Ｃ３Ｈ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠表现出完全相同的酶切栈局,未发     

MaeⅢ酶解诊断Leber遗传性视神经萎缩

目的 探讨内切酶ＭａｅⅢ诊断Ｌｅｂｅｒ遗传性视神经萎缩的可行性。方法 采用ＰＣＲ＾－ＲＦＬＰ技术对一个Ｌｅｂｅｒ病家系作基因分析。结果 ＭａｅⅢ成功地鉴定出母系成员ｍｔＤＮＡ１１７７８位点突变。结论 ＭａｅⅢ酶解可对该病在基因水平上作出诊断。     

安徽人FⅧ基因内及其旁侧RFLPs的研究

研究若干不相关安徽个人体的四个凝血因子Ⅷ（ＦⅧ）基因内限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰｓ）（ＢｃｌⅠ、ＨⅢ、ＸｂａⅠ、ＭｓｐⅠ）及四个基因旁侧的ＲＦＬＰｓ（ＢｓｔｘⅠ、ＰｓｔⅠ、ＭｓｐⅠ、和ＡｃｃⅠ）。ＢｃｌⅠ／ＨｉｎｄⅢ、ＸｂａⅠ、ＭｓｐⅠ基因内多态位点的杂合子频率分别为０．２３、０．４２、０．４９６。在接近内含子２２处，发现了两个额外的ＸｂａⅠ多态位点。在基因旁侧，应用ＢｓｔｘⅠ和ＰｓｔⅠ发现安     

中国北京地区绝经后汉族妇女雌激素受体基因多态性与骨密度的相关性研究

目的：研究雌激素受体（ｅｓｔｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＥＲ）基因多态性在中国北京地区绝经后的汉族妇女中的分布及其与骨密度的相关性。方法：采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ ｆｒａｇｍｅｎｔ ｌｅｎｇｔｈ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ,ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法研究ＥＲ基因的Ｘｂａ Ⅰ和Ｐｖｕ Ⅱ酶切多态性,检测骨密度,通过方差分析探讨ＥＲ基因的多态性分布与骨密度的关系。结果：ＥＲ基因Ｐｖｕ Ⅱ酶切多态性分布与桡骨松质骨以及桡骨密质骨的骨密度之间不存在相关性,而ＥＲ基因Ｘｂａ Ⅰ酶切多态性分布与桡骨松质骨以及桡骨密质骨的骨密度之间存在相关性,ＸＸ基因型骨密度值最低,ｘｘ基因型骨密度值最高。结论：ＥＲ基因Ｘｂａ Ⅰ酶切多态性分布与桡骨松质骨以及桡骨密质骨的骨密度之间显相关（Ｐ〈０