病理性瘢痕组织中微血管密度的测定及与survivin mRNA的表达关系

目的测定病理性瘢痕组织中CD105标记的微血管密度（microvesiel density,MVD）和survivin mRNA的表达,探讨病理性瘢痕组织中癌基因在血管形成中的作用。方法采用多相寡核苷酸探针原位杂交技术和免疫组织化学染色技术（SP法）,分别检测survivin mRNA、CD105蛋白在40例病理性瘢痕、20例非病理性瘢痕和20例正常皮肤组织中的表达,并计数CD105标记的MVD。结果CD105-MVD、survivinmRNA在病理性瘢痕较非病理性瘢痕和正常皮肤的表达差异皆具有统计学意义（P〈0.05）。病理性瘢痕组中survivin mRNA表达与CD105-MVD表达有相关性（P〈0.05）。结论病理性瘢痕组织中,凋亡抑制基因survivin表达上调可能参与了其血管形成过程。     

E2F1蛋白在病理性瘢痕组织中的表达

目的　增生性瘢痕和瘢痕疙瘩是临床上常见的病理性瘢痕 ,是创伤后过度愈合反应的结果 ,以成纤维细胞的异常增殖及合成分泌大量细胞外基质为特征 ,其形成机理尚不清楚 ,研究表明基因失调是其中的关键。E2F基因是细胞周期G1向S期过渡的重要调控因子 ,在调节细胞周期进程和调节细胞增殖过程中起着关键作用。本实验的目的是检测E2F1基因在病理性瘢痕组织中的表达 ,以正常皮肤组织做对照 ,初步探讨E2F1在病理性瘢痕形成中的生物学作用。方法　利用免疫组化ABC法检测正常皮肤、成熟瘢痕、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中E2F1蛋白的表达 ,并进行统计学分析。结果　增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中E2F1蛋白表达两组间无明显差异 ,与正常皮肤、成熟瘢痕对照组比较均有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　E2F1蛋白表达在病理性瘢痕组织中增高 ,促进瘢痕组织中细胞的增生 ,对病理性瘢痕的形成可能起着重要作用     

E2F1蛋白在病理性瘢痕组织中的表达

目的增生性瘢痕和瘢痕疙瘩是临床上常见的病理性瘢痕,是创伤后过度愈合反应的结果,以成纤维细胞的异常增殖及合成分泌大量细胞外基质为特征,其形成机理尚不清楚,研究表明基因失调是其中的关键.E2F基因是细胞周期G1向S期过渡的重要调控因子,在调节细胞周期进程和调节细胞增殖过程中起着关键作用.本实验的目的是检测E2F1基因在病理性瘢痕组织中的表达,以正常皮肤组织做对照,初步探讨E2F1在病理性瘢痕形成中的生物学作用.方法利用免疫组化ABC法检测正常皮肤、成熟瘢痕、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中E2F1蛋白的表达,并进行统计学分析.结果增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中E2F1蛋白表达两组间无明显差异,与正常皮肤、成熟瘢痕对照组比较均有显著性差异(P＜0.01).结论 E2F1蛋白表达在病理性瘢痕组织中增高,促进瘢痕组织中细胞的增生,对病理性瘢痕的形成可能起着重要作用.     

瘢痕内微循环的变化

目的探讨皮肤瘢痕从增生到萎缩成熟过程中组织内微循环的变化。方法采用免疫组织化学法检测烧伤创面肉芽组织、不同时期瘢痕组织和正常皮肤组织中CD34的表达，并根据CD34的表达进行血管计数，比较瘢痕浅、深层组织和不同时期瘢痕组织的血管数量、分布及形态的变化。结果各组浅、深层血管计数差异有统计学意义（P〈0．01），浅、深层血管计数，肉芽明显大于其他组（P〈0．01），1年内各组瘢痕大于1年后组瘢痕和正常皮肤组（P〈0．01）。表现为各组浅层微血管密度明显高于深层，随着皮肤瘢痕时间的增长，瘢痕组织内微血管数目逐渐减少，分布逐渐转变为有序，血管管腔通畅度逐渐增大。结论随着瘢痕时间的增长，瘢痕内微血管逐渐由新生态变为成熟态。瘢痕内正常微循环的形成可能有促进瘢痕成熟的作用。     

真核翻译起始因子4E在病理性瘢痕中的表达与作用

目的探讨真核翻译起始因子4E（eukaryotic translation initiation factor4E,eIF4E）在病理性瘢痕组织中的表达及其在病理性瘢痕形成中的作用及机制。方法（1）应用免疫组织化学SP法检测20例正常皮肤、20例成熟瘢痕、14例增生性瘢痕和25例瘢痕疙瘩组织中eIF4E蛋白的表达。（2）应用逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）测定eIF4EmRNA在8例正常皮肤、8例成熟瘢痕、7例增生性瘢痕和8例瘢痕疙瘩组织中的半定量值。结果（1）病理性瘢痕组织中eIF4E蛋白表达增高,与正常皮肤、成熟瘢痕对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）与正常对照组0．99±0．28比较,eIF4EmRNA在病理性瘢痕组织1．73±0．31中的表达显著增高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论eIF4E在病理性瘢痕组织中表达增高,eIF4E与病理性瘢痕的形成密切相关,可能对病理性瘢痕的形成起着重要作用。     

基质金属蛋白酶-2和CD105在胃癌中的表达及其相关性的研究

目的 检测基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及CD105标记的血管密度(microvessel density,MVD)在胃癌中的表达,探讨二者在胃癌发生发展及转移中的作用.方法 采用免疫组织化学方法,分别检测MMP-2和CD105标记的微血管密度在不同临床病理特征之间的关系.结果 胃癌组织中MMP-2表达阳性率为66.7%,明显高于正常胃黏膜组织,胃癌中的血管密度明显高于正常胃黏膜组织,MMP-2及血管密度在胃癌中的表达均与分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关,MMP-2阳性的血管密度明显高于阴性组.结论 MMP-2和CD105参与胃癌的发生和进展,MMP-2能促进胃癌中CD105阳性的血管生成.     

CD105和Ⅷ因子相关抗原对大肠癌新生血管标记的研究

目的：探讨CD105和Ⅷ因子相关抗原（F-8RAg）在大肠癌的表达意义，并将二者对大肠癌新生血管的标记作用进行对比。方法：采用鼠抗人CD105单克隆抗体和鼠抗人F-8RAg原单克隆抗体，应用免疫组化技术对40例大肠癌手术切除的新鲜标本及40例正常对照组的微血管进行定量检测，计数100倍视野下5个血管丰富视野的微血管密度（MVD），取其均值。结果：大肠癌组织与正常对照组的MVD间的差异具有非常显著性（P〈0．01）；以CD105和F-8RAg为新生血管标记物测得的大肠癌微血管密度间的差异具有非常显著性（P〈0．01）；以CD105标记的大肠癌微血管密度与大肠癌的淋巴结转移、远处转移及临床分期有关（P〈0．01）；而以F-8RAg为标记物测得的MVD与淋巴结转移、远处转移及临床分期无关（P〉0．05）。结论：大肠癌新生血管形成与肿瘤的生长、转移及预后有关，CD105和F-8RAg均在大肠癌有良好表达，但CD105在标染肿瘤新生血管上比F-8RAg更具有特异性。     

病理性瘢痕组织中SDF-1、CXCR4的表达

目的:检测病理性瘢痕组织中SDF-1、CXCR4的表达。方法:采用免疫组织化学SABC法检测58例病理性瘢痕(增生性瘢痕30例,瘢痕疙瘩28例)、30例非病理性瘢痕及28例正常皮肤组织中SDF-1、CXCR4的表达。结果:SDF-1在病理性瘢痕中的阳性表达率均高于非病理性瘢痕与正常皮肤组织(P<0.01),且在瘢痕疙瘩中的阳性表达率高于增生性瘢痕(P<0.05)。CXCR4在病理性瘢痕、非病理性瘢痕及正常皮肤组织中均为低表达或不表达,且各组间的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:SDF-1/CXCR4生物轴在病理性瘢痕形成过程中的作用是通过SDF-1的表达升高实现的。     

CD105和Ⅷ因子相关抗原对大肠癌新生血管标记的研究

目的：探讨CD105和、Ⅷ因子相关抗原（F-8 RAg）在大肠癌的表达意义，并将二者对大肠癌新生血管的标记作用进行对比。方法：采用鼠抗人DCl05单克隆抗体和鼠抗人第Ⅷ因子相关抗原单克隆抗体，应用免疫组化技术对40例大肠癌手术切除的新鲜标本及40例正常对照组织的微血管进行定量检测，计数100倍视野下5个血管丰富视野的微血管密度（MVD），取其均值。结果：大肠癌组织与正常对照组织的微血管密度（MVD）间的差异具有非常显著性（P〈0．01）；以DC105和Ⅷ因子相关抗原为新生血管标记物测得的大肠癌微血管密度间的差异具有非常显著性（P〈0．01）；以DC105标记的大肠癌微血管密度与大肠癌的淋巴结转移、远处转移及临床分期有关（P〈0．01）；而以Ⅷ因子相关抗原为标记物测得的MVD与淋巴结转移、远处转移及临床分期无关（P〉0．05）。结论：大肠癌新生血管形成与肿瘤的生长、转移及预后有关，DC105和Ⅷ因子相关抗原均在大肠癌有良好表达，但CD105在标染肿瘤新生血管上比Ⅷ因子更具特异性。     

病理性瘢痕中结缔组织生长因子的免疫电镜观察

目的：研究结缔组织生长因子（CTGF）在病理性瘢痕组织中的表达定位，以探讨其在病理性瘢痕中的作用及与病理性瘢痕形成的关系。方法：分别留取正常皮肤2例、浅表性瘢痕3例、增生性瘢痕、增生性瘢痕边缘正常皮肤、瘢痕疙瘩及瘢痕疙瘩边缘正常皮肤各5例组织标本，用特异性抗体作为标记物，用胶体金作示踪物进行免疫电镜观察，观察标记物所在位置，以了解在不同组织中表达水平的差异性。结果：CTGF在增生性瘢痕、瘢痕疙瘩、瘢痕疙瘩边缘正常皮肤中的表达均明显高于正常皮肤、浅表性瘢痕及增生性瘢痕边缘正常皮肤。免疫电镜标记显示成纤维细胞细胞超微结构清晰，金颗粒呈团状、点灶状分布，特异性强，CTGF蛋白阳性标记主要位于粗面内质网，粗面内质网核糖体、胶原纤维、细胞外基质、桥粒连接、常染色质等部位也有表达。结论：CTGF与病理性瘢痕的形成有相关性，在其发病过程中可能发挥重要作用。     

CD105在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨CD105在结直肠癌中的表达及其作为肿瘤新生血管标记物的临床价值。方法采用鼠抗人CD105单克隆抗体(MAb),应用免疫组织化学技术检测48例结直肠癌手术切除标本及48例对照组织的微血管密度(MVD),并以Ⅷ因子相关抗原(F-8RAg)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达作为对照研究。结果(1)MVD及VEGF在结直肠癌组织与对照组织间表达的差异具有非常显著性意义(P<0.001,P<0.01);(2)以CD105和F-8RAg测得的MVD差异具有非常显著性意义(P<0.001);(3)VEGF在结直肠癌的表达与CD105的表达呈显著正相关(P<0.01),而与F-8RAg的表达无关(P>0.05)。结论CD105在结直肠癌组织新生血管有良好表达,可以作为结直肠癌新生血管有价值的标志物。以CD105测得的MVD可以被认为是与肿瘤生长、转移及预后有关的一种重要指标。     

SDF-1、CXCR4及ERK1／2在病理性瘢痕中的表达及临床意义

目的：检测病理性瘢痕组织中SDF-1,CXCR4及ERK1／2的表达并探讨其在病理性瘢痕中的相互作用机制。方法：采用免疫组织化学SABC法检测66例病理性瘢痕,25例非病理性瘢痕及27例正常皮肤中SDF-1,CXCR4及ERK1／2的表达。结果：与正常皮肤及非病理性瘢痕相比,SDF-1、CXCR4及ERK1／2三者在病理性瘢痕中均高表达（P〈0．05）;在病理性瘢痕中,SDF—1与ERK1／2的表达呈正相关关系（r=0．293,P〈0．05）,CXCR4和ERK1／2的表达呈正相关关系（r=0．284,P〈O．05）结论：SDF-1／CXCR4生物轴在病理性瘢痕形成过程中可能通过调节ERK1／2途径从而在病理性瘢痕的增生中发挥重要作用。     

CD105和细胞周期蛋白D1协同表达与食管鳞癌淋巴结转移及预后的关系

目的 探讨食管鳞癌中CD105和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的协同表达与淋巴结转移和预后的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测南通市第一人民医院收治的80例食管鳞癌患者食管鳞癌组织中CD105和cyclin D1的表达,分析两者协同表达与食管鳞癌淋巴结转移及预后的关系.选取80例正常食管组织作对照.采用方差分析或t检验、x2检验、Pearson相关分析,生存分析采用Kaplan-Meier法,CD105的表达用微血管密度(MVD)值以-x±s表示.结果 食管鳞癌组织和正常食管组织CD105表达分别为36±8和11±3;Cyclin D1阳性表达率分别为61%(49/80)和23%(18/80),两者比较,差异有统计学意义(t=25.129,x2=4.972,P<0.05).按照食管鳞癌中CD105标记的MVD均值36为界,分为LCD105(MVD≤36)和HCD105(MVD＞36),其中LCD 44例,HCD 36例.LCD105淋巴结转移9例,HCD淋巴结转移26例.Cyclin D1阳性表达者有淋巴结转移28例,阴性表达者淋巴结转移7例.经Pearson列联相关分析显示CD105高表达、cyclin D1阳性表达与淋巴结转移有关(x2=21.562,9.217,P<0.05).HCD105+cyclin D1阳性28例,生存时间为(31±6)个月;LCD105+cyclin D1阳性21例,生存时间为(47±7)个月;HCD105+cyclin D1阴性8例,生存时间为(51±9)个月;LCD105+cyclin D1阴性23例,生存时间为(61±5)个月,4者比较,差异有统计学意义(F=11.76,P<0.05).结论 CD105和cyclin D1两者协同表达可作为判断食管鳞癌预后的指标.     

ILK,PI3K,PTEN蛋白在病理性瘢痕中的表达

目的：探讨病理性瘢痕组织中整合素连接激酶（ILK）,第十染色体同源丢失性磷酸酶基因（phosphatase and tensin homolog deleted on Chromosome10,PTEN）和磷酯酰肌醇3一激酶（PI3K）的表达。方法：采用免疫组化sP法检测ILK,PTEN,PI3K在40例病理性瘢痕,20例非病理性瘢痕及20例正常皮肤组织中的表达水平。结果：病理性瘢痕组织中,ILK,PI3K蛋白阳性表达率分别为67．50％,70．00％,均高于非病理性瘢痕及正常皮肤组（P〈0。0167）;PTEN蛋白阳性表达率为25．00％,低于其他两组（P〈0．0167）。PTEN的表达与ILK,PI3K的表达强度成负相关（P〈0．05,r〈0）,ILK与PI3K表达成正相关（P〈0．05,r=O．63）。结论：ILK,PI3K及PTEN可能依赖PTEN／PI3K／ILK／PKB信号传导通路共同参与病理性瘢痕的形成,且ILK,PI3K可能起协同作用,与PTEN互相拮抗。     

内质网分子伴侣GRP94、GRP78和XBP1在病理性瘢痕中的表达初探

目的：检测内质网应激反应的关键分子葡萄糖调节蛋白94（GRP94）、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和X-盒结合蛋白1（XBP1）mRNA在病理性瘢痕的表达,探讨其基因表达及内质网应激反应与病理性瘢痕形成及转归的关系。方法：用RT-PCR法检测GRP94、GRP78和XBP1mRNA在：①瘢痕疙瘩（13例）、增生性瘢痕（17例）和正常皮肤（15例）组织以及体外培养的瘢痕疙瘩（5例）、增生性瘢痕（5例）和正常皮肤（6例）成纤维细胞中的表达;②体外培养瘢痕疙瘩和增生性瘢痕成纤维细胞（各5例）中经0.1mg/ml氢化可的松作用前后的表达。结果：①GRP94、GRP78和XBP1mRNA在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤组织及其成纤维细胞中的表达均无显著性差异（P〉0.05）;②0.1mg/ml氢化可的松作用后,GRP94mRNA在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕来源的成纤维细胞中的表达量均显著下降,具有统计学意义（P〈0.01）;而GRP78和XBP1mRNA在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕来源的成纤维细胞中的表达量改变均无显著性差异（P〉0.05）。结论：内质网分子伴侣GRP94、GRP78和XBP1在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕组织及其成纤维细胞中基因转录与正常皮肤组织及其成纤维细胞中基因转录水平一致;GRP94mRNA的表达量显著下降可能是糖皮质激素治疗病理性瘢痕的机制之一。     

曲安奈德注射和电子线照射及手术治疗兔耳瘢痕的研究

目的 观察采用生理盐水、曲安奈德、手术、电子线照射等治疗对兔耳增生性瘢痕的形态学影响,探寻治疗瘢痕的最优方案.方法 建立兔耳腹侧增生性瘢痕模型.随机分为空白组（A组）、生理盐水组（B组）、手术加生理盐水组（C组）、曲安奈德组（D组）、手术加曲安奈德组（E组）、电子线组（F组）、手术后2d电子线组（G组）、手术后7d电子线组（H组）,通过HE染色、VG染色、甲苯胺蓝染色、CD34和α-SMA免疫组织化学行组织形态学观察.结果 胶原纤维观察显示：A、B组,D、G组,F、H组差异无统计学意义（P＞0.05）,其余各组两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）.甲苯胺蓝染色发现肥大细胞不典型.微血管观察显示：A、B组,F、H组,G、H组差异无统计学意义（P＞0.05）,其余各组两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）.成肌纤维细胞观察显示：A、B组差异无统计学意义（P＞0.05）,其余各组两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 曲安奈德注射治疗兔耳瘢痕效果优于电子线放疗,电子线术后早期放疗效果优于愈合后放疗,曲安奈德、电子线联合手术治疗效果优于单一治疗.