终点法底物耗尽现象的自动识别

目前各种型号的全自动生化分析仪在各级医院检验科已得到广泛应用，但对于终点法底物耗尽现象各种设备自动识别的参数设置各不相同，各试剂供应商提供的参数也存在一些不合理的地方，大部分限制参数为开放式，对底物耗尽现象根本起不到自动识别的限制作用，给临床高值标本的分析带来很大的误差。本文以岛津CL-8000全自动生化分析仪双试剂终点法测定血糖为例，就终点法底物耗尽现象自动识别的参数设置条件及临床实际应用情况进行总结，供同行参考。     

HK法葡萄糖测定中克服溶血、脂浊、黄疸干扰的探讨

目的　探讨己糖激酶 (HK)法葡萄糖测定中试剂加样类型、读测法和副波长的不同组合对克服溶血、脂浊、黄疸干扰的作用。方法　用单试剂或双试剂类型、终点法或二点法、副波长为 0、4 80或 5 4 6nm等组成的12套检测程序 ,在日立 70 6 0分析仪上同时测定溶血、脂浊或黄疸血清及其对照血清的葡萄糖。结果　单试剂二点法组 (含 3种副波长类型 )干扰样品的误差 (绝对值 )均 <5 % ,明显优于双试剂二点法组和终点法组。结论　在本实验条件下 ,采用单试剂二点法作HK法葡萄糖分析 ,可将溶血、脂浊和黄疸样品的误差控制在 5 %以下     

HK法葡萄糖测定中克服溶血、脂浊、黄疸干扰的探讨

目的探讨己糖激酶(HK)法葡萄糖测定中试剂加样类型、读测法和副波长的不同组合对克服溶血、脂浊、黄疸干扰的作用.方法用单试剂或双试剂类型、终点法或二点法、副波长为0、480或546 nm等组成的12套检测程序,在日立7060分析仪上同时测定溶血、脂浊或黄疸血清及其对照血清的葡萄糖.结果单试剂二点法组(含3种副波长类型)干扰样品的误差(绝对值)均＜5%,明显优于双试剂二点法组和终点法组.结论在本实验条件下,采用单试剂二点法作HK法葡萄糖分析,可将溶血、脂浊和黄疸样品的误差控制在5%以下.     

电解质仪线性参数设置方法探讨

目的建立一种有效设置HC-9885型电解质仪线性参数的方法。方法用三种不同方法设置电解质仪的线性参数，然后分别测定5个不同取值的质控品，统计学分析实测离子浓度均值与其靶值的误差。结果回归法的比例系统误差和恒定误差最小，三种设置方法测定离子浓度的F≥F0．01（1：4）-21．4，P≤0．01。结论在三种方法中回归法是一种非常有效的设置方法。     

全自动生化分析仪参数设置与应用

目的 对全自动生化分析仪的参数进行合理设置与应用,保证测定结果的准确.方法 使用OLYMPUS2700全自动生化分析仪对速率法测定的项目的低限、高限、线性、延迟时间、试剂空白限参数进行设置,观察不同的参数设置方式对结果的影响.结果 不同的参数设置方式测定的结果之间相差很大.结论 检验人员在仪器使用前一定要对仪器的参数进行正确地分析理解,合理地设置,从而保证测定结果的准确.     

自动分析中高酶样品测定的结果核查

生化自动分析仪使用多点连续监测速率法测定酶的活性。这类仪器均通过对信号 (吸光度 )———时间反应曲线的监查 ,控制分析质量 ,一般设有检查反应的线性和监测底物耗尽的参数。但能使用通用试剂的仪器没有预先固定的参数设置 ,需要使用人员根据试剂和方法的不同自己去设置参数 ,如果未设置或设置不当会造成错误结果。虽然各家仪器设计的具体方法不同 ,但基本原理是一致的。本文以东芝 (ＴＯＳＨＩＢＡ)公司生产的ＴＢＡ 4 0ＦＲ生化自动分析仪测定ＡＬＴ为例 ,介绍有关的参数设置方法。1　比值检查 (ｒａｔｉｏｓ)的设定此参数用来比较两…     

血清铜nitro—PAPS终点比色法测定测量点选择的研究

目的 研究不同测量点设置方式对2-(5-硝基-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚二钠(nitro-PAPS)终点比色法测定血清铜结果的影响,以获取准确、可靠的血清铜检验结果.方法 分别采用一点终点法、双置二点终点法和单置二点终点法检测样本中铜含量,以质控品、临床标本、精密度和准确度分析结果评价检测效果,应用SPSS 13.5统计软件对实验结果进行分析.结果 双置二点终点法和单置二点终点法通过质控品评价和临床标本验证且精密度与准确度符合要求,而一点终点法则否.结论 nitro-PAPS比色法测量血清铜时,选择双置二点终点法和单置二点终点法测量点设置方式均可获可靠的血清铜检验结果.     

三种反应类型测定血浆葡萄糖的实验观察

目的在生化分析仪设置的三种反应类型下,对葡萄糖氧化酶法测定血浆葡萄糖浓度进行实验观察和应用评价,显示其优异的特性。方法在500nm的波长下设置终点法(End-Point)、两点法(EP-2Points)及速率法(Kinetic),通过精密度试验、线性试验、对比试验和干扰试验进行评价。结果三种反应类型的精密度试验结果:批内CV为1.71～2.51%,批间CV为2.17～3.01%;线性试验结果:终点法0.055～22.2mmol/L、两点法0.024～2.2mmol/L、速率法0.0123～60mmol/L;对比试验结果:终点法作为对照组,与两点法及速率法的对比试验结果的相关系数(r)为0.999,P>0.05,直线回归方程为Y1=0.997x-0.028、Y2=0.996x-0.025;干扰试验结果:终点法TG<11.3mmol/L、两点法TG<15.3mmol/L、速率法TG<20.5mmol/L不影响测试结果。结论三种反应类型测定血浆葡萄糖在线性范围内的重复性能满足临床需要,速率法既能提高抗干扰能力又能增大线性范围。     

用新色原双试剂结合速率法测定血清葡萄糖浓度

利用新色原建立测定血清葡萄糖浓度的方法．以葡萄糖氧化酶为基础用双试剂结合速率法进行定量分析．结果：葡萄糖浓度达50．0mmol／L反应仍呈良好的线性；回收率为99．9％，日内CV为0．88％，日间CV为2．03％，除高浓度的血红蛋白外，能有效地避免血清中氧化物、浊度、色素等物质的干扰，测定结果与葡萄糖氧化酶／酚法和葡萄糖激酶法有良好的相关性，参考值范围为3．88～5．56（4．72±0．43）mmol／L．结论：该方法由于试剂稳定，成本低，测定方法可靠，适合在具有双试剂分析功能的自动生化分析仪上使用．     

三种反应类型测定血浆葡萄糖的实验观察

目的 在生化分析仪设置的三种反应类型下,对葡萄糖氧化酶法测定血浆葡萄糖浓度进行实验观察和应用评价,显示其优异的特性.方法 在500nm的波长下设置终点法(End-Point)、两点法(Ep-2 Points)及速率法(Kinetic),通过精密度试验、线性试验、对比试验和干扰试验进行评价.结果 三种反应类型的精密度试验结果:批内CV为1.71～2.51%,批间CV为2.17～3.01%;线性试验结果:终点法0.055～22.2mmol/L、两点法0.024～2.2mmol/L、速率法0.0123～60mmol/L;对比试验结果:终点法作为对照组,与两点法及速率法的对比试验结果的相关系数(r)为0.999,P＞0.05,直线回归方程为Y1=0.997x-0.028、Y2=0.996x-0.025;干扰试验结果:终点法TG＜11.3mmol/L、两点法TG＜15.3mmol/L、速率法TG＜20.5mmol/L不影响测试结果.结论 三种反应类型测定血浆葡萄糖在线性范围内的重复性能满足临床需要,速率法既能提高抗干扰能力又能增大线性范围.     

血清总蛋白测定试剂的改良与应用效果评价

目的　探讨能消除脂质与葡聚糖双重干扰的血清总蛋白测定方法。方法　用氢氧化钾代替Doumas法试剂中的氢氧化钠,使脂质的溶解度增大,以消除或减低脂质所致反应液混浊。优选调整酒石酸钾钠的浓度,以消除葡聚糖对测定的干扰。用正交法设计实验,优选氢氧化钾和酒石酸钾钠的最佳浓度。结果　含氢氧化钾 143mmol/L、酒石酸钾钠 56.7mmol/L的改良试剂与含 TG 5.6mmol/L、葡聚糖60g/L的血清反应均不显混浊,可不设标本空白。TG>5.6mmol/L时,反应液混浊程度较Doumas法轻,可用标本空白纠正。对蛋白标准液和新鲜混合血清反应的吸收曲线相同。吸收峰530~560nm,最大峰值546nm,与Doumas法一致。改良试剂和Doumas试剂与蛋白反应的比吸光度分别为0.299 2L·g-1·cm-1和0.303 6L·g-1·cm-1。测定线性范围28~140g/L。回归方程y=0.892 5+0.272 7xL·g-1·cm-1,r=0.999 5。与 Doumas法平行测定外观正常的血清 72 例。配对 t检验,t=0.99,P>0.2。结论　改良试剂性能稳定,成本低廉,既能消除脂质与葡聚糖的双重干扰,又保留了Doumas法的优点。适合手工、半自动和全自动生化分析仪测定血清总蛋白。     

New chromogen for assay of glucose in serum.

We describe a colorimetric assay for glucose determination in human serum, with use of the chromogen 2-amino-4-hydroxybenzenesulfonic acid (AHBS), glucose oxidase, and peroxidase. With this assay, glucose concentrations less than or equal to 27.8 mmol/L can be measured in serum, with a sample/reagent volume ratio as low as 0.0025. The chromogen itself is easily soluble in water and does not require other components for the color change, making the reagent composition less complex. A single working reagent is used, and the reaction is completed within 10 min at 37 degrees C. The absorbance of the yellow reaction product is measured at 415 nm, and a blank sample measurement is not needed. The average analytical recovery of glucose in different human sera was 97.6%, with no significant interference of reducing compounds in serum. The results of the recommended procedure correlated well with those of the phenol/4-aminoantipyrine method of Trinder.     

维生素C对单试剂氧化酶法检测总胆固醇和三酰甘油的干扰分析

目的分析不同维生素C(VC)浓度对单试剂氧化酶法检测总胆固醇(CHOL)和三酰甘油(TG)的干扰影响,确定影响临床应用价值的最低VC干扰浓度。方法收集覆盖CHOL、TG检测线性范围的新鲜血清样本各10份,制备不同浓度梯度的VC干扰管,单试剂氧化酶法测定CHOL和TG,计算加入不同梯度浓度的VC前后CHOL、TG的差值及相对偏差,使用国家卫生行业标准(WS/T403-2012)的允许总误差判断偏差是否具有临床意义,确定不同CHOL、TG浓度对VC影响检测结果不可接受的浓度。结果VC对单试剂酶法检测CHOL、TG的干扰为负干扰,干扰值与VC干扰浓度呈正相关关系,随着干扰浓度的增加,干扰值越大。相关关系方程式为TG:Y=-1.0021 X(r 2=0.9956);CHOL:Y=-0.997 X-0.0213(r 2=0.9976)。结论VC对单试剂氧化酶法检测CHOL和TG产生负干扰,产生具有临床意义的干扰与VC干扰浓度及CHOL、TG值密切相关。     

缺血修饰清蛋白测定试剂的性能评价

目的：评价终点法测定缺血修饰清蛋白（IM A ）试剂盒的性能,判断其分析性能是否满足临床要求。方法应用终点法测定血清中的IM A浓度,对试剂盒的精密度、正确度、线性及参考区间做出评价。精密度按照定量测量方法的精密度性能评价（EP5‐A2）指南标准进行评价;正确度按照定值参考物质检测的回收实验批准（EP15‐A ）指南标准进行评价;线性范围按照EP6‐A指南推荐方法进行评价;参考区间按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）标准进行评价。结果该IMA试剂盒参考范围适用本实验室;线性良好,精密度、正确度均在规定范围内。结论该商品化IM A试剂盒符合实验室性能标准,性能良好,可供本实验室对大批量血清标本进行检测。     

丙型肝炎病毒抗体检测试剂在高危人群中的应用评价

目的 对研制的丙型肝炎病毒（HCV）抗体检测试剂（双抗原夹心法）在高危人群中的应用进行评价，并与间接法进行比较。方法 收集河北省固安县丙型肝炎高发地区A村38份、B村47份，共85份样品，采用研制的抗-HCV检测试剂（双抗原夹心法）及间接法同时测定样品抗-HCV，对检测结果不符的样品用HCV-RIBA补充试剂进行确认。结果 85份样品中，间接法检测阳性76份（89．41％），阴性9份；双抗原夹心法检出阳性73份（85．88％），阴性12份。有3份间接法检测弱阳性，而双抗原夹心法检测为阴性，经HCV-RIBA补充试剂确认2份为阴性，1份仅1条带阳性，再经病毒核酸定量检测为（1．2～4．8）×10^2copies／ml，HCVRNA测定为阴性。结论 研制的双抗原夹心法抗-HCV检测试剂的灵敏度与间接法相同，特异性优于间接法。     

梅毒螺旋体明胶凝集试验对酶联免疫吸附试验法和金标法梅毒抗体检测的结果评价

目的应用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)法对ELISA法和胶体金法梅毒血清学检测试剂的临床适用性进行评价。方法收集6 291例临床手术前或输血前住院患者的血清标本,采用ELISA法(试剂A、试剂B)和金标法分别进行初筛检测,初筛阳性或弱阳性标本用TPPA法做确证试验。结果血清标本6 291份中,试剂A、试剂B、金标法检测阳性分别为66、64、56份,金标法阳性检出率与试剂A、B比较,差异无统计学意义(P0.05)。阳性标本经TPPA确证为66份,其中试剂A、试剂B阳性均为61份,金标法为56份。试剂A检测为阳性的5份标本及试剂B检测为阳性的3份标本,经TPPA确证为阳性的分别为3、2份,金标法灵敏度与试剂A、B比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 ELISA法灵敏度高,易实现自动化酶联免疫分析,适合临床手术前或输血前患者标本的筛查,金标法灵敏度低,但特异度高,方法简捷,适用于大规模健康体检及急诊手术前的初筛试验。为避免医疗纠纷,对ELISA法和金标法阳性的标本应用TPPA法来确诊。     

竞争抑制法检测抗-HBc总抗体的影响因素及对策

目的研究酶联免疫吸附试验(ELISA)待测血清标本与辣根过氧化物酶(HRP)标记的乙型肝炎病毒(HBV)核心抗体(抗-HBc-HRP)加入间隔时间对抗-HBc总抗体检测结果的影响。方法选择HBV标志物检测结果为阴性的标本分A、B、C 3组:A组,加样后延长室温放置不同时间再加入抗-HBc-HRP;B组,加样同时加入抗-HBc-HRP延长室温放置不同时间;C组,A组方式测定的阴性转阳性标本再用ELISA试剂2和化学发光(CLIA)试剂重复测定,确认阴、阳性结果。结果A组加样方式对抗-HBc总抗体检测结果影响明显,且加样和加入抗-HBc-HRP的间隔时间越长,标本的假阳性越多;B组加样方式对抗-HBc总抗体检测结果基本无影响;C组ELISA试剂1和试剂2有72.8%的检测结果一致;20例ELISA阴性转阳性标本经过CLIA方法验证仍为阴性。结论A组的不公平竞争在不同时间内可出现程度不等的抗-HBc总抗体假阳性;B组加样方式可最大限度地减少抗-HBc总抗体假阳性,保证检验质量。     

A semiautomated micromethod for dextran in the presence of glucose.

A semiautomated method for microanalysis of dextran with anthrone reagent has been developed. The method utilizes the Technicon inulin manifold and other standard AutoAnalyzer equipment. Since the anthrone method is sensitive to plasma glucose, a glocuse oxidase method which eliminates glucose in samples to be analyzed for dextran has also been developed. When solutions containing 50 mg. per 100 ml. of dextran were compared to solutions containing 50 mg. per 100 ml. of dextran plus up to 200 mg. per 100 ml. glucose, no significant difference was observed. The coefficient of the anthrone-glucose oxidase method is 0.039, which is within the error of the AutoAnalyzer itself.     

HBsAg胶体金检测试剂进货性能验证的探讨

目的通过使用已知水平的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)标准物质和HBsAg阳性标本验证HBsAg胶体金试剂(简称乙肝试纸条)性能,并作对比分析,以确定乙肝试纸条进货性能验证的最佳方法。方法选用不同水平的HBsAg标准物质,分别验证不同厂家乙肝试纸条性能,观察5、10、15、30min后试纸条的变化,同时使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上述标准物质的S/CO值,挑选最合适的HBsAg阳性标本40份验证乙肝试纸条性能。结果用4IU/mL的标准物质验证试纸条性能时,5min后90%试纸条出现反应性结果,15min后全部试纸条出现反应性结果,另外通过倍比稀释方法,得出最低检出限为2IU/mL,不同厂家之间差异无统计学意义(P>0.05);4IU/mL的标准物质通过ELISA得出相应的S/CO在28.00±2.00,而使用S/CO值28.00±2.00的HBsAg阳性标本验证试纸条性能时,试纸条全部出现反应性结果。结论4IU/mL的HBsAg标准物质或ELISA中S/CO在28.00±2.00的HBsAg阳性标本,均能够作为乙肝试纸条进货性能验证的质控品,采用HBsAg标准物质作为阳性质控品,既没有职业暴露风险,又解决了HBsAg阳性标本反复冻融导致抗原活性下降的问题,是乙肝试纸条进货性能验证的最佳选择。     

维生素C对3种血糖检测方法的干扰效应分析

目的探讨维生素C对3种不同方法检测血糖所造成的干扰效应。方法参照CLSI EP7-A2文件,将系列浓度的维生素C溶液按照5%体积加入到新鲜混合血清中,分别用己糖激酶法(方法 A)、葡萄糖氧化酶法(方法B)、葡萄糖还原酶电极法(方法 C)检测混合血清的葡萄糖水平,评价维生素C对3种不同方法检测血糖的干扰程度。结果维生素C在1 250mg/L时对方法 A测定血糖无干扰。在156mg/L时对方法 B产生临床不可接受的负干扰,对方法 C产生临床不可接受的正干扰,并且对2种方法的干扰程度随着维生素C的浓度升高而升高。相同浓度的维生素C对同一方法测定不同水平血糖的影响无明显差异。结论高浓度维生素C对葡萄糖氧化酶法和葡萄糖还原酶电极法测定血糖均会产生明显干扰。