干细胞研究的前景(3)

(接第 8卷第 5期 )老龄化方面的研究多能干细胞可用于许多老龄退化疾病的细胞替换和组织的修复 .如侵犯神经系统疾病 ,老年性痴呆和帕金森氏病、肌萎缩侧索硬化、脊髓和大脑损伤 ,移植多能干细胞衍生的神经细胞可替代丢失的细胞并恢复其功能 .人类多能干细胞比已诱导成熟的干细胞有许多优点 .用多能干细胞移植比用成熟的干细胞更容易克服随后的排斥问题.在体内多能干细胞能分化各种类型细胞并能再生大量细胞 .另外 ,人类多能干细胞为了解增龄和相关疾病的分子和细胞学过程的基础研究提供模型 .用人类多能干细胞对老年性痴呆和帕金森氏病进行…     

干细胞治疗1型糖尿病的研究与应用进展

背景：通过胰腺或胰岛移植等重建胰岛素分泌系统是治疗1型糖尿病的有效方法,但材料来源受限,移植后免疫排斥反应易导致治疗失败。 目的：简要总结了胚胎干细胞、成体干细胞及诱导性多能干细胞等治疗1型糖尿病的研究进展。 方法：应用计算机检索CNKI和PubMed数据库中2008-01/2011-12关于干细胞治疗1型糖尿病的文章,在标题和摘要中以“胚胎干细胞;成体干细胞;诱导性多能干细胞;1型糖尿病”或“Embryonic stem cells,somatic stem cells,induced pluripotent stem cells,type 1 diabetes”为检索词进行检索。选择文章内容与干细胞治疗1型糖尿病相关,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到128篇文献,根据纳入标准选择33篇文章进行综述。 结果与结论：目前,不同来源的干细胞在体内外均能被诱导为产生胰岛素的细胞,并且这种诱导细胞用于1型糖尿病动物模型治疗,具有一定治疗效果,甚至能使受体血糖恢复正常水平,但干细胞是否参与胰岛细胞再生或修复尚存在争议。     

自体造血干细胞移植治疗1型糖尿病合并甲状腺功能减退2例

背景:已有研究证实造血干细胞移植技术治疗1型糖尿病效果确切。目的:观察自体造血干细胞移植治疗1型糖尿病合并甲状腺功能减退的安全性和有效性。方法:免疫清除联合自体造血干细胞移植治疗1型糖尿病合并甲状腺功能减退患儿2例。经造血干细胞动员、采集、免疫抑制及造血干细胞回输治疗。治疗前后观察比较胰岛素、左旋甲状腺素钠用量、血清C肽质量浓度、糖化血红蛋白水平及甲状腺功能的差异。结果与结论:1例患儿治疗后C肽质量浓度恢复正常,停用胰岛素,甲状腺素片减量,甲状腺功能正常;另1例患儿治疗后胰岛素减量64%,停用甲状腺素片,甲状腺功能正常。说明自体造血干细胞移植治疗1型糖尿病合并甲状腺功能减退的患儿是安全的,近期疗效明显。     

干细胞研究的前景

癌症的研究多能干细胞具有无限制分化及在一种器官中生成多种特异细胞的能力 .为什么人类多能干细胞在癌症研究中是重要的并能减少癌症的发生 ?有许多原因 .首先 ,多能干细胞可用于因治疗癌症所致的组织毒性的治疗 .骨髓和外周血多能造血干细胞 (一种定向造血干细胞 )已经用于恢复大剂量化疗病人造血和免疫系统 .而且 ,多能干细胞有巨大潜能恢复骨髓移植病人的免疫反应 ,从而促进了其它治疗方法的发展 ,如免疫 /疫苗治疗方法 .由治疗癌症所导致的其他组织损害也可得益于相应的干细胞池的再补充 ,如心脏注射多能干细胞可永久逆转由于某些化疗…     

自体造血干细胞移植治疗外周T细胞淋巴瘤

背景：外周T细胞淋巴瘤亚洲地区发病率高,具有侵袭性,预后普遍较差,目前尚无标准治疗策略。 目的：评价自体造血干细胞移植治疗外周T细胞淋巴瘤的疗效及毒副反应。 方法：回顾性分析2003年3月至2014年4月行自体造血干细胞移植治疗外周T细胞淋巴瘤35例,包括结外NK/T细胞淋巴瘤鼻型22例,血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤1例,外周T细胞淋巴瘤(非特殊型)8例,间变性大T细胞淋巴瘤 ALK(+)3例,ALK(-)1例;所有病例均按WHO 2001年和WHO 2008年分类进行病理分型,均采用VAEMMC+全射照射预处理方案。 结果与结论：随访中位时间54个月(9-120个月),28例患者(80%)存活,其中无病存活25例(71%),8例(23%)复发,其中7例死亡,1例尚在治疗中。近期毒性主要为骨髓造血受抑,无明显远期并发症。结果表明自体造血干细胞移植治疗外周T细胞淋巴瘤安全有效,早期(第1次完全缓解)行移植疗效佳。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

糖尿病患者血液细胞来源多能干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞

目的建立和鉴定1型糖尿病(T1DM)患者血液细胞来源诱导多能干细胞(iPSCs),研究其在体外诱导分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)的潜能及对糖尿病小鼠的治疗效果。方法将表达OCT4、SOX2、LIN28、L-MYC和KLF4转录因子的oriP/EBNAl附加体电转染T1DM患者外周血红系祖细胞使其重编程获得iPSCs,通过形态、核型鉴定、碱性磷酸酶染色、RT-PCR和体外畸胎瘤实验检测其干细胞多能性。诱导iPSCs分化为IPCs,对其进行RT-PCR检测和葡萄糖刺激实验,并将其移植入C57BL/6J雄性糖尿病小鼠左肾包膜下,监测血糖、体质量和糖耐量变化。结果获得的iPSCs核型正常,碱性磷酸酶染色呈阳性,表达干细胞多能性基因OCT4、SOX2、LIN28、L-MYC和KLF4,畸胎瘤实验可分化为三胚层细胞。获得的IPCs表达胰岛β细胞特异性基因PDX-1、INSULIN和NKX6.1,在葡萄糖刺激下分泌C肽。移植后,糖尿病小鼠血糖降低,体质量恢复,控糖能力增强。结论 T1DM患者血液细胞的iPSCs可诱导分化为IPCs,移植至1型糖尿病小鼠体内具有治疗作用。     

干细胞移植联合免疫抑制治疗1型糖尿病的应用前景

背景：最近许多研究报道,干细胞细胞移植联合免疫干预可维持较长的胰岛素非依赖时间并减少糖尿病并发症的发生,但其机制尚不清楚。 目的：探讨应用干细胞移植联合免疫抑制治疗1型糖尿病的前景。 方法：应用计算机检索了Pubmed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/)、CNKI数据库(http://www.cnki.net)、维普数据库(http://www.cqvip.com/index.shtml)、万方数据库(http://g.wanfangdata.com.cn/),检索范围为各数据库中的全部文章,英文检索词为“stem cells,diabetes mellitus,immunosuppression”,中文检索词为“干细胞,糖尿病”。从检索出的1 676篇文章中选择出文章内容与干细胞移植、免疫抑制治疗1型糖尿病密切相关、较为权威的文章,排除较陈旧文献及重复研究,共纳入中英文文章共29篇进一步分析。 结果与结论：就目前干细胞移植联合免疫抑制治疗1型糖尿病的研究现状,对国内外29篇相关文献和报道进行研究总结。结果显示干细胞移植联合免疫抑制治疗1型糖尿病可提高治疗效果,减少并发症的出现,具有良好的应用前景。     

诱导多能干细胞及其在神经再生医学的应用前景

诱导多能干细胞 （induced pluripotent stem cells, iPS）最初由日本学者山中申弥（Shinya Yamanaka）于2006年利用病毒载体将四个转录因子（Oct4、Sox2、Klf4和c．Myc）的组合转入分化的体细胞中，使其重编程而得到的类似胚胎干细胞（Embryonic stem cells）的一种细胞类型。该类细胞在体内具有分化为任何一种细胞类型的潜能。更重要的是，诱导多能干细胞来源于自体，相比胚胎干细胞，诱导多能干细胞来源的细胞移植不需要免疫抑制治疗。此外，诱导多能干细胞的出现还省却了胚胎干细胞研究中涉及到的政治及伦理因素的困惑。这项细胞可被重塑的重要发现在医学研究领域具有旅程碑的作用。本文总结了目前医学研究领域里可用的的干细胞平台，并重点阐述了细胞的重编程及诱导多能干细胞在疾病模型及神经退行性疾病细胞移植治疗领域的应用前景。     

自体骨髓间充质干细胞经动脉介入移植治疗犬糖尿病*

背景：目前多数研究倾向于将骨髓间充质干细胞经静脉移植等方法移植入糖尿病动物模型体内,而缺少将骨髓间充质干细胞经动脉介入移植入糖尿病动物模型胰腺内的相关研究。 目的：用自体骨髓间充质干细胞经动脉介入移植入糖尿病犬胰腺内,观察骨髓间充质干细胞的分布、分化、对糖尿病的治疗效果及安全性。 方法：将30只家犬随机分为骨髓间充质干细胞组(治疗组,n=13),糖尿病模型对照组(模型组,n=10)和对照组(n=7)。治疗组及模型组通过静脉注射四氧嘧啶建立糖尿病模型。造模后,治疗组进行胰岛素治疗,同时进行自体骨髓间充质干细胞的动脉介入移植。模型组仅接受胰岛素治疗,对照组则不接受任何治疗。 结果与结论：与模型组比较,治疗组于移植后第12周的胰岛素用量明显减少(P < 0.05),血清C-肽水平明显升高(P < 0.05)。治疗组于移植后第4周及12周的组织病理切片显示,心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏的组织结构清晰,均未发生坏死、纤维化,与模型组及对照组比较,移植后各器官组织形态无明显异常改变。移植后第4周,骨髓间充质干细胞主要分布在胰腺及肾脏内,免疫荧光发现胰腺内存在CM-DiI和胰岛素共表达细胞。表明将骨髓间充质干细胞经动脉介入移植入糖尿病犬胰腺内来治疗糖尿病的方法,是安全有效的。关键词：胰腺;移植;骨髓间充质干细胞;糖尿病;胰岛素 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.19.026     

诱导多能干细胞或能调节受体机体移植组织的免疫排斥反应

据Otsuka R 2020年2月11日(Sci Rep,2020,10(1):224.doi.org/10.1038/s41598-019-57088-1)报道,日本北海道大学的科研人员利用诱导多能干细胞(iPSCs)调节机体对移植器官的免疫反应。研究发现,衍生自小鼠iPSCs的胸腺上皮细胞能调节机体对皮肤移植物的免疫反应,并延长移植物的寿命。胸腺位于胸骨后,是产生T细胞的重要器官之一,T细胞能够控制机体免疫反应,包括器官免疫排斥等,同时还与免疫自身耐受性直接相关;其还能作为机体免疫系统的重要成员,将机体自身产生的抗原视为非危险物质。诸如胚胎干细胞和iPSCs等多能干细胞能够分化为多种类型的细胞,其通常能作为机体组织移植的替代来源,但当移植供体器官或组织时,移植物就会被排斥,并最终被受体免疫系统破坏,对于多能干细胞衍生的细胞或组织而言也是如此。因此,在再生医学中,最重要的就是成功调节宿主对移植物的免疫反应。     

以4种基因诱导产前诊断绒毛细胞建立诱导性多能干细胞

背景：诱导性多能干细胞因具有多能性特征,可以诱导分化为特定的细胞,包括神经细胞、造血细胞等。 目的：建立产前诊断绒毛细胞来源的诱导性多能干细胞。 方法：运用反转录病毒介导4种基因hOct4、hSox2、hc-Myc、hKlf4诱导产前诊断绒毛细胞,对建立的诱导性多能干细胞进行多能性、体内外分化能力、核型等鉴定。 结果与结论：建立的诱导性多能干细胞能维持自我更新状态,在蛋白和mRNA水平上高表达全能性的标志基因,具有体内、外分化潜能;在体外长期培养能维持正常核型。说明4种全能性基因转入绒毛细胞可获得具有多能性的诱导性多能干细胞,这为胎儿的细胞自体移植治疗提供理想来源,为产前诊断疾病机制研究提供很好的细胞模型。     

胰腺导管上皮细胞转分化为胰岛样细胞(英文)

背景:胰岛移植是治疗1型糖尿病包括部分2型糖尿病的有效方法。然而,供体来源的匮乏及移植免疫排斥反应极大地阻碍了该方法的推广和应用。最有希望的来源是从干细胞诱导分化出大量可供移植的胰岛细胞,但目前胰腺干细胞转分化方面的研究尚处于起步阶段。目的:寻找胰岛移植治疗糖尿病合适的细胞来源。方法:分离培养昆明小鼠胰腺导管上皮细胞,以添加有角化细胞生长因子、肝细胞生长因子和烟酰胺的DMEM/F12培养基培养,不同时间取样本于光镜和电镜下观察,检测第1,16天时CK-19、PDX-1免疫化学染色变化并以半定量RT-PCR检测第1,16天时胰岛素和胰高血糖素基因表达情况,21d时行双硫腙染色实验及葡萄糖刺激的胰岛素释放实验以检验胰岛样细胞的生理功能。结果与结论:分离第1天,大部分细胞CK-19染色阳性,偶可见PDX-1阳性细胞,16d后,CK-19阳性细胞快速增殖形成细胞团,大部分细胞PDX-1染色阳性;RT-PCR显示培养细胞胰岛素和胰高血糖素表达明显增强,分别增加了5.4倍和6.1倍(P0.01);21d时胰岛样细胞团更加成熟,双硫腙着色阳性,且对高糖(15mmol/L)刺激的胰岛素释放较低糖(5.6mmol/L)时增加了1.6倍(P0.05)。提示小鼠胰腺导管上皮细胞在体外培养条件下可增殖,并具有干细胞潜能,可转分化胰岛素分泌细胞。     

心肌干细胞的提交分化及其调控机制

心肌细胞被认为是终末分化细胞，损伤后不能再生。但最近研究发现，成人心脏中存在多能心肌干细胞(cardiacstemcell，CSC)，CSC能够再生为心肌。另外，全能胚胎干细胞(ES细胞)、多能成体祖细胞(MAPC)和成体多能干细胞(aMSC)具有向心肌分化的潜力，可用于心肌损伤后的修复治疗。ES细胞和MAPC作为CSC的前体细胞，在心肌梗塞的干细胞移植治疗方面需经过向心肌谱系的提交过程。本综述了干细胞向心肌谱系的提交、分化及其调控机制。     

Conophylline与尼克酰胺联合诱导脂肪源干细胞为功能性类胰岛细胞

背景：1型糖尿病的胰岛移植治疗一直面临供体来源不足与免疫排斥两大关键问题,寻找一种自体来源的种子细胞通过组织工程方法制备类胰岛组织可以提供充足新型供体、降低异基因供体移植的不良反应。 目的：分析成人脂肪干细胞体外分化为对葡萄糖敏感、可分泌胰岛素的功能性胰岛样细胞团的能力,探索体外制备类胰岛组织的技术路线。 方法：首先分离纯化人体脂肪干细胞,采用新型植物诱导剂Conophylline与其他诱导因子的不同组合将脂肪干细胞诱导分化为胰岛样细胞团,观察不同组合的诱导分化效率,并利用特异性染色、RT-PCR,免疫细胞化学等方法对诱导分化后的细胞团在基因水平与蛋白水平上进行鉴定,最后用ELISA法检测细胞团在不同浓度葡萄糖刺激下胰岛素的分泌情况。 结果与结论：脂肪干细胞具有多能干细胞特性,可诱导分化为具有胰岛素分泌和葡萄糖浓度反应性类胰岛细胞团;Conophylline与尼克酰胺联合诱导可大幅度提高诱导分化效率。     

心肌干细胞的提交分化及其调控机制

心肌细胞被认为是终末分化细胞,损伤后不能再生。但最近研究发现,成人心脏中存在多能心肌干细胞(cardiacstemcell,CSC),CSC能够再生为心肌。另外,全能胚胎干细胞(ES细胞)、多能成体祖细胞(MAPC)和成体多能干细胞(aMSC)具有向心肌分化的潜力,可用于心肌损伤后的修复治疗。ES细胞和MAPC作为CSC的前体细胞,在心肌梗塞的干细胞移植治疗方面需经过向心肌谱系的提交过程。本文综述了干细胞向心肌谱系的提交、分化及其调控机制。     

干细胞临床应用安全性评估报告

目的通过对现阶段干细胞治疗技术的安全状况进行系统评价,为各层次决策者包括卫生行政部门和患者等提供合理选择干细胞治疗技术的科学信息和决策依据。
　　方法采用卫生技术评估方法对造血干细胞、间充质干细胞、胚胎干细胞、神经干细胞、脂肪干细胞和诱导多能干细胞在临床研究和应用中的死亡率,伤残率,不良反应的发生率、持续时间以及严重程度等方面进行系统评估。
　　结果造血干细胞移植最常用于治疗血液系统的恶性肿瘤,这一类别研究报告的不良反应较多,多数与合并使用的放化疗和移植前的预处理有关;异体造血干细胞移植易出现急慢性移植物抗宿主病（GVHD）,严重影响患者的预后。自体造血干细胞移植还常用于肿瘤或自身免疫性疾病放化疗后的支持,此时虽然仍会出现一些放化疗的不良反应,但不会出现 GVHD。自体造血干细胞移植尝试治疗一些肝脏和缺血性疾病等,不良反应报道相对较少。②无论是自体还是异体来源的间充质干细胞移植,在临床试验中未见明显的毒性反应和致瘤性报道,无 GVHD 报告。临床上见到的不良反应多数较轻微,短暂发热和注射部位局部疼痛偶有报道,有些不良反应与注射途径和部位有关。③胚胎干细胞移植的动物实验均表明有畸胎瘤的形成,尚未有关于直接用胚胎干细胞进行临床研究的报道。④神经干细胞移植多见于治疗神经系统疾病,未发现严重不良反应,无致瘤性报道。⑤脂肪干细胞移植治疗肛周瘘,未发现严重不良反应,无致瘤性报道。⑥诱导多能干细胞研究目前多数仍为方法的研究,无临床文献报道。动物实验表明诱导多能干细胞移植后其后代会发生肿瘤,同时诱导过程中反转录病毒的使用对安全性的影响仍需研究。
　　结论造血干细胞移植开展最早、研究最为深入和广泛,间充质干细胞是继造血干细胞之后临床应用研究最多的一类干细胞,神经干细胞和脂肪干细胞目前也进入临床试验阶段,胚胎干细胞和诱导多能干细胞因其致瘤性等安全问题,目前还在临床前研究阶段,临床试验报到很少。从目前文献看,自体造血干细胞、间充质干细胞、神经干细胞、脂肪干细胞等成体干细胞移植,相对来说比较安全。由于目前多数干细胞的临床研究尚处于试验阶段,病例数不多,特别是干细胞不似普通药品或生物制品,各项研究采用的制备方法、质量控制不尽相同,一项研究的数据不一定能全面反应所有同类干细胞的安全性,因此,干细胞的安全性需要随着干细胞的研究进展不断加以总结和完善。     

应用双胎羊水多能干细胞建立诱导分化的内对照模型

目的 快速重编程羊水细胞为多能干细胞,建立诱导分化研究的内对照模型.方法 应用逆转录病毒介导4种基因(Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4)诱导双胎羊水细胞,筛选羊水诱导性多能干细胞(human amniotic fluid-derived cells induced pluripotent stem cells,hAFDCs-iPSCs),对其进行多能性、体内外分化能力、核型等鉴定.结果 双胎hAFDC-iPSCs能维持自我更新状态,在蛋白和mRNA水平上高表达全能性的标志基因,具有体内外分化潜能,在体外长期培养能维持正常核型.结论 双胎hAFDCs-iPSCs遗传背景相一致,可以为iPSCs的诱导分化研究提供很好的内对照模型,并为胎儿的细胞自体移植治疗提供理想来源.     

胰腺发育和生物活性的主要调控因子——PDX-1

糖尿病 ,尤其是Ⅰ型糖尿病 (juvenile onsetautoimmunediabetes或者insulin dependentdiabetesmellitus)是世界上普遍危害人类健康的慢性疾病之一。据统计 80 %的糖尿病患者为Ⅰ型糖尿 ,发病初期症状不明显 ,临床期开始出现明显症状时其自身免疫系统及 90 %的胰岛 β 细胞遭到破坏 ,导致胰岛素分泌不足 ,血糖升高和多系统累及并发症的发生。目前许多研究者正在探索新的途径替代胰岛素彻底治疗糖尿病 ,如 :胰腺移植、胰岛组织移植、胰腺干细胞诱导分化替代疗法、其它来源干细胞替代疗法。前两种方法受到器官来源 ,移植条件和宿主移植物间的免疫排斥反应的限制 ,成体中的移植率和生存率都相对较低 ,因此近年来以干细胞为基础的研究迅速开展起来。本文主要阐述胰岛素特异性基因PDX 1对胰腺的发生、发育及胰岛素表达、合成、分泌的调控作用 ,为干细胞诱导分化替代胰岛素分泌 β 细胞的临床应用提供理论参考     

血液疾病有关的词典和新知识

074 骨髓移植(Bone marrow transplantaton,BMT)骨髓移植是治疗血液系统恶性肿瘤的有效方法.骨髓移植方法有:同基因骨髓移植 正常的骨髓细胞来自遗传上完全相同的同卵双胎供血者.异基因骨髓移植(Allo-BMT)除同卵双胎外之供血者.自体骨髓移植(Autologous bone marrowtransplantation,ABMT)供髓者来源困难减少,予处理是消灭体内残留的肿瘤细胞,ABMT发展极快,有可能成为Allo-BMT的替代治疗方法.075 造血干细胞移植(Hematopoietic stem celltransplantation,HSCT)造血干细胞(HSC)是一种人体血细胞的母细胞,具有自我更新和繁殖分化的能力,它不断地分裂繁殖造成大量的血细胞,以补充更新外周血液.对HSC的研究证实1个造血干细胞可分化成微环境和各种造血细胞.能分化为各种血细胞的干细胞亦称多能干细胞.它的下一级分化为造血祖细胞,亦称单能或定向干细胞,造血干细胞是理想的基因治疗的靶细胞.在骨髓中,外周血和脐带血均有大量的造血干细胞.把骨髓造血干细胞移植和外周血造血干细胞移植称为自身造血干细胞移植.     

自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病的进展

背景：药物、介入或外科治疗均不能从根本上解决心脏缺血梗死后心肌细胞丧失问题。大量研究结果显示自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病安全可行,可减少梗死瘢痕面积、改善心室重构、提高心脏功能。目前自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病已进入临床试验阶段。 目的：综述近年国内外自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病的研究进展。 方法：第一作者应用计算机检索1998年1月至2012年4月PubMed数据库、中国期刊全文数据库相关文章,英文检索词“autologous, cardiac stem cells, ischemic cardiomyopathy, transplantation,treatment”;中文检索词“自体,心脏干细胞,缺血性心肌病,移植,治疗”。共检索到82篇相关文献,57篇文献符合纳入标准。 结果与结论：经过大量小动物实验和大型动物的前临床实验准备阶段,目前自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病已经进入临床试验阶段,初步临床试验结果显示自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病安全、可行、有效。从心脏中分离的心脏干细胞移植到自体缺血梗死的心脏,可以分化生成心肌细胞、内皮细胞、平滑肌细胞,抑制心室重构,改善心脏收缩、舒张功能。相对于其他来源的干细胞移植治疗,自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病无免疫源性,不存在免疫排斥反应;不存在伦理问题;其趋向分化成心脏细胞系,成瘤率低,相对安全。自体心脏干细胞移植为缺血性心肌病的治疗提供了一条新的途径,有更高的临床应用价值。但目前开展的临床试验较少,观测时间不够长,缺少多中心大样本量的临床试验等,这些都需要进一步研究探索。