青蒿素 蒿甲醚 蒿琥酯预防日本血吸虫病研究进展

青蒿素（artemisine）是自黄花蒿（artemlslaannu－aL．）中提取的抗疟药。80年代初，我国学者又发现青蒿素及其衍生物具有抗血吸虫童虫的作用。现就其研究进展情况综述如下。1筛选、研制过程1981年陈德基等试用青蒿素油和油混悬液二种剂型治疗慢性血吸虫病103例，结果疗效较差，剂型使用不便，普遍出现发热反应，未再扩大试验［l，l。j。1985年李思温等曾试用青蒿素合并吹哺丙胺预防血吸虫病，也因副反应重而未能继续试验。1987年4月和9月，卫生部相继批准青蒿貌酯（artesunate）、蒿甲醇（artemether）为抗疟新药，同期由浙江、上海寄研…     

蒿甲醚及其在预防日本血吸虫病中的应用

蒿甲醚是青蒿素的甲基醚衍生物，青蒿素是由菊科植物黄花蒿中提取的具有抗疟作用的有效成分，青蒿素或蒿甲醚属于含过氧基团的倍半萜类化合物，系新类型的抗寄生虫药物。观察发现，蒿甲醚有明显的预防血吸虫病的作用，因而受到人们的高度重视。     

在云南大理血吸虫病流行区用蒿甲醚预防血吸虫感…

在山区血吸虫病流行区观察蒿甲醚口服预防血吸虫感染的效果。选择云南省大理市洱源县有血吸虫病流行的３个村为试点。该试点的钉螺感染率为８．７％，感染螺平均密度为０．２２１９只／０．１１ｍ＾２，人群感染率为１６．４％。     

蒿甲醚预防耕牛血吸虫病的研究

目的观察耕牛口服蒿甲醚预防血吸虫感染的效果.方法选择血吸虫病重流行区耕牛175头,按随机原则分为服蒿甲醚组和对照组,在感染季节前对所有受试对象用吡喹酮普治,实验组接触疫水后15d口服第1剂蒿甲醚4mg/kg,以后每15d服1次,共4次,对照组服安慰剂.两组牛群于末次服药后1个月作粪检,考核预防效果.结果实验组血吸虫感染率为5.41%;对照组为16.67%,两者差异有显著意义(x2=4.74,P＜0.05).实验组保护率为67.55%,效果指数为3.08.结论在感染季节耕牛口服蒿甲醚具有良好的预防血吸虫感染的效果.     

旋毛虫感染鼠血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库

目的 探讨旋毛虫与血吸虫之间交叉免疫的分子机制,并寻找有效的日本血吸虫疫苗侯选分子。方法 以旋毛虫感染鼠血清为探针,筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,对获得的阳性克隆插入片段进行PCR扩增。结果 共筛选出11个阳性克隆,其插入的cDNA片段大小在1．4－5．0kb之间,其中1．4kb片段2个,5．0kb片段9个。结论 获得的阳性在隆插入基因片段可能为编码旋毛虫与日本血吸虫共同的抗原基因,其表达产物可能有抗日本血吸虫感染的作用。     

日本血吸虫雌虫抗原免疫血清筛选成虫cDNA文库

目的筛选日本血吸虫(Schistosoma ja ponicum，Sj)新的疫苗候选基因或雌虫性别特异性基因。方法用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清，对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选，将阳性克隆的插入片段进行PCR扩增，采用Sanger双脱氧核苷酸末端终止法对阳性克隆插入子进行测序，与GeneBank中的已知序列进行比对分析。结果共获得26个阳性克隆，其PCR产物大小约0．5～3kb。在进行测序的8个阳性克隆中发现了GeneBank未报道的Sj肌球蛋白的部分基因序列(GeneBank登录号为AY322148)和1个新基因(命名为Sj-F1，GeneBank登录号为AY261995)。Sj-F1编码的蛋白理论分子质量为13．45ku，等电点为6．29，富含α螺旋和随机卷曲，含多个蛋白激酶磷酸化位点，1个酪氨酸激酶Ⅱ磷酸化位点和1个豆蔻酸位点。结论Sj雌虫免疫血清可识别Sj特异性抗原分子，该抗原基因是否为雌虫性别特异性基因及其作为日本血吸虫病疫苗候选基因的价值，有待进一步研究。     

蒿甲醚预防水上作业人员日本血吸虫病初步观察

蒿甲醚是由昆明制药厂生产的高效抗疟药物。“八五”期间肖树华等在湖南洞庭湖［‘j、云南大理［Zj进行了蒿甲醚预防日本血吸虫感染的现场观察，证明蒿甲醚具有降低人群血吸虫感染率、减轻感染度以及防治急性血吸虫病的作用。为了观察蒿甲醚预防水利行业水上作业人员血吸虫病效果和长期应用的副作用，我们于1996年8～11月在长江委部分水上作业人员中进行了现场试验。1材料和方法1．l观察对象及分组选择18～60岁经常接触疫水的水上作业职工为观察对象，并根据年龄、性别、工种随机分组，配对分成蒿甲醚组和对照组。2组观察对象服药前血清免…     

蒿甲醚,吡喹酮早期治疗感染血吸虫病病兔的肝脏…

兔于感染日本血吸虫尾蚴后ｄ７灌服１次蒿甲醚（Ａｒｔ）３０ｍｇ／ｋｇ＾－１，并于感染后ｄ１４，ｄ２１，ｄ３５和ｄ４９重复ｉｇ１相同剂量的Ａｒｔ时，在兔肝的切片中仅查见死虫，未见有虫卵或和虫卵性肉芽肿形成。若于感染后ｄ７，ｄ２１，ｄ３５和ｄ４９ｉｇ上述剂量的Ａｒｔ次时，肝内偶而查见少量虫卵和虫卵性肉芽肿，若于感染后ｄ２１ｉｇ１次吡喹酮（Ｐｒａ）４０ｍｇ．ｋｇ＾－１，然后每ｗｋ（ｄ２８和ｄ３５）或每２ｗ     

蒿甲醚预防耕牛血吸虫病效果的实验研究

目的观察耕牛口服蒿甲醚预防血吸虫感染的效果.方法选择血吸虫病重流行区耕牛175头,按随机原则分为服蒿甲醚组和对照组,在感染季节前对所有受试对象用吡喹酮普治,实验组接触疫水后15d内服第一剂蒿甲醚4mg/kg,以后每15d服1次,共4次,对照组眼安慰剂.两组牛群于末次服药后1个月作粪检,考核预防效果.结果实验组阳性率5.41%;对照组为16.67%.两组感染率经卡方检验,差异有显著意义(x2=4.74,P＜0.05).实验组保护率为66.55%,效果指数为3.08.结论在感染季节耕牛口服蒿甲醚具有良好的预防血吸虫感染的效果.     

蒿甲醚对日本血吸虫超微结构的影响

目的：了解蒿甲醚对日本血吸虫超微结构的影响。方法：小鼠于感染日本血吸虫尾蚴后７或３５ｄ灌服蒿甲醚２００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，连给２ｄ，并于治后１、３、７、１４和２８ｄ剖检取虫体作透射电镜观察。结果：治后１－７ｄ，在虫的皮层、合体细胞、肌束、实质组织、肠管上皮细胞和卵黄细胞等均发现超微结构变化。主要的损害为皮层基质模糊、疏松、溶解和空泡形成；皮层细胞质突起的外质膜模糊、融合、电子密度增加和破溃，以及感觉结构的变性等。皮层下的肌束、合体细胞和肠管上皮细胞可查见广泛的肿胀、溶解和空泡形成。雌虫的卵黄细胞亦示有核空泡变化、粗面内质网减少和卵黄球溶解等。治后１４－２８ｄ，一些存活虫的超微结构变化已恢复，但有的虫仍示有损害。结论：蒿甲醚对７ｄ童虫和３５ｄ成虫的超微结构均有明显影响。     

大鼠抗感染血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库

目的　探讨大鼠抗日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)感染的分子机制 ,为血吸虫病疫苗的研制提供新的抗原分子。方法　用Sj感染大鼠血清筛选Sj成虫cDNA文库 ,对阳性克隆cDNA插入片段进行PCR扩增及测序分析。 结果　对cDNA文库中约 3× 10 5个噬菌斑进行筛选 ,获 7个阳性克隆 ,其插入基因片段大小为 0 9kb～ 2 0kb。初步测序获 5个部分序列 ,其中R3与Sj线粒体基因明显同源 ;R5为新基因序列 ,命名为Sj-Cs2 (GenBank的登录号为AY0 36 5 80 ) ,经计算机分析该基因片段编码 2 0 6个氨基酸组成的跨膜蛋白 ,Sj-Cs2蛋白含有 3个蛋白激酶C磷酸化位点和 6个N -肉豆蔻酸化位点 ;其余序列亦为新基因片段 ,但无完整编码框。结论　筛选获得了与大鼠抗Sj感染有关的基因克隆 ,相关克隆cDNA全长的获取、新基因的结构与功能以及免疫学特性值得深入研究     

日本血吸虫童虫cDNA文库的免疫筛选及其生物信息学分析

目的筛选新的可能具有诊断意义的血吸虫蛋白分子,并对其进行生物信息学分析。方法以血吸虫病人血清筛选日本血吸虫15d肝期童虫cDNA文库,对阳性克隆插入片段的核苷酸进行序列分析,将结果通过Internet送入NCBI GenBank进行同源性比较并利用蛋白质分析软件进行生物信息学分析。结果经3轮筛选,共获15个阳性克隆,对其进行测序,获得11个基因,其中5个为编码日本血吸虫线粒体的基因,1个为编码日本血吸虫肌球蛋白的基因,其他5个分别为编码SjCHGC05315、SjCHGC01371、SjCHGC04782、SjCHGC05166、SjCHGC09769的基因。结论从日本血吸虫肝期童虫cDNA文库中筛选到一批日本血吸虫基因,为血吸虫病新的诊断候选分子的研究提供了材料。     

水牛感染血清免疫筛选日本血吸虫成虫cDNA文库

目的 筛选新的有潜质的日本血吸虫保护性抗原分子编码基因。方法 用水牛感染血清对日本血吸虫(Schistosoma Japonicum，Sj)成虫cDNA文库进行免疫筛选，将阳性克隆的插入片段进行PCR扩增和序列分析。结果 3轮筛选后，将7个阳性克隆经辅助噬菌体自动剪切并PCR扩增显示，插入的日本血吸虫cDNA片段大小在0．8～2．0kb之间，选取其中4个经DNA测序分析，发现2个未曾报道过的日本血吸虫新基因，分别命名为Sj-IB1和Sj-Rho GTPase-like gene，并在Gene Bank登记注册。结论 水牛感染血清可识别日本血吸虫的特异性抗原分子，这些抗原分子的免疫保护作用值得进一步研究。     

日本血吸虫童虫cDNA文库免疫学筛选及阳性克隆的初步鉴定

用日本血吸虫感染14 d的小鼠血清免疫筛选日本血吸虫童虫cDNA文库,将获得的7个阳性克隆进行核苷酸序列同源性分析,结果显示其中一个克隆所测序列与日本血吸虫HSP70有很高的同源性（分值score=650）,另有2个克隆所测序列分别与已报道的日本血吸虫FABP（score=229）和含锌指结构的CDGSH型蛋白样蛋白（score=246）明显同源,其余4个未找到已知的同源序列,为新基因。4个新基因序列已被GenBank接受（登录号为EU121231、202646、202647和202648）。     

血吸虫感染抗性人血清筛选日本血吸虫童虫cDNA文库

目的分析血吸虫感染抗性人血清中起免疫保护作用抗体针对的日本血吸虫蛋白抗原谱,为日本血吸虫病疫苗研究提供新的候选抗原分子。方法采集血吸虫流行病区感染抗性人血清,免疫学方法筛选日本血吸虫童虫cDNA文库,对获得的阳性克隆核苷酸进行序列分析,并利用软件对所筛基因编码的抗原分子进行表位预测。结果共筛选出29个持续阳性克隆,对其进行测序,获得25个基因,包括5种已知基因(其中日本血吸虫肌球蛋白12个、丝氨酸蛋白酶抑制剂2个、细胞色素b1个、延伸因子1-α1个和线粒体编码区1个)和5个未知基因,软件分析显示不同抗原分别具有多个不同的抗原表位。结论获得的阳性克隆插入基因片段可能编码潜在的日本血吸虫病疫苗分子,其中日本血吸虫肌球蛋白为主要抗感染蛋白分子。     

日本血吸虫未成熟卵抗血清对日本血吸虫cDNA文库的免疫筛选

目的为了获得抗雌虫生殖和卵胚发育相关抗原的血吸虫基因。方法通过采用抗日本血吸虫未成熟卵SIEA26—28kDa免疫血清对日本血吸虫成虫cDNA文库进行筛选。结果共获得阳性克隆23个,经重复筛选之后,随机挑取其中的5个阳性克隆,分别进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳显示获得单一扩增条带,其大小位于150bp～1.5kb之间。结论从SjcDNA文库中筛选出抗卵相关阳性克隆,有关分析鉴定在进一步进行中。     

卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库的单抗筛选

目的　从卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库中筛选并鉴定出可用于免疫诊断和免疫预防的基因克隆。方法　采用预吸收的抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选多次后得到 5个阳性克隆 ,经PCR扩增后测定其插入片段的大小。用辅助噬菌体做体内剪切 ,以抗生素平板筛选含重组质粒的阳性菌落。其中 3个克隆测定其DNA序列 ,用BLAST软件对所得DNA序列进行同源性比较。结果　得到 1,2 ,4三个不同阳性克隆 ,其长度分别为 1783bp、397bp和 1132bp ,分别与卫氏并殖吸虫卵黄铁蛋白 (P wyolkferritin)基因、鞘脂激活蛋白A(DictyosterliumdiscoideumsaposinA)基因和曼氏血吸虫主要卵抗原 (Smmajoreggantigen -P4 0 )基因同源。 结论　本研究首次报道用抗肺吸虫成虫单克隆抗体筛选卫氏并殖吸虫成虫cDNA文库 ,所获克隆1、2、4可能系肺吸虫免疫诊断和预防的相关基因     

蒿甲醚对血吸虫超微结构的影响

蒿甲醚是青蒿素的一个衍生物,不仅是有效的抗疟药,而且对血吸虫特别是血吸虫童虫亦有效,并已在20世纪末被发展为预防血吸虫病的药物.为了了解蒿甲醚的抗血吸虫作用,除观察其对血吸虫生化代谢的影响外,还用扫描电镜和透射电镜观察了蒿甲醚对感染人体的主要3种血吸虫,即日本血吸虫、曼氏血吸虫和埃及血吸虫超微结构的影响,结果表明蒿甲醚不仅损害血吸虫的皮层、感觉器和皮层结节,而且对虫的肌层、实质组织、肠上皮细胞和卵黄细胞等亦引起广泛的损害.该文综述了蒿甲醚对这3种血吸虫超微结构损害的观察结果,并进行了讨论.     

紫外线致弱尾蚴免疫猪血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库

目的 寻找紫外线致弱日本血吸虫尾蚴中起免疫保护作用的候选抗原分子,为血吸虫疫苗研究提供新的候选靶位抗原.方法用紫外线照射致弱尾蚴免疫猪血清筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,测定用于筛选的cDNA文库滴度,选用最佳滴度的cDNA文库用于筛库.结果测得最佳cDNA文库的滴度为1.89×109 ρfu/mL,经3轮筛选,致弱尾蚴组分别获得20个、10个阳性克隆,经3轮筛选获7个阳性克隆;对照尾蚴组获15个和9个阳性克隆,经3轮筛选获3个阳性克隆;无尾蚴感染组未获阳性克隆.结论获得的阳性克隆可能为寻找编码抗日本血吸虫感染的抗原基因提供了材料与方向.     

日本血吸虫尾蚴抗原免疫血清筛选成虫cDNA文库与新基因分析

目的　筛选与日本血吸虫尾蚴抗原有共同免疫原性的日本血吸虫成虫抗原分子,为血吸虫病诊断和疫苗研究提供新的候选分子。　方法　利用日本血吸虫尾蚴可溶性抗原免疫兔血清筛选日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj)成虫cDNA文库,对阳性克隆的插入片段进行PCR扩增和序列分析。　结果　共筛选出13个阳性克隆,PCR扩增出特异的插入片段。测序分析获4个新基因SjCAI、SjCA、SjCAI2和SjCAI3(登录号分别为AF495883、AF515834、AY118086和AY129303),分别编码353、161、137和72个氨基酸的蛋白。SjCAI蛋白含6个DNA结合锌指,与原肠胚锌指蛋白XLCGF48.2有一定同源性;SjCA蛋白、SjCAI2蛋白和SjCAI3蛋白含N糖基化和磷酸化位点。　结论　筛选Sj成虫cDNA文库获得了新的基因序列。