IL-4在获得性和先天性弓形虫病中的作用

本文选用IL-4缺损小鼠(C57BL/6、C57BL/6×129Sv、BAlB/c)及其相应的野生型鼠(IL-4+/+)研究刚地弓形虫感染过程。小鼠均经口饲接种组织包囊。与野生型对照,IL-4缺损鼠中的易感型(C57BL/6和C57BL/6×129Sv两型)小鼠的生存率显著降低。作者发现IL-4缺损的小鼠感染刚地弓形虫后,体内IFN-γ增高。而IFN-γ对炎症趋化因子具抑制作用,故其增多可导致生存率的下降。但是,抗刚地弓形虫的BALB/c     

自然调节性T细胞对脑型疟疾易感鼠和抵抗鼠感染结局的影响

目的探讨自然调节性T细胞(nTregs)在伯氏疟原虫感染过程中的活化特点及其与疾病进展的相关性。方法用伯氏疟原虫ANKA分别感染C57BL/6、BALB/c和DBA/2小鼠,计数红细胞感染率;感染前和感染后3、5、8d制备脾细胞悬液,流式细胞术检测脾细胞悬液中nTregs百分含量;ELISA和Griess方法检测脾细胞培养上清IFN-γ、IL-10和NO水平。结果C57BL/6小鼠感染后8～11d死于脑疟,BALB/c和DBA/2小鼠感染后3～4w死于贫血和过度虫体血症。3种小鼠于感染后3d,nTregs百分数达到峰值后逐渐下降,于感染后8d,C57BL/6小鼠nTregs百分数下降最为显著并明显低于正常水平,整个感染过程中,C57BL/6小鼠的nTregs百分含量显著低于BALB/c和DBA/2小鼠。3种小鼠脾细胞培养上清IFN-γ、NO和IL-10水平于感染后开始升高,感染后5d达到峰值,感染后8d与感染后5d相比,C57BL/6小鼠IFN-γ、NO水平轻微下降,IL-10水平显著下降;BALB/c和DBA/2小鼠IFN-γ、NO水平显著下降,IL-10水平轻微下降。并且C57BL/6小鼠IFN-γ、NO水平高于BALB/c和DBA/2小鼠,而IL-10水平低于BALB/c和DBA/2小鼠。3种小鼠感染后脾脏nTregs数量与IFN-γ和NO水平呈负相关,IL-10水平与感染率呈正相关。结论伯氏疟原虫感染过程中,nTregs数量的动态变化与宿主感染结局密切相关。     

小鼠闭塞性细支气管炎动物模型的建立

目的通过异位气管移植建立小鼠的闭塞性细支气管炎动物模型,观察其病理改变及免疫因素对模型的影响。方法 C57BL/6小鼠30只作为供体,取出气管分别植入10只C57BL/6小鼠、20只BALB/c小鼠颈部皮下。术后分3组。同质组：10只C57BL/6小鼠。对照组和实验组：每组10只BALB/c小鼠。同质组、对照组小鼠给予生理盐水25mL·kg^-1·d^-1灌胃。实验组小鼠25mg·kg^-1·d^-1环孢素A灌胃。术后4周处死小鼠,取出移植气管。观察移植气管的阻塞率、上皮细胞缺失率等指标。结果同质组移植气管管腔通畅,上皮细胞连续完整。对照组移植气管管腔阻塞,气管上皮细胞全部脱落。实验组气管有部分阻塞,部分上皮细胞脱落,气管的阻塞率、上皮细胞缺失率明显低于对照组（P〈0.05）。结论小鼠的异位气管移植在术后4周可以观察到与闭塞性细支气管炎相同的病理改变。免疫药物对该病理过程有抑制作用。     

疟原虫全虫疫苗长效保护性下降机制初探

目的探讨疟疾红外期全虫疫苗免疫保护性随时间逐渐降低的机制。方法取C57BL/6及BALB/c小鼠,经尾静脉分别接种10 000或50 000约氏疟原虫(P.yoelii)17XNL子孢子,3h后给予氯喹控制红内期感染的发生。一部分小鼠于接种后30、90、180d用10 000同种疟原虫子孢子进行攻击检查保护性;另一部分在相同时间点取血,分离淋巴细胞,进行流式抗体染色,检测免疫保护性及其与肝脏淋巴细胞表型间的相互关系。结果疟原虫全虫抗原免疫后30d两种小鼠均可产生100%的免疫保护;免疫后90d,C57BL/6保护性开始下降,180d时保护性将至40%,而BALB/c小鼠保护性无明显变化。C57BL/6小鼠肝脏CD8~+T_(EM)细胞PD-1的表达在免疫后180d显著上升(t=7.369,P0.01),BALB/c小鼠无明显变化(t=1.368,P0.05)。C57BL/6小鼠肝脏CD8~+T_(EM)细胞PD-1的表达免疫后随时间增加而升高,其中免疫后180d较90d时上升趋势更显著(t=6.175,P0.01)。结论在C57BL/6小鼠,疟原虫红外期全虫疫苗免疫保护性随免疫时间延长逐渐降低与肝脏CD8~+T细胞PD-1表达增高有关。     

幽门螺杆菌疫苗接种小鼠产生免疫后胃炎的影响因素

目的:研究幽门螺杆菌(H pylorl)疫苗接种小鼠产生免疫后胃炎的影响因素．方法:将H pylori疫苗免疫C57BL／6和BALB／c的小鼠,观察攻击后胃黏膜H pylori定植和炎症情况．将H pylori疫苗免疫C57BL／6小鼠,然后予不同菌量的H pylori攻击,观察胃黏膜H Pylori定植和炎症情况．将H pylori疫苗经口和经腹腔免疫C57BL／6小鼠,观察攻击后胃黏膜H pylori定植和炎症情况.对感染H pylori的C57BL／6小鼠予H pylori疫苗治疗,观察治疗免疫后胃黏膜H pylori定植和炎症情况．结果:不同品系的小鼠免疫保护程度无明显差异,但C57BL／6小鼠免疫后胃炎重于BALB／c小鼠．接受不同攻击茵量的小鼠保护程度无明显差异,但大的攻击茵量可诱导更严重的免疫后炎症．不同免疫途径诱导的免疫保护程度及攻击后不同时间点的炎症程度均无显著性差异．治疗性免疫导致H pylori定植明显降低,同时也引发更为严重的胃炎．结论:在不同的免疫宿主、免疫途径和治疗性免疫中均存在免疫后胃炎．免疫后胃炎的强弱程度受免疫宿主和攻击菌量的影响．     

低氧及常氧条件下不同品系小鼠体外受精胚胎发育及妊娠结局观察

目的 比较不同品系小鼠来源胚胎在低氧条件（5%O2）及常氧条件（20%O2）下体外发育情况和妊娠结局，探讨适用于评价人类体外受精实验室质量控制的体系。方法 KM小鼠、ICR小鼠、C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠各20只，雌雄各半。取四种品系雌性小鼠各10只常规促排卵，取卵后每个品系小鼠均随机分为低氧组与常氧组分别进行培养，进行体外受精及胚胎移植，观察并比较两组各品系小鼠囊胚形态结构、正常受精率、体外受精第2天（D2）卵裂率、D2优质胚胎率、D3优质胚胎率、囊胚率、新鲜移植妊娠率、解冻移植妊娠率。结果 与常氧组比较，低氧组KM小鼠、ICR小鼠、C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠囊胚体外培养均呈中空球形，囊胚均具有更加规则的形状和更高的折光度。低氧组KM小鼠、ICR小鼠、C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠囊胚率、新鲜移植妊娠率、解冻移植妊娠率均高于常氧组（P均<0.05），两组四个品系小鼠正常受精率、D2卵裂率、D2优质胚胎率、D3优质胚胎率比较均无统计学意义。结论 低氧条件下胚胎体外培养可提高KM小鼠、ICR小鼠、C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠胚胎体外发育潜能...     

缺少NK细胞小鼠能产生有效的Th1型免疫反应并控制皮肤硕大利什曼原虫感染[英]

不同种系小鼠对硕大利什曼原虫(Leishmania major)的敏感性不同。敏感株BALB/c小鼠感染硕大利什曼原虫后,产生重症非自愈性病理损害;而C3H、CBA/J和C57BL/6等非敏感小鼠感染后只产生轻微病变并可自愈。有学者认为其机制是,敏感鼠对硕大利什曼原虫感染免疫为Th2型反     

鼠疟原虫感染大鼠和小鼠的种特异性分析

目的用约氏疟原虫(P.y) BY265株和伯氏疟原虫(P.b) ANKA-luciferase株感染小鼠和大鼠，分析鼠疟原虫感染宿主的种特异性。方法制备P.y和P.b的子孢子和裂殖子。分别用5×10⁴的P.y和P.b子孢子经尾静脉注射感染SD大鼠、BALB/c小鼠(P.y感染组，5只/组)和SD大鼠、C57BL/6J小鼠(P.b感染组，5只/组)，每日取尾静脉血涂片镜检，记录红内期疟原虫出现的时间。P.y子孢子感染SD大鼠和BALB/c小鼠后42 h取肝组织，实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测肝组织疟原虫18S rRNA的相对表达量。P.b子孢子感染SD大鼠和C57BL/6J小鼠后42 h活体成像法检测肝脏荧光值。分别用1×10⁸、1×10⁷、1×10⁶的P.y和P.b被感染红细胞(iRBC)感染SD大鼠(P.y感染组、P.b感染组)和易感小鼠(BALB/c、C57BL/6J)(阳性对照组)，每日取尾静脉血涂片镜检，计算原虫血症。分别用P.y、P.b裂殖子感染SD大鼠和易感小鼠，每日取尾静脉...     

不同品系小鼠对卡氏肺孢子虫的易感性及其免疫反应的研究

目的　探讨不同品系小鼠对卡氏肺孢子虫 (P.c)的易感性及其免疫反应。　方法　以接触传播方式使BAL B/ c和 C5 7BL / 6小鼠 (各 15只 )感染 P.c。观察小鼠与传染源接触 4、5、6 wk后肺内虫数、支气管肺泡灌洗液中CD4 + T细胞和 CD8+ T细胞及血清 Ig G水平的变化。　结果　与传染源接触 4 wk,小鼠肺内均可检出 P.c,之后 ,BAL B/ c小鼠虫数继续增高 ,5 wk末达高峰。4 wk时 C5 7BL/ 6小鼠虫数无明显变化 ,5 wk时显著少于 BAL B/ c小鼠。两组小鼠支气管肺泡灌洗液内 CD4 + CD6 2 low T细胞和 CD8+ CD6 2 low T细胞数明显增多 ,血清 Ig G抗体水平显著上升。6 wk小鼠肺内 P.c均转阴。　结论　 BAL B/ c比 C5 7BL / 6小鼠更易感染 P.c。 BAL B/ c和 C5 7BL / 6小鼠感染 P.c后5 wk可产生有效的细胞和体液免疫反应并清除肺内感染的 P.c     

日本血吸虫(中国大陆株)感染小鼠粪虫卵的分布特征

目的以数学模型描述感染日本血吸虫(中国大陆株)的小鼠阳性粪便虫卵数的时间动力学分布规律。方法自血吸虫感染小鼠后第5周至第11周,每周收集24 h粪便1次,并计数每克粪样中的虫卵数(EPG)。EPG的均数m≥400时,利用回归方程lg(v)=a+blg(m)的回归系数b是否接近2,来判断粪虫卵是否服从负二项分布。结果剔除EPG为0的结果,组内小鼠EPG在同一时间点上呈正态分布。取各时间点小鼠粪EPG的均值m,分别构建C57BL/6与BALB/c小鼠阳性粪样便EPG的回归方程,显示全部阳性粪样的方程系数b分别为1.72和1.39,连续7次阳性鼠粪EPG的回归方程系数b分别为1.71和1.26。结论实验室感染日本血吸虫的C57BL/6与BALB/c小鼠,粪虫卵的时间的分布均可以负二项分布来描述,但C57BL/6小鼠粪虫卵数随时间分布的拟合优度高于BALB/c。     

利什曼原虫感染过程的-β生长转化因子:一种原虫逃避机制

在动物模型中,近交系小鼠感染利什曼原虫出现截然不同的易感性。决定感染是否自愈的宿主反应虽不清楚,但细胞因子产生的选择性与小鼠感染有关。在大型利什曼原虫易感的BALB/c小鼠主要是T_H2并产生IL-4和IL-10,而在不易感的C57BL/6小鼠主要为T_H1并分泌IFN-γ和IL-2。IFN-γ是与抗利什曼原虫感染最密切的细胞因子,而IL-4与易感性有关。β-生长转化因子(TGF-β)是多种细胞产生的24kDa     

129/J和C57BL/6小鼠对日本和曼氏血吸虫感染不同抵抗力的进一步研究

在WEHI实验室繁殖的大部分129/J小鼠和小部分C57BL/6小鼠对血吸虫感染具有明显抵抗力。由于门脉漏的出现,门静脉系统的虫体可经血管分流到达肺,肺中炎症反应最终消灭大部分虫体,因而在肝门脉系统中未检出虫体。本研究发现小鼠抵抗力比例与同种鼠肠系膜静脉内注射乳胶小珠显示门脉漏(分流)的比例是高度相关的,用此方法证明:WEHI 129/J小鼠的抵抗力可高达100％;而C57BL/6小鼠抵抗力约为20％;C57BL/6裸鼠(nu/nu)、WEHI 129/J小鼠与C57BL/6或BALB/c小鼠的杂交子_1代(F_1)均为血吸虫适宜宿主,未显示门脉漏;     

华支睾吸虫感染小鼠模型的建立及比较

目的观察3个品系小鼠分别感染不同剂量华支睾吸虫囊蚴后其粪便巾虫卵检出率及肝组织的病理变化。方法分别以10、20、30个囊蚴／鼠经口感染BALB／c（Ⅰ）、C57BL／s（Ⅱ）、昆明鼠（Ⅲ）各3组。同时设不感染对照组。于感染后第20～30d采用NaOH消化法粪检虫卵，感染30d后剖杀部分小鼠，取肝脏作组织切片。各组剩余小鼠继续观察至感染后12周。结果BALB／c（Ⅰ）、C57BL／s（Ⅱ）、昆明鼠（Ⅲ）粪检虫卵阳性率分别为79．17％、12．50％和37．50％，差异有显著性（P〈0．005）。受染BALB／c和昆明鼠肉眼可见肝脏肿大，镜下均见胆管扩张、管壁增厚、炎细胞浸润，并随感染度增加程度加重，C57BL／s肝脏未见明显病理改变。结论BABL／c对华支睾吸虫感染的敏感性最高，昆明鼠次之，C57BL／6不敏感。动态观察小鼠宿主状态及相关研究的适宜感染剂量为每鼠30个囊蚴。     

BALB/c小鼠阻断肝期疟原虫并降低对伯氏疟原虫的易感性

BALB/c小鼠比C57BL6小鼠对伯氏疟原虫子孢子感染具有更强的抵抗力。在用γ射线减毒子孢子感染小鼠的实验中,少量的减毒子孢子即可诱导BALB/c小鼠产生抗攻击感染的长期的保护性免疫力。     

IFN-γ和Toll样受体在弓形虫感染诱发的肾病中的作用

IFN-γ可抑制弓形虫在肾脏等多种组织中的增殖，在免疫保护中具彳丁重要作用，但组织的炎性病变程度与虫体的数量往往不成比例。近来有研究显示Toll样受体家族（TLRs）参与了肾脏抗感染的先天免疫机制；炎性病变的肾小管上皮细胞TLR2和TLR4mRNA合成明显增加；TLR2和髓样分化因子88（MyD88，一种重要的胞内转接蛋白）在宿主抗真菌、抗细菌和抗弓形虫感染的保护机制中起重要作用。为了探求弓形虫感染与肾脏病变的病理联系，最近日本干叶大学Kudo等研究了IFN-γ和TLRs对弓形虫感染小鼠肾脏的免疫保护作用。以弱毒的成囊型Fukaya株弓形虫经口感染不同型别小鼠，被感染小鼠有6种，野生型（WT）BALB／c小鼠，野生型C57BL／6小鼠，IFN-7基因敲除（GKO）BALB／c小鼠，IFN-γ基因敲除C57BL／6小鼠，TLR2缺陷C57BL／6小鼠和TLR4缺陷C57BL／6小鼠。     

幽门螺杆菌ureI核酸疫苗免疫活性的初步研究

目的 观察幽门螺杆菌ureI核酸疫苗诱导C57BL/6小鼠产生体液免疫应答及细胞免疫应答水平.方法 重组质粒pcDNA3.1(+)/ureI、空质粒pcDNA3.1(+)及PBS分别肌注免疫C57BL/6小鼠.ELISA法检测小鼠血清中特异性IgG抗体水平以及脾淋巴细胞培养上清中IL-4和IFN-γ含量,MTT比色法检测脾淋巴细胞增殖反应,PCR和免疫荧光组化法检测ureI基因和蛋白表达.结果 pcDNA3.1(+)/ureI能够诱导小鼠产生特异性IgG抗体,该组小鼠脾淋巴细胞经UreI重组蛋白刺激后,其刺激指数和培养上清中IL-4、IFN-γ含量明显升高; ureI基因可在小鼠肌细胞中有效表达.结论 pcDNA3.1(+)/ureI核酸疫苗能刺激C57BL/6小鼠产生较强的体液免疫应答和细胞免疫应答,为进一步研究该疫苗的免疫保护作用奠定了基础.     

日本血吸虫感染适宜与非适宜宿主的免疫学特征初步研究

目的研究3种不同易感性宿主感染日本血吸虫后免疫应答特征的差异,初步探讨适宜和非适宜鼠类宿主感染血吸虫后免疫应答的机制。方法 C57BL/6小鼠、Sprague Dawley(SD)大鼠和东方田鼠(Microtus fortis)各12只,均随机分为感染组和未感染组,每组6只。C57BL/6小鼠、SD大鼠和东方田鼠的感染组每鼠经腹部皮肤分别感染日本血吸虫尾蚴20、200和1000条。感染后42d,剖杀各组动物,观察门脉系统成虫寄生及肝脏肉芽肿情况。收集血清,ELISA法检测细胞因子白细胞介素10(IL-10)、γ干扰素(IFN-γ)和血清特异性抗体IgG、IgG_(2a)及IgG_1的水平。结果感染日本血吸虫后42d,C57BL/6小鼠和SD大鼠均检获日本血吸虫成虫,并在宿主肝脏发现虫卵肉芽肿,而东方田鼠未检获血吸虫成虫及虫卵,肝脏正常。SD大鼠血清中IL-10的含量[(2.21±0.12)pg/ml]明显高于东方田鼠[(1.64±0.39)pg/ml](P<0.05)和C57BL/6小鼠[(0.10±0.04)pg/ml)](P<0.01),而东方田鼠也显著高于C57BL/6小鼠(P<0.01);SD大鼠血清...     

一种恶性疟原虫多价重组候补疫苗引起小鼠免疫反应的研究

本实验检测了一种恶性疟原虫多价重组候补疫苗在小鼠体内引起的体液免疫和细胞免疫反应。该重组疫苗包含了MSA1、MSA2、RESA上的T细胞和／或B细胞刺激位点及IL－1、TT上的T细胞刺激位点；尤其是含有Spf66的序列。经重组疫苗免疫后，BALB／c小鼠和C57BL／6小鼠均产生了明显的抗重组疫苗的抗体，且经重组疫苗免疫的BALB/c小鼠脾细胞在体外经重组疫苗刺激后发生了明显的增殖，并产生了明显的IL－2。以上结果提示该候补疫苗具有免疫原性，且具有一定的T细胞刺激能力和一定的广谱识别能力，其能否有效地刺激人淋巴细胞还需进一步研究。     

IFN-γ和IL-4抗卡氏肺孢子虫感染作用的研究

目的研究细胞因子IFN-γ和IL-4的抗卡氏肺孢子虫感染作用.方法分别用IFN-γ或IL-4基因敲除的C57BL/6小鼠(各15只作为动物模型)与未经基因敲除的C57BL/6小鼠(15只作感染对照组),以密切接触的方式,使小鼠自然感染卡氏肺孢子虫;同时设非感染组15只小鼠作阴性对照.分别于3、5和7 wk后观察各组小鼠肺内虫体数量、肺部CD4+、CD8+T细胞反应以及血清中卡氏肺孢子虫特异性IgG抗体滴度.分析基因敲除鼠对卡氏肺孢子虫的易感性.结果IFN-γ基因敲除小鼠肺内虫体数量明显高于IL-4基因敲除小鼠(P＜0.05)和对照组小鼠,而IL-4基因敲除小鼠肺内虫体数量与对照组无显著性差异(P＞0.05).T细胞亚群分析表明,两种基因敲除小鼠的CD4+和CD8+T细胞反应曲线与感染度呈正相关.而IgG抗体滴度,3组接触感染鼠均逐渐呈不同程度上升.结论IFN-γ在小鼠抗卡氏肺孢子虫中起重要作用,但缺少IL-4基因的小鼠对肺孢子虫感染的影响不明显.     

PRU株弓形虫包囊感染小鼠模型的建立

目的建立一个合理、经济的弓形虫包囊小鼠感染模型,为弓形虫的相关研究提供参考。方法 20个PRU株弓形虫包囊分别感染C57BL/6J、ICR、KM或BALB/c四个品系雌性小鼠10只,感染后42d,统计小鼠存活率、脑组织包囊数和包囊直径。结果 KM小鼠存活率100%(10/10),ICR小鼠存活率70%(7/10),C57BL/6J存活率10%(1/10),BALB/c全部死亡(0/10);ICR小鼠包囊数和包囊直径与KM小鼠相比具有显著性差异(P0.01):ICR鼠脑组织包囊数为1385.71±378.555,直径为4.044±0.187μm;而KM鼠脑组织包囊数为290.00±129.743,直径为3.557±0.271μm。结论与其他3个品系小鼠相比,ICR小鼠对PRU株弓形虫包囊的抗性较强,可以作为弓形虫包囊感染模型。