蛋白质组学技术在中医药研究中的应用

中医强调整体观念，注重从宏观角度对疾病的认识。由于受当时科技发展的制约，不可能对发病病因及中药的作用机制进行量化分析，制约着中医药研究的深入和提高。蛋白质组学的研究不仅能为阐明生命活动提供物质基础，也能为多种疾病机制的阐明提供理论根据和解决途径。     

蛋白质组学技术及其临床应用研究

蛋白质组学（proteomics）是指根据蛋白质种类、数量、局部存在的时间、空间上的变化来研究表达于细胞、组织及个体中的全部蛋白质,并从其结构和功能的角度应用各种技术手段综合分析生命活动的一门科学。运用蛋白质分离技术、蛋白质鉴定技术,结合生物信息学对蛋白质组进行研究,可以从整体的角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成、表达水平与修饰状态,了解蛋白质之间的相互作用与联系,揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律。将其应用于临床,为从整体水平研究临床疾病开辟了更广阔的前景,有助于各种疾病的早期发现和治疗。     

蛋白质组学技术在骨关节炎研究中的应用探讨

目的通过了解骨关节炎的发病机理,针对性提出相应的治疗方案,使得骨关节炎能够得到更好的治疗,取得满意的临床效果。该文主要是对蛋白质组学技术应用在骨关节炎中进行研究讨论。方法通过探讨蛋白质组学的研究方法以及各种类型骨关节样本的前处理方法以及应用情况等。初步了解蛋白质组学技术在骨关节炎中的应用情况。通过蛋白质组学技术初步研究骨关节炎,能进一步明确骨关节炎的发病机制以及相应的有效的治疗方法。     

RNA干扰技术在卵巢癌基因治疗中的应用

卵巢癌是一种常见的女性生殖系统肿瘤,恶性程度高,极易发生浸润和远处转移.其发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌,居第3位,其致死率却位居各类妇科肿瘤的首位.卵巢癌的发生发展涉及一系列的基因突变,包括癌基因、抑癌基因等,因此针对卵巢癌发生发展过程中起关键作用的癌基因、抑癌基因等,可利用RNA干扰(RNAi)技术抑制靶基因的表达来达到基因治疗的目的.     

蛋白质组学技术在脓毒症研究中的应用

脓毒症是由感染引起的一种严重的病理状态,在重症加强护理病房中致死率较高。对脓毒症的早期诊断可防止其进一步发展为败血症及休克,进而导致器官衰竭和死亡。目前临床上对该病尚缺乏特异且及时的诊断手段,难以区分脓毒症和其他炎症反应。基于质谱的蛋白质组学能高通量分析脓毒症患者体内蛋白及翻译后修饰水平的表达变化,有利于该病的早期诊断和预后生物标志物的发现,并能初步反映脓毒症患者机体的生理病理变化。     

蛋白质组学技术进展及其在恶性肿瘤研究中的应用

近年,随着蛋白质组学相关技术发展,该技术在研究恶性肿瘤发生发展机制及诊断方面的作用越来越受关注。蛋白质组学（proteomics）名称来自蛋白质（protein）与基因组学（genomics）两个词的组合,由Marc Wilkins和Williams最早提出,指研究特定时间、特定条件下一种基因组所表达的全套蛋白质的科学。     

蛋白质组学技术在营养学研究中的应用

蛋白质组学技术有助于人类深入研究食物蛋白质活性成分、揭示营养素代谢与调控机制、进行营养评价和营养相关疾病的生物学标记等,在营养学研究中具有广泛的应用前景。笔者就蛋白质组学技术在营养学中的应用进行了综述。     

蛋白质组学技术在医学研究中的应用

随着人类基因组计划逐渐实施推进,生命科学研究迎来后基因组时代,蛋白质组学大门随之开启。尽管人类已在疾病,尤其是肿瘤分子水平的研究方面取得了巨大进步,但在有关疾病发病机制,以及早期诊断与有效治疗手段的发展方面,仍存在较大差距[1]。蛋白质组学(Proteomics)的概念最早由澳大利亚的Wilkins于1994年提出,并于次年在“Electrophoresis”杂志上发表。蛋白质组是基因组表达的全部蛋白质[2],而蛋白质组学是以蛋白质组的存在及其活动方式为研究对象,包括细胞、组织以及体液等表达的全部蛋白质。2001年,Science杂志把蛋白质组学列为六大研…     

蛋白质组学技术在乳腺癌研究中的应用

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,2002年全球新发乳腺癌11501298例。尽管各种技术在乳腺癌诊断和治疗中已经取得了长足进步,但是其治疗效果仍难令人满意。1994年澳大利亚学者Marc Wilkins和Keith Williams首先提出了蛋白质组（proteome）的概念并迅速发展成为一门新兴学科——蛋白质组学（proteomics）。蛋白质组学研究方法已经被广泛应用于肿瘤早期诊断、判断预后和预测治疗反应以及寻找生物标志物等研究方面,本文就其在乳腺癌研究中的应用进行综述。     

蛋白质组学技术进展及在中药现代化研究中的应用

蛋白质组（proteome）是指一个细胞或一个组织基因组所表达的全部蛋白质。同一基因组在不同细胞、不同组织中的蛋白质表达情况各不相同．即使是同一细胞，在不同的发育阶段、不同的生理条件甚至不同的环境影响下，其蛋白质的存在状态也不尽相同。蛋白质组是一个在空间和时间上动态变化着的整体。蛋白质组学（proteomics）是指以蛋白质组为研究对象，从整体的角度，分析细胞内动态变化的蛋白质组成与活动规律。     

大肠侧向发育型肿瘤细胞株双向电泳技术成功建立

目的:建立侧向发育型肿瘤细胞(LST)株双向电泳技术.方法:提取LST细胞株总蛋白质,采用不同pH范围IPG胶条进行LST细胞株总蛋白质双向电泳,并对实验步骤进行一系列的调整优化.结果:获得了较为清晰的LST细胞株双向电泳图谱,采用pH 3～10线性IPG胶条分离出1356±43个蛋白质斑点;pH 4～7 IPG胶条两种上样量(250μg和150μg)分别分离出了1285±51和989个蛋白质斑点.结论:通过相关条件的调整优化,成功建立了双向电泳技术,为研究LST特殊性生物学行为相关蛋白质奠定了坚实的基础.     

基于激光解析/离子化飞行时间质谱技术的中药龟甲胶蛋白质组分析

目的对传统中药龟甲胶蛋白质、肽成分进行组蛋白质组分析。方法采用饱和硫酸胺沉淀,透析脱盐法获得龟甲胶蛋白质成分,美国Ciphergen Biosystems Inc.ProteinChip Biology System(PBSⅡ )及配套的NP10芯片、激光解析/离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF MS,Surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flightmass spectro metry)技术,分析了龟甲胶1 500～13 000 Da区间蛋白质、肽分布及其分子量。结果龟甲胶蛋白质/肽质量1 500～3 000区间显示1个分子量峰;4 800～5 400显示3个分子量峰,其中相对分子量分别相差410.8、151.7;8 000～8 600区间显示1个分子量峰;10 000～13 000区间显示1个分子量峰。共获得6个肽分子量峰。结论通过分析,可以形成龟甲胶蛋白质/肽成分质量指纹图,可作为龟甲胶数字化质控标准;并为进一步分离、纯化及验证龟甲胶功能相关活性蛋白质/肽成分打下基础。     

人骨肉瘤蛋白质组双向凝胶电泳图像分析方法的建立与应用

目的： 建立人骨肉瘤蛋白质组双向电泳图像分析方法。方法： 组织标本分为骨肉瘤组和肿瘤旁组。对第一向双向电泳的关键因素与环节进行一系列优化。分离骨肉瘤总蛋白，银染，用ImageMasLer 2D Elite 3.01分析软件分析图谱，使用基质辅助电离解析飞行时间质谱仪主要高丰度部分差异蛋白质进行鉴定。结果：获得分辨率和重复性好的双向电泳图谱。变异系数平均值（%）和变异系数范围（%）：骨肉瘤组为23.00±10.11和3.80～6.89，肿瘤旁组为20.33±9.90和2.70～6.89。同一蛋白质斑点在3次实验中等电点、分子量的相对标准差分别为（8.93±1.17）%、（10.16±2.02）%和（10.87±3.86）%。初步鉴定11个蛋白，其中9个蛋白质只在骨肉瘤中特异高峰度上调表达，分别为转甲状腺素蛋白、磷酸甘油醛异构酶、慢收缩骨骼肌钙蛋白T、心肌钙蛋白、肌动蛋白、肌球蛋白、膜联蛋白-5、 热休克蛋白-1及Fanconi anemia groupD2蛋白；鉴定2个蛋白，锰超氧化物歧化酶、碳酸酐酶蛋白质下调表达。结论：成功构建了用于研究骨肉瘤蛋白质组双向凝胶图谱分析方法，认为初步鉴定的部分差异蛋白可能为骨肉瘤的关联蛋白，其在骨肉瘤发生和进展的病理过程中具有重要作用。     

腹腔镜阑尾切除术难易程度评分系统在腹腔镜培训中的应用

结合实践,介绍了腹腔镜阑尾切除术难易程度评分系统的建立及应用该系统进行腹腔镜外科医师培训的做法及取得的效果。     

无标记定量方法在小鼠精子发生相关蛋白质组学研究中的应用

目的: 利用无标记定量蛋白质组学技术筛选在3周龄及成年小鼠睾丸中差异表达的蛋白质?方法:分别抽提3周龄及成年小鼠睾丸蛋白,酶解后所得肽段经纳升液相色谱分离,并经LTQ Obitrap质谱鉴定,在获得蛋白鉴定信息的同时根据相应肽段离子质谱峰强度对蛋白进行相对定量?结果:在3周龄及成年小鼠睾丸中共鉴定到非冗余蛋白319种,其中30种蛋白在两者之间存在显著的表达差异,这些蛋白主要参与形态发生?收缩?胞吞?受精等细胞事件,与精子变形过程及精子功能相关?结论:无标记定量蛋白质组学技术,具有方法简便?通量大?成本低廉等优点,利用其寻找睾丸发育,精子发生/功能相关蛋白具有广阔的前景?     

小胶质细胞蛋白质组三维分离方法的建立

目的:建立基于二维液相色谱法的三维分离小胶质细胞蛋白质组的方法.方法:将小胶质细胞裂解后制备全细胞蛋白,在传统的一维HPCF、二维HPRP分离后,增加了三维SDS-PAGE电泳,对小胶质细胞实现了三维分离.结果:经过优化后的三维分离,小胶质细胞全蛋白按照pH值由高到低的顺序分为34个组分,其中pH 8.5～4.0的部分包含16个组分,每一个组分又包含若干种蛋白质.结论:同传统的二维液相色谱分离方法相比,改进后的三维分离方法对小胶质细胞全蛋白具有更彻底、更好的分离效果,为后续的质谱鉴定提供了分离度更好的样品.     

胰腺癌早期诊断的蛋白组学研究进展

肿瘤早期诊断的蛋白组学研究是近来国内外研究的热点。本文综述了胰腺癌早期蛋白质组的改变在胰腺癌早期诊断的作用,为胰腺癌的早期诊断提供科学手段。     

黏细菌总蛋白质组双向电泳条件的建立

目的 :建立可以对黏细菌蛋白质组进行阵列分离的双向电泳条件。方法 :以黏细菌模式菌株DK162 2为材料 ,不同方法制备DK162 2在营养性生长阶段的蛋白质组样品 ,双向电泳阵列菌体总蛋白。通过不同条件下电泳图谱的比较建立蛋白质组样品的制备方法和双向电泳的技术条件。结果 :两性离子去污剂CHAPS及还原剂的浓度是影响双向电泳图谱分辨力的重要因素 ;蛋白质组样品的处理必须在低温下快速完成 ,以避免蛋白降解。结论 :初步建立了黏细菌总蛋白质组的双向电泳条件 ,为在细胞水平分析该模式生物发育时期蛋白表达谱奠定了基础     

快速康复外科理念联合腹腔镜技术在结直肠癌手术中的应用研究

目的 探讨快速康复外科(FTS)理念联合腹腔镜技术应用在结直肠癌手术中的临床价值.方法 将100例结直肠癌患者随机分为观察组和对照组,各50例.观察组采用FTS理念联合腹腔镜手术,对照组采用FTS理念联合开腹手术.比较两组手术时间、术中出血量、切口长度、清扫淋巴结数量和手术前后的应激反应指标[白细胞(WBC)计数、C-...     

平肝潜阳药物对甲亢肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质表达的影响

目的:观察平肝潜阳药物对甲亢肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质表达的影响,为进一步探讨平肝潜阳药物治疗甲亢肝阳上亢证作用机制提供依据.方法:左旋甲状腺素(L-T4)腹腔注射和附子汤灌胃以建立甲亢肝阳上亢证模型,应用蛋白质组学技术比较正常组、甲亢肝阳上亢证组及平肝潜阳药物治疗组中下丘脑的差异蛋白质.结果:3组蛋白质斑点总体分布相似,主要分布在等电点pI 3～10,分子质量为13.8～98.8 kD.与正常组比较,甲亢肝阳上亢证模型组中蛋白质点表达上调的有6个点,下调的有10个点;在模型组中上调的6个点在治疗后均较治疗前有下降;而模型组中下调的10个点在治疗后均较治疗前有上调.结合生物信息学进行质谱鉴定,发现其中9个蛋白质分别为prohibitin,硫氧还蛋白过氧化物酶6,组氨酸三聚体核苷结合蛋白1,蛋白酪氨酸磷酸酶,假定蛋白,肌动蛋白抑制蛋白2,硫氧还蛋白过氧化物酶-Ⅱ,热休克蛋白-27,膜联蛋白-A1.结论:平肝潜阳药物治疗后的甲亢肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质的表达具有差异,所鉴定的这9个蛋白质可能与平肝潜阳药物的作用机制有关.