舌鳞癌组织中Cyclin D1、VEGF的表达变化及其相关性

目的观察Cyclin D1、血管内皮生长因子（VEGF）在舌鳞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测45例舌鳞癌组织及正常舌黏膜组织中Cyclin D1、VECF的表达变化。结果舌鳞癌组织中Cyclin D1、VECF的阳性表达率分别为62．2％、71．1％,均高于正常舌黏膜（P均〈0．01）;Cyclin D1表达与舌鳞癌的组织分级、临床分期有关（P〈0．05）,VEGF表达与舌鳞癌的临床分期、淋巴结转移有关（P〈0．05）;Cyclin D1与VECF表达呈正相关（r=0．515,P〈0．01）。结论Cyclin D1和VEGF在舌鳞癌组织中呈过表达,二者表达呈正相关。联合检测Cyclin D1和VEGF可以做为判断舌鳞癌生物学行为和指导临床治疗的指标。     

宫颈上皮内瘤变、宫颈鳞癌组织中CD34、α-SMA的表达变化及意义

目的 观察宫颈上皮内瘤变（CIN）及子宫颈鳞癌组织中CD34、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达变化,并探讨其意义.方法 采用免疫组化SP法检测14例宫颈鳞癌、77例CIN及23例正常宫颈组织中的CD34、α-SMA.结果 CD34、α-SMA在CIN和宫颈鳞癌组织中的阳性表达率明显高于正常宫颈组织（P均＜0.05）.CIN和宫颈鳞癌组织中CD34、α-SMA的表达有相关性（P＜0.05）.结论 宫颈上皮内瘤变及子宫颈鳞癌组织中CD34表达减弱、α-SMA的表达增强,二者可作为诊断宫颈癌前病变及宫颈鳞癌的指标.     

KiSS-1、P16INK4A及Ki67在宫颈鳞癌中的表达及其意义

目的探讨KiSS-1、P16INK4A及Ki67在正常宫颈黏膜上皮、宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈鳞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测40例正常宫颈黏膜上皮、40例CIN及40例宫颈鳞癌组织中KiSS-1、P16INK4A及Ki67的表达。结果 KiSS-1、P16INK4A及Ki67在正常宫颈黏膜上皮的阳性表达率为85.00%、62.50%、29.70%,CINⅡ~Ⅲ为10.00%、65.00%、87.50%,宫颈鳞癌为8.00%、40.00%、95.00%;KiSS-1蛋白失表达与宫颈鳞癌的浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0.05）,P16INK4A及Ki67的高表达与宫颈鳞癌的浸润深度及淋巴结转移有关（P〈0.05）;宫颈鳞癌组织中KiSS-1和P16INK4A、Ki67的表达具有相关性（P〈0.01）。结论 KiSS-1低表达和P16INK4A、Ki67过表达与宫颈癌的发生、发展、浸润及转移有关,联合检测KiSS-1、P16INK4A及Ki67的表达可以在一定程度上预测宫颈癌患者预后并指导治疗。     

子宫颈癌组织中p14ARF的表达及意义

目的 探讨p14ARF在宫颈癌、上皮内瘤变(CIN)及正常宫颈组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测30例正常宫颈组织、20例CIN组织和52例子宫颈鳞癌组织中p14ARF的表达.结果 在正常宫颈组织中p14ARF蛋白呈阴性表达;在CIN组织及宫颈癌组织中呈过表达,阳性率分别为30.0%(6/20)、63.5%(33/52)(P＜0.05).p14ARF蛋白在有淋巴转移宫颈癌组织中阳性表达率为85.0%,无淋巴转移者为50.0%(P＜0.05).p14ARF蛋白在组织分级G3期阳性率为90.9%与G1期(33.3%)相比,P＜0.05.结论 p14ARF的过表达发生在宫颈癌和癌前病变阶段,可作为一种肿瘤标记物用于宫颈癌的临床筛查及诊断.     

宫颈鳞癌组织中VEGF-C、VEGFR-3的表达变化及意义

目的观察血管内皮生长因子C（VEGF-C）及其受体（VEGFR-3））在宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈鳞癌组织中的表达变化,探讨其与宫颈癌发生发展及浸润转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测11例正常宫颈组织、19例CIN及47例宫颈鳞癌组织中的VEGF-C、VEGFR-3。结果VEGF-C与VEGFR-3在正常宫颈组织、CIN及宫颈鳞癌组织中的表达依次增高,三者相比,P〈0．05。在宫颈鳞癌组织中VEGF-C与VEGFR-3的表达有关（P〈0．01）,淋巴结转移组VEGF-C与VEGFR-3的阳性表达率明显高于无转移组（P〈0．05）。结论VEGF-C和VEGFR-3在宫颈鳞癌发生发展及淋巴转移过程中发挥重要作用。     

食管癌变过程中CyclinB1、CDK1及细胞周期调控因子p53、Rb的表达及意义

目的:探讨食管癌变过程中细胞周期蛋白B1(CyclinB1)、细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent kinases 1,CDK1)的变化及其相关细胞周期调控因子p53、Rb的表达及相互关系.方法:选取35例食管鳞癌组织(同一个病例同时存在鳞癌、上皮内瘤变组织及正常食管黏膜),采用组织芯片及免疫组织化学En Vision二步法,分别观察食管鳞状上皮癌变各阶段Cyclin B1、CDK1、p53和Rb的蛋白表达变化并分析其相互关系.结果:(1)Cyclin B1、CDK1与p53在食管鳞癌组中均呈高表达,且与正常上皮、低级别及高级别上皮内瘤变组间比较均有统计学差异(P0.05);(2)Rb除鳞癌组与高级别上皮内瘤变组表达率接近外(P0.05),其他各组间表达率均具有显著统计学差异(P0.01);(3)Cyclin B1、CDK1、p53及Rb在食管鳞癌组中的表达均呈显著正相关(P0.01).结论:(1)在食管癌变的过程中,Cyclin B1、CDK1、p53及Rb基因蛋白过表达并协同作用;(2)Rb蛋白的过表达参与了食管上皮内瘤变的演进过程,是食管癌变的早期事件;(3)联合检测Cyclin B1、CDK1、p53和Rb蛋白表达将有助于食管癌的早期诊断及病变发展的评估.     

ICC、CIN组织中VEGF的表达及意义

采用免疫组化法检测75例宫颈上皮内瘤样病变（CIN）、45例宫颈癌（ICC）及30例正常宫颈组织中的VEGF。结果显示,正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢI、CC组织中,VEGF阳性表达率分别为46.7%、64.0%、68.2%、82.1%、97.8%。各组VEGF的阳性表达率比较,P均〈0.05。认为VEGF可能在CIN发展为ICC过程中发挥重要作用。     

宫颈鳞癌组织中cFLIP mRNA、Caspase-8 mRNA的表达变化及意义

目的寻找有效预测宫颈癌转移和评估预后的生物学指标。方法采用原位杂交法检测46例宫颈鳞癌组织、21例上皮内瘤样病变（CIN）及26例正常宫颈黏膜组织中Fas相关死亡区域蛋白样IL-1β转换酶抑制蛋白（chap）mRNA及Caspaae-8mRNA。结果cFLIP mRNA在宫颈鳞癌、CIN及正常黏膜组织中阳性表达率依次为76．1％、28．6％、15．4％，两两比较，P均〈0．05；cFLIP mRNA表达与宫颈鳞癌分化程度及淋巴结转移有关（P均〈0．05）。宫颈鳞癌、CIN及正常黏膜组织中Caspase-8mRNA阳性表达率分别为9．1％、9．5％、57．1％，两两比较，P均〈0．05；Caspase-8 mBNA表达与宫颈鳞癌分化程度有关（P〈0．05）。cFLIP mRNA、Caspase-8mRNA表达呈负相关（r=-0．642，P〈0．05）。结论在宫颈癌发展中cFLIP及Caspase-8分别发挥正负调节作用，Caspase-8可能通过抑制cFLIP的表达限制肿瘤细胞的侵犯和转移。二者联合检测有助于评估患者病情，为临床治疗方案的制定提供参考。     

P53、PTEN在宫颈上皮内瘤样病变中的检测及意义

目的检测基因表达产物P53和PTEN蛋白在正常宫颈上皮、各级宫颈上皮内瘤样病变（CIN）以及宫颈鳞状细胞癌（SCC）组织中的表达水平,探讨其与CIN病理学及分级的关系。方法采用SP免疫组化法检测10例正常宫颈上皮、55例CIN及15例SCC组织中P53、PTEN蛋白的表达情况。结果P53蛋白阳性表达率在正常宫颈鳞状上皮、CIN和SCC中分别为0、41．82％、73．33％,两两比较有统计学差异（P均〈0．05）。在各CIN分级中,P53蛋白阳性表达率比较无统计学差异（P〉0．05）;PTEN蛋白在正常宫颈鳞状上皮、CINI级、CINII级、CINⅢ级及SCC中阳性表达率比较均无统计学差异（P均〉0．05）。结论P53参与了CIN、SCC的发生,PTEN在CIN、SCC中可能起到有限的作用。     

突变型p53、Ki67在宫颈病变组织中的表达及临床意义

目的探讨突变型p53与Ki67作为宫颈病变早期生物学标志的可能性。方法采用免疫组化SP法检测10例正常宫颈、50例宫颈上皮内瘤变（CIN）和60例宫颈鳞癌组织中p53、Ki67的表达。结果 p53和Ki67在慢性宫颈炎中的表达率低于CIN、宫颈鳞癌（P〈0.01）;CINⅠ、CINⅡ与CINⅢ、宫颈癌间有显著性差异（P〈0.05）,而CINⅢ与宫颈癌间无统计学差异（P〉0.05）。p53、Ki67蛋白的表达与宫颈癌临床分期、病理分级有关（P〈0.05）。结论突变型p53、Ki67的异常表达与宫颈癌发生、发展有关,两者协同检测有可能成为筛选高危人群及判断预后的指标之一。     

STAT3和CyclinD1在宫颈癌组织中的表达及意义

目的探讨信号转导和转录激活因子3（STAT3）和细胞周期蛋白D1（CyclinD1）表达与宫颈癌生物学行为的关系及意义。方法用免疫组化S-P法检测12例正常宫颈、24例宫颈上皮内瘤变（CIN）、60例宫颈癌中STAT3与CyclinD1的表达。结果宫颈癌组织STAT3、CyclinD1的阳性表达率均明显高于正常宫颈组织与CIN组织（P〈0．01,〈0．05）;STAT3和CyclinD1的表达呈正相关（r=0．327,P〈0．05）;STAT3、CyclinD1异常表达率随着病理分级和临床分期的增加而增加,两者的表达均与淋巴转移有关（P〈0．01,〈O．05）。结论STAT3可能通过激活其下游靶基因CyclinD1,引起宫颈癌细胞异常增殖和分化失控。     

高危型HPV感染与宫颈癌组织中IDO表达的相关性研究

目的探讨吲哚胺2,3-二氧酶（IDO）在宫颈癌发生发展中的作用及其与高危型人乳头状瘤病毒（HR—HPV）感染之间的关系。方法我院经宫颈活检病理确诊为CINⅢ和宫颈浸润癌患者43例,同时期因子宫肌瘤行全子宫切除宫颈正常患者30例作为对照。采用第2代杂交捕获法（HC-2）HR-HPVDNA检测高危型HPV DNA,免疫组化染色方法检测IDO的表达。结果IDO和HR—HPV阳性率在宫颈原位癌和浸润癌组均显著高于正常宫颈组（P〈0．01）。HR—HPV感染与IDO表达呈正相关（rs=0．759,P〈0．01）。结论在HR—HPV感染的CINⅢ和宫颈浸润癌中,IDO出现过表达,可能与肿瘤免疫逃逸有关。IDO可能成为宫颈癌预后的预测因子及治疗靶点。     

平消胶囊联合索拉非尼片对老年肝癌患者免疫功能及VEGF蛋白表达的影响

[目的]研究平消胶囊联合索拉非尼片对老年肝癌患者免疫功能及VEGF蛋白表达的影响.[方法]2009年1月～2012年12月60例初诊中晚期原发性肝癌患者随机分为观察组和对照组,2组患者术后均接受化疗,观察组患者同时口服平消胶囊和索拉非尼片,TACE两个疗程后进行近期临床疗效评估,并且测定2组患者治疗前后细胞免疫功能和VEGF蛋白的表达.[结果]①观察组有效率为63.33％,显著高于对照组（P＜0.05）;②治疗后观察组患者CD4＋、CD4＋/CD8＋和NK细胞显著高于对照组患者（P＜0.01）,但是CD8＋细胞显著低于对照组（P＜0.01）;③治疗后观察组患者VEGF水平显著低于对照组（P＜0.01）.[结论]平消胶囊联合索拉非尼可提高中晚期老年肝癌患者化疗的近期临床疗效,并提高患者细胞免疫功能及抑制VEGF蛋白表达.     

口腔鳞癌组织中 p73、p15蛋白的表达变化及意义

目的：观察口腔鳞癌组织中p73、p15蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测20例份口腔正常黏膜组织（对照组）、35例份扁平苔藓组织（扁平苔藓组）、50例份鳞癌组织（鳞癌组）中p73、p15蛋白,并分析鳞癌组中两指标的相关性。结果鳞癌组、扁平苔藓组、对照组p73阳性率分别为82．00％、54．29％、15．00％,p15阳性率分别为42．00％、100．00％、100．00％,两两比较,P均＜0．05;鳞癌组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级p73阳性率分别为70．83％、90．00％、100．00％,p15阳性率分别为54．17％、35．00％、16．67％,两两比较,P均＜0．05。鳞癌组p73、p15蛋白表达呈负相关（r＝－0．932,P＜0．05）。结论口腔鳞癌组织中p73蛋白表达升高,p15蛋白表达降低,两者在口腔鳞癌发生、发展过程当中起到相互拮抗的作用。     

喉鳞癌组织中HIF-1α、VEGF的表达及其与淋巴结转移的关系

目的观察喉鳞癌组织中缺氧诱导因子（HIF）-1α和血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况及其与淋巴结转移的关系。方法用免疫组化法检测57例喉鳞癌组织中HIF-1α和VEGF的表达变化;10例癌旁正常组织作对照。结果喉鳞癌组织中HIF-1α和VEGF阳性表达率均高于正常组织（P〈0．05）;有淋巴结转移的喉鳞癌组织中HIF-1α和VEGF阳性表达率均高于无淋巴结转移者（P〈0．05）。结论HIF-1α和VEGF在喉鳞癌组织中呈高表达,二者均与喉鳞癌淋巴结转移有关。     

尿pH值与慢性肾脏疾病患者对比剂肾病的关系

目的 探讨尿pH值与慢性肾脏疾病（chronic kidney disease,CKD）患者经皮冠状动脉介入（percutaneous coronary intervention,PCI）治疗或冠状动脉造影术（coronary angiography,CAG）后对比剂肾病（contrast-induced nephropathy,CIN）的相关性.方法 回顾性分析2009年9月至2012年8月在广东省人民医院行择期PCI治疗或CAG的CKD患者453例的临床资料.按术前尿pH值水平将患者分为2组：尿pH值≥6组（n=254例）,尿pH值＜6组（n=199例）.比较两组之间的基线资料、CIN发病率、院内病死率及血液透析率.采用单因素Logistic 回归分析筛选CIN的危险因素,采用多因素Logistic回归分析尿pH值＜6与CIN的关系.结果 共52例患者（11.5％）发生CIN;尿pH值≥6组,尿pH值＜6组CIN的发病率分别5.5％ （14/254）、19.1％（38/199）,两组比较差异有统计学意义（P＜0.001）;院内病死率分别为0和1.5％ （3/199）,两组比较差异无统计学意义（P=0.050）;血液透析率分别为0.4％（1/254）和1.5％（3/199）,两组比较差异无统计学意义（P=0.209）.单因素Logistic回归分析显示,尿pH值＜6与CIN的发病率相关（OR =4.406,95％CI：2.124-7.708,P＜0.001）;多因素Logistic回归分析提示,尿pH值＜6是CIN的独立危险因素（OR =3.267,95％CI：1.674-6.374,P=0.001）.结论 CKD患者术前尿pH值＜6与择期PCI或CAG术后CIN相关,尿pH值＜6增加发生CIN的风险.     

肺癌药敏与耐药基因MRP1、P-gp、GST-π和TopoⅡ表达的相关性研究

目的 研究多药耐药相关蛋白1 （MRP1）、P-糖蛋白（P-gp）、谷胱甘肽S转移酶-π（GST-π）、拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）基因表达和肺癌药物敏感试验相关性.方法 药物敏感试验采用MTT比色法,MRP1、P-gp、GST-π及TopoⅡ采用免疫组化检测.结果 MRP1、P-gp、GST-c及TopoⅡ在肺癌中总的阳性率分别为72.5％、67.5％、57.5％、50.0％.在鳞癌和腺癌中,这四种因子其表达无显著性差异（P＞0.05）,但P-gp、GST-π在鳞癌或腺癌中与在小细胞肺癌中表达有明显差异（P＜0.05）.P-gp和GST-π表达与顺铂、吉西他滨、长春瑞滨、紫杉醇耐药性呈正相关（P＜0.05）,与异环磷酰胺的耐药性无相关性（P ＞0.05）;MRP1的表达与顺铂、吉西他滨、长春瑞滨的耐药性均呈正相关（P＜0.05）,其表达与紫杉醇、异环磷酰胺的耐药性无相关性（P＞0.05）;TopoⅡ的表达与顺铂、吉西他滨、紫杉醇、异环磷酰胺的耐药性均呈正相关（P＜0.05）,其表达与长春瑞滨的耐药性无相关性（P＞0.05）.结论 MRP1、P-gp和GST-π的高表达及TopoⅡ的低表达共同介导参与了肺癌耐药的机制,且与检测的化疗药物耐药性有不同程度的相关性.     

let-7c对HCCLM3细胞增殖的影响

目的 用瞬时转染的方法 研究let-7c对人肝癌细胞HCCLM3增殖的影响并探讨其机制.方法 用脂质体2000将miRNA转染人人肝癌细胞HCCLM3,设let-7c组转染let-7c,设对照组转染阴性对照miRNA,设空白组不做任何转染.用细胞计数试剂盒CCK-8检测转染后细胞生长增殖的变化,用流式细胞术检测各组细胞周期分布的差异.用Western blot和实时荧光PCR检测转染后细胞周期蛋白(cyclin) D1及其mRNA表达的变化.多组数据的两两比较采用LSD法.结果 let-7c组细胞在转染后48、72h时的吸光度值分别为0.70±0.05、0.77±0.09,低于空白组的0.97±0.10、1.21±0.12和对照组的0.91±0.07、1.12±0.09,各组比较,F值分别为14.431、21.146,P值均＜0.01,差异均有统计学意义.转染后72h,let-7c使癌细胞处在G1期的细胞比例增加.空白组、对照组、let-7c组G1期的细胞比例分别为43.53％±0.86％、44.82％±0.77％、54.52％％±0.13％,各组比较,F=240.739,P＜0.01,差异有统计学意义.let-7c能抑制cyclin D1及其mRNA的表达,空白组、对照组、let-7c组cyclin D1的表达水平分别为0.48±0.09、0.47±0.06、0.23±0.06,各组比较,F=11.316,P＜0.01,差异有统计学意义; mRNA的相对表达量分别为1.03％±0.29％、1.01％±0.11％、0.63％±0.14％,各组比较,F=6.315,P＜0.05,差异有统计学意义.结论 let-7c能抑制HCCLM3细胞的增殖,并使细胞停留在G1期的细胞比例增加.导致这种现象的机制可能为let-7c抑制cyclin Dl及其mRNA的表达.