苦参碱与氧化苦参碱体外抗乙肝病毒的比较

目的:观察苦参碱与氧化苦参碱对HepG2.2.1 5细胞分泌HBsAg,HBeAg和Pre-S1的影响,探讨其体外抗乙型肝炎病毒作用.方法:采用HepG2.2.1 5细胞模型进行体外培养,给予不同浓度苦参碱与氧化苦参碱,作用9 d后收集上清液,用MTT法观察药物对HepG2.2.15细胞的抑制作用,用ELISA法检测上清夜中HBsAg,HBeAg和Pre-S1的分泌.结果:苦参碱与氧化苦参碱在浓度为0.001mol/L以下时对HepG2.2.1 5的生长抑制作用较小(低于25%).在浓度为1000 μmol/L到0.1 μmol/L之间,苦参碱和氧化苦参碱对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的抑制率均高于50%,而对HBeAg的抑制率均低于50%;浓度为0.001 mol/L时对Pre-Sl的抑制率分别为53.58%、59.33%.结论:苦参碱与氧化苦参碱均具有一定的抗HBV作用,两者无显著差别,且对HBsAg和Pre-S1的抑制效果优于拉米夫定.     

相关基因在苦参碱诱导人肺腺癌细胞凋亡中的表达

目的 探讨苦参碱对肺腺癌细胞凋亡和Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.方法 肺腺癌A549细胞进行传代培养后,分别加入30、60、120、240 mg/L的苦参碱,MTT法检测其对A549细胞生长的抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 不同浓度的苦参碱对肺腺癌细胞生长均有抑制作用,抑制率与浓度呈正相关.苦参碱可诱导A549细胞凋亡,与作用时间呈正相关.苦参碱能显著降低Bcl-2蛋白表达(P＜0.01),而显著升高Bax蛋白表达水平.结论 Bcl-2基因表达降低、Bax基因表达增高可能在苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡中起重要作用.     

苦参碱对白血病KG1a细胞增殖及凋亡的影响

目的 观察苦参碱对人急性髓白血病细胞株KG1a体外增殖抑制和凋亡的影响.方法 CCK-8法和台盼蓝拒染色法检测苦参碱对KG1a细胞增殖抑制作用和细胞存活率;甲基纤维素培养体系分析细胞克隆形成能力;流式细胞仪法检测作用前后KG1a细胞的凋亡率及细胞周期变化.结果 苦参碱能够抑制KG1a细胞增殖,随着药物浓度增大和作用时间延长,抑制率逐渐升高、存活率逐渐下降;作用后细胞克隆形成率明显低于对照组(P＜0.05);各浓度药物组均能诱导KG1a细胞凋亡;苦参碱作用后细胞大部分被阻于Go/G1期.结论 苦参碱能抑制KG1a细胞的增殖,改变其周期,诱导其凋亡.     

氧化苦参碱对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的探讨氧化苦参碱对大鼠肝星状细胞增殖的影响及其抗肝纤维化的机理.方法用链酶蛋白酶和胶原酶原位灌流消化正常大鼠肝脏,Nycodenz密度梯度离心分离肝星状细胞,以MTT比色法观察氧化苦参碱对肝星状细胞毒性作用,3H-TdR法观察氧化苦参碱对肝星状细胞增殖的效应.结果氧化苦参碱浓度＞10-5mol/1时对肝星状细胞增殖有抑制作用(P＜0.05).结论氧化苦参碱可抑制肝星状细胞的增殖,有抗肝纤维化的作用.     

氧化苦参碱对局灶性脑缺血大鼠脑组织超微结构的保护作用

目的 观察氧化苦参碱(Oxymatrine,OMT)对局灶性脑缺血大鼠脑组织超微结构的保护作用.方法 将健康Wistar大鼠随机分为模型组、假手术组、路路通组(LLT)及OMT 35、70及105 mg/kg三个不同剂量组,每组8只.采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型,测定各组大鼠神经学评分、脑梗死体积及脑组织超微结构改变. 结果 与模型组相比,OMT各剂量组均能降低局灶性脑缺血大鼠神经学评分(P<0.05)及缩小脑梗死体积(P<0.01).电镜观察发现OMT 70及105 mg/kg剂量组能够改善脑组织神经元及神经毡的空化现象,对线粒体的结构也起到了一定的保护作用. 结论 氧化苦参碱能够减轻局灶性脑缺血大鼠脑组织超微结构的损伤,对缺血脑组织具有一定的保护作用.     

苦参碱对肺间质纤维化大鼠超微结构的影响

目的 观察苦参碱对博莱霉素(BLM)致大鼠肺间质纤维化模型超微结构的保护作用.方法 90只大鼠随机分为正常对照组、模型组、苦参碱各治疗组、氢化可的松组.BLM按5 mg/kg体重制作大鼠肺间质纤维化模型,24 h后给药,以上动物于7、14、28 d处死后观察肺间质纤维化形成的超微结构变化,并进行细胞外基质透明质酸(HA)及羟脯氨酸(HYP)含量的检测.结果 苦参碱治疗后肺泡炎和肺纤维化超微病理结构明显减轻,与模型组比较,HA及HYP含量明显降低(P＜0.01),与激素组疗效相近.结论 苦参碱能减慢肺间质纤维化的进程,明显改善肺间质纤维化大鼠超微结构,对肺间质纤维化有保护作用.     

苦参碱对大鼠肝星状细胞增殖和凋亡的影响

目的研究苦参碱对体外培养肝星状细胞(HSC)增殖与凋亡的影响,探讨苦参碱抗肝纤维化作用机制。方法用0.125、0.25、0.5mgml的苦参碱分别处理HSC细胞系rHSC99和肝细胞株HL770224h后,MTT比色法检测细胞增殖,AnnexinVFITCPI双染色流式细胞分析法检测早期细胞凋亡,TUNEL法原位检测DNA断裂,透射电镜观察形态改变。结果①苦参碱对HSC增殖有明显的抑制作用,且作用呈剂量依赖性;苦参碱对肝细胞增殖有促进作用,但促增殖作用不随浓度增加而增强。②AnnexinVFITCPI双染色流式细胞分析:对照组、苦参碱0.125mgml组、0.25mgml组、0.5mgml组凋亡率分别为0.99%±0.45%、5.00%±0.98%、13.6%±2.19%、17.2%±2.17%,差异有显著性(F=63.14,P<0.05)。苦参碱处理组细胞TUNEL检测发现DNA断裂,透射电镜下见核仁消失,染色质浓缩并凝聚成团块状,沿核膜排列。结论苦参碱可抑制HSC增殖、诱导HSC凋亡,可能是其抗肝纤维化机制之一。     

二硫代氨基甲酸吡咯烷对苦参碱诱导肝癌细胞凋亡的影响

目的 观察二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)抑制核因子-κB(NF-κB)活化后对苦参碱诱导肝癌细胞HepG2凋亡的影响.方法 MTT法观察苦参碱(分0.8、1.0、1.5、2.0、2.5 g/L组)及PDTC联合苦参碱对HepG2细胞增殖的抑制作用.将HepG2细胞随机分为细胞对照组、PDTC组(20μmol/L)、苦参碱组(1.5 g/L)和PDTC+苦参碱联合组,流式细胞仪和末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法检测细胞凋亡;电泳迁移率改变实验检测细胞核内NF-κB的活化水平.结果 PDTC增强了苦参碱对细胞增殖的抑制作用(F=183.92,P＜0.01).苦参碱同时具有诱导HepG2细胞凋亡和NF-κ B活化的作用;PDTC能显著增加苦参碱诱导的HepG2细胞凋亡和抑制苦参碱诱导的HepG2的NF-κB活化,细胞凋亡率由6.11%±0.81%增加至12.95%±0.02%(χ2=9.67,P＜0.05),NF-κB活化的灰度值由38.82±0.17降至32.01±0.69(χ2=10.38,P＜0.05).结论 苦参碱诱导HepG2细胞凋亡的同时激活NF-κB;PDTC可通过抑制NF-κB活化,增强苦参碱诱导HepG2细胞凋亡的作用.     

苦参碱对大肠癌细胞增殖和表达增殖诱导配体的影响

目的 通过研究苦参碱对大肠癌细胞株SW480增殖和表达增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)水平的影响,为苦参碱和APRIL的抗癌研究提供理论基础.方法 采用MTT法检测苦参碱对大肠癌细胞株SW480增殖的抑制率.免疫组化法和实时荧光定量PCR检测大肠癌SW480细胞株的APRIL表达,用实时荧光定量PCR检测加入不同终浓度(0.5、1.0、2.0 mg/ml)的苦参碱后24、48、72 h SW480细胞表达APRIL mRNA的水平,设氟尿嘧啶为对照组及不加药为空白对照组.结果 苦参碱对大肠癌SW480细胞的增殖有明显的抑制作用,并且呈剂量和时间依赖.SW480细胞有明显的APRIL表达,加入不同浓度(50、100、200 ug/ml)的氟尿嘧啶后,SW480细胞APRIL mRNA的水平均逐渐升高,至72 h表达最高并与空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.001),而加入不同浓度苦参碱,在药物作用后24 h,SW480细胞的APRIL mRNA水平升高并与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.001),而后逐渐下降,至药物作用后72 h,其水平与空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 氟尿嘧啶在抑制SW480细胞增殖的同时,残存癌细胞的增殖能力有可能因为APRILmRNA水平的高表达而增强,故同时辅予对抗APRIL功能的治疗措施可能具有潜在的重要作用,而苦参碱不会引起SW480细胞APRIL mRNA水平的持续升高.可望成为一个有益的抗大肠癌辅助治疗手段.     

氧化苦参碱对HepG2.2.15细胞蛋白酪氨酸激酶活性的影响

目的:探讨氧化苦参碱抗乙肝病毒复制的作用机制。方法:采用HepG2.2.15细胞体外培养,以拉米夫定为对照药物,用ELISA方法检测细胞内总蛋白酪氨酸激酶活性,观察氧化苦参碱对细胞内蛋白酪氨酸激酶活性影响。结果:氧化苦参碱体外对HepG2.2.15细胞内总蛋白酪氨酸激酶抑制率为19.93%;而拉米夫定对蛋白酪氨酸激酶活性抑制率更高,达49.30%。结论:氧化苦参碱具有一定的抑制蛋白酪氨酸激酶活性作用,可能是其抗乙肝病毒复制的作用机制之一。     

氧化苦参碱对人结肠癌细胞株SW1116细胞周期通路相关调控因子的影响

背景：氧化苦参碱为中药苦参的主要有效成分，研究显示其对结肠癌细胞具有杀伤作用。目的：观察氧化苦参碱对人结肠癌细胞株SW1116细胞周期通路相关调控因子的影响，阐明其抗结肠癌作用的分子机制。方法：分别以2、3、4mg／m1氧化苦参碱干预SW1116细胞24h或48h，以流式细胞仪检测细胞周期，以逆转录聚合酶链反应（RTPCR）和蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白（cyclin）D1、细胞周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）、CDK抑制剂p53、核转录岗子E2F1和S期激酶相关蛋白2（Skp2）mRNA和蛋白水平的表达。结果：氧化苦参碱干预可使SW1116细胞周期阻滞于G0／G1期，cyc1inD1、CDK4、E2F1和Skp2mRNA和蛋白表达显著下降，p53mRNA和蛋白表达显著上升，作用呈剂量和时间依赖性（P〈0．05）。结论：氧化苦参碱可通过影响细胞周期相关通路以抑制人结肠癌细胞增殖。     

氧化苦参碱对高果糖饮食诱导大鼠脂肪肝的改善作用及机制研究

观察氧化苦参碱干预对高果糖饮食诱导大鼠胰岛素抵抗和肝脏脂质沉积的影响,并探讨其改善肝脏脂质代谢的分子机制.结果表明高果糖喂养降低大鼠葡萄糖耐量,增加肝脏脂质沉积;而氧化苦参碱可改善大鼠糖耐量和肝脏脂质沉积;高果糖喂养刺激大鼠肝脏脂质合成关键酶蛋白表达,而氧化苦参碱干预显著降低了高果糖喂养诱导的肝脏脂质合成关键酶蛋白表达;高果糖喂养和氧化苦参碱干预对大鼠的线粒体脂肪酸氧化酶类表达无明显影响.     

NF-κB和RBP-Jκ在大鼠肝再生过程中的作用及苦参碱的调节机制

目的:探讨肝再生过程中NF-κB、RBP-JK的作用及苦参碱对其调节机制,揭示苦参碱参与肝再生启动的分子机制.方法:60只SD大鼠随机分为2组,每组30只.肝大部分切除组:建立2/3肝切除模型;苦参碱/肝大部分切除组:建立2/3肝切除模型,同时以苦参碱灌胃.观察点为术后1、3、7、14、21 d,通过苏木精-伊红染色、...     

苦参碱对高频左心房起搏房颤模型兔的影响

目的应用微电极阵(MEA)技术研究苦参碱对高频左心房起搏房颤模型兔的影响,探讨其可能具有的抗房颤作用。方法 60只成年新西兰大白兔,随机分成对照组、起搏组、苦参碱A组(5 mg/kg)、苦参碱B组(10 mg/kg)、苦参碱C组(20 mg/kg),苦参碱D组(40 mg/kg),每组10只。连续高频左心房起搏3 w后,开胸取出心脏,用柔性电极贴附心房肌,分别记录各组场电位和激动传导的变化。结果起搏组与对照组相比,场电位时限(f APD)明显缩短,传导速度(CV)减慢,差异有统计学意义(P<0. 05)。苦参碱各组与起搏组相比,f APD、CV分别呈浓度依赖性延长与加快,差异均有统计学意义(P<0. 05)。结论在房颤兔模型中,苦参碱能有效延长心房肌f APD和加快CV,显示出较好的抗房颤作用。     

苦参碱对肺间质纤维化大鼠外周血单个核细胞DNA损伤的保护研究

目的 观察肺间质纤维化大鼠氧化/抗氧化状态、外周血单个核细胞(PBMCs)DNA 损伤情况及苦参碱的保护作用机制.方法 采用气管内灌注博来霉素(BLM)的方法建立大鼠肺纤维化模型,设正常对照组、模型组、小剂量苦参碱组、大剂量苦参碱组和氢化可的松组,每组18只,再各分为第7天、第14天和第28天组.观察各组不同时期病理切片和肺组织羟脯氨酸(HYP)浓度;测定肺组织丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;用荧光显微镜检测PBMCs DNA 损伤情况.结果 苦参碱组和氢化可的松组的肺泡炎和肺纤维化程度及HYP含量显著地低于模型组(P＜0.05);苦参碱和氢化可的松能明显减少肺间质纤维化大鼠肺组织MDA水平,提高GSH-Px含量,降低PBMCs彗星率(P＜0.01).结论 苦参碱能减轻BLM诱导的大鼠肺纤维化,这种作用有可能通过改善BLM大鼠体内氧化应激状态,减轻肺间质纤维化大鼠PBMCs DNA损伤实现的.     

苦参碱诱导大鼠肝卵圆细胞株WB-F 344细胞分化中Wnt-1信号通路的作用

目的: 研究苦参碱干预体外培养的大鼠肝卵圆细胞分化中Wnt-1信号通路的作用.方法: 体外培养大鼠肝卵圆细胞,分别用不同浓度的苦参碱(0.001、0.01、0.05、0.2、0.5、1、1.5、2 g/L)处理卵圆细胞,HE染色观察细胞的形态变化,免疫细胞化学检测细胞内甲胎蛋白、白蛋白、Wnt-1信号蛋白的表达.结果: 苦参碱对肝卵圆细胞的生长有抑制作用,且苦参碱浓度越大,作用时间越长,抑制作用越明显,0.05、0.2、1 g/L的苦参碱作用72 h后,对卵圆细胞的抑制率分别为24.16%±2.03%、40.25%±3.92%和67.31%±6.04%.0.01 g/L的苦参碱即可使肝卵圆细胞的形态发生变化,细胞核变大、变圆,核浆比例减小,双核细胞增多;免疫细胞化学结果显示,0.2 g/L的苦参碱能够使肝卵圆细胞的ALB表达增高,AFP的表达降低,Wnt-1信号蛋白的表达量降低.结论: 苦参碱可以抑制Wnt信号通路的传导,使卵圆细胞向着成熟肝细胞的趋势分化.     

苦参碱在动脉粥样硬化相关疾病中的研究进展

苦参碱是从我国传统中草药苦参的根中提取出来的一种喹嗪类生物碱。动脉粥样硬化是以血管壁纤维增生、慢性炎症、脂质堆积和免疫紊乱为特征的一种病理性疾病。近年来,苦参碱在治疗动脉粥样硬化及其相关疾病方面受到广泛关注。研究表明苦参碱可以通过减少血脂、减缓肥胖、抑制炎症和保护内皮细胞等多种途径在动脉粥样硬化相关疾病中发挥重要作用。本文通过文献梳理,对苦参碱治疗动脉粥样硬化及相关疾病的作用机制进行阐述,为其今后苦参碱在临床治疗中的进一步应用奠定基础。     

苦参碱对人肝癌SMMC-7721细胞体外生长及细胞黏附分子表达的影响

采用CCK-8法检测苦参碱对人肝癌SMMC-7721细胞体外杀伤作用AnnexinV／PI双染色法检测苦参碱对体外培养的SMMC-7721细胞的体外诱导凋亡作用;流式细胞仪检测细胞膜表面E-Cadherin、CD44、CD14、V6租CD54的表达。结果 苦参碱在体外能明显抑制SMMC-7721细胞的生长和增殖,并可诱导细胞凋亡,具有明显的剂量和时间相关性。苦参碱作用48h后,SMMC-7721细胞膜表面的E-Cadherin表达增高,CD44、CD44、V6和CD54表达减少。提示苦参碱能够抑制人肝癌SMMC-7721细胞的体外增殖,诱导细胞凋亡,同时能增加E—Cadherin的表达,减少其CD44、CD44、V6和CD54的表达。阻止其对邻近正常组织的浸润及远处转移,从而发挥抗癌作用。     

苦参碱及其衍生物抗肝纤维化效应

目的探讨苦参碱及其衍生物抗肝纤维化效应及其抑制慢性炎症状况下单核细胞肝脏浸润作用。方法 24只C57BL/6小鼠随机分成正常对照组、造模组、苦参碱组以及衍生物组,每组6只。造模组、苦参碱组以及衍生物组进行肝纤维化造模。同时,苦参碱组予苦参碱30 mg/kg灌胃,衍生物组予衍生物30 mg/kg灌胃,造模组和正常对照组PBS液0.5 ml灌胃,1次/d,每周连续5 d。6 w末检测肝脏组织羟脯氨酸水平、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1 m RNA水平,单核细胞数目。结果造模组羟脯氨酸水平、MCP-1 m RNA表达、单核细胞计数及百分比显著高于正常对照组,苦参碱组和衍生物组显著低于造模组,而衍生物组显著低于苦参碱组(P0.01或0.05)。结论苦参碱及其衍生物衍生物能够抑制肝脏纤维化,减少单核细胞肝脏浸润,降低MCP-1 m RNA的表达,并且其衍生物的作用较苦参碱更明显。     

苦参碱治疗非酒精性脂肪性肝炎大鼠的效果观察

目的研究苦参碱的抗氧化作用,并观察其治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的疗效。方法 30只大鼠随机分为3组:对照组、NASH组和苦参碱组,每组10只。采用高脂饮食诱导建立NASH大鼠模型,并给予苦参碱36 mg·kg-1·d-1灌胃治疗。观察所有大鼠体质量、肝重变化,并采用HE染色观察各组大鼠肝组织病理学改变,测定血清ALT、AST水平及肝组织还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活性。多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果与对照组比较,NASH组、苦参碱组的大鼠体质量均明显增加(P值均0.001),肝重均明显减轻(P值均0.001)。苦参碱组大鼠肝组织病理学改变较NASH组亦明显减轻。苦参碱组大鼠ALT、AST水平与NASH组比较均有所降低,差异均有统计学意义[(52.0±3.0)U/L vs(41.8±3.7)U/L;(233.6±9.4)U/L vs(170.1±1.8)U/L,P值均0.001)]。苦参碱组与NASH组比较,大鼠肝组织SOD、GSH水平明显升高[(17.7±2.0)μg/mg vs(27.0±3.6)μg/mg;(16.5±1.6)U/mg vs(28.5±2.1)U/mg],MDA水平明显降低[(22.9±1.9)nmol/mg vs(17.8±1.8)nmol/mg],差异均有统计学意义(P值均0.001)。结论苦参碱在治疗NASH大鼠中具有抗氧化的作用,对NASH大鼠的治疗作用显著。