应用阳离子脂质体及裸HSV-TK基因瘤体内直接注射比较研究

目的　比较研究阳离子脂质体及裸HSV TK基因瘤体内直接注射治疗肝癌的效果 ,探讨较好的基因转移方法。方法　用阳离子脂质体Lipofectin tk基因复合物及裸pLXT于小鼠瘤体内直接注射 ,观察肿瘤的生长情况。结果　瘤体内基因转染后脂质体介导的pLXT、ACV治疗组及裸pLXT注射、ACV治疗组平均瘤体积均显著小于其它六组对照组 (P <0 0 0 1,P <0 0 5 ) ,前两者比较亦有显著差异 (P <0 0 2 )。结论　阳离子脂质体介导的HSV tk基因转移的方法简便、安全、有效。裸tk基因瘤体内直接注射效果亦很明显。     

重组内皮抑素联合吉西他滨对小鼠肺癌移植瘤生长的抑制作用

目的探讨重组内皮抑素（ES）与吉西他滨（GEM）联用对小鼠肺癌移植瘤生长的抑制作用。方法建立小鼠肺癌模型,将其随机分为GEM组、ES组、ES＋GEM组及生理盐水（NS）组,比较四组肿瘤体积、生存期;用原位末端标记染色法检测其肿瘤细胞凋亡情况,CD31免疫组化染色法检测肿瘤组织内微血管密度（MVD）,ELISA法检测血清血管内皮生长因子（VEGF）。结果与ES组、GEM组比较,ES＋GEM组肿瘤体积缩小、生存期延长、肿瘤细胞凋亡率增加、MVD减少（P均〈0.05）;与对照组比较,ES＋GEM组血清VEGF明显下降（P〈0.05）。结论 ES＋GEM治疗小鼠肺癌移植瘤的抑瘤效应明显优于GEM组、ES组,其机理可能是两药对抗肿瘤血管生成有协同作用。     

抑癌基因p53及p16单独或共转染治疗非小细胞肺癌的动 …

目的 观察抑癌基因ｐ５３和ｐ１６单独或或共转染在动物整体中治疗非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的效果。方法 采用培养细胞移植法,将２ ＮＳＣＬＣ细胞系Ａ５６９接种于裸小鼠背部皮下,建立裸小鼠皮下肺癌移植瘤模型。将２５只荷瘤裸小鼠随机分成空白对照组、十八酰基胺阳离子（ＳＡ０对照组、ｐ５３基因组、ｐ１６基因组、ｐ５３＋ｐ１６基因组,共５组,每组５只。采用瘤体内直接注射的方法,用ＳＡ脂质体介异,将ｐ５３和（或     

肺痿合剂对小鼠Lewis肺癌抑瘤作用的实验研究

小鼠接种Lewis肺癌细胞后随机分为对照组、肺痿合剂低剂量组、中剂量组、高剂量组、环磷酰胺(CTX)组.各组灌胃14 d后处死,观察瘤重、肺转移数目,计算抑瘤率,检测肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达.发现各实验组瘤重较对照组明显减轻,肺痿合剂各组和CTX组对Lewis肺癌移植瘤均有一定的抑制作用,且能明显降低肺癌组织中VEGF表达.认为肺痿合剂可抑制小鼠Lewis肺癌生长和转移,其可能是通过抑制VEGF表达来实现的.     

内皮抑素基因对肝癌治疗作用的实验研究

目的探讨鼠源性内皮抑素基因治疗对大鼠肝癌模型的抑制效应.方法制作大鼠肿瘤株Walker-256细胞肝癌的动物模型,通过肝动脉给予内皮抑素基因与脂质体混和物后72 h,采用RT-PCR技术观察各组肝癌中的内皮抑素mRNA表达,并测量不同时间肿瘤生长速率及观察各组大鼠的生存期.结果基因治疗组可见到内皮抑素mRNA表达,而对照组则未见表达;基因治疗组肿瘤的生长速率明显小于对照组（P＜0.001）;治疗组大鼠的生存期长于对照组（P＜0.05）.结论通过肝动脉介入方法给予内皮抑素基因后,在Walker-256细胞内有明显表达的内皮抑素mRNA;内皮抑素基因治疗有明显的抑制肝癌作用,可延长大鼠的生存时间.     

腺病毒介导的IL-12基因对Lewis肺癌的抑制作用

目的 研究重组鼠白细胞介素12(AdCMVIL-12)对Lewis肺癌的抗肿瘤作用.方法 将Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠,成瘤后将荷瘤小鼠随机分4组,观察小鼠的肿瘤体积及病理改变,同时检测各组小鼠血清中的IL-12含量.结果 应用腺病毒载体介导的IL-12基因治疗小鼠Lewis肺癌取得了较好的疗效,全量AdCMVIL-12(7×10~8 pfu)瘤内注射后肿瘤生长缓慢,瘤体明显小于对照组,生存期明显延长,未见转移.结论 AdCMVIL-12基因治疗Lewis肺癌的疗效确切,并且存在剂量依赖性.     

联合应用肿瘤血管抑制基因对肝癌的协同治疗作用

目的 观察联合应用内皮抑素基因和血管抑素基因重组质粒对大鼠肝癌的抑制作用.方法 将肝癌模型大鼠随机分为内皮抑素基因组、血管抑素基因组、双基因组和对照组.治疗组给予200 μl质粒和脂质体复合物(含20 μg质粒),对照组给予生理盐水200 μl.观测肿瘤大小、微血管密度、血管内皮生长因子、肿瘤凋亡(AI)的变化,采用RT-PCR方法测定血管抑制基因在各组中的表达.结果 在含有内皮抑素基因的组别中均见到内皮抑素mRNA的特异性条带;在含有血管抑素基因组内见到血管抑素mRNA的特异性条带.除了第1次治疗后,其他时间基因治疗组各治疗指标与对照组相比均有统计学差异(P＜0.001),双基因联合治疗组与单一基因治疗组相比也有统计学意义(P＜0.05).对照组VEGF表达率为100%,单基因治疗组为50%,双基因联合治疗组为25%.结论 内皮抑素基因联合血管抑素基因可能达到更明显的抑瘤作用.     

转染内皮抑素基因联合放射治疗对肝癌移植瘤生长的影响

实体瘤的生长和转移依赖于血管生成。用抗血管生成剂靶向肿瘤血管生成是新的肿瘤治疗方法之一。观察转染内皮抑素基因联合放射治疗对人肝癌BEL7402细胞株裸鼠移植瘤生长的影响，以探索内皮抑素联合放射治疗对肿瘤的治疗作用。     

内皮抑素基因转移联合电离辐射对肺腺癌移植瘤生长的影响

目的探讨内皮抑素(endostatin)基因转移联合电离辐射对肺腺癌移植瘤生长的抑制作用. 方法以逆转录病毒为载体,转导内皮抑素基因至肺腺癌A549细胞,获得含内皮抑素基因的A549/Endo细胞.20只裸鼠平均分为4组(A549 、A549/Endo、A549+辐照、A549/Endo+辐照组),A549、A549+辐照组裸鼠皮下种植A549细胞,A549/Endo、A549/Endo+辐照组裸鼠皮下种植A549/Endo细胞,建立移植瘤模型.A549、A549/Endo组裸鼠用于观察成瘤时间,并计算抑瘤率;另2组裸鼠于种植瘤细胞后第28天,用直线加速器电离辐照移植瘤体,剂量为20 Gy,3 d后重复照射20 Gy;照射后继续饲养荷瘤鼠,定期观察移植瘤体积变化.于瘤细胞移植后第42天(照射后第14天)处死荷瘤鼠,用免疫组化法测定4组裸鼠瘤体的微血管密度(MVD).结果聚合酶链测定(PCR)法证实,A549/Endo细胞基因组中整合有内皮抑素基因.裸鼠成瘤时间A549组(7.8±1.6)d、A549/Endo组(12.2±1.7 )d ,两组比较差异有显著性(P<0.05);瘤细胞移植后42 d,移植瘤体积A549组(927.8±269.2)mm3 、A549/Endo组(217.5±81.5)mm3,两组比较差异有显著性(P<0.01),抑瘤率为76.5% .电离辐照后第14天,移植瘤体积A549+辐照组为(157.7±49.0)mm3,A549/Endo+辐照组为(4.6±2.9)mm3, 两组比较差异有显著性(P<0.01).裸鼠移植瘤组织MVDA549组35.78±5.67 、A549/Endo组21.62±3.55、 A549+辐照组31.52±4.43、 A549/Endo+辐照组11.32±2.78,与A549组比较,A549/Endo组MVD明显减少(P<0.01),联合电离辐照后MVD进一步降低(P<0.01).结论逆转录病毒能有效介导内皮抑素基因转移;内皮抑素基因转移能通过抑制血管生成而抑制肺腺癌移植瘤的生长;内皮抑素基因转移联合电离辐射对肺腺癌血管形成和瘤体生长具有协同抑制作用.     

复方水蛭素对小鼠移植瘤组织中p53、Ki-67及VEGF表达的影响

建立小鼠移植瘤模型（均接种S180瘤细胞）。取40只实验鼠随机分为四组,各10只。模型对照组给予生理盐水,阳性对照组给予环磷酰胺,实验组分别给予1.3、2.6g／kg的复方水蛭素（连续用药14d）。比较各组肿瘤生长情况,并计算抑瘤率,同时取肿瘤组织用免疫组化法检测p53、Ki-67及血管内皮生长因子（VEGF）的表达。实验组中大小剂量组抑瘤率分别为57.89％和53.68％,其肿瘤组织中p53、Ki-67阳性细胞百分数均低于肿瘤模型对照组（P〈0.05）,同时其VEGF表达降低（P〈0.05）。认为复方水蛭素对小鼠移植瘤具有显著的抑制作用,使肿瘤组织p53、Ki-67以及VEGF表达降低。     

Blood flow does not correlate with the size of metastasis in our new intravital observation model of Lewis lung cancer

We previously reported a novel in situ observation model for microcirculation of lung metastasis from subcutaneously implanted Lewis lung cancer into mouse. Using this model, we studied the correlation of blood flow and the size of lung metastasis. It was revealed that metastatic growth and its angiogenesis are suppressed by circulating angiogenesis inhibitors, such as angiostatin or endostatin, released from primary tumor. When we removed the primary tumor, the metastasized lung cancer significantly grew faster and larger. But the blood flow per area did not increase either inside or outside of the metastatic tumor. This suggests that the growth of metastatic tumor is directly regulated not by blood flow increase but by the other effects of the circulating factors.     

p16、p53、p21基因对肺癌细胞增殖的影响

目的 观察肿瘤抑制基因ｐ１６,ｐ５３及细胞周期信赖激酶抑制物ｐ２１基因单独或联合应用时对肺癌细胞增殖的影响。方法 应用十八酰基胺阳离子脂质体介导ｐ１６,ｐ５３,ｐ２１基因单独或共转染到非小细胞肺癌细胞系Ａ５４９和小细胞肺癌细胞系ＳＨ７７,观察转染后１,３,５日该细胞增殖的活力。采用四甲基偶氮唑 盐微量酶反应比色法（ＭＴＴ法）测定吸光度（Ａ）,以检测细胞增殖活力,结果 Ａ５４９细胞系：Ａ均值分别为：     

海藻硫酸多糖对肺癌增殖的抑制作用及其机制

目的　探讨海藻硫酸多糖 (SPA)对肺癌增殖的抑制作用及其可能的机制。方法(1)建立Lewis肺癌小鼠模型 ,以抽签法随机分为对照组 ,SPA 2 0、4 0、80mg/kg组及替加氟 (FT 2 0 7)组 ,每组 10只 ,从接种肿瘤次日开始分别灌服生理盐水 ,SPA 2 0、4 0、80mg/kg及FT 2 0 715 0mg/kg ,连续 10d。末次给药后 2 4h处死小鼠 ,剥取肿瘤 ,称瘤重 ,计算抑瘤率。同时应用体外细胞培养模型 ,采用甲基噻唑基四唑 (MTT)法检测SPA在体外对肺癌细胞增殖的影响。 (2 )取雄性新西兰兔 6只 ,按抽签法随机分为对照组、SPA组及环磷酰胺 (CTX)组 ,分别口服生理盐水、SPA 5 0 0mg/kg、CTX 10 0mg/kg,连续10d。最后 1次灌药后 2h ,采集含药血清 ,通过流式细胞仪观察SPA及其含药血清对A5 4 9肺癌细胞增殖、凋亡、细胞周期以及凋亡相关基因p5 3、bcl 2的影响。结果　 (1) 2 0、4 0、80mg/kgSPA连续灌服给药 10d ,对小鼠Lewis肺癌的生长具有明显抑制作用 ,抑制率分别为 35 .2 7%、4 8.2 9%和 6 5 .4 1%。体外SPA在 2 5～ 10 0 μg/ml范围内对A5 4 9肺癌细胞生长无明显抑制作用 (P >0 .0 5 )。 (2 )含SPA兔血清在体外可明显抑制肺癌细胞增殖、诱导癌细胞凋亡 ,出现明显的细胞周期阻滞。A5 4 9细胞株经含SPA兔血清作用后 ,p5 3阳性蛋白标记     

Intravenous delivery of an endostatin gene complexed in cationic lipid inhibits systemic angiogenesis and tumor growth in murine models

Inhibition of the neovascularization of tumors has proven efficacious in reducing tumor growth and metastases. Attaining antiangiogenesis through cationic lipid-based systemic gene therapy presents an attractive approach to the treatment of disseminated and primary cancers. Intravenous administration of an endostatin plasmid, complexed with a cationic lipid system, produced significant levels of endostatin in the lung and the circulation. The expressed endostatin blocked systemic angiogenesis and inhibited tumor growth in murine models. Cytokine induction by cationic lipid/DNA complex increased the anti-tumor activities of endostatin. These results demonstrate the possibility of using cationic lipid delivery of an antiangiogenic gene for cancer treatment. This revised version was published online in June 2006 with corrections to the Cover Date.     

Anticancer treatment of endostatin gene therapy by targeting tumor neovasculature in C57/BL mice

Antiangiogenesis strategy has been widely recognized as a viable approach to fight cancer. Considering the high cost and inconvenience of protein therapy of endostatin (ES), which is a potent antiangiogenic protein, we attempted to explore the inhibitory effect of ES gene therapy on tumor growth and metastasis. In this experiment, Lewis lung carcinoma (LLC)-bearing C57/BL mice were used to evaluate the antitumor effect of ES gene therapy and its impairment of tumor neovasculature. The data showed that the ectopic ES in circulation expressed by intramuscular administration of formulated ES-encoding plasmid DNA significantly suppressed primary tumor growth and lung metastasis in LLC-bearing C57/BL mice. Hence, our results demonstrated the inhibitory effect of ES gene therapy on angiogenesis-dependent tumor growth and metastasis.     

~(125)Ⅰ粒子植入联合内皮抑素对A549肺腺癌裸鼠移植瘤生长抑制作用

目的研究放射性125I粒子植入联合重组人血管内皮抑素(Endostatin,ES)对A549肺腺癌移植瘤生长的抑制作用。方法建立移植瘤模型,24只裸鼠随机分成治疗组:单纯粒子内照射组,单纯内皮抑素组,内照射+内皮抑素联合组和空白对照组。治疗结束,免疫组化检测微血管内皮CD31及血管内皮生长因子(VEGF)的表达,蛋白免疫印迹方法测定VEGF的表达,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。结果治疗15天后,内皮抑素组、125Ⅰ粒子组及联合治疗组瘤体积抑制率依次为69.65%、92.64%、116.4%;联合治疗组MVD较粒子组下降明显(P0.05);联合治疗组的细胞凋亡明显增多;内皮抑素对VEGF表达的影响无显著差异(P0.05)。结论 125Ⅰ粒子植入近距离放疗联合内皮抑素能较早抑制A549移植瘤的生长,通过减少放射治疗后肿瘤血管的再生及增加细胞的凋亡起到抑瘤作用。     

UFT inhibits lung metastases in spontaneous metastasis model of lung cancer

BACKGROUND: UFT, an oral 5-fluorouracil derivative, is the only drug that is effective as a postoperative adjuvant therapy for non-small cell lung cancer (NSCLC) [ ], but the mechanism of the action remains unclear. We examined whether UFT and/or its metabolite, gamma-hydroxybutyric acid (GHB) inhibits lung metastases in a mouse model. METHODS: Lewis lung carcinoma cells were implanted into the foot pads of C57 BL/6 mice, and mice were treated with UFT or GHB. RESULTS: Both the mean number of metastatic nodules and the mean lung weight for UFT-treated mice (11.4 and 192.1 mg, respectively) were significantly lower than those for saline-treated mice (41.5 and 415.0 mg, respectively) (p < 0.001 for both). UFT did not inhibit tumor growth at the primary sites (foot pads). No significant body weight loss was documented in UFT-treated mice. GHB did not inhibit development of lung metastases even when a higher dose was used. CONCLUSIONS: UFT inhibits development of lung metastases without any toxicity in mouse model, which may explain the efficacy of postoperative administration of UFT for resected NSCLC.     

维甲酸对胃癌生长和肝转移抑制作用的实验研究

[目的]研究维甲酸（RA）对裸鼠原位荷人胃癌细胞BGC-803移植瘤和肝转移的抑制作用。[方法]建立人胃癌裸鼠原位种植肝转移模型,分为2组,对照组和RA组,种植后第5天开始,分别自腹腔注射0．85％氯化钠、RA（1mg／kg）,每日1次,第8周处死动物,检测抑瘤率、胃癌细胞凋亡指数（AD,观察肿瘤细胞肝转移以及金属基质蛋白酶2（MMP-2）、增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况。[结果]RA组的抑瘤率为37．8％。与对照组相比,RA组胃癌生长、肝转移受到明显抑制（P〈0．05）,AI明显增高（P〈0．05）,MMP-2、PCNA的表达降低。[结论]RA对胃癌生长和肝转移的抑制可能通过诱导胃癌细胞凋亡、抑制细胞增殖以及肿瘤细胞外基质降解实现的。