猪卵透明带单克隆抗体体外对人精卵结合的影响

在于观察猪卵透明带单克隆抗对人精卵结合的影响，采用体外精卵结合试验方法，结果提示当１７Ｄ３单抗按１：２，１：１０，１：２０，１：３０稀释时，抑制率分别为９９．３％，９４％，７５．７％和４６．７％，其抑制人精卵结合的生物效应呈剂量相关，结论为猪卵透明带单克隆抗体对人精卵结合有抑制作用。     

猪卵透明带单克隆抗体在体外与人,猪卵巢组织的反应

Reaction between monoclonal antibodies to porcine zona pellucida (LPD8, LPC4) and human and porcine ovaries was studied by ABC immunohistochemistry technique in vitro. When slices of human and porcine ovaries were stained with ABC, not only the zona pellucida but also the ovum cytoplasm was stained. Other regions of the ovary, such as granulosa cell, theca cell and connective tissue, could not be stained. These results suggest that the monoclonal antibodies to porcine zona pellucida probably have no direct effect on the endocrine function of ovary, but they may combine with ovum cytoplasm and inhibit follicular growth, so that the number of follicles reduces and endocrine function of the ovary decreases. We do not think that the prospects of continual study on LPD8, LPC4 are good.     

猪卵透明带单克隆抗体在体外与人、猪卵巢组织的反应

用ABC免疫组织化学染色法,观察猪卵透明带单克隆抗体(LPD_8、LPC_4),在体外与人、猪卵巢组织的反应。LPD_8和LPC_4使人、猪卵透明带及卵细胞质着色,但不使卵巢的其他结构,如颗粒细胞、卵泡膜细胞及结缔组织着色。这些结果提示:猪卵透明带单克隆抗体对卵巢内分泌功能可能无直接影响,但可通过与卵细胞质结合,抑制卵泡的发育,继而导致卵泡数目减少和内分泌功能降低。作者认为,用本实验提取的两株猪卵透明带单克隆抗体,进行免疫避孕研究前途不大。     

猪卵透明带抗体对卵巢功能的影响

用sephadex G-100柱层析分离提纯的猪卵透明带(ZP)抗原,及卵巢组织中的其他蛋白抗原,分别免疫兔和猪。观察到不论是异种还是同种兔疫时,只有在猪被免疫时,其卵巢功能受到不同程度的抑制。提示ZP免疫动物的抗生育作用,与卵巢功能受抑制有关。     

人精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验与人精卵体外受精的比较

目的　研究在人工助孕技术中能否以人精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验 ( SPA)结果作为确定采用人精卵体外受精 ( IVF)或经卵细胞胞浆内单精子注射 ( ICSI)的指标。方法　对 2 2例准备行 IVF的夫妇男方精子 SPA受精率与其 IVF受精率结果进行比较。结果　 SPA和 IVF受精率分别为 38.6 %± 2 3.5 %与 5 3.5 %±2 8.4% ,SPA受精率较 IVF受精率低 ,但随着 SPA受精率的增加 ,IVF受精率也呈明显增加的趋势。在 SPA受精率大于 10 %的病例中 ,约 76 %的病例 IVF受精率大于 5 0 %。经统计学分析两者有显著相关性 ( rs=0 .70 46 ,| U | =3.2 2 84>u0 .0 1 /2 )。结论　 SPA受精率可作为助孕技术中确定 IVF或 ICSI助孕方案的参考指标     

人精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验与人精卵体外受精的比较

OBJECTIVE: The research question was whether the result of human sperm zona-free hamsterovum penetration assay (SPA) could serve as an indicator for in vitro fertilization (IVF) or intracytoplasmic sperm injection (ICSI). METHODS: The semen samples of 22 male partners in couples with infertile marriage were assessed for their fertilizing capacity by SPA. The fertilization rate of SPA was compared with that of IVF. RESULTS: The fertilization rates of SPA and IVF were 38.6% +/- 23.5% and 53.5% +/- 28.4% respectively, and a significant correlation between SPA and IVF was observed (rs = 0.7045). CONCLUSION: The result of SPA may be used as a reference indicator for assisting fertilization, IVF or ICSI.     

猪卵透明带抗独特型抗体对鼠免疫抗生育作用的研究

目的评价猪卵透明带抗独特型抗体的免疫对生育功能的作用。方法利用一株鼠抗猪卵透明带单克隆抗体（１７Ｄ３ｍＡｂ）,通过异种动物免疫及亲和层析纯化制备猪卵透明带抗独特型抗体（Ａｂ２）。结果用Ａｂ２免疫小鼠,妊娠率有下降趋势,平均胚胎数明显低于对照组（正常兔ＩｇＧ免疫的小鼠）（Ｐ＜００５）。卵巢组织形态学显示,Ａｂ２只影响晚期生长卵泡。结论虽然Ａｂ２组对卵巢的损伤程度较热溶解透明带组明显减轻,但抗生育效果不完全,可能与Ａｂ２中内影像结构仅占Ａｂ２分子的成份较低有关。因此,未来通过基因工程筛选Ａｂ２内影像表位并连续表达,可能是克服这一障碍的有效手段。     

蛋白水解酶抑制剂对人精子穿透去透明带蛙卵的影响

目的研究蛋白水解酶抑制剂对人精子穿透去透明带蛙卵的影响。方法用人精子穿透经不同浓度的蛋白水解酶抑制剂处理过的去透明带蛙卵,观察对穿卵率的影响。结果(1)在人精子获能期,1.0×10-3mol.L-1天花粉抑制剂可使人精子的穿卵率明显下降(P<0.01),而同样浓度的慈姑抑制剂,作用不明显。(2)去透明带蛙卵用抑制剂预处理0.5 h,被获能精子的穿卵率和未用抑制剂处理的卵子相似。(3)在获能后的人精子和去透明带蛙卵孵育期,两种抑制剂的浓度为0.5×10-3mol.L-1或1.0×10-3mol.L-1时精子的穿卵率明显下降。(4)在人精子获能期及人精子/去透明带蛙卵孵育期,两种抑制剂的浓度为1.0×10-3mol.L-1时,均使精子的穿卵率下降(P<0.01),而抑制剂浓度为1.0×10-4mol.L-1时,作用不明显。结论蛋白水解酶抑制剂对人精子穿透去透明带蛙卵的穿透能力有显著影响,但不影响精子的活力,提示精子穿透卵子的酶体系受蛋白酶抑制剂的影响。     

猪卵透明带的分离和提纯

用机械方法绞碎猪卵巢,经不同孔径尼龙筛过滤及热溶解等方法取得的去卵母细胞透明带,用双向-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称2D-PAGE)后,不论用考马斯蓝染色或银染色,均得两条分子量分别为74000～102000和98000～118000的条带,称为ZP_1和ZP_2。 将去卵母细胞的透明带用葡聚糖凝胶(Sephadex)G-100柱层析分离,得到A和B两个吸收峰,用2D-PAGE分析,证实A峰内仍含有ZP_1及ZP_2抗原,而B峰内为一些其他蛋白的染色点,提示Sephadex柱层析可进一步纯化透明带抗原。     

去整合素抑制体外培养的人眼晶状体上皮细胞生长的研究

目的:研究去整合素Kistrin对体外培养的人眼晶状体上皮细胞(HLECs)生长的抑制作用.方法:MTT法检测不同浓度去整合素Kistrin(5、10、20、40、80 μg/L)对HLECs的黏附抑制作用;划线法检测80μg/L的去整合素Kistrin对HLECs作用不同时间后(24、48、72 h)对其移行的抑制作用;MTT法检测不同浓度去整合素Kistrin(20、40、80 μg/L)对HLECs增殖的抑制作用.结果:不同浓度的去整合素Kistrin(20、40、80 μg/L)对HLECs的黏附和增殖具有抑制作用.80 μg/L的去整合素Kistrin可显著抑制HLECs的移行.结论:去整合素Kistrin对体外培养的HLECs的生长具有抑制作用.     

抗人IgG单克隆抗体制备和鉴定

以人ＩｇＧ为抗原，采用杂交瘤技术获得６株不同性质的抗人ＩｇＧ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）（ＡＩ２、ＡＩ３、ＡＩ４、ＡＩ５、ＡＩ６、和ＡＩ）。ＡＩ２ＭｃＡｂ具有抗ＩｇＧ１亚类的特异性，可识别ＩｇＧγ链和Ｆ（ａｂ＇）２片段，作用位点可能在人ＩｇＧ１铰链区。ＡＩ３ＡＩ、ＭｃＡｂ分别为ＩｇＧ３、ＩｇＧ４亚类限制性ＭｃＡｂ，可能作用于ＩｇＧＣＨ１区。ＡＩ４ＭｃＡｂ可识别χ和λ型ＩｇＧ四个亚类以及Ｆ（ａｂ＇）２片段，不识别游离χ、λ链。ＡＩ５ＭｃＡｂ特异地抗ＩｇＧ１结合型χ，作用于ＩｇＧ独特型位点。ＡＩ６ＭｃＡｂ只抗λ型ＩｇＧ，可能作用于ＩｇＧＣＬ区。６种抗人ＩｇＧＭｃＡｂ除了ＡＩ５外，均能用于人血清中ＩｇＧ的检测。     

单克隆抗体2E6对乙酰胆碱酯酶活性的影响

以超速离心制备的电鳐乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）及蛋白Ａ亲和层析纯化的单克隆抗体２Ｅ６为材料，以酶抑制法观察了２Ｅ６对ＡＣｈＥ活性的影响，结果显示，随着２Ｅ６量的增大，对ＡＣｈＥ的抑制作用逐渐增强，表明２Ｅ６是ＡＣｈＥ的抑制性单克隆抗体。     

组合单克隆抗体提高人胃癌细胞系反应性的研究

目的：将胃癌单克隆抗体（ ＭｃＡｂ） 组合提高ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性，为肿瘤定位诊断及导向治疗提供有效的ＭｃＡｂ 组合。方法：采用ＥＬＩＳＡ、ＦＣＭ 观察了单一胃癌ＭｃＡｂ 及组合ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性。结果：经ＥＬＩＳＡ、ＦＣＭ 分析单一的ＭｃＡｂ３Ｇ９ 、ＢＢ４．３ 与胃癌细胞结合的膜荧光阳性率分别为７４－２ ％ 和５４－９ ％ 。平均膜荧光强度分别为５３－６ 和６５－８。两者组合后，在相同抗体浓度下，膜荧光阳性率为９７－４ ％ （ Ｐ＜０－０１）；平均膜荧光强度为１２５－５（ Ｐ＜ ０－０１） 。结论：合理采用组合的ＭｃＡｂ 可提高ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性，降低抗原表达的异质性，从而提高ＭｃＡｂ 的载体效应。     

分泌抗人精子单克隆抗体杂交瘤细胞的建立

用人精子免疫BALB/C小鼠,用杂交瘤技术制备出9株抗人精子单克隆抗体。经酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光实验证明,9株抗人精子单克隆抗体均能与人精子产生特异性免疫反应。连续传代及液氮中保存的杂交瘤细胞分泌抗人精子单克隆抗体的滴度持续稳定。     

复方参七汤对人胃癌细胞株体外抑制作用的观察

复方参七汤对人胃腺癌细胞株ＢＧ Ｃ－８２３的细胞分裂和集落形成有明显的抑制作用。用集落形成法测定其半数抑制浓度为０．００７ｇ生药／ｍｌ。在浓度较高时也有直接杀伤作用，用台盼蓝排斥试验测定其半数杀伤浓度为０．０４８ｇ生药／ｍｌ。     

抗人精子单克隆抗体对生殖的影响

本文报告9株抗人精子单克隆抗体在体外对生殖的影响。TAT、SIT、SCMC和精子—地鼠去透明带穿卵实验表明:3株IgM类抗人精子单克隆抗体主要引起精子的头—头凝集,对精子有较强的补体依赖性细胞毒作用;6株IgG类抗人精子单克隆抗体主要引起精子的尾—尾凝集,并能阻止精子在宫颈粘液中的前向性运动;4/9株抗人精子单克隆抗体对精子穿卵有明显抑制作用,且两株联合应用有协同效应,提示有效而可靠的精子避孕疫苗应具有多个抗原决定簇。     

人肝癌培养细胞粗提膜相关抗原的单克隆抗体

用人肝癌培养细胞粗提膜免疫Balb/c小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤(SP_2/o)细胞在PEG作用下融合。以LLISA筛选抗体。通过免疫荧光和免疫酶标进行组织定位。初步获得一株抗人肝癌细胞膜相关抗原的单克隆抗体杂交瘤—命名FP—5。用此抗体在涂片上对人肝癌细胞膜呈阳性反应,在3例手术切除的人肝癌活检冰冻切片中,肝癌组织细胞亦呈阳性反应。FP—5细胞株染色体为83—108条,含1—2条中着丝点标记染色体。经6次克隆化体外培养6个多月,仍持续分泌特异性抗体,此抗体鉴定属鼠的IgM型。