绞股蓝总皂甙减轻小鼠血吸虫性肝纤维化的实验观察

本实验采用绞股蓝总皂甙（ＧＰｓ）治疗小鼠血吸虫病，观察其对血吸虫性肝纤维化的影响。结果表明，ＧＰｓ治疗组肝虫卵肉芽肿反应增长比和肝纤维化程度均明显小于感染对照组（Ｐ〈０．０５），提示ＧＰｓ具有减轻血吸虫性肝纤维化的作用，也提示自由基在血吸虫虫卵肉芽肿形成和发展中起了重要作用。     

小鼠日本血吸虫模型肝组织坏死形态学观察

建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型和自然感染模型，发现早期肝脏出现，片状或灶性凝固性坏死，后期发生纤维组织增生。提示肝组织凝固性坏死诱发肝纤维化，与虫卵肉芽肿引起的纤维化协同作用可能是血吸虫性肝硬化的又一发生机理。     

α干扰素治疗小鼠日本血吸虫病肝纤维化实验研究

目的观察IFN-α是否具有抗日本血吸虫病肝纤维化的作用及疗效.方法以日本血吸虫尾蚴感染IcR小鼠造成肝纤维化模型.10周后顿服吡喹酮杀虫治疗,继以IFN-α皮下注射治疗,并与模型对照组和0.9%氯化钠注射液治疗组比较.肝脏组织切片作苏木素-伊红、苦味酸-酸性品红染色,观察肝脏虫卵肉芽肿平均大小、胶原面积百分比及肝纤维化程度（SSS评分）.结果IFN-α治疗组肝脏虫卵肉芽肿平均大小缩小（P〈0.05）、胶原面积百分比降低（P〈0.05）、SSS评分较模型对照组下降〉2分（P〈0.05）.结论IFN-α治疗小鼠日本血吸虫病肝纤维化有效.     

晚期血吸虫病患者肝内T细胞亚群的免疫组织化学检测

采用免疫组织化学技术检测了22例晚期血吸虫病（下称晚血）患者肝内T细胞亚群。发现晚血患者肝内T细胞可集中分布于虫卵肉芽肿外层或者散在分布于非肉芽肿部位的虫卵附近，广泛纤维化的区域无T细胞浸润。肉芽肿和非肉芽肿部位的T细胞均以CD8 T细胞（抑制性／细胞毒T细胞）为主。晚血患者肝脏病变以汇管区纤维化为主，浸润细胞不多，仅27．27％（6／22）患者肝内存在已被免疫调节了的慢性虫卵肉芽肿。提示晚血患者肝内细胞免疫反应很弱，肝内的CD 8T细胞可能主要是抑制性T细胞（Ts）。     

单克隆抗独特型抗体NP30对血吸虫虫卵肉芽肿细胞凋亡的影响

目的：探索日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30对血吸虫虫卵肉芽肿细胞凋亡的影响。方法：BALB／c小鼠随机两组，实验组腹腔注射 NP30主动免疫3次，对照组腹腔注射生理盐水，分别在尾蚴攻击感染后第39，49，64，108，112天处死，应用透射电镜观察肝虫卵肉芽肿细胞凋亡的形态改变，流式细胞术（FCM）和末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测虫卵肉芽肿凋亡细胞。结果：透射电镜观察虫卵肉芽肿细胞有凋亡小体形成；经FCM和TUNEL检测实验组虫卵肉芽肿细胞凋亡明显多于对照组。结论：细胞凋亡在日本血吸虫虫卵肉芽肿的形成、细胞转化过程中起着重要作用。NP30抗病免疫作用的机制之一是促进虫卵肉芽肿细胞的凋亡。     

IL—12对日本血吸虫重组SjGST—Sj32免疫小鼠攻击感染后虫 …

目的 观察白细胞介素－１２（ＩＬ－１２）对重组日本血吸虫谷胱苷肽－Ｓ－转移酶－３２ｋＤ融合蛋白（ｒＳｊＧＳＴ－Ｓｊ３２）蛋白免疫小鼠肝脏虫卵肉芽肿大小的影响。方法 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠３６只随机分别ＩＬ－１２加ｒＳｊＧＳＴ－Ｓｊ３２组、ｒＳｊＧＳＴ－Ｓｊ３２组和磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）组，第３次免疫后４周，经腹部贴片感染１０条尾蚴，４５天后杀鼠取肝组织，常规染色，光镜下进行组织学观察及单个虫卵肉芽肿大小     

经脾脏注射血吸虫虫卵实验方法的探讨

报告应用经脾脏注射虫卵法建立Ｃ５７ＢＬ／６小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型，并与自然感染模型作比较。结果表明，脾脏注射组小鼠肝虫卵肉芽肿发生率为１００％，其肉芽肿的形态、细胞组成、转化发展过程均与自然感区染模型相似。本实验提示经脾脏注射虫卵是一种较好的、建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型的方法。     

晚期血吸虫病患者肝内T细胞亚群的免疫组织化学检测

采用免疫组织化学技术检测了２２例晚期血吸虫病（下称晚血）患者肝内Ｔ细胞亚群。发现晚血患者肝内Ｔ细胞可集中分布于虫卵肉牙中外层或者菜知分布于非肉芽肿部位的虫卵附近，广泛纤维化的区域无Ｔ细胞浸润。肉芽肿和非肉芽肿部位的Ｔ细胞均以ＣＤ８＾＋Ｔ细胞（抑制性／细胞毒Ｔ细胞）为主。晚血患者肝脏病变以汇管区纤维化主，浸润细胞不多，仅２７．２７％（６／２２）患者肝内存在已被免疫调节了的慢性虫卵肉芽肿。提示晚血患者     

血吸虫病免疫病理研究进展

血吸虫病主要病理变化是宿主肝组织内虫卵的沉积诱发虫卵肉芽肿及其后的纤维化病变.在动物模型的相关研究已显示Th1细胞主要参与血吸虫虫体抗原的免疫调节反应,而虫卵衍生抗原主要介导Th2细胞免疫反应.研究证明Th1细胞、Th2细胞、巨噬细胞、Treg细胞和IL-17分泌型淋巴细胞对调节虫卵肉芽肿反应和肝脏的纤维化过程起重要作用.     

脑益嗪对大鼠肝纤维化肝透明质酸、羟脯氨酸及N－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶活性的影响

用四氯化碳（ＣＣＬ４）造成大鼠肝纤维化，发现钙拮抗剂Ｃｉｎ能明显降低大、中剂量早期治疗组和大剂量晚期治疗组肝ＨＡ含量（Ｐ＜０．０１）；大剂量Ｃｉｎ使早期治疗组肝Ｈｙｐ含量降低（Ｐ＜０．０５），晚期治疗组肝总β－ＮＡＧ活性下降。实验提示，Ｃｉｎ在某些生化指标上反映出对肝纤维化有一定防治效果，尤其在肝纤维化的早期，应用Ｃｉｎ可望获得延缓或阻止肝纤维化发展的作用。     

日本血吸虫感染小鼠CD8+T细胞亚群的变化及其与肝脏免疫病理的相关性研究

目的:研究CD8+T细胞中Tc1(CD3+CD8+ IFN-γ+)?Tc2(CD3+CD8+IL-4+)和调节性CD8+T细胞(CD8+CD28-)亚群在日本血吸虫感染导致的小鼠肝脏免疫病理发生发展中可能的作用?方法:取正常小鼠及日本血吸虫感染8周的小鼠脾脏淋巴细胞,采用流式细胞术检测Tc1?Tc2和调节性CD8+T细胞亚群分别占T淋巴细胞的比例及绝对数量,并分析感染血吸虫不同时期的CD8+T细胞亚群与血吸虫感染小鼠肝脏肉芽肿和肝纤维化指标的关系?结果:与正常对照小鼠比较,日本血吸虫感染后小鼠脾脏的单个核细胞绝对数显著增加(P < 0.001);日本血吸虫感染小鼠脾细胞中T细胞(CD3+)和CD8+T细胞(CD3+CD8+)的比例及绝对数均显著增加(P均 < 0.05);此外,感染小鼠脾淋巴细胞中Tc1?Tc2?调节性CD8+T比例均显著增加(P均 < 0.001);与正常小鼠相比,感染小鼠Tc2/Tc1比率显著增加(P < 0.001)?此外,多元线性逐步回归分析显示Tc2和调节性CD8+T细胞是影响血吸虫感染所致肝脏免疫病理的主要影响因素?结论:CD8+T细胞及其Tc1?Tc2?调节性CD8+T细胞亚群在日本血吸虫感染宿主的肝脏肉芽肿和纤维化发生发展中可能发挥重要作用?其中,Tc2和调节性CD8+T细胞可能分别促进/抑制血吸虫感染所致的肝脏免疫病理?     

IL-12在血吸虫感染小鼠肝脏中的表达及其对肝纤维化的影响

目的探讨日本血吸虫感染小鼠肝脏中白细胞介素-12（IL-12）的表达及其对肝纤维化的影响。方法在小鼠感染血吸虫后的不同时期（6、8、10、12周），分别采用免疫组织化学法观察肝脏IL-12的变化，VG染色及多媒体病理图文定量分析系统检测注射基因重组小鼠IL-12（rIL-12）前、后胶原纤维含量的改变。结果小鼠肝脏IL-12含量随感染时间延长而缓慢下降，胶原纤维含量随感染时间延长逐渐升高，经皮下注射rIL-12后小鼠肝脏IL-12含量随着相应因子补充而显著上升，胶原纤维含量则逐渐降低。结论IL-12能明显抑制血吸虫感染小鼠肝脏胶原纤维合成，延缓肝纤维化发生。     

雷公藤煎剂对小鼠肝脏日本血吸虫卵肉芽肿形成的影响

本文报道雷公藤对感染日本血吸虫小白鼠肝虫卵肉芽肿的影响。结果显示实验组肝单卵和多卵肉芽肿直径均明显小于对照组:肉茅肿内浆细胞和嗜酸性粒细胞极为罕见;平均每对成虫排入肝内的虫卵数少于对照组。表明雷公藤对日本血吸虫病鼠肝虫卵肉芽肿的形成有明显抑制作用。     

IL-6RFP 在小鼠血吸虫感染中对肝细胞的保护作用

目的：探讨鼠白介素6受体融合蛋白（mIL-6RFP）在BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型中对肝细胞的保护作用。方法通过亲和层析方法获得可阻断白介素-6（IL-6）的mIL-6RFP,经人类肝癌细胞（HepG2）IL-6刺激及阻断实验检测纤维蛋白原（fibrinogen,FGG）和结合珠蛋白（haptoglobin, HP）的 mRNA 表达变化,体外验证重组蛋白 mIL-6RFP 的生物活性。建立 BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型,于感染第24天起经尾静脉注射 mIL-6RFP,隔天注射每次100μg／只,感染第42天剖杀小鼠。HE 染色法检测小鼠肝脏肉芽肿面积,荧光定量 PCR 法检测小鼠肝组织 IL-1β、IL-13、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和趋化因子1（CXCL1）的 mRNA 表达,连续监测法检测小鼠肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）。结果 HepG2细胞实验显示 mIL-6RFP 可降低IL-6对该细胞的刺激作用,显著下调 FGG 和 HP 的表达（P＜0．05）。在小鼠感染模型中阻断 IL-6后,肝功能指标 ALT和 AST 与溶剂对照组相比均显著下降（P ＜0．05）,肉芽肿病变无显著性差异。结论在 BALB／c 小鼠日本血吸虫感染模型中 mIL-6RFP 可明显改善肝细胞功能,但对肉芽肿形成未见明显作用。     

日本血吸虫组织蛋白酶B2在小鼠抗血吸虫再感染中的作用

目的 构建日本血吸虫组织蛋白酶B（Sjcb2）真核表达载体,检测日本血吸虫组织蛋白酶B2单独和联合吡喹酮（PZQ）在小鼠抗血吸虫再感染中的作用.方法 将60只BALB/c雌性小鼠随机均分为六组,建立日本血吸虫感染动物模型：感染组、感染攻击组、空质粒处理组、Sjcb2免疫组、吡喹酮处理组、Sjcb2联合吡喹酮处理组.Sjcb2免疫组和Sjcb2联合吡喹酮组分别在初次尾蚴感染前第21天、14天及7天接种pcDNA3.1（＋）/Sjcb2重组质粒,空质粒处理组接种pcDNA3.1（＋）空质粒.初次尾蚴感染后第六周,对吡喹酮处理组和Sjcb2联合吡喹酮处理组小鼠给予PZQ治疗.除感染组外其它各组在第八周再次进行尾蚴攻击感染.分别于第8周和第14周取各组小鼠肝脏组织做病理切片,观察虫卵肉芽肿大小;采用间接ELISA法检测血清中特异性IgE和IgG亚型（IgG1,IgG2和IgG3）;检测各组小鼠荷成虫数,计算抗血吸虫再感染率.结果 Sjcb2免疫组、联合组与其它组分别比较,小鼠荷虫数显著性减少,抗血吸虫再感染率显著升高,虫卵肉芽肿直径显著减小,IgG1水平显著下降和IgE水平显著升高（P〈0.01）.结论 Sjcb2在小鼠模型中具有抗日本血吸虫再感染作用,抗血吸虫再感染率为70.3%,抗再感染作用机制可能与特异性IgE水平升高和IgG1水平下降有关.     

血吸虫病小鼠肝脏功能变化的动态观察

目的动态观察血吸虫小鼠肝纤维化过程中肝脏的病理改变。方法随机将48只健康小鼠分为感染组与正常组,于感染后第6、9、11、13周每组随机挑选6只剖杀作病理观察;同时检测两组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)及肝脏羟脯氨酸(HyP);并进行统计分析。结果感染组小鼠血清ALT含量在感染后第6、9周时明显升高(P<0.01),之后逐步回复到正常水平附近;而PA含量先下降,后又升高,但在各阶段与正常组相比差别都具有统计学意义(P<0.05)。同时,ALB在早期变化并不明显。HA、LN及肝脏HyP的含量,在感染后各个时期与正常组比都明显升高,差别具统计学意义(P<0.01)。结论小鼠感染血吸虫后,急性期时肝脏损伤较为严重,检测血清PA含量可以更敏感、及时、特异地反映肝脏的损伤及贮备状况,而HA、LN则可以反映血吸虫肝脏纤维化的进展。     

人参皂苷Rg3、干扰素α联合与单一用药治疗血吸虫病肝纤维化疗效对比

目的比较人参皂苷Rg3、IFN-α联合用药与单一用药抗日本血吸虫病肝纤维化的疗效.方法将56只雄性IcR小鼠随机分为5组(A组为正常对照组,B、C、D、E组为治疗组),除A组8只外,其余B、C、D、E每组各12只.以腹部贴片法经皮肤感染B、C、D、E组小鼠,每只小鼠感染尾蚴18～22条.10周末,以每鼠吡喹酮1次性灌胃(300 mg/kg体重)杀虫治疗.继而分别以人参皂苷Rg3联合IFN-α使用和2者分别单独治疗B、C、D组小鼠,连续8周;第18周末,取各鼠肝组织分别作苏木素-伊红(HE)染色和苦味酸-酸性品红(VG)染色,观察分析各组小鼠肝脏胶原面积百分比及肝纤维化程度(SSS评分),以比较人参皂苷Rg3和IFN-α联合用药与单一用药的治疗效果.结果肝纤维化小鼠经人参皂苷Rg3、IFN-α联合或单一分别治疗8周后,肝脏仍有不同程度增大,暗褐色,质地略韧.肝脏内纤维增生、炎细胞浸润等病变比模型组减轻.3组治疗组肝脏胶原面积百分比均降低(P<0.05);SSS评分均低于实验对照组2分以上(P<0.05);3治疗组间胶原面积百分比及SSS评分没有统计学差异(P>0.05).结论吡喹酮治疗后,人参皂苷Rg3和IFN-α联合用药与单一用药一样,均具有改善小鼠日本血吸虫病肝纤维化作用,但2者合用疗效不优于单独用药,没有协同作用.     

Congenital infection of rabbits with Schistosoma japonicum and protective immunity of offspring

Background Recently congenital infection with Schistosoma japonicum (S. japonicum) has been domonstrated in pigs, rabbits, mice and dogs. We explored the rabbit as an animal model for the congenital infection of schistosomiasis japonica and assessed the effect of a congenital S. japonicum infection on the resistance of rabbit kittens to a postnatal challenge infection.Methods Sixteen pregnant New Zealand white rabbits were infected with a single dose of S. japonicum cercariae. The exposed animals were divided into three groups according to the gestation age at the time of infection. Diagnosis of prenatally acquired S. japonicum infection in the rabbit kittens was primarily based on serological tests in combination with parasitological and histopathological findings. Congenitally infected kittens were challenged percutaneously with 100 S. japonicum cercariae to assess the effect of a congenital S. japonicum infection on kitten resistance to a postnatal challenge infection.Results The overall prevalence of congenital infection in offspring of infected mothers was 20% (12/60). The congenital infection rate in group L (late gestation) was much higher than in group E (early gestation) and group M (mid-gestation) (P&lt;0.05). After a postnatal challenge infection, prenatally infected kittens had a 54.66% worm reduction rate, 41.45% egg reduction rate, and 51.76% granuloma size reduction rate compared to nave kittens.Conclusions This study demonstrates the possibility of congenital infection of S. japonicum in rabbits and the resistance of congenitally infected kittens to a postnatal challenge infection. These results have important implications not only for epidemiological investigations, but also in designing government control programs for schistosomiasis.     

N-乙酰半胱氨酸对日本血吸虫病小鼠肝纤维化的影响

目的观察N－乙酰半胱氨酸（NAC）对日本血吸虫病小鼠肝纤维化的影响。方法将小鼠随机分为正常组、模型组、预防a、b组和治疗a-b组。除正常组外,其他各组每只小鼠经腹部皮肤人工感染日本血吸虫尾蚴30条。在感染同时给预防a、b组、感染后第六周给治疗a、b组分别以200mg/kg和400mg／kgNAC两种剂量灌胃,2次,d。正常组、模型组和预防组分别在第42d、56d时,治疗组在第56d时处死小鼠,取肝脏,石蜡包埋切片,VG染色观察各组肝组织内纤维增生程度,测量肝内胶原纤维的面积,检测肝组织中羟脯氨酸（Hyp）的含量。结果预防a组第42d时肝组织中胶原面积显著比第56d时小（P〈0．05）,第42d时肝组织中胶原面积比模型组小46．67％（P〈0．05）,第56d时肝组织中胶原面积比模型组小53．12％（P〈0．05）;第42d时和第56d时肝组织中Hyp含量净减少率分别为67．58％和31．34％（P〈0．05）。治疗a组肝组织中胶原面积比模型组小28．12％（P〈0．05）;肝组织中Hyp含量净减少率为21．23％（P〈0．05）。预防b组和治疗b组的疗效不佳。结论预防用小剂量NAC减缓日本血吸虫病小鼠肝纤维化的效果最好。